左归丸对免疫性卵巢早衰小鼠性激素的影响

目的 观察左归丸对免疫性卵巢早衰(POF)小鼠外周血抗透明带抗体(AZpAb)、FSH、E₂水平变化的影响,进一步揭示中药补肾养血活血法在调节卵巢功能方面的作用机制。方法 以小鼠透明带3所合成透明带多肽为免疫原,免疫SPF级BALB/C雌性小鼠,建立小鼠免疫性POF模型,随机分为模型组、左归丸高、中、低剂量组,强的松组、己烯雌酚组和对照组,共灌胃给药4周。采用ELISA法检测外周血FSH及E₂、AZpAb值。结果 FSH、AZpAb组间的比较测定值都有显著性差异;各用药组之间对正常组及模型组比较：己烯雌酚组的FSH值有极显著的意义,左归丸高、低剂量组的E2值有显著的意义,左归丸高、中、低剂量组及己烯雌酚组的AZpAb值都有极显著的意义。结论 左归丸能使阴虚小鼠外周血中雌二醇含量增加,减缓POF小鼠外周血FSH的升高,抑制AZpAb产生,改善POF小鼠卵巢免疫性炎症的损伤。     

左归丸对免疫性卵巢早衰小鼠卵巢Fas、Fas—L表达的影响

目的：探讨免疫性卵巢早衰小鼠（POF）卵巢Fas、Fas-L蛋白的表达及补肾复方左归丸的影响。方法：以小鼠透明带3为抗原，皮下多点注射免疫BALB／C雌性小鼠建立免疫性卵巢早衰模型。设左归丸低、中、高不同剂量进行治疗，以泼尼松、己烯雌酚为阳性对照，免疫组化法检测卵巢卵泡、间质Fas、FasL蛋白的表达。结果：POF小鼠大、小卵泡Fas蛋白表达均明显减少，小卵泡、间质FasL表达均明显增强。左归丸各剂量组大、小卵泡Fas表达明显增强；左归丸低剂量组间质Fas表达也增强，小卵泡FasL表达减弱；左归丸高剂量组问质Fas表达也均增强，与模型组相比差异显著。结论：POF小鼠Fas／FasL系统平衡失调，B细胞凋亡减弱，抗体聚集，抑制免疫应答的效应减低，导致对卵巢的免疫性损伤，卵巢功能的破坏、衰竭。补肾中药复方左归丸可通过调节Fas／FasL系统平衡，调节免疫反应及细胞毒性淋巴细胞功能，促进B细胞凋亡，抑制抗体聚集，减轻卵巢免疫炎性反应，改善卵巢功能。     

调经汤治疗卵巢早衰的药效学研究

目的:观察调经汤对卵巢早衰大鼠卵巢功能的影响。方法:将60只雌性成熟未交配Wistar大鼠,随机分为正常组、模型组、阳性药物(雌二醇)对照组、调经汤高、中、低剂量组,腹腔注射顺铂溶液制作大鼠卵巢早衰动物模型,观察大鼠动情周期、血清性激素FSH、E2和LH的变化及卵巢组织的病理改变。结果: 模型组和阳性药物对照组大鼠无稳定的动情周期,调经汤高、中剂量组逐渐恢复规律的动情周期。模型组血清E2水平含量降低,血清FSH和LH含量均升高,与空白对照组相比差异有统计学意义(P<0.05);与模型组相比,调经汤高中低剂量组血清FSH水平含量明显降低、E2含量明显升高,差异具有统计学意义(P<0.05);血清LH含量水平降低,差异无统计学意义(P>0.05)。模型组大鼠卵巢萎缩,卵泡生长少,闭锁卵泡增加,部分被纤维组织代替,黄体数量少,子宫内膜明显变薄。调经汤高、中、低剂量组能不同程度的增多卵泡数量和黄体数目,子宫内膜也有所增厚。结论:调经汤能有效改善顺铂诱导的模型大鼠卵巢功能。     

左归丸对免疫性卵巢早衰小鼠的治疗作用

目的 通过对BALB/c小鼠多点注射透明带多肽,造成免疫性卵巢早衰模型,研究左归丸对免疫性卵巢早衰模型的治疗作用. 方法 (1)建立小鼠免疫性卵巢早衰模型:以小鼠透明带3所合成透明带多肽为免疫原,以其免疫SPF级BALB/C雌性小鼠.以出现动情周期紊乱、卵巢细胞受损,表示造模成功.(2)造模成功后,将BALB/c小鼠随机分为模型组、左归丸高、中、低剂量组,泼尼松组、己烯雌酚组和对照组,共灌胃给药4周. 结果 模型组小鼠在第3～8周的体重与对照组比较,具有显著性差异(P<0.05).模型组仅有16.7%(2/12)的动物维持正常的性周期,而空白对照组有91.7%(11/12)的动物维持正常的性周期.模型组小鼠卵巢中颗粒细胞、卵母细胞的凋亡率与对照组比较,具有显著性差异(P<0.05). 结论 左归丸可能具有改善免疫性卵巢早衰小鼠症状的作用.     

补肾活血方对小鼠自身免疫性卵巢功能衰退的防治作用

目的：探讨补肾活血中药对小鼠自身免疫性卵巢功能早衰（premature ovarian failure．POF）的防治怍用。 方法：以BALB／c雌性小鼠卵巢组织制备卵巢抗原，皮下和两后脚掌多点注射免疫同种雌性小鼠建立卵巢早衰模型。分别在第1次免疫以及第3次免疫后给予补肾活血中药，灌服中药后分析阴道脱落细胞涂片．酶联龟疫法检测外周血雌二醇（estradiol，E2）、卵泡刺激素（follicle-stimulating hormone．FSH）以及黄体生成素（1uteinizing hormone，LH）浓度。 结果：POF小鼠卵巢间质可见淋巴细胞浸润，外周血FSH和LH升高,E2下降明显（P〈0.05）；而补肾活血中药能减少POF小鼠外周血FSH和LH含量，提高体内E2水平。早期预防比岳期治疗用药作用显著。 结论：补肾活血中药主要通过纠正紊乱的生殖内分泌轴，恢复部分卵巢功能，对免疫性卵巢早衰具育防治作用。     

育泡饮对小鼠自身免疫性卵巢损伤保护作用的实验研究

目的探讨中药复方育泡饮对实验性自身免疫性卵巢早衰(POF)小鼠卵巢功能的影响。方法以成熟的SD雌性大鼠卵巢组织制备卵巢抗原,皮下多点注射免疫BALB/C雌性小鼠,建立卵巢早衰模型。在3次免疫后连续灌服中药复方,以强的松为阳性对照,酶联免疫法检测外周血雌二醇水平(E2)、卵泡刺激素(FSH)、外周血抗卵巢抗体(AoAb),IL-4、IL-10,观察卵巢的形态学变化,并计数各级卵泡及黄体数目。结果POF小鼠外周血E2下降,FSH升高,AoAb阳性,IL-4、IL-10明显提高,卵巢内有大量淋巴细胞浸润,各级卵泡及黄体数目减少。育泡饮能提高体内E2水平,减缓POF小鼠外周血FSH升高,抑制AoAb产生,降低IL-4与IL-10水平,减轻卵巢内淋巴细胞浸润,使各级卵泡及黄体数增加,育泡饮高剂量组比中剂量、低剂量组作用显著。结论育泡饮能减轻卵巢自身免疫性炎症损伤,对自身免疫性卵巢早衰具有治疗作用。     

仙子益真胶囊对卵巢早衰小鼠外周血清性激素水平的影响

目的观察补肾填精中药仙子益真胶囊对卵巢早衰(premature ovarian failure,POF)模型小鼠性激素调节作用,初步探讨仙子益真胶囊治疗卵巢早衰的可能机制。方法选用动情周期规律的SPF级雌性C57BL/6J性小鼠随机分为空白对照组、造模组。造模组使用雷公藤多苷片造模成功后,再随机分为模型组,益真低、中、高剂量组和西药组,并予以相应干预。治疗结束后ELISA测定血清中雌二醇(estradiol,E2)、卵泡刺激素(follicle-stimulating hormone,FSH)及黄体生成素(luteinizing hormone,LH)的含量。结果与空白对照组比较,模型组E2含量下降,FSH、LH含量升高,差异有统计学意义(P0.01);与模型组比较,益真低剂量组、益真中剂量组、益真高剂量组、西药组E2含量上升,FSH、LH含量下降,差异有统计学意义(P0.01)。结论补肾填精中药仙子益真胶囊可以提高POF模型小鼠血清E2的含量,降低FSH、LH的含量,改善POF小鼠生殖内分泌环境。     

微RNA-21和Peli1在自身免疫性早发性卵巢功能不全小鼠体内的表达及意义

目的探讨miR-21和其下游靶基因Peli1在自身免疫性早发性卵巢功能不全（POI）模型小鼠的表达和意义。方法将24只雌性BALB/c小鼠随机均分为POI组和对照组（n=12），分别予皮下注射ZP3多肽和生理盐水。通过小鼠卵泡计数，观察动情周期和检测血清中E2、FSH和AMH评估卵巢功能，酶联免疫吸附法(ELISA)测定炎性因子IFN-γ和IL-10，流式细胞仪分析脾脏Treg细胞比例，生物信息学预测miR-21的靶基因，qRT-PCR法检测外周血、卵巢组织miR-21表达和外周血、脾脏Treg细胞Peli1表达。结果二次免疫6周后，POI组小鼠基本无动情期，而对照组动情周期均正常。Peli1为miR-21的靶基因。POI组小鼠各级卵泡计数，E2、AMH、IL-10水平，脾脏Treg细胞比例，miR-21、Peli1表达均明显较对照组低（p＜0.05），而FSH、IFN-γ水平明显较对照组高(p＜0.05)。结论miR-21和其下游靶基因Peli1在自身免疫性POI小鼠模型中的表达均明显降低，提示miR-21和Peli1可能参与自身免疫性POI的发病。     

补肾养血方对去势雌性大鼠动情周期及性激素水平影响的研究

目的：探讨补肾养血方对去势雌性大鼠动情周期及性激素E2、FSH、LH水平的影响。方法：选用50只SD雌性大鼠,采用去势大鼠模型,随机分为模型对照组、六味地黄汤组、补肾养血方高剂量组、低剂量组,并与假手术组对照,每日做阴道脱落细胞涂片,观察大鼠动情周期,各组用药连续20日后采血样用放免法测定性激素E2、FSH、LH值。结果：研究表明补肾养血方能使去势大鼠阴道上皮细胞出现角化现象,缩短动情间期,恢复动情期;明显升高去势大鼠血清E2水平（P〈0.01）,降低FSH和LH水平（P〈0.01）。结论：研究表明补肾养血方能改变去势大鼠动情周期,缩短动情间期,恢复动情期;并能提高去势大鼠血清E2水平,降低血清FSH和LH含量。     

HRT联合左归丸治疗肾阴虚型卵巢早衰的疗效观察

目的 观察激素替代疗法(hormone replacement treatment,HRT)联合左归丸治疗肾阴虚型卵巢早衰的临床疗效。方法 将65例卵巢早衰患者按就诊次序分为2组,治疗组35例,对照组30例。治疗组用HRT联合左归丸治疗;对照组单用HRT,30d为1个疗程,共治疗3个疗程,随后2组均停止HRT,但治疗组仍继续服用左归丸2个月。观察2组患者卵泡刺激素(FSH)、黄体生成素(LH)、雌二醇(E2)水平。结果 治疗组总有效率为88.5%,对照组总有效率为83.3%,2组比较差异无统计学意义(P0.05),但治疗组在改善FSH、LH、E2水平和中医症状方面均明显优于对照组(P0.05)。结论 HRT联合左归丸治疗肾阴虚型卵巢早衰,能改善血清激素水平和提高临床疗效。     

不同治法方药治疗小鼠自身免疫性卵巢功能衰退的比较研究

目的：比较补肾法、活血法、疏肝法对小鼠自身免疫性卵巢功能衰退（premature ovarian failure,POF）的干预作用。方法：以BALB／C雌性小鼠卵巢组织制备卵巢抗原。皮下和两后脚掌多点注射免疫同种雌性小鼠建立自身免疫性卵巢功能衰退模型。六味地黄丸、少腹逐瘀颗粒及柴胡疏肝丸分别治疗3周后,酶联免疫吸附测定法检测血清雌二醇（estradiol,E2）、卵泡刺激素（follicle—stimulating hormone,FSH）、黄体生成素（luteinizing hormone,LH）、催乳素（prolactin,PRL）、睾酮（testosterone,T）以及抗卵巢抗体和抗透明带抗体。结果：模型组小鼠血清FSH、LH较正常组明显升高,E2显著下降（P〈0．05）,PRL、T含量与正常组比较差异无统计学意义（P〉0．05）;模型组小鼠抗卵巢抗体阳性率为84．2％,抗透明带抗体阳性率为78．9％。与正常组相比,差异有统计学意义（P〈0．05）。六味地黄丸显著下调小鼠血清FSH、LH水平,提高E2含量（P〈0．05）;而抗卵巢抗体及抗透明带抗体仅有下降趋势,与模型组比较差异无统计学意义（P〉0．05）。少腹逐瘀颗粒组小鼠血清FSH、LH含量有下降趋势,E2含量稍有升高,但差异无统计学意义（P〉0．05）;其抗卵巢抗体和抗透明带抗体阳性率与模型组相比,差异有统计学意义（P〈0．05）。柴胡疏肝丸组小鼠抗卵巢抗体和抗透明带抗体阳性率,与模型组相比差异有统计学意义（P〈0．05）。各种治疗对血清PRL和T含量无明显影响。结论：补肾中药可以显著改善自身免疫性卵巢功能衰退小鼠生殖内分泌轴功能,活血及疏肝中药可以调整自身免疫性卵巢功能衰退小鼠体液免疫功能。     

卵巢早衰32例临床分析

目的探讨卵巢早衰的治疗,加深对卵巢早衰的认识及重视程度.方法对1999年10月至2006年10月诊断的32例卵巢早衰患者的临床资料及治疗情况进行回顾性分析.结果卵巢早衰患者血清性激素测定显示E2值低于或等于卵泡期水平,FSH和LH值明显升高,PRL值在正常范围.卵巢早衰患者常伴有情绪异常、不同程度的生殖器和乳房萎缩、骨矿物缺乏和骨质疏松、通过合理的激素替代治疗,临床症状能得到明显改善,但完全恢复正常极困难.结论卵巢早衰病因复杂、治疗困难、治愈率低、值得临床重视和研究.     

补肾养阴法协同干细胞移植治疗化疗后卵巢早衰的实验研究

目的探讨补肾养阴法协同骨髓间充质干细胞(BMSCs)移植治疗卵巢早衰(POF)的可行性。方法以连续腹腔注射环磷酰胺(CTX)14 d的方法建立卵巢早衰模型。其后分别用BMSCs移植及BMSCs移植联合补肾养阴中药灌胃法治疗卵巢早衰,以青年大鼠为空白对照,治疗28 d后,Elisa法检测外周血雌二醇(E2)、卵泡刺激素(FSH);Tunel法检测卵巢颗粒细胞凋亡;Western-blot法检测Bcl-2相关X蛋白(Bax)mRNA、B淋巴细胞瘤-2基因mRNA(Bcl-2)相对表达量。结果 A组(空白对照组)注射生理盐水前后激素水平无明显变化;建模后14 d,与A组比较,B组(模型组)大鼠血E2水平显著降低(P0.01),而FSH水平明显升高(P0.01);与B组比较,治疗后C组(干细胞干预组)及D组(干细胞+补肾养阴药物干预组)E2水平呈逐渐上升趋势(P0.01),FSH水平逐渐下降(P0.01),其中D组变化幅度明显高于C组(P0.05);Tunel法检测细胞凋亡结果显示,A组染色较少,B组最多,C、D 2组染色程度介于A、B组之间,C、D 2组之间染色程度差异不明显。Western-blot检测结果显示,Bax mRNA在B组表达明显增多(P0.01),用药后,C、D 2组Bax mRNA有所下降,尤其以D组明显,与B组比较,差异有显著性意义(P0.05)。Bcl-2 mRNA在B组表达最少(P0.01);用药后,C、D 2组Bcl-2 mRNA表达均有所增加,与B组比较,差异有极显著性意义(P0.01)。结论 BMSCs移植联合补肾养阴中药灌胃法可改善化疗后(POF)大鼠卵巢功能,其疗效优于单纯使用BMSCs移植。     

经阴道多普勒超声检测卵巢早衰患者卵巢血流变化与卵巢激素水平的相关性

目的探讨卵巢早衰患者卵巢血流指标与激素水平的相关性。方法研究对象为临床及实验室诊断为卵巢早衰的20例患者（POF组）和正常育龄妇女20例（CTR组）进行彩色多普勒超声检查,并检测两组同时期的血清雌二醇（17β-estradiol,E2）、卵泡刺激素（follicle-stimulating hormone,FSH）和促黄体生成素（luteinizing hormone,LH）。结果POF组FSH、LH、阻力指数（resistive index,RI）、搏动指数（pulsatilityindex,PI）值高于CTR组,E2、收缩期峰流速（peak systolic velocity,PSV）明显低于CTR组,两组间卵巢动脉血流指标、激素水平的差异均有统计学意义（P〈0.05）。POF组卵巢血流PSV与E2呈正相关（r^2=0.93,P〈0.05）,PSV与FSH呈负相关,（r^2=-0.64、-0.55,P〈0.05）。PI、RI与激素无相关性。结论卵巢早衰患者的卵巢动脉血流、激素水平与卵巢功能密切相关,经阴道超声检查卵巢血流变化结合卵巢激素水平为卵巢早衰的早期诊断和预测治疗提供了新的方法。     

抑制素B水平及相关因素与卵巢反应性的探讨

目的：探讨抑制素B（INHB）水平及相关因素与卵巢反应性的关系,寻求预测卵巢反应性的较好指标。方法：收集55例首次接受体外受精/单精子卵胞浆内注射受精-胚胎移植术（IVF/ICSI-ET）治疗的患者,在上次月经周期的第2~4天及降调节后控制性卵巢刺激日分别取血测定INHB、卵泡刺激素（FSH）;根据获卵数、注射绒毛膜促性腺激素日雌激素水平、促性腺激素（Gn）用量,将患者分为低反应组、正常反应组、高反应组,比较3组降调节前后INHB及FSH水平、年龄（AGE）、窦卵泡数（antral follicles counts,AFC）、Gn用量、Gn起始剂量,分析卵巢反应性与这些指标的关系。结果：（1）降调节前后的INHB（bINHB、INHBd0）水平、AGE、AFC、Gn用量、Gn起始剂量在3组之间有统计学差异（P〈0.05）,降调节前后的FSH（bFSH、FSHd0）水平在3组间无统计学差异（P〉0.05）;（2）获卵数与降调节前后INHB水平、AGE和AFC无相关性,与降调节前后FSH水平呈负相关,降调节FSH水平较基础FSH水平更具统计学意义。结论：降调节前后的INHB水平可能不是预测卵巢反应性的较好指标,降调节前后的FSH水平可能能较好的预测卵巢反应性,且降调节后的FSH水平可能较基础FSH水平更具有临床价值。     

循期阴阳序贯疗法对化疗致POF大鼠血清INHB的影响

目的通过研究循期阴阳序贯疗法对化疗致POF大鼠血清INHB水平变化的影响,为建立中医药治疗POF提供有效治疗方案及其临床推广应用提供科学依据。方法选取动情周期规律的SD大鼠纳入实验,运用环磷酰胺腹腔注射造模。选取造模成功的大鼠随机分成左归丸组、右归丸组、循期阴阳序贯低、中、高剂量组、雌孕序贯组、模型组、空白对照组并分别给予不同治疗药物。治疗20天后,股动脉采血并处死大鼠,运用酶联免疫吸附法检测各组大鼠血清抑制素B（INHB）浓度。结果循期阴阳序贯组对大鼠血清INHB水平有不同程度的升高（与模型空白组比较P〈O．05）。循期阴阳序贯组比左归丸组（即单补肾阴）大鼠血清INHB水平亦有不同程度的升高（P〈0．05）。结论循期阴阳序贯组对化疗致POF大鼠可以增加血清INHB浓度,说明此疗法可以改善化疗致卵巢早衰大鼠的卵巢功能,为其临床推广应用提供了实验依据。     

小鼠卵巢玻璃化冻存中FSH干预对移植卵巢VEGF和VEGFR-2表达的影响

目的 通过在玻璃化冻存液中给予重组人促卵泡刺激素（rhFSH）,观察冻存卵巢异体异位移植后VEGF和VEGFR-2表达的变化,探索卵巢玻璃化冻存中的FSH干预对移植卵巢血流重建相关因子的影响.方法 对4周龄C57BL/6J小鼠卵巢进行异体肾被膜下移植,实验分为新鲜移植组（FCG）、单纯玻璃化冻存移植组（VCG）和0.3IU·mL^-1 FSH干预玻璃化冻存移植组（VG-FSH）.通过监测受体小鼠动情周期的变化、卵巢组织切片中正常卵泡百分比、移植后2、7、14、28d卵巢VEGF及其受体VEGFR-2的表达,判断FSH干预效果.结果 FSH干预冻存组的正常卵泡数、VEGF及VEGFR-2的表达均高于单纯玻璃化冻存组（P＜0.05）,且均低于新鲜移植组;FSH干预冻存组动情周期恢复所需时间明显低于冻存组（P＜0.05）,而明显长于新鲜移植组（P＜0.05）.结论 玻璃化冻存全程添加FSH干预,有利于冻存卵巢移植后的卵泡存活及功能恢复,可能与上调促血管生成的VEGF、VEGFR-2蛋白的表达有关.     

不同止血方法以及GnRH- a的使用对双侧卵巢异位囊肿剥除术后卵巢储备功能的影响

目的：探讨不同止血方法以及GnRH- a的使用对双侧卵巢异位囊肿剥除术后卵巢储备功能的影响。方法选择2007-06-2012-03妇科住院行腹腔镜或开腹双侧卵巢子宫内膜异位囊肿剥除手术治疗的育龄患者140例,于术前月经周期第2天、手术后1、6和12个月月经第2天抽取静脉血测定FSH、LH、E2值;根据术中止血方法将患者分为电凝组（70例）和缝合组（70例）,从中选取116例根据术后是否使用GnRH- a分为GnRH- a组（58例）和对照组（58例）,根据术前、术后1、6和12个月静脉血FSH、LH、E2值的变化情况来评估不同止血方法以及GnRH- a对双侧卵巢异位囊肿剥除术后卵巢储备功能的影响。结果术后1个月电凝组FSH、FSH/LH和E2水平均高于缝合组,差异均有统计学意义（均P＜0.05）;术后6个月GnRH- a组FSH、FSH/LH和E2水平分别均低于对照组,差异均有统计学意义（均P＜0.05）;术后12个月GnRH- a组患者58例中FSH恢复正常范围有55例（94.8%）,对照组患者58例中FSH恢复正常46例（79.3%）,前者高于后者,差异有统计学意义（P＜0.05）。结论卵巢异位囊肿剥除术中电凝止血会导致卵巢储备功能下降,术后联合GnRH- a治疗可促进卵巢储备功能的恢复。