大分子葡萄糖酐血瘀证动物模型表征的偶氮蓝变化特征

目的探讨偶氮蓝与不同浓度大分子葡萄糖酐所致血瘀证动物模型血瘀程度表征变化规律的关系。方法用0.5%偶氮蓝配制的5%、10%、15%的大分子葡萄糖酐造模,观察偶氮蓝在大分子葡萄糖酐所致血瘀证模型动物耳廓、舌体呈现出的体表表征变化,检测耳廓、血浆中偶氮蓝含量。结果糖酐各组1h后耳廓及舌体出现不同程度蓝色瘀斑,且与大分子葡萄糖酐注射浓度呈正相关。同对照组大鼠相比,糖酐各组大鼠1h后耳廓偶氮蓝含量随大分子葡萄糖酐注射浓度的增加而增加,血浆偶氮蓝含量则随其注射浓度的增加而减少。结论大鼠尾静脉注射用0.5%偶氮蓝配制的不同浓度的大分子葡萄糖酐后能使血瘀证模型大鼠的血瘀程度在其耳和舌体等体表表征中较为直观地呈现出来,且大分子葡萄糖酐注射浓度不同所致血瘀证模型大鼠耳廓和血浆偶氮蓝含量变化与耳廓、舌体在同一时间出现的血瘀程度明显相关,说明偶氮蓝可以客观反映大分子葡萄糖酐所致血瘀证模型大鼠血瘀程度的表征变化。     

大分子葡萄糖酐所致血瘀模型小鼠中偶氮蓝渗出量与血瘀程度的相关性

目的探讨大分子葡萄糖酐血瘀模型小鼠偶氮蓝渗出量和血瘀程度的相关性。方法用0.5%偶氮蓝将大分子葡萄糖酐配制成10%、5%、2.5%的浓度,尾静脉注射,0.1mL/10g,分别在注入后0.5、1、2h对造模小鼠耳、舌的颜色进行观察,并用丙酮无水硫酸钠溶液将耳组织中的偶氮蓝提出,在590μm测定各实验组小鼠耳廓偶氮蓝含量。结果实验结果表明,不同浓度的大分子葡萄糖酐所致血瘀模型的血瘀程度明显不同,同单用偶氮蓝组小鼠相比,大分子葡萄糖酐10%、5%、2.5%的浓度造模小鼠的耳、舌的颜色明显呈现蓝色,随着剂量的增加偶氮蓝渗出量明显增加(P<0.05或0.01),在尾静脉注射后0.5h,造模小鼠耳、舌的颜色呈现点状或片状蓝色,在尾静脉注射后1h,造模小鼠耳、舌的颜色明显呈现蓝色,在尾静脉注射后2h,造模小鼠耳、舌的颜色明显消退。结论表明大分子葡萄糖酐所致血瘀模型的血瘀程度和偶氮蓝渗出量明显相关,呈现明显的量效和时效关系。     

丁苯酞对脑白质慢性缺血性血管发生及血脑屏障的影响研究

目的 探讨丁苯酞对脑白质区域慢性缺血性血管发生与血脑屏障状态的影响及可能机制.方法 72只雄性Wistar大鼠随机分为对照组、缺血组、干预组,缺血组及干预组大鼠行双侧颈总动脉结扎,干预组大鼠给予丁苯酞溶液灌胃.术后4周对大鼠检测脑深部白质微循环血管密度以了解微循环状况,检测血管内皮细胞生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)mRNA表达水平以了解血管发生状态,检测静脉注射伊文思蓝6 h后脑组织伊文思蓝浓度以评估血脑屏障破坏水平.结果 缺血组大鼠脑白质微循环密度、VEGF mRNA表达水平以及脑组织伊文思蓝浓度均高于对照组.干预组微循环密度高于缺血组,但VEGF mRNA表达水平、脑组织伊文思蓝浓度低于缺血组.结论 丁苯酞可明显改善慢性缺血脑白质区域的微循环状态,下调血管发生水平,降低血脑屏障通透性.微循环的改善有助于保护血脑屏障,其机制可能与抑制血管发生有关.     

LPS对正常和脾虚大鼠体温的影响

目的：比较LPS对不同状态大鼠体温的影响。方法：大鼠随机分为正常对照组、单纯发热组（正常＋LPS）、脾虚发热组（脾虚＋LPS）共3组,每组10只。脾虚发热组先用饮食失节＋过度疲劳法复制脾虚模型,连续21天,每周末称量体重1次,并观察其外观行为表征变化。于造模第22天的上午8：00,脾虚发热组大鼠和单纯发热组大鼠腹腔注射LPS（80μg/kg）,正常对照组注射等量生理盐水。分别于注射后30、60、120、180、240、330min测肛温,绘制各组平均体温曲线。结果：与正常对照组和单纯发热组比较,脾虚发热组大鼠在3周末的体重明显降低,差异有非常显著性意义（P〈0.01）。较之正常对照组和单纯发热组,脾虚发热组大鼠第3周出现动作迟缓、神情倦怠、饮食减少、毛发不泽、倦卧、便溏等变化,外观行为变化积分值明显升高,差异有非常显著性意义（P〈0.01）。与正常对照组比较,单纯发热组大鼠的体温在60、120、180、240、330min时均明显升高,脾虚发热组的体温在30min时有一过性降低,之后体温显著升高,其中在60、120、180、240min时的差异均具有非常显著或显著性意义（P〈0.01或P〈0.05）;与单纯发热组相比,脾虚发热组大鼠体温在30、60、120、330min的体温降低,其差异均有显著或非常显著性意义（P〈0.05或P〈0.01）。结论：LPS对正常和脾虚大鼠均可引起体温升高,但升高的体温在幅度和持续时间方面均有所不同。提示LPS引起机体发热的反应模式因机体状态而有所不同。     

烟酰胺联合链脲佐菌素诱导2型糖尿病大鼠模型的研究

目的：采用烟酰胺（NAA）联合链脲佐菌素（STZ）诱导方法建立2型糖尿病大鼠模型,并探讨NAA的最佳保护剂量。方法：将体重220～250g的雄性wistar大鼠70只随机分为7组,分别为对照组（A组：腹腔注射生理盐水,15min后尾静脉注射柠檬酸缓冲液）和造模组（B—G组：分别先腹腔注射100、120、140、160、180、200mg／kg的NAA溶液,15min后再尾静脉注射65mg／kg新鲜配制的STZ溶液）,造模后观察大鼠的尿量及饮水量,每周测定摄食量、体重及空腹血糖（FBG）,连续测定4周,实验结束测定各组大鼠糖化血红蛋白（HbAlc）及胰岛素（FINS）水平,并计算胰岛素抵抗指数（HOMA—IR）,同时取大鼠胰腺行病理组织学检查。结果：实验过程只有B组有大鼠死亡,病死率为20％;B～G组的成模率依次为87．5％、80％、40％、20％、0％和0％。与A组相比,造模纽中只有B和C组大鼠的饮水量、尿量、摄食量明显增加（P〈0．05）,体重增长却明显减慢（P〈0．05）,造模4周只有B和c组的HbAlC、FINS及HOMA—IR与A组比有显著性差异（P〈O．05）,胰岛细胞数目及体积也显著减少。结论：大鼠腹腔注射120mg／kgNAA,并于15rain后尾静脉注射65mg／kgSTZ,可制备出成模率高、病死率低、症状明显的2型糖尿病大鼠模型。     

不同血瘀造模对B16荷瘤鼠肝转移模型的影响

目的 比较不同血瘀造模对B16荷瘤鼠肝转移模型的影响.方法 取60只6周龄雌性C57BL/6J小鼠,随机分为正常对照组、单纯荷瘤组、BS1(利血平法)组、BS2(游泳复合高分子右旋糖酐法)组、BS3(寒凝复合肾上腺素法)组和BS4(地塞米松复合肾上腺素法)组,首先根据中医理论用不同造模方法形成血瘀模型,然后经脾接种B16黑色素瘤建立肝转移模型.用激光多普勒观察小鼠耳廓微循环变化,并在接种后第15天小鼠眼眶取血,检测红细胞免疫功能和血清唾液酸酶(SA)含量的变化,并麻醉处死动物,观察肝转移情况.结果 ①单纯荷瘤组和各血瘀荷瘤组小鼠的耳廓微循环血流均明显减少(P＜0.01),以BS2组降低显著.②单纯荷瘤组和各血瘀荷瘤组小鼠的红细胞免疫功能亦明显降低(P＜0.01),血清SA含量显著升高(P＜0.05,P＜0.01),以BS2和BS3组变化明显.③肝转移发生率:单纯荷瘤组、BS2组和BS3组均为100%,BS1组为80%,BS4组为60%,肝转移抑制率:BS2组、BS3组、BS1组和BS4组分别为-71.76%、3.90%、16.42%、100.6%.④荷瘤鼠肝转移的肝重与其耳廓微循环血流、红细胞免疫功能和唾液酸酶含量具有显著的相关性(P＜0.05,p＜0.01).结论 不同血瘀造模对B16荷瘤鼠肝转移模型肝转移发生程度具有明显的影响,应注意血瘀模型的选择,且其与红细胞免疫功能低下有关.     

血瘀证模型大鼠舌象评价标准研究

目的通过模型动物舌体颜色及其光泽度的变化,判定血瘀证并建立血瘀证动物模型评价标准。方法40只SD大鼠随机分为5组,正常大鼠、寒凝血瘀证模型大鼠、肾上腺素皮下注射致血瘀证模型大鼠、10%大分子右旋糖苷尾静脉注射致血瘀证模型大鼠,采用数码相机拍摄舌象,分析比较所有舌腹面色泽深浅和舌下脉络呈色长短。结果舌腹面色泽深浅分级如下:舌质色泽红润记0分;舌质色泽红润略暗记1分;舌质色泽紫暗记2分;舌质色泽紫黑记3分。舌腹面舌下脉络色泽与长短分级如下:舌下脉络色泽红润,显色约1/3舌体长,记0分;舌下脉络色泽紫暗,显色大于1/3小于1/2舌体长,记1分;舌下脉络色泽紫暗,显色约1/2舌体长,记2分;舌下脉络色泽紫黑,显色约2/3舌体长,记3分。结论建立了血瘀证模型动物舌体色泽和舌下脉络的半定量评价标准,为血瘀证和活血化瘀药物的客观化研究提供了科学依据。     

大鼠失眠模型造模中对氯苯丙氨酸混悬液改良法的探讨

目的探讨大鼠失眠模型造模中对氯苯丙氨酸(para-chlorophenylalanine,PCPA)混悬液配制的改良方法,并对造模效果进行评价。方法 98只SD大鼠中50只用NaOH溶液配制法、24只用NaHCO_3溶液配制法和24只用改良法进行失眠大鼠造模,探讨制作PCPA致失眠模型的最佳方法。结果 NaOH溶液配制法50只大鼠造模失败,NaHCO_3溶液配制法24只大鼠造模失败,改良法24只大鼠造模成功,且PCPA剂量以0.5 g/kg造模效果最好(P0.05)。结论改良的PCPA混悬液的配制法可以成功制作大鼠失眠模型。     

乳清酸左卡尼汀对大鼠脑缺血再灌注后血脑屏障的保护作用

目的观察乳清酸左卡尼汀对大鼠脑缺血再灌注损伤后血脑屏障的保护作用并探讨其作用机制。方法 80只SD雄性大鼠随机分为5组:①假手术组(n=16);②模型对照组(n=16);③乳清酸左卡尼汀低剂量组(n=16);④乳清酸左卡尼汀中剂量组(n=16);⑤乳清酸左卡尼汀高剂量组(n=16)。线栓法制作大鼠脑缺血再灌注模型,用干湿重法测定缺血脑组织含水量;经尾静脉注射伊文思蓝观察血脑屏障的通透性;电镜观察血脑屏障的变化;Western杂交技术检测基质金属蛋白酶9(MMP-9)的表达。结果脑缺血再灌注24 h,与对照组相比,模型组缺血侧脑含水量明显升高,伊文思蓝含量明显增加,脑组织MMP-9表达明显增加;而应用乳清酸左卡尼汀处理的大鼠其缺血脑组织含水量明显减少,缺血侧伊文思蓝含量较对照组明显降低,而MMP-9表达水平也明显低于对照组,且乳清酸左卡尼汀对缺血再灌注后血脑屏障的保护作用呈现一定的剂量依赖性。结论乳清酸左卡尼汀对大鼠脑缺血再灌注损伤后的血脑屏障具有保护作用。     

侗药血马鞭水提物对吡啶诱导的急性非感染咽喉炎大鼠的保护作用研究

[目的]在吡啶所致的急性非感染性咽炎大鼠模型上初步评价侗药血马鞭水提取物对咽喉炎的保护作用。[方法]SD大鼠被随机分为5组,包括吡啶+侗药血马鞭水提物低、高剂量组（500、1 000 mg/kg,灌胃给药）、吡啶+地塞米松组（4 mg/kg,灌胃给药）、正常对照组、模型对照组。造模前,各组大鼠尾静脉注射无菌伊文思蓝溶液（EB）,随后大鼠通过采用10%吡啶溶液涂抹咽喉部建立咽喉炎模型,正常对照组涂抹相同体积的无菌生理盐水。造模1 h后处死大鼠,观察大鼠咽部并拍照,同时对咽部组织EB渗出量进行测定。称量各组大鼠主要脏器质量,采用苏木精-伊红（HE）染色法观察各组大鼠咽喉组织病理改变情况。[结果]与正常组大鼠相比,模型组大鼠咽喉组织EB渗出显著增加、炎性细胞浸润明显增多、黏液腺细胞排列分散不规则且部分肥大破裂,并伴有组织出血。与模型组比较,侗药血马鞭水提物高剂量组大鼠和地塞米松组大鼠EB渗出明显降低（P<0.05）,组织炎性细胞浸润显著减少。[结论]侗药血马鞭水提物对吡啶所诱导的急性非感染性咽炎大鼠有很好的保护作用。     

聚氧乙烯蓖麻油微乳对血脑屏障通透性的影响

目的:以伊文思蓝为指示剂,研究聚氧乙烯蓖麻油(cremophor)微乳对血脑屏障通透性的影响.方法:采用甲酰胺提取-紫外分光光度法测定小鼠各脏器中伊文思蓝的浓度,比较不同微乳体系中伊文思蓝在小鼠体内的组织分布情况.结果:伊文思蓝在脑组织中的浓度依次为:聚氧乙烯蓖麻油微乳、陈皮油微乳、(cremophor/Tween-80为1∶1)微乳、Tween-80微乳、胶束、伊文思蓝水溶液.其中聚氧乙烯蓖麻油微乳、陈皮油微乳组脑中伊文思蓝的浓度分别为水溶液组的5.0倍、3.2倍(P<0.01),胶束组的3.0倍、1.9倍(P<0.05),脑靶向效果显著.结论:微乳对血脑屏障通透性有一定的促进作用,且聚氧乙烯蓖麻油开放血脑屏障的作用较Tween-80强.     

乳舒改善微循环和血液流变学的作用研究

目的：研究乳舒对试验动物的微循环和血液流变学的影响为临床应用提供科学依据。方法：腹腔注射。肾上腺素造成小鼠耳廓微循环障碍模型及皮下注射。肾上腺素加冰水浸泡造成急性血瘀模型法。结果：乳舒低、中、高3个剂量组均能使小鼠微血管细动脉、细静脉管径增大；乳舒低、中、高3个剂量组能降低造模大鼠全血粘度、全血还原粘度（低切）和血浆粘度。结论：乳舒可扩张微血管，降低血液粘度，具有改善微循环和血液流变学的作用。     

AQP4在幼年大鼠感染性脑水肿中的作用机制

目的观察内毒素致幼年大鼠感染性脑水肿后水通道蛋白4（AQP4）的表达变化。方法将50只幼鼠随机分为内毒素组（40只）和对照组（10只）。建立内毒素致大鼠感染性脑水肿模型,于术后6h、12h、24h和48h处死动物,分别行脑组织含水量、血脑屏障通透率的测定,以伊文思兰含量判定血脑屏障通透率,并应用免疫组织化和RT--PCR,技术检测脑组织内AQP4蛋白和mRNA的表达水平。结果内毒素组脑组织含水量和伊文思兰含量明显高于对照组。在内毒素注射后6h时,脑组织中AQP4的表达明显增加,12h时达高峰,各时间点与对照组比较均有显著性差异（P〈0．01）。结论感染性脑水肿后脑组织中AQP4的表达增加,且与脑组织含水量和BBB的破坏呈正相关。     

高频诊断超声联合微泡对肝血管通透性影响的实验研究

目的探讨高频诊断级超声联合微泡对肝血管通透性的影响。方法选择机械指数(mechanical index,MI)为1.2的高频诊断超声,并经实验大鼠尾静脉注射0.2ml/kg微泡造影剂,超声辐照大鼠肝脏时间分为1、3、5、7min。用伊文氏蓝(Evens Blue,EB)观察超声辐照后肝血管通透性的改变,透射电镜观察肝血管内皮细胞及肝细胞结构改变。结果高频诊断超声联合微泡辐照肝脏后,肝组织EB含量与对照组相比差异有统计学意义,透射电镜证实肝血管内皮细胞肿胀,连接中断明显。结论高频诊断超声联合微泡辐照肝脏时可增加肝脏血管通透性。     

伊文思蓝脂质体的制备及其在小鼠体内的分布

目的:研究伊文思蓝脂质体在小鼠体内的组织分布状况,为研究脑靶向脂质体奠定基础.方法:用反相蒸发法制备伊文思蓝脂质体,用凝胶柱分离的方法测得脂质体的包封率为25.07%,比较了伊文思蓝脂质体和伊文思蓝水溶液在小鼠体内的组织分布状况.结果:磷脂与胆固醇的比例对伊文思蓝脂质体的包封率有较大的影响;尾静脉注射后2～4 h时脂质体组在脑中伊文思蓝的浓度高于水溶液组.结论:伊文思蓝可作为检测脂质体跨血脑屏障的模型药物,脂质体对药物跨血脑屏障有一定的促进作用.     

改良自制低钾右旋糖酐液用于犬肺移植肺保存质量的观察

目的 探讨改良自制低钾右旋糖酐液(LPD液)的配制方法及对移植肺的保存质量.方法 参照Per-fadex液公开配方加入前列腺素E1(PGE1)和硝酸甘油(NTG)进行改良,自行配制LPD液.于2007年4月至2008年8月通过动物实验验证LPD液对移植肺的保存质量.32只家犬随机分成供体组和受体组,每组16只.完成16...     

r-hFSH制备卵巢过度刺激综合征动物模型

目的 探讨用重组人促卵泡刺激素构建卵巢过度刺激综合征的大鼠模型.方法 20只未发育的雌性Wistar大鼠,随机分成重组人促卵泡刺激素组(实验组)和对照组.实验组从22 ～ 25日龄连续4d腹腔注射重组人促卵泡刺激素10IU,在第26日龄皮下注射绒毛膜促性腺激素30IU;对照组从第22～ 26日龄连续5d注射生理盐水0.1 ml,比较两组腹腔毛细血管通透性、腹水评分及卵巢重量.结果 实验组腹水EB含量(4.324±0.372μg/ml)、双侧卵巢重量(389±23.30 g)、腹水评分(2.43±0.34)与对照组腹水EB含量(0.312 ±0.032μg/ml)、双侧卵巢重量(29.37±4.26g)、腹水评分(1.00±0.00)比较,实验组均显著高于对照组(均P＜0.001).结论 重组人促卵泡刺激素可以用于适当日龄Wister大鼠构建OHSS动物模型.     

热休克蛋白70在急性百草枯中毒大鼠肺脏中的表达

目的检测百草枯(PQ)诱导急性肺损伤(ALI)中肺组织热休克蛋白70(HSP70)的表达情况。方法健康雄性SD大鼠36只,随机分为对照组(n=18),ALI组(n=18)。ALI组用PQ灌胃(200 mg/kg)染毒建立大鼠ALI模型。对照组用等量生理盐水灌胃。采用RT-PCR检测大鼠肺组织HSP70的表达,比色法检测肺组织髓过氧化物酶(MPO)、伊文蓝(EBD),观察肺组织病理变化。结果 ALI组大鼠肺组织HSP70的表达在染毒后12 h明显增高,差异有统计学意义(P<0.05),24 h达高峰。MPO及EBD水平显著增高(P<0.01)。肺组织病理检查可见PQ中毒后肺泡壁充血、炎性细胞浸润,并有局灶性出血。结论 HSP70在PQ中毒后的表达增多,可能参与了PQ诱导的ALI后的组织保护作用。