CLOCK在甲状腺癌与腺瘤组织中的表达及其临床意义

目的 甲状腺癌是内分泌系统最常见的恶性肿瘤之一,甲状腺腺瘤是最常见的甲状腺良性肿瘤,研究发现甲状腺良、恶性肿瘤在形成过程中存在多种基因表达的差异。本研究拟探讨生物节律基因(circadian locomotor output cycles kaput,CLOCK)在甲状腺癌与腺瘤组织中的表达及其临床意义。 方法 系统收集2012年3月—2015年3月在徐州医科大学附属淮海医院普外科手术切除的甲状腺癌标本74例及甲状腺腺瘤标本55例,应用免疫组化方法检测CLOCK表达水平,并分析其与临床病理特征的关系。 结果 甲状腺癌、甲状腺腺瘤组织中CLOCK的阳性表达率分别为68.9%(51/74)和32.7%(18/55),两者差异有统计学意义(P<0.001)。甲状腺癌组织CLOCK表达量为4.2±3.8,甲状腺腺瘤组织CLOCK表达量为2.1±2.0,差异有统计学意义(P<0.001)。CLOCK在有淋巴结转移的癌组织中阳性表达率明显高于无淋巴结转移的癌组织(P=0.012),且CLOCK阳性表达率随肿瘤体积增大而提高(P=0.028),而且CLOCK阳性表达率随TNM分期的提高而提高(P=0.023)。 结论 CLOCK表达上调不仅参与甲状腺癌的形成过程,而且在肿瘤的侵袭、转移等演进过程中发挥着重要作用。      

抗凋亡基因Survivin在分化型甲状腺癌中的表达及临床意义

目的分析分化型甲状腺癌组织中Survivin表达,探讨其表达水平与肿瘤病理学因素的相关性.方法采用逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）和免疫组织化学方法检测分化型甲状腺癌组织和正常甲状腺组织中的Survivin的表达.结果在分化型甲状腺癌组织中,Survivin mRNA阳性率72.9%（35/48）,Survivin蛋白的阳性表达率为75%（42/56）,正常甲状腺组织中均为阴性表达.Survivin在肿瘤组织中的表达与临床分期、淋巴结转移和癌组织突破包膜密切相关（P〈0.05）,而与年龄、性别及病理分型无关（P〉0.05）;临床Ⅱ-Ⅲ期患者Survivin的表达明显高于Ⅰ期,随肿瘤恶性程度的增加及颈部淋巴结转移的出现,Survivin的表达呈升高趋势.结论 Survivin在分化型甲状腺癌组织中表达上调,提示Survivin在分化型甲状腺癌的发生、发展中起重要作用.其表达水平增高可将其作为预测肿瘤的侵袭性、恶性程度和预后的重要标志物.Survivin有望成为甲状腺癌诊断和治疗的新靶点.     

甲状腺癌中CyclinE及CDK2的表达及意义

目的探讨CyclinE和CDK2蛋白的表达与甲状腺癌发生、发展的关系。方法采用免疫组织化学S-P法检测甲状腺癌49例、甲状腺腺瘤26例、结节性甲状腺肿29例、正常甲状腺组织10例中CyclinE和CDK2蛋白的表达,并结合临床资料进行分析。结果 CyclinE和CDK2蛋白在甲状腺癌组的阳性表达率分别为61.22%（30/49）、75.51%（37/49）,明显高于甲状腺腺瘤组、结节性甲状腺肿组及正常甲状腺组的表达率（P〈0.01）。甲状腺癌组中的CyclinE、CDK2蛋白表达率与患者的性别、年龄、肿瘤大小及淋巴结转移情况无相关性（P〉0.05）。CyclinE与CDK2在甲状腺癌中的表达呈正相关（r=0.6524,P〈0.01）。结论CyclinE和CDK2在甲状腺癌中呈高表达状态,提示两者可能与甲状腺癌的发生发展有关。二者联合检测或许能作为临床诊断及判断甲状腺肿瘤细胞增殖活性的参考指标。     

Survivin与Smac在卵巢上皮性肿瘤中的表达及其相关性研究

目的探讨凋亡抑制因子Survivin及凋亡促进因子Smac在卵巢上皮性肿瘤中的表达及临床意义,并分析二者的相关性。方法 RT-PCR法检测20例上皮性卵巢癌及20例良性卵巢上皮性肿瘤组织中Survivin及Smac基因的表达情况;免疫组化S-P法检测60例上皮性卵巢癌及60例良性卵巢上皮性肿瘤组织中Survivin及Smac蛋白的表达情况,分析其与上皮性卵巢癌患者各临床病理指标的关系及两者表达的相关性。结果上皮性卵巢癌组织中Survivin基因表达水平（70.0%）明显高于良性卵巢上皮性肿瘤组织（5%）,Survivin蛋白在上皮性卵巢癌组织中的阳性表达率为61.7%,而在良性卵巢上皮性肿瘤组织表达率6.7%,免疫组化结果与RT-PCR结果一致;Survivin蛋白在上皮性卵巢癌组织中的阳性表达率与浸润深度、分化程度及淋巴结转移均相关（P〈0.05）。RT-PCR结果显示,Smac基因在上皮性卵巢癌组织中的阳性表达率为40%（8/20）,明显低于良性卵巢上皮性肿瘤组织90%（18/20）,此结果得到免疫组化的证实,Smac蛋白在上皮性卵巢癌组织中的阳性表达率为41.7%,明显低于良性卵巢上皮性肿瘤组织93.3%,而且Smac蛋白在上皮性卵巢癌中的阳性表达率与组织分化程度、浸润深度及淋巴结转移密切相关（P〈0.05）。Survivin蛋白与Smac在上皮性卵巢癌癌组织中的表达呈明显负相关（P〈0.05）。结论抗凋亡蛋白Survivin和促凋亡蛋白Smac之间存在着相互拮抗,相互调节的关系,在卵巢上皮性肿瘤的发生发展中共同发挥作用。     

Bcl-2基因在甲状腺癌组织中的表达及意义

目的探讨Bcl-2基因在甲状腺癌中的表达及其临床意义。方法应用免疫组化S-P法检测了45例甲状腺癌、20例甲状腺腺瘤及20例结节性甲状腺肿中Bcl-2基因的表达。结果Bcl-2基因在甲状腺腺瘤、结节性甲状腺肿、甲状腺癌、有淋巴结转移的甲状腺癌、无淋巴结转移的甲状腺癌中的表达率分别为20．0％、15．0％、62．2％、77．7％．38．8％;在甲状腺癌组织中Bcl-2基因阳性率高于甲状腺腺瘤组织（P〈0．01）及结节性甲状腺肿组织（P〈0．01）;临床Ⅲ、Ⅳ期病例中Bcl-2基因的阳性率明显增高;有淋巴结转移者的阳性率明显高于无淋巴结转移者（P〈0．01）。结论Bcl-2基因过度表达可能与甲状腺肿瘤的发生发展有关,Bcl-2基因可以作为判断甲状腺癌预后的参考指标。     

C-erbB-2在甲状腺癌中的表达及意义

目的 探讨C-erbB-2在甲状腺癌中的表达及其临床意义.方法 应用免疫组化S-P法对30例甲状腺癌组织和20例甲状腺良性病变组织中C-erbB-2的表达进行检测.结果 C-erbB-2在甲状腺腺瘤、结节性甲状腺肿、甲状腺癌、有淋巴结转移的甲状腺癌、无淋巴结转移的甲状腺癌中的表达率分别为0%、0%、66.7%、83.3%、41.7%;甲状腺良性病变与甲状腺癌两者相比差异有高度显著性（P＜0.001）,有淋巴结转移者的阳性率明显高于无转移者（P＜0.05）.结论 C-erbB-2的检测对甲状腺良恶性肿瘤的鉴别诊断具有参考价值,C-erbB-2可以作为判断甲状腺癌生物学行为的重要指标.     

食管鳞癌中Survivin和Smac/Diablo的表达及意义

目的:探讨Survivin和Smac/Diablo在食管鳞癌中的表达及其临床意义。方法:应用免疫组化SP法对80例经病理确诊为食管鳞癌的病例和相对应的30例病理确定为正常组织及30例癌旁组织进行Survivin蛋白和Smac/Diablo蛋白半定量免疫组化分析。结果:Survivin在食管鳞癌组织,癌旁组织,正常组织的阳性表达率分别为81.25%,10.0%,3.33%,有显著性差异(χ2=72.983,P<0.01)。Smac/Diablo在食管鳞癌组织,癌旁组织,正常组织的阳性表达率分别为61.25%,76.67%,93.33%,有显著性差异(χ2=11.518,P<0.01)。Survivin和Smac/Diablo表达与患者的年龄、性别、分化程度、浸润深度等均无明显关系(P>0.05)。但与TNM分期、淋巴结转移相关(P<0.05)。在Smac阳性组中的表达率为23.21%(13/56),在Smac/Diablo阴性组中的表达率为16.67%(9/54),两者间有统计学差异(P<0.05),两者关联性较强,呈负相关。Survivin阳性率与淋巴结转移呈低度正相关(r=0.329,P<0.05),Smac/Diablo阳性率与淋巴结转移呈负相关(r=-0.733,P<0.05)。结论:Survivin蛋白和Smac/Diablo蛋白表达与食管癌的病理分期,淋巴结转移都有着密切的关系,Smac/Diablo在食管鳞癌组织中低表达,其表达和Survivin呈明显的负相关,两者可能在食管鳞癌细胞凋亡信号传导网络中发挥重要作用。     

MMP-2和TIMP-2在甲状腺癌中的表达及其意义

目的:探讨金属基质蛋白酶-2(MMP-2)和金属基质蛋白酶组织抑制剂-2(TIMP-2)在甲状腺良恶性肿瘤中的表达情况,分析MMP-2和TIMP-2与甲状腺癌的相关性。方法:采用逆转录酶-聚合酶链反应检测32例甲状腺癌、30例甲状腺良性肿瘤及18例癌旁组织MMP-2和TIMP-2mRNA的表达。结果:在甲状腺癌、甲状腺良性肿瘤和癌旁组织中MMP-2的表达率分别为78.1%(25/32)、20%(6/30)、16.7%(3/18),TIMP-2的表达率为65.6%(21/32)、26.7%(8/30)、11.1%(2/18),MMP-2的表达率在TNM分期Ⅲ Ⅳ及淋巴结转移的标本中要高于TNM分期Ⅰ Ⅱ及无淋巴结转移的标本,但TIMP-2的表达在这两类中无差别。在甲状腺癌组织中MMP-2和TIMP-2的表达呈正相关。Logistic回归分析结果显示:MMP-2与甲状腺癌关系密切,TIMP-2与甲状腺癌无相关性。结论:MMP-2和TIMP-2在甲状腺癌中表达明显提高,两者的表达呈正相关。MMP-2与甲状腺癌的关系更为密切,其表达上调往往提示甲状腺癌的转移和侵袭。     

LYVE-1在甲状腺肿瘤中的表达及意义探讨

目的:探讨淋巴管生成因子在甲状腺肿瘤中的变化规律以及与转移的相关性,为此类疾病的预防、治疗和判断预后提供理论依据.方法:选择甲状腺肿瘤病理石蜡切片135例,亚急性甲状腺炎13例,腺瘤48例,乳头状癌38例,髓样癌10例,滤泡状癌27例,未分化癌12例,其中有淋巴结转移20例.运用免疫组化检测各标本LYVE-1的表达水平,分析对不同病理类型的甲状腺癌及有无淋巴结转移肿瘤之间LYVE-1的表达水平的关系.结果:LYVE-1所标记的甲状腺恶性肿瘤中淋巴管的密度显著高于甲状腺良性肿瘤.在甲状腺癌中,有淋巴结转移者淋巴管的密度显著高于无淋巴结转移者.在各病理类型的甲状腺癌组织中,乳头状癌组织中淋巴管的密度为11.4±8.6,髓样癌组织中淋巴管的密度为4.2±2.4,未分化癌组织中淋巴管的密度为8.8±1.8,乳头状癌与髓样癌相比较t=2.6020,P=0.0124,乳头状癌与未分化癌相比较t=2.6227,P=0.0117,在统计学上均具有显著统计学差异.结论:①在甲状腺肿瘤中LYVE-1表达是恶性肿瘤较良性肿瘤高,恶性肿瘤中表达程度由高到低依次为乳头状癌、未分化癌、滤泡状癌及髓样癌,有淋巴结转移的肿瘤较无转移的肿瘤表达升高.②LYVE-1与淋巴结转移有关.     

Annexin II、尿激酶型纤溶酶原激活剂在甲状腺癌中的表达及临床意义

目的探究Annexin II、尿激酶型纤溶酶原激活剂（uPA）在甲状腺癌发生发展和淋巴结转移中的作用。方法应用免疫组织化学法检测AnnexinII、uPA蛋白在35例甲状腺乳头状癌组织、10例甲状腺腺瘤组织、16例结节性甲状腺肿组织、7例甲状腺正常组织中的表达。结果Annexin II、uPA蛋白在甲状腺乳头状癌组织中的表达较正常、结节性甲状腺肿和腺瘤组织中的表达显著增高（P〈0．05）,且2者在癌组织中的表达呈正相关（P〈0．05）。Annexin II蛋白的表达与肿瘤大小和淋巴结转移有关,uPA蛋白的表达只与淋巴结转移有关。结论Annexin II、uPA蛋白参与了甲状腺乳头状癌的发生发展;并在甲状腺乳头状癌淋巴结转移中发挥促进作用。     

卵巢癌组织中Survivin和PCNA的表达

目的 :研究卵巢癌组织中Survivin的表达及其临床意义。方法 :用免疫组化法检测 38例卵巢癌和 1 2例卵巢良性肿瘤组织中Survivin和细胞增殖核抗原 (PCNA)蛋白的表达 ,用原位杂交 (ISH)法检测SurvivinmRNA。结果 :卵巢癌组织中SurvivinmRNA及其蛋白的阳性表达率分别为 6 8.4 2 % (2 6 / 38)、81 .5 8% (31 / 38) ,高于卵巢良性肿瘤组织中的 2 5 .0 0 % (3/ 1 2 )、33.33% (4 / 1 2 ) (P <0 .0 5或P <0 .0 1 )。其中 ,Survivin蛋白表达阳性的卵巢癌组织中PCNA标记指数明显高于Survivin蛋白表达阴性者 ,且Survivin表达与卵巢癌的临床分期、分化程度、淋巴结转移和腹水密切相关 ,但与组织学类型无关。结论 :卵巢癌组织中Survivin表达增强 ,且与细胞增殖密切相关 ;Survivin有可能成为卵巢癌的一项重要预后预测因素和治疗靶点     

Smac和Survivin基因在急性白血病中的表达及临床意义

目的 检测急性白血病(AL)患者Smac、Survivin基因mRNA的表达,以探讨其与AL的发生、发展、疗效及预后的关系.方法 采用RT-PCR技术检测74例AL患者Smac、Survivin基因mRNA的表达情况.10例健康人作为对照组.K562细胞株为阳性对照.结果 4组阳性率及Smac mRNA、Survivin mRNA表达水平比较均有统计学意义(P<0.01);初诊组、复发组高于对照组和完全缓解组(P<0.05);初诊组与复发组、对照组与完全缓解组之间则无统计学意义(P>0.05).治疗后,Smac、Survivin阴性表达者其完全缓解率明显高于阳性表达患者(P<0.05).2种基因mRNA表达水平呈正相关关系(r=0.828,P<0.01).结论 2基因的表达与AL发生、发展相关,是监测病情进展及判断预后的重要分子标志物;二者的表达与化疗药物的敏感性密切相关,可能是导致AL细胞对化疗药物不敏感的原因之一.     

Survivin基因在甲状腺癌中的表达及意义

目的 研究Survivin基因在甲状腺癌中的表达及意义。方法应用免疫印迹法（Westernblotting）,逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）法检测98例甲状腺癌及相应的癌旁组织中Survivin基因的表达,应用原位末端标记法（TUNEL）检测甲状腺癌细胞凋亡指数（A1）。结果甲状腺癌组织表达Survivin蛋白与RT-PCR的结果一致,68．37％的甲状腺癌组织表达Survivin蛋白和mRNA,而癌旁组织内无一例阳性表达。其阳性表达率与病理分型、淋巴结转移、血行转移密切相关。所有甲状腺癌组织标本中均可检测凋亡细胞,Survivin表达阳性组平均AI（0．48±0．38）显著低于阴性组AI（2．984±0．12,P=0．0082）。结论Survivin基因在甲状腺癌组织中异常表达;其表达与分化程度、淋巴结转移、血行转移密切相关;Survivin对凋亡的抑制可能是其参与肿瘤发生、发展、转归的关键因素,Survivin基因将成为甲状腺癌基因治疗的新靶点。     

脑星形细胞肿瘤中Survivin蛋白的表达及其病理意义

目的:研究脑星形细胞肿瘤Survivin蛋白表达与其临床、病理和预后的关系。方法:应用免疫组化方法检测65例脑星形细胞肿瘤组织中Survivin蛋白的表达。结果:Survivin仅表达于脑星形细胞肿瘤细胞,而在正常脑组织中无表达。在脑星形细胞肿瘤中Survivin阳性检出率为61.54%(40/65)。Survivin蛋白的表达强度与脑星形细胞肿瘤的病理分级密切相关,在高级别肿瘤中Survivin蛋白的表达强度均高于低级别肿瘤(P<0.05)。结论:随着星形细胞肿瘤分化程度的降低,Survivin蛋白的表达强度均显著增强;Survivin的高表达预示着星形细胞肿瘤患者预后不良,Survivin可成为一个有价值的评估该肿瘤预后的指标。     

Survivin基因在脑星形细胞肿瘤中的表达及其病理意义

目的：研究脑星形细胞肿瘤中Survivin基因mRNA表达的临床、病理和预后的关系。方法：应用RT-PCR方法检测26例脑星形细胞肿瘤组织中Survivin基因mRNA的表达,并通过电泳凝胶图像系统检测Survivin的相对表达量。结果：Survivin只表达于脑星形细胞肿瘤中的肿瘤细胞,对正常脑组织中胶质细胞无表达。在脑星形细胞肿瘤中RT-PCR的检出率为65%（17/26）。Survivin基因mRNA的相对表达量与脑星形细胞肿瘤的病理分级密切相关,在高级别肿瘤中Survivin基因mRNA相对表达量和表达强度均高于低级别肿瘤（P〈0.05）。结论：随着星形细胞肿瘤分化程度的降低,Survivin相对表达量显著增强;其高表达预示着预后不良,可成为有价值的评估该肿瘤预后指标。     

PTEN基因对慢性粒细胞白血病Survivin、Xiap、Smac调控的研究

目的 探讨肿瘤抑制基因PTEN对人慢性粒细胞白血病(CML)中生存素(Survivin)、X连锁凋亡抑制蛋白(Xiap)、线粒体促凋亡蛋白(Smac)调控的作用.方法(1)将携带有野生型PTEN和绿色荧光蛋白的腺病毒(Ad-PTEN-GFP)及对照载体腺病毒(Ad-GFP)转染人慢性粒细胞白血病细胞系K562,四甲基偶氮唑盐(MTT)检测细胞增殖抑制率;流式细胞仪检测转染效率、细胞周期及凋亡率;荧光定量PCR(FQ-PCR)检测PTEN、Survivin、Xiap、Smac mRNA水平变化,Western印迹检测PTEN蛋白表达水平的变化.(2)研究10例慢性粒细胞白血病慢性期(CML-CP)、10例慢性粒细胞白血病急变期(CML-BC)及10名健康人(NC)骨髓单个核细胞内PTEN、Survivin、Xiap、Smac mRNA表达水平变化.结果 以感染复数(MOI)=200转染K562细胞后,Ad-PTEN-GFP组K562细胞最大增殖抑制率为38.6％,转染3d后Ad-PTEN-GFP组K562细胞内Survivin、Xiap、Smac mRNA表达水平(0.0700±0.0059、0.0089±0.0006、0.0600±0.0039)均明显低于Ad-GPF组(0.4370±0.0790、0.0661±0.0072、0.1580±0.0078)和未转染组(0.4530±0.0810、0.0700±0.0079、0.1770±0.0085),转染Ad-PTEN-GFP组与转染Ad-GFP相比Survivin mRNA表达水平降低6.14倍、Xiap降低7.44倍,而Smac mRNA降低2.95倍(均P＜0.01).CML-BC患者中PTEN mRNA表达水平低于CML-CP及健康对照组,而Survivin、Xiap、Smac mRNA在CML-BC患者中均高于CML-CP及健康对照组(均P＜0.01).结论 Survivin、Xiap、Smac基因可能在PTEN介导的慢性粒细胞白血病细胞凋亡通路中参与抑制细胞增殖、促进细胞凋亡的作用.     

Cyclin D1和Survivin蛋白在甲状腺乳头状癌中的表达及意义

目的探讨Cyclin D1和Survivin蛋白在甲状腺乳头状癌中的表达情况,并分析二者在甲状腺乳头状癌发生发展中的作用。方法选择39例手术后单侧发生甲状腺乳头状癌的石蜡标本及相应对侧正常组织,应用免疫组织化学EnVision法检测Cyclin D1和Survivin蛋白在组织中的表达,结合临床病理资料进行统计分析。结果 Cyclin D1蛋白在甲状腺乳头状癌中的阳性表达率为71.8%,正常组织中阳性率为7.7%,二者间比较差异有统计学意义(P<0.05);Survivin蛋白在甲状腺乳头状癌中的阳性表达率为59.0%,正常组织中阳性率为2.5%,二者间比较差异有统计学意义(P<0.05)。Cyclin D1和Survivin蛋白表达与患者年龄、性别、病灶部位无关(P>0.05),与淋巴结有无转移及病理分期有关(P<0.05)。Cyclin D1和Survivin蛋白在甲状腺乳头状癌中的阳性表达存在显著相关性(r=0.404,P<0.05)。结论 Cyclin D1和Survivin蛋白表达增高与甲状腺乳头状癌的发生发展密切相关,并且可能有一定的相互促进作用,二者联合表达与患者的预后相关。     

Survivin和CyclinD1在卵巢癌中的表达和相关性

目的：检测Survivin和CyclinD1在卵巢癌组织中的表达情况,探讨其与卵巢癌之间的关系。方法：采用链霉素-过氧化物酶（S-P）免疫组化方法检测20例正常卵巢组织、15例良性卵巢上皮性肿瘤组织和40例卵巢癌组织中Survivin和CyclinD1的表达情况。结果：Survivin在卵巢癌组织中、良性卵巢上皮性肿瘤组织中、正常卵巢组织中的阳性表达率分别为67．5％、6．7％、0％,呈现显著下降的趋势（P〈0．05）。CyclinD1在卵巢癌组织、良性卵巢上皮性肿瘤组织、正常卵巢组织中的阳性表达率分别为72．5％、20％、10％,呈现显著下降的趋势（P〈0．05）。在卵巢癌中Survivin阳性表达随着临床分期和组织分级升高、有淋巴转移而增强,CyclinD1阳性表达随着组织分级升高、有淋巴转移而增强。CyclinD1表达与Survivin表达存在正相关性。结论：Survivin和CyclinD1可能促进卵巢癌发生浸润、转移。两者可能在卵巢癌的形成和发展中起协同作用。