草苁蓉多糖的抗肿瘤作用及免疫调节作用

目的：观察草苁蓉多糖对荷瘤小鼠免疫器官的调节作用及对免疫功能的影响。方法：接种肝癌细胞H₂₂的荷瘤小鼠随机分为50、100、200和400 mg•kg^-1•d^-1草苁蓉多糖组、阴性对照组及阳性对照组（环磷酰胺组），按剂量给药。10 d后处死小鼠，分别称量脾重、胸腺重，检测荷瘤小鼠脾脏指数和胸腺指数；采用MTT法测定NK细胞活性；淋巴细胞转化实验测定T淋巴细胞转化率(LTT)；中性红比色法观察小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬能力；通过称量各小鼠实体瘤的重量，计算抑瘤率。结果：草苁蓉多糖能够显著抑制肿瘤生长，抑瘤率达38.86%;与阴性对照组比较,实验组荷瘤小鼠的脾脏指数显著提高(P<0.01)，胸腺指数则有降低趋势，T淋巴细胞的转化率、NK 细胞的活性、巨噬细胞的吞噬能力显著增强(P<0.01)，与给药剂量存在正相关关系。结论：草苁蓉能抑制肿瘤生长，对小鼠免疫功能具有调节作用。     

血管生成抑制素基因对人原发性肝细胞癌裸鼠移植瘤的治疗作用

目的：研究血管生成抑制素基因对人原发性肝癌裸小鼠皮下移植瘤的治疗作用。方法：建立人原发性肝癌裸小鼠皮下移植瘤模型。将荷瘤裸小鼠随机分为3组；肿瘤对照组，空载体组及angio基因治疗组分别瘤内直接注射裸露DNA质粒，不同时段观察皮下肿瘤生长情况，绘制计算皮下肿瘤生长曲线：病理学检查；原位末端标记（TUNEL）法检查细胞原位凋亡；放射免疫法检测裸小鼠血清甲胎蛋白变化；透射电镜观察细胞超微结构变化。结果：皮下肿瘤生长曲线及病理学检查结果显示，angio基因瘤内注射可部分抑制肿瘤生长。TUNEL法检测显示，angio组凋亡指数明显高于肿瘤对照组。扫描电镜观察细胞超微结构变化。发现angio基因治疗组内有明显的细胞凋亡发生。结论：angio基因直接瘤内注射能抑制人原发性肝癌裸小鼠移植瘤肿瘤生长。其作用机理可能为抑制肝癌的血供从而抑制肿瘤生长。     

人多发性骨髓瘤荷瘤SCID小鼠模型的建立及其生长特性

为研究人多发性骨髓瘤(Multiple Myeloma，MM)在SCID小鼠免疫重建前后体内生长的特性和免疫细胞对肿瘤的作用，建立人多发性骨髓瘤(MM)荷瘤SCID小鼠模型。体外培养IL-6依赖的人MM细胞株XG7，接种于SCID小鼠和用人淋巴细胞重建的SCID小鼠皮下；监测成瘤状态，通过免疫组化观察细胞毒性T淋巴细胞(Cytotoxic T lymphocytes，CTLs)杀伤。结果表明：成瘤后的肿瘤细胞CD28、CD138等分子的表达与接种前没有明显变化；免疫重建后的SCID小鼠成瘤潜伏期延长，瘤体积小；免疫重建后的SCID小鼠肿瘤组织中，有人CD3 T细胞的浸润。结果提示：SCID小鼠是建立肿瘤模型和肿瘤免疫研究的良好动物；免疫重建后的SCID小鼠体内肿瘤生长受抑制：人MM细胞在小鼠体内的生长状态与淋巴细胞免疫有关。     

生长抑素类似物奥曲肽抑制肝癌细胞血管内皮生长因子表达的研究

目的 探讨生长抑素类似物奥曲肽对肝癌细胞血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响.方法 将40只小鼠随机分为2组,每组各20只.每只小鼠于腋窝皮下注射小鼠肝癌细胞株细胞.A组为实验组,皮下接种肿瘤24 h后予生长抑索奥曲肽(100μg·kg1·d-1)腹腔注射,连用20 d,B组为对照组,予以相同容积的无菌生理盐水腹腔注射,连用14 d.20 d后处死小白鼠,检测肿瘤大小、血管内皮生长因子(VEGF).结果 皮下接种7 d及14 d后A组皮下肿瘤的体积均明显小于B组(P＜0.05,P＜0.01).A组VEGF表达明显低于B组,统计学有显著差异性(Ridit检验,P＜0.05);A组微血管密度MVD亦较B组为低,但统计学差异无显著性(P=0.075).结论 奥曲肽对小白鼠肝癌移植瘤具有抑制作用,其作用机制是抑制肝癌细胞、VEGF的表达,对肿瘤组织血管形成的抑制作用亦可能为其原因.     

阿魏酸钠对小鼠H22肝癌生长的抑制作用及其机制研究

目的 观察注射用阿魏酸钠对小鼠H22肝癌生长及血管生成抑制作用及其对血管内皮生长因子(VEGF)Mrna转录的影响.方法 昆明小鼠前腋下皮下接种H22小鼠肝癌细胞,腹腔注射阿魏酸钠,每3 d测量1次肿瘤体积.用免疫组化法测定VEGF及增殖细胞核抗原(PCNA)的表达.MTT法检测阿魏酸钠对H22肿瘤细胞及血管内皮细胞(ECV304)增殖的影响,RT-PCR法测定肿瘤组织的VEGF Mrna的转录.结果 阿魏酸钠组小鼠H22肿瘤体积、重量增长明显较对照组缓慢(P＜0.05),同时阿魏酸钠组的肿瘤微血管密度及VEGF、PCNA阳性细胞较对照组显著减少(P＜0.05).阿魏酸钠组VEGF Mrna转录比对照组显著减少(P＜0.05).体外实验,阿魏酸钠对ECV304及H22细胞的增殖均无显著抑制作用.结论 阿魏酸钠可以显著抑制小鼠H22肿瘤的生长及血管生成,且能抑制VEGF的表达,但不能抑制ECV304及H22细胞的增殖.阿魏酸钠对肿瘤组织VEGF表达的抑制作用可能是其抗H22肿瘤及抗血管生成的一个重要机制.     

环磷酰胺在动物模型体内抗肿瘤影响及抑瘤机制的研究

目的探讨环磷酰胺（CTX）在动物模型体内抗肿瘤影响及抑瘤机制。方法建立小鼠实体瘤模型和腹水瘤模型：分别在昆明系小鼠皮下接种S180肉瘤细胞、腹腔接种鼠源性H22肝癌细胞,同时给予环磷酰胺处理小鼠,其后观察各组肿瘤生长大小,小鼠存活率的变化;应用Western blot技术检测凋亡抑制基因（Bcl-2）、血管内皮细胞生长因子（VEGF）含量、抑癌基因P53及P21的蛋白表达。结果环磷酰胺组肿瘤重量明显低于模型组（P〈0.05）,其抑瘤率为88.55%;小鼠存活天数均较模型组长,其生命延长率为57.73%;环磷酰胺可明显诱导P53的表达,抑制BCL-2的表达,从而促进肿瘤细胞的凋亡,但对P21没有作用;对瘤体组织中VEGF蛋白表达水平亦有抑制作用。结论环磷酰胺可通过激活抑癌基因P53,抑制抗凋亡基因Bcl-2和促血管生成因子VEGF等多种途径,发挥抗肿瘤活性,为抗肿瘤动物模型尤其为调节抗肿瘤相关基因表达方面的阳性药物对照提供重要的实验依据。     

多西紫杉醇在肝癌细胞裸鼠肝脏移植瘤中对P53、VEGF作用的研究

目的探讨多西紫杉醇在肝癌细胞株SMMC-7721裸鼠皮下移植瘤中与血管内皮生长因子(VEGF)、肿瘤抑制蛋白(p53)表达的研究.方法建立肝癌细胞株SMMC-7721裸鼠皮下移植瘤模型,建模成功后,将20只裸鼠分成两组,多西紫杉醇组及肿瘤对照组.3周后处理裸鼠,应用免疫组化Envision法检测实验组与对照组肝癌组织中p53、VEGF表达情况.结果实验组肝癌组织中p53表达阳性率41.26%,显著低于对照组肝癌组织的p53表达阳性率87.16%,两者间差异有统计学意义(P<0.05).实验组肝癌组织中VEGF表达阳性率为36.79%,显著低于对照组肝癌组织的VEGF表达阳性率68.27%,两者间差异有统计学意义(P<0.05).结论p53在诱导肝癌细胞凋亡中起到重要作用,VEGF过度表达在肝癌微血管生成过程中起重要作用,多西紫杉醇可降低p53、VEGF的表达,从而起到移植肿瘤生长及转移的作用.     

热休克小鼠肝癌细胞(H_(22))源Exosomes的体内抗肝癌作用研究

目的:在荷瘤 BALB/c 小鼠观察热休克小鼠肝癌细胞(H_(22))源 Exosomes(HS-Exo) 激发宿主抗肝癌免疫应答的效应.方法:用自行分离纯化的小鼠肝癌细胞 H_(22) 源 Exosomes 及 HS-Exo 免疫小鼠,然后给小鼠皮下接种 H_(22) 肿瘤细胞,观察肿瘤的生长状况.用MTT法检测小鼠脾细胞增殖情况和细胞毒活性;用免疫组织化学法检测肿瘤组织中CD_4~+、CD_8~+T淋巴细胞浸润情况.BALB/c 小鼠皮下接种 H_(22) 细胞,肿瘤长至可触及大小后,分别注射Exosomes及HS-Exo进行治疗,观察各组肿瘤大小及其小鼠存活期.结果:与对照组 Exosomes 相比,HS-Exo 能使肿瘤出现时间延迟,肿瘤生长缓慢(P<0.05);更能促进脾淋巴细胞增殖并增强其细胞毒活性(P<0.05),能更有效的诱导 CD_4~+ 和 CD_8~+T 细胞活化(P<0.05);更为显著的抑制了小鼠的肿瘤生长(P<0.05).结论:HS-Exo 具有更强的免疫活性,能更好的诱导小鼠抗 H_(22) 肝癌作用,有针对亲本细胞的免疫保护作用,并且具有更为显著的肿瘤治疗作用.     

H22源exosomes瘤苗在小鼠体内的抗肿瘤及免疫调节作用

目的:探讨exosomes瘤苗对小鼠免疫功能及肝癌移植瘤生长的影响.方法:从培养的小鼠肝癌H22细胞上清中分离exosomes瘤苗,以H22细胞接种BALB/e小鼠建市动物模型,随机分为exosomes瘤苗接种组及PBS对照组.15 d后处死小鼠,测量移植瘤体重量,计算抑瘤率;分别称取脾重、胸腺重,检测荷瘤小鼠脾脏指数和胸腺指数;用MTT法检测小鼠脾淋巴细胞增殖情况和细胞毒活性;酶连免疫吸附试验(Enzyme-linked immunoabsorbent assay,ELISA)检测脾淋巴细胞产生IL-2、INF-γ的能力.结果:接种exosomes瘤苗能显著抑制肿瘤生长,抑瘤率达42.26%;与对照组比较,实验组荷瘤鼠胸腺指数、脾指数显著提高(P<0.05);exosomes促进脾淋巴细胞增殖并增强其细胞毒活性,同时脾淋巴细胞培养上清中IL-2、INF-γ的水平升高.结论:exosomes瘤苗可能通过增强小鼠的免疫功能抑制小鼠肝癌移植瘤生长.     

树突状细胞疫苗联合抗PD-L1抗体治疗小鼠肝癌的实验研究

[目的]探讨抗PD-L1抗体能否增强树突状细胞疫苗对小鼠肝癌的治疗效果。[方法]将H22肝癌细胞接种于C57BL/6J小鼠左侧腋窝皮下。5 d后,小鼠被随机分为4组,分别给予树突状细胞疫苗治疗、抗PD-L1抗体治疗,树突状细胞疫苗联合抗PD-L1抗体治疗,以及未治疗组。肿瘤接种后28 d,处死小鼠,提取各组小鼠脾淋巴细胞并分析其活性。通过测量肿瘤大小来判定抗肿瘤效应。[结果]与未治疗组相比,各治疗组T细胞活性显著增加,肿瘤生长明显受抑制。[结论]抗PD-L1抗体能够增强树突状细胞疫苗治疗小鼠肝癌的效果,可能于T细胞的活性增强有关。     

鼠尾胶原蛋白提取、分离、纯化方法的建立及鉴定

目的建立一种高效提取、分离、纯化鼠尾胶原蛋白的方法。方法通过对鼠尾进行剥离获得鼠尾腱,用Tris-HCl缓冲液、胃蛋白酶处理获得鼠尾胶原蛋白原液、反复使用氯化钠溶液进行分级盐析、醋酸溶液复溶进行鼠尾胶原蛋白的纯化。超纯水透析除去无机盐类获得纯化的鼠尾胶原蛋白。通过SDS-PAGE蛋白质电泳、氨基酸含量分析等技术手段鉴定。结果本研究建立的方法可以获得高纯度的鼠尾胶原蛋白,纯度达到电泳纯。与国外进口的商业化鼠尾胶原蛋白产品相比无差异。研究了提取、分离、纯化参数对得率、纯度的影响,建立了最优的鼠尾胶原蛋白提取条件,胃蛋白酶用量:1∶500,酶解时间:72 h,盐析浓度:2 mol/L,提取所用酸溶液:0.05mol/L醋酸溶液。结论为鼠尾胶原蛋白的扩大化生产提供了合适的工艺参数,为大量获得鼠尾胶原蛋白并进行更深层次的功效方面研究提供了理论支持和实践基础。     

微重力对骨骼肌蛋白代谢的影响

失重环境下肌肉萎缩的发生是由于骨骼肌蛋白质代谢的紊乱,包括蛋白合成降低和蛋白降解增强所致。本文就失重环境下肌原纤维蛋白在合成和降解过程中的多种影响因素,如肌原纤维mRNA的表达、热休克蛋白和泛素等的改变及其作用进行综述。     

有关前导肽影响目标蛋白表达及活性的研究与展望

选择目前已报道的5种含有前导肽的目标蛋白(枯草杆菌蛋白酶、α-水解蛋白酶、米根霉脂肪酶、华根霉脂肪酶、米黑霉脂肪酶),对其表达情况与活性测定的结果进行对比,结果表明前导肽的存在对目标蛋白的正确表达具有重要意义。通过分析前导肽的变化对成熟蛋白活性的影响,提出前导肽进化对目标蛋白进化具有重要意义。     

树舌多糖对HepA小鼠瘤细胞蛋白质表达影响的研究

目的探讨树舌多糖抗肿瘤的作用机制,寻找特异蛋白。方法将各组小鼠的眼血清蛋白、匀浆蛋白、膜糖蛋白分别做PAGE电泳,分析其蛋白组分的变化。结果树舌多糖作用后血清蛋白、匀浆蛋白、膜糖蛋白的蛋白组分都有变化。     

蛋白激酶CK2B的相互作用蛋白筛选

目的研究与蛋白激酶CK2B发生相互作用的蛋白。方法应用酵母双杂交系统,以人蛋白激酶CK2B为诱饵,筛选成人肝cDNA文库,利用生物信息学分析,一对一酵母回复性杂交等提供的信息,筛除假阳性。结果经过酵母双杂交共获得211个克隆,经过验证分析,最终确定12个相互作用蛋白,其中3个是已知的,9个是新发现的相互作用。结论获得的9个新的相互作用蛋白可能揭示CK2新的作用机制。     

白血病细胞中蛋白激酶C底物的研究

白血病细胞ｉｎ ｖｉｖｏ蛋白质磷酸化实验结果表明，当ｆＭｅｔ－Ｌｅｕ－Ｐｈｅ三肽或促癌剂ＴＰＡ作用到白血病细胞使ＰＫＣ活化时，活化的ＰＫＣ可特异地促进白血病细胞中包括分子量为４０ＫＤ蛋白质在内的三种蛋白质磷酸化。这三种蛋白质的磷酸化反应，可被抗癌药物硫杂脯氨酸衍生物所抑制。     

SAS蛋白质适配分子的筛选及其抗肿瘤作用的初步研究

目的：筛选肿瘤细胞株SP2／0的SAS蛋白适配分子,并观察该适配分子对肿瘤细胞株SP2／0的抑制作用。方法：利用配体指数增强系统进化技术(SELEX)筛选出对小鼠骨髓瘤细胞株SP2／0 SAS蛋白质的DNA性质适配分子,并观察该适配分子对SP2／0和小鼠成纤维细胞株3T3的影响。结果：该适配分子对SP2／0细胞株的抑制率较高,SP2／0细胞株的存活率较对照组明显下降,而对3T3细胞株无影响。结论：该适配分子能够抑制肿瘤细胞株SP2／0的生长。     

血清淀粉样蛋白A、降钙素原及C反应蛋白在急性胰腺炎病程中的变化及意义

目的:观察急性胰腺炎患者血清淀粉样蛋白A(serum amyloid A protein,SAA)、降钙素原(procalci-tonin,PCT)和C反应蛋白(C-reactive protein,CRP)在急性胰腺炎早期病程中的变化,探讨SAA、PCT及CRP在急性胰腺炎其临床实用价值。方法:轻型急性胰腺炎(MAP)患者32例,重症胰腺炎(SAP)患者10例,动态检测入院时和入院后第1、3、5、7天血清SAA、PCT及CRP的水平,并均与42例健康对照组相互比较。结果:(1)急性胰腺炎患者各个不同时间点SAA、PCT及CRP均显著高于对照组。(2)其中CRP在入院后第3天达最高水平,随后逐步降低,第3天后两组差异显著;在MAP组于入院后第3天达峰值,随后显著下降并逐步恢复正常水平,而SPA组一直保持在较高的水平。(3)SAA于SAP组、MAP组均在入院后第1天为最高水平,随后逐步降低,各时间点与第1天比较,差异显著。(4)PCT在SAP组入院后第1天、3天为最高水平,在MAP组第1天为最高水平,随后均逐步降低,各时间点与第1天比较,差异显著。结论:血清SAA、PCT及CRP水平的变化反应了急性胰腺炎患者病情严重程度,其中SAA和PCT对急性胰腺炎早期病程判断具有一定的临床意义。     

M蛋白检测在诊断多发性骨髓瘤中的临床应用价值

目的探讨M蛋白定量分析在多发性骨髓瘤（MM）的诊断和治疗中的应用。方法回顾性分析49例MM患者的临床资料与M蛋白之间的关系,并进行统计学分析。结果初治时IgG、IgA型及轻链型M蛋白的量与血红蛋白、血小板计数均呈负相关,M蛋白的量与初治时患者的骨质破坏程度无明显相关;肾功能不全的发生率IgG型低于IgA型及轻链型,三者之间相比差异有统计学意义（p〈0.05）;化疗2个疗程后M蛋白的下降与初治时M蛋白的量无明显相关。结论M蛋白是MM诊断和临床分期的重要指标,也是评价治疗是否有效的标准之一。     

肿瘤患者血清蛋白电泳结果的变化及临床意义探讨

目的　探讨肿瘤患者放化疗前后血清蛋白组分的变化及意义。方法　采用法国sebia电泳仪对标本进行琼脂糖凝胶电泳、扫描 ,确定各组分比例。结果　放化疗肿瘤患者血清蛋白各区带蛋白与正常对照组相比较 ,都发生了变化 ;肿瘤患者放化疗前后血清蛋白电泳比较 ,各组分也发生了变化 ,除γ区发生明显变化 (P <0 .0 1 )外 ,其余变化不明显。结论　对放化疗肿瘤患者血清蛋白电泳变化的观察有利于对患者的临床治疗、疗效判断和患者身体状况提供参考。