应用SPA的ELISA检测血清胰岛素抗体

应用SPA代替抗人IgG第二抗体的ELISA测定血清胰岛素抗体(IA)。经正交试验分析,受检血清稀释度是影响IA测定的主要因素。选用胰岛素包被浓度为10μg/ml,受检血清1:2.5稀释时,IA测定可获较满意的结果。竞争性结合抑制试验表明IA测定具有特异性。血清稀释试验提示OD值大小反映了IA滴度高低。28例正常人血清IA测定结果OD正常值范围(X±2SD)为0.05～0.25。使用胰岛素的DM病例均为阳性,而未使用胰岛素病例未发现IA阳性。本文认为应用该法测定IA是一种稳定、特异、简便的方法。     

分泌抗SPA单克隆抗体杂交瘤细胞系的建立与鉴定

以 SPA 作基础免疫 BALB/C 小鼠后,融合前三天直接脾内免疫,取脾细胞与 SP_2/O 瘤细胞常规融合,融合率100%;以快速 ELISA 法检测抗体,阳性率60%。5次有限稀释法克隆化后获得7株杂交瘤细胞,作中和抑制试验,证实为 SPA 特异性抗体。经鉴定属 IgG2a 及 IgG2b 亚类。电镜观察细胞融合,发现其细胞内含逆转录病毒。杂交瘤细胞液氮保存与体外连续传代一年,仍保持原有各种特性。     

酶标记SPA检测脐带血中风疹抗体的研究

用PPA-ELISA和HAI同时检测192份脐带血的风疹抗体,结果两者的阳性率差异无显著性,但血清抗体滴度的平均几何均值ELISA为1∶50.92,HAI为1∶16.22两者差异有显者性。PPA与马抗人IgG-HRP同在一条件下测定脐带血的风疹抗体结果基本一致,说明在ELISA中可以用PPA代替抗人IgG-HRP,前者又可直接用常规的阳性(兔)血清,同时测定出抗原效价和本身的使用浓度。     

用日本血吸虫成虫抗原ELISA检测血吸虫病抗体的现场应用

用日本血吸虫成虫抗原(AAg)和虫卵抗原(EAg)ELISA检测血吸虫病疫区粪检阳性病人134例,其阳性率分别为99.25％和98.51％。134例中45例儿童和89例成人用AAg检测,其阳性率分别为100％和98.88％,而用EAg检测的阳性率分别为97.78％和98.88％。AAg和EAg检测26例正常人均为阴性。结果表明:AAg与EAg的检出率以及儿童与成人的检出率均相似。     

肝卵石蜡切片酶联葡萄球菌A蛋白免疫酶染色检测血吸虫病抗体

本文报道应用肝卵石蜡切片抗原酶联葡萄球菌A蛋白免疫酶染色诊断日本血吸虫病的一种较新方法,对100例确诊病人,76例健康人的血清检测,阳性符合率和阴性符合率分别为93.0％和97.3％。本法特异性强,敏感性高,可作为血吸虫病的辅助诊断和流行病学调查的一种方法。     

ELISA间接法检测人轮状病毒血清抗体的研究

本文对ELISA间接法检测人轮状病毒(RV)血清抗体的方法学进行了探讨.结果表明,RV抗原能直接包被酶标反应板,与经免疫血清间接包被者无甚差异;RV抗原经EDTA、硫氰酸钾或盐酸胍预作用后再行包被,可提高抗原的包被效果.以ELISA间接法和间接双抗体夹心法同时检测34份血清标本,两者检出率无差异(P>0.05);进一步检测11份阳性血清的抗体效价,两法GMT分别为755.1和822.1,也无差异(P>0.05).进行ELISA间接法阻断试验,阻断率达95.6%;重复性试验表明变异系数在3.7～8.7%之间.因此,ELISA间接法敏感性高、特异性强和重复性好,可代替ELISA间接双抗体夹心法以检测RV血清抗体.     

酶标记SPA法检测肺炎患儿咽分泌物中的腺病毒和合胞病毒抗原

用酶标记SPA法检测了肺炎患儿咽脱落细胞中的腺病毒和合胞病毒抗原,证实此法具有明显的特异性。共检测了108例申的腺病毒抗原和238例中的合胞病毒抗原,与传统法的总符合率分别为87. 0%和87. 4%。经统计学处理,均与传统法有明显的一致性,说明可用于临床,作为小儿病毒性肺炎的快速诊断方法。     

检测脑脊液中结核IgG抗体对结脑诊断的研究

以聚台OT为抗原,用ELISA间接法,检测了155份结脑(42例),病脑(17侧)、化脑(14例)和非脑部感染患者(82例)脑脊液中的特异证IgG抗体。结果42例结脑中38例阳性,阳性率90.5％。病脑和化脑全部阴性,82例非脑部感染者有3例阳性,假阳性3.66％。提示该方法有较高的敏感性及特异性。初步认为可作为结脑诊断的重要手段之一。     

免疫传感器载体上SPA法固定抗体的条件探讨

目的 以乙肝病毒表面抗体为研究对象,摸索在免疫传感器载体上用葡萄球菌A蛋白(staphylococcal protein, SPA)固定抗体的最佳条件.方法 用SPA法在载体上固定系列浓度酶标记抗体,绘制抗体浓度-吸光度曲线,寻找SPA与抗体的最佳结合条件.结果 实验表明5 μl浓度为1 mg/ml的SPA与10 μl浓度为300 mIU/ml的抗体固定效果最佳.结论 用SPA法在免疫传感器载体上固定乙肝病毒表面抗体,能使检测达到较好的重现性、稳定性、线性和较宽的检测范围,为生物传感器用于临床免疫检测打下基础,具有实际的应用价值.     

老年冠心病人血清中抗CMV IgG抗体水平的探讨

用 ELISA 和 IFA 技术检测老年冠心病人、老年非冠心病人及正常献血员各30例血清中的抗 CMV IgG 抗体水平结果表明:老年冠心病人组抗 CMV IgG 抗体水平高于老年非冠心病人组和正常献血员组的抗体水平(P<0.01),作者对 CMV 的感染与动脉粥样硬化发病的关系进行了讨论。     

冠心病人血清中抗单纯疱疹病毒Ⅰ型IgG抗体检测

用 ELISA 和 RIA 技术检测冠心病人、老年非冠心病病人及正常献血员各30例的血清中抗 HSV-Ⅰ型 IgG 抗体水平。结果表明:正常献血员血清中抗HSV-Ⅰ型 IgG 抗体的水平高于老年病人组(P<0.01),但与冠心病人组无差异(P>0.05)。作者认为这一结果并不能完全否定病毒感染在动脉粥样硬化发病中起一定的作用,并进行了讨论。ELISA 和 RIA 均具有简便、灵敏、稳定可靠、微量等优点,其结果呈直线正相关(r=0.76)。     

酶联A蛋白检测补体防止免疫复合物沉积和溶解免疫复合物的能力

本文报道 HRP-SPA 检测 ICPIC 和 CMSC 方法,对 ICPIC 和 CMSC 产生条件和试验有关影响因素作了分析和探讨,同时观察了慢性乙型肝炎患者 ICPIC 和 CMSC 变化,证实其水平显著低于健康对照组。     

人宫颈脱落细胞单纯疱疹病毒抗原的检测

本文对60例宫颈癌病人,38例宫颈上皮不典型增生者,70例慢性宫颈炎及60例正常妇女作了宫颈脱落细胞HSV-2抗原的免疫酶标检测。各组HSV-2抗原阳性率检测结果比较显示:宫颈癌(70.0%)与宫颈不典型增生组(55.26%)显著高于宫颈炎(12.86%)与正常组(6.67%)(P<0.01)。宫颈癌病人与同年龄范围的对照妇女比较,癌症组HSV-2抗原阳性率(70.0%)仍明显高于非癌对照组(15.1%)(P<0.01)。提示宫颈癌病人中有较高的生殖道HSV-2感染率。     

免疫酶斑点试验(Dot-ELISA)诊断斯氏肺吸虫病的研究

用Dot-ELISA检测了30份斯氏肺吸虫抗原皮试阳性的患者血清,其中,斯氏肺吸虫循环抗体(CAb)呈阳性反应的血清有12份,阳性率为40％(12/30),同时检测的80份正常人血清,全部呈阴性反应。检测结果与间接ELISA法的相同。在实验动物血清的检测方面,斯氏肺吸虫免疫的兔血清,效价达1 :6400,而人工感染血吸虫、华枝睾吸虫、弓形虫溶组织内阿米巴的兔血清及正常兔血清均为阴性。实验表明,Dot-ELISA法具有较高的特异性、敏感性,其检测结果可作为临床诊断的可靠依据。     

人血清中青霉素抗体的酶联免疫吸附测定

目的: 建立检测青霉素抗体的ELISA法,并探讨其临床意义。方法: 以氨苄西林用SPDP法与兔血清白蛋白交联,用此交联物为包被抗原,HRP-抗人IgG为酶标抗体,建立检测青霉素抗体的ELISA法,并对部分临床标本进行青霉素抗体检测。结果: 建立的方法其批内、批间变异系数分别为6.8%、8.4%。氨苄西林-兔白蛋白交联物免疫家兔获得兔抗氨苄西林的抗体,以此抗体作阻断试验,抑制HRP-抗人IgG的显色。临床标本检测结果表明,不同疾病患者青霉素抗体的阳性率不同。结论: ELISA可用于临床对青霉素抗体的检测,具有较好的特异性、敏感性和重复性。     

检测抗HSV-1IgG的斑点金免疫渗滤方法的建立

目的：建立检测人血清中抗单纯疱疹病毒Ⅰ型IgG（抗HSV-1 IgG）的斑点金免疫渗滤法（DIGFA）。方法：增殖纯化HSV-1抗原并包被于硝酸纤维素膜，自制胶体金并用于标记羊抗人IgG，自制斑点金免疫渗滤检测装置，用于检测血清中抗HSV-1 IgG。结果：当血清样本中抗HSV-1 IgG为阳性时，滴加的金标羊抗人IgG可使检测装置膜上出现红色斑点。以DIGFA与酶联免疫吸附试验（ELISA）用于检测血清样本41份，两法差异无显著性（X^2=0.01，P〉0.05）。结论：建立了检测抗HSV-1 IgG的斑点金免疫渗滤方法，该法较其他方法检测时间短，操作简便快捷。     

广西罗城县少数民族和汉族人群血清EB病毒感染情况分析

目的探讨EBV病毒感染的民族差异性。方法收集广西罗城仫佬族自治县健康成人血清共3 060例(仫佬族1 497例,毛南族963例,汉族600例)及其基本信息,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清中VCA-IgA、Zta-IgA、EBNA1-IgA 3种抗体的水平,结果以校正相对吸光度值(ArA)表示,分别统计3种抗体的阳性率,分析民族之间的差异。结果 VCA-IgA、Zta-IgA阳性率仫佬族和毛南族(9.22%、8.28%和8.83%、7.48%)高于汉族(5.67%、3.670%),差异有统计学意义(P<0.05)。结论广西罗城仫佬族自治县成人EB病毒感染率较高,在同一年龄段内仫佬族、毛南族人群罹患鼻咽癌的风险比汉族高。     

单克隆抗体分析单纯疱疹病毒的抗原性

用15种抗HSV型共同性McAb相2种分别抗HSV-1和HSV-2的型特异性McAb,分析了43株HSV临床株的抗原性。间接免疫荧光试验和改良ELISA的分机结果表明,从宫颈炎患者分离出的15株HSV中,1株为HSV-1,14株为HSV-2;从口唇和眼部感染病变中分离出的28株HSV均为HSV-1.用15种型共同性McAb对HSV的抗原性分析表明43株HSV分离株中,22株(51.2％)可与所有型共同性McAb反应,21株(48.8％)仅与部分McAb反应。结果表明,HSV临床分离株间及不同的HSV参考株间在抗原性上有明显差异,其原因有待进一步研究。