应用组织微阵列研究D2-40在胰腺癌中的表达及其临床病理意义

目的探讨淋巴管内皮标记物D2-40在胰腺癌组织中的表达及其临床病理意义。方法应用免疫组织化学法检测胰腺癌组织芯片中D2-40在88例胰腺导管腺癌和11例正常胰腺组织的表达水平,并计数淋巴管密度（LVD）,分析其与胰腺癌临床病理参数的关系。结果 88例胰腺导管腺癌组织LVD明显低于11例正常胰腺组织（P〈0.05）;胰腺癌临床分期和病理分级越高,LVD就越大（均P〈0.01）,有淋巴结转移的胰腺癌组织中LVD显著高于无淋巴结转移的胰腺癌组织（P〈0.01）。结论 D2-40在胰腺导管腺癌组织中的表达明显高于正常胰腺组织,并且和胰腺癌的临床分期、病理分级和淋巴结转移显著相关,两者的联合检测可能更有助于判断胰腺癌患者的预后。     

D2-40在结直肠腺癌中的表达及临床意义

目的 探讨结直肠腺癌组织中淋巴管形成的临床病理意义.方法 应用单克隆抗体D2-40采用免疫组化EnVision法检测94例结直肠腺癌周围和中心区以及正常结直肠组织中淋巴管密度(LVD),分析其与结直肠腺癌分化程度、浸润深度、淋巴管侵犯和淋巴结转移的关系.结果 肿瘤周围区LVD明显高于中心区和正常组织(P<0.01).肿瘤周围区LVD与淋巴管侵犯和淋巴结转移密切相关(P<0.01),而与肿瘤的分化程度和浸润深度无关(P>0.05),肿瘤中心区LVD与肿瘤分化程度、浸润深度、淋巴管侵犯和淋巴结转移均无相关性(P>0.05).结论 结直肠腺癌主要是肿瘤周围区存在着淋巴管形成,检测肿瘤周围淋巴管密度可以预测肿瘤淋巴结转移.     

早期子宫颈鳞癌中podoplanin标记的淋巴管密度及其临床意义

目的 探讨早期子宫颈癌组织中肾小球上皮细胞整合膜蛋白(podoplanin)标记的淋巴管密度(LVD)及其临床意义.方法 免疫组化SP法检测38例I b1期子宫颈鳞状细胞癌和10例非癌性宫颈组织中podoplanin标记的LVD,分析其与临床病理分级的关系.结果 癌组织中心及边缘组织淋巴管密度与正常子宫颈组织相比均明显增加(P＜0.05,P＜0.05);癌灶边缘组织淋巴管密度为12.10±2.83条/例,明显高于癌灶中心部位淋巴管密度7.71 ±1.12条/例(P＜0.05).有淋巴结转移者癌灶边缘组织LVD 14.67±3.72条/例,无淋巴结转移者10.77±2.65条/例,差异有统计学意义(P＜0.01);组织学分级G1、G2和G3组癌灶边缘LVD分别为8.29±1.76条/例,11.31±3.63条/例,13.24±0.79条/例.G2组LVD明显高于G1组而低于G3组(P＜0.05,P＜0.05).结论 早期宫颈癌组织中LVD的增加有临床意义,其与肿瘤淋巴转移,细胞分化等临床病理因素相关,宫颈癌组织中淋巴管的生成可能在其淋巴转移过程中发挥重要作用.     

乳腺癌组织COX-2、VEGF-C的表达与淋巴结转移的关系

目的 研究COX-2、VEGF-C在乳腺癌组织中的表达及其与淋巴管生成、淋巴结转移间的相关性.方法 采用免疫组化学S-P法检测46例浸润性导管癌组织中COX-2、VEGF-C的表达,通过淋巴管特异性标记物D2-40记数淋巴管密度(LVD),分析COX-2、VEGF-C的表达与淋巴管生成和淋巴结癌组织转移的相关性.结果 ①乳腺癌组织COX-2、VEGF-C表达阳性率分别为73.91%(34/46)和71.74%(33/46).②有淋巴结转移组COX-2阳性率为86.48%(32/37)、VEGF-C为81.08%(30/37),D2-40阳性淋巴管密度为(13.350±3.097)/×200.无淋巴结转移组COX-2为22.22%(2/9)、VEGF-C为33.33%(3/9)、LVD为(9.560±2.031)/×200,转移组中COX-2、VEGF-C的表达及淋巴管密度均明显高于无转移组(P＜0.01).③VEGF-C表达与COX-2表达呈正相关(r=0.757,P＜0.01),并且COX-2、VEGF-C的表达与LVD也呈正相关(P＜0.01).结论 VEGF-C、COX-2在人乳腺癌组织呈高水平表达,其表达与肿瘤淋巴管密度及癌组织淋巴结转移有关;COX-2可能通过诱导VEGF-C表达促进肿瘤淋巴管生成和淋巴结转移.     

宫颈鳞癌组织淋巴管分布及密度的研究

目的：研究宫颈鳞癌组织淋巴管分布、密度及其与临床病理参数的关系。方法：以D2-40单克隆抗体应用免疫组化P-V二步法检测63例宫颈浸润鳞癌组织内、癌旁及11例正常宫颈组织内的淋巴管密度（LVD）,采用SPSS 17.0统计软件包进行统计学处理。结果：①宫颈浸润鳞癌组织内（7.21±2.30）及癌旁（9.71±2.07）LVD均明显高于正常宫颈组织（1.55±1.04）,差异有高度统计学意义（均P=0.000）。癌旁LVD明显高于癌组织内,差异有高度统计学意义（Z=-5.778;P=0.000）。②癌组织内LVD与病理分级及淋巴转移有关（均P〈0.05）;癌旁LVD与病理分级、间质浸润深度及淋巴转移有关（均P〈0.05）。结论：宫颈浸润鳞癌内的淋巴管分布存在一定规律性,新生淋巴管形成对宫颈鳞癌的发生、发展和淋巴转移起重要作用,且癌旁淋巴管的作用更强。     

微血管密度和淋巴管密度与卵巢癌临床病理参数的联系

目的 探讨卵巢癌组织微血管密度(MVD)和淋巴管密度(LVD)与临床病理参数之间的联系.方法 采用免疫组化的方法,用分化簇34(CD34)标记卵巢癌组织中的微血管,用血管内皮生长因子受体3(VEGFR-3)标记卵巢癌淋巴管,人工计数MVD与LVD,分析卵巢癌的MVD及LVD与临床病理之间的联系.结果 LVD与卵巢癌淋巴结转移(P＜0.01)、FIGO分期(P＜0.05)及腹膜转移(P＜0.05)显著正相关,MVD与卵巢癌淋巴结转移(P＜0.05)、腹膜转移(P＜0.05)、远处转移(P＜0.01)及FIGO分期显著正相关(P＜0.05).结论 新生血管和淋巴管促进卵巢的生长和转移,卵巢癌组织中高微血管密度和高淋巴管密度与腹膜转移、远处转移及淋巴结转移显著相关.     

COX-2在胃癌中的表达及其与淋巴管生成的关系

目的:研究环氧化酶2(cyclooxygenase-2,COX-2)在胃癌中的表达及其与胃癌淋巴管生成的关系.方法:采用免疫组织化学SABC法检测胃癌组织中COX-2的表达及肿瘤内淋巴管密度(LVD).结果:胃癌组织中COX-2表达显著高于癌旁组织(P＜0.05),与淋巴结转移呈正相关(P＜0.01).淋巴管密度与COX-2表达(P＜0.01)和淋巴结转移(P＜0.01)呈正相关.结论:COX-2表达可能和胃癌的发生、淋巴管生成及淋巴结转移有关.     

早期宫颈癌和癌前病变中微血管密度和微淋巴管密度的相关性研究

目的 同时检测早期宫颈癌和癌前病变中的肿瘤微血管密度(MVD)和微淋巴管密度(LVD),分析它们之间的关系及其临床意义.方法 采用SP法利用抗人CD34和D2-40单克隆抗体分别检测102例宫颈组织中的MVD和LVD水平,并结合临床资料分析MVD和LVD与肿瘤的临床分期、淋巴结状态和肿瘤细胞分化程度之间的关系.结果 在早期宫颈癌和癌前病变中MVD与临床分期(P＜0.01)和患者盆腔淋巴结转移(P＜0.05)有显著相关性;LVD与临床分期(P＜0.01)、患者盆腔淋巴结转移(P＜0.01)和肿瘤细胞的分化程度(P＜0.01)有显著相关性.研究还发现早期宫颈病变组织中MVD和LVD的水平呈正相关(r=0.620,P＜0.01).结论 早期宫颈病变中MVD和LVD与宫颈病变的临床进展和转移密切相关,高MVD和LVD促进宫颈病变的发展和转移,并且早期宫颈癌的血管新生和淋巴管新生密切相关.     

胃癌中D2-40标记的淋巴管密度的检测及表达意义

目的探讨胃癌组织中微淋巴管分布、密度、形态特征及其与相关临床病理因素之间的关系,分析胃癌淋巴结转移的可能机制.方法应用单克隆抗体D2-40检测49例原发性胃腺癌淋巴管情况,并分析其和临床病理参数之间及和癌周淋巴结转移之间的关系.结果人胃癌癌旁区淋巴管密度高于肿瘤区,肿瘤癌旁区域中淋巴管密度与肿瘤的浸润深度、分化程度、淋巴结转移,差异有统计学意义（P〈0.05）.但在年龄、性别上无差异性.结论 （1）胃癌组织中淋巴管的分布及形态存在异质性,淋巴管主要分布于肿瘤边缘区,肿瘤边缘区淋巴管密度与淋巴结转移、分化程度、浸润深度有关,其淋巴管的数量的增加和形态的变化可能与胃癌的侵袭及转移相关;（2）胃癌癌旁组织中的淋巴管密度检测可作为评估胃癌淋巴结转移状况的一项辅助指标,为判断胃癌患者预后及确定临床治疗方案提供实验和理论依据.     

乳腺癌组织中Plexin-B1和c-met的表达与淋巴结转移的关系

目的 探讨Plexin-B1和c-met在乳腺癌组织中的表达与淋巴管生成及淋巴结转移的关系.方法 采用免疫组化学SP法检测乳腺癌组织中Plexin-B1和c-met的表达,通过淋巴管特异性标记物D2-40记数微淋巴管密度(LVD),分析plexin-B1和c-met的表达与淋巴管生成和淋巴结癌组织转移的相关性.结果 乳腺癌组织中Plexin-B1和c-met蛋白的阳性表达率分别为71.82％和68.18％;有淋巴结转移组的Plexin-B1和c-met的阳性表达率和LVD值均高于无淋巴结转移组(P＜0.01);Plexin-B1和c-met表达呈正相关性(r=0.7,P＜0.01).结论 Plexin-B1和c-met在乳腺癌组织中呈高表达,其表达与肿瘤淋巴管密度及淋巴结转移有关,对判断乳腺癌预后有一定的指导意义.     

淋巴管与微血管密度在乳腺癌患者预后中的意义

目的 探讨淋巴管密度和微血管密度在乳腺癌预后中的意义.方法 选择69例乳腺浸润性导管癌标本,应用免疫组织化学SP染色法用D240、CD31分别标记淋巴管和微血管后进行密度计数,对淋巴管密度（lymphatic vessel density,LVD）、微血管密度（microvessel density,MVD）与临床病理特征及患者的预后关系进行统计学分析.结果 肿瘤周围淋巴管密度（peri-lymphatic vessel density,P-LVD）明显高于肿瘤内淋巴管密度（intra-lymphatic vessel density,I-LVD）及对照组淋巴管密度（P＜0.01）.I-LVD与患者年龄、肿块大小、组织学分级、淋巴管浸润、淋巴结转移、雌激素受体（estrogen receptor,ER）,孕激素受体（progesterone receptor,PR）及人类表皮生长因子受体2（human epidermal growth factor receptor-2,HER2）的表达等临床病理因素无关（P＞0.05）,而P-LVD与淋巴结转移,肿瘤的临床分期密切相关（P =0.003、0.026）,MVD仅与临床分期密切相关（P=0.038）.在生存分析中发现P-LVD、MVD与患者的总生存期、无病生存期密切相关（P =0.007、0.008、0.014、0.024,log-rank检验）,多因素分析提示P-LVD、MVD是患者总生存期的独立预后因素.结论 乳腺癌P-LVD、MVD与患者的预后密切相关,通过定量分析,P-LVD、MVD可预测乳腺癌患者的预后.     

早期子宫颈癌中LYVE 1标记的淋巴管密度及其临床意义

目的探讨早期子宫颈癌组织中淋巴管内皮透明质酸受体 1（LYVE 1）标记的淋巴管密度（LVD）及其临床意义。方法采用免疫组织化学SP法检测41例早期子宫颈癌（Ⅰa Ⅱa）和12例正常子宫颈存档组织蜡块中LYVE 1标记的LVD，分析其与临床病理因素的关系。结果　①肿瘤组织周围淋巴管管腔扩大，形态不规则，肿瘤组织内部淋巴管管腔小，多呈闭塞状态。肿瘤组织内部淋巴管密度（ILVD）明显高于肿瘤组织周围淋巴管密度（PLVD）（P＜0.01）。ILVD和PLVD与正常子宫颈组织LVD相比均明显增加（P＜0.01）；②与无淋巴结转移者相比，有淋巴结转移者ILVD和PLVD均明显增加（P＜0.05，P＜0.01）。与无淋巴管浸润者相比，有淋巴管浸润者ILVD和PLVD均明显增加（P＜0.05，P＜0.01）。组织学分级G2、G3与G1相比，ILVD和PLVD均明显增高（P＜0.05），而G2、G3差异无统计学意义（P＞0.05）。结论早期子宫颈癌组织中ILVD和PLVD与正常子宫颈组织相比明显增加，并与淋巴结转移、淋巴管浸润等临床病理因素相关，肿瘤淋巴管生成可能在早期子宫颈癌淋巴转移过程中发挥了重要作用。     

人表皮生长因子受体-2基因与乳腺癌患者淋巴管新生的相关性及其对预后的影响

目的研究人表皮生长因子受体-2（HER-2）基因与乳腺癌患者淋巴管新生的关系及其对预后的影响,以期探讨HER-2过表达患者预后差的分子机制。方法（1）在体外赫赛汀阻断乳腺癌SKBR-3、MDA．MB-231细胞株HER-2蛋白质功能,采用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应技术（qRT-PCR）和免疫组织化学法检测阻断前后血管内皮生长因子-C（VEGF-c）mRNA及蛋白质表达水平。（2）采用实时qRT-PCR法检测67例乳腺浸润性导管癌VEGF-C mRNA表达水平。（3）免疫组织化学法分别检测160例乳腺癌患者石蜡包埋组织中HER-2、VEGF-C蛋白质表达,podoplanin抗体标记并计数淋巴管密度（LVD）,观察淋巴管侵犯（LVI）情况。结果（1）赫赛汀阻断后HER-2高表达的SKBR-3细胞VEGF-C mRNA和蛋白质表达明显降低。人原发性乳腺癌中HER-2蛋白质表达与VEGF-C蛋白质表达正相关（r=0．215,P〈0．05）,VEGF-C蛋白质表达与LVD显著正相关（r=0．248,P〈0．01）。（2）淋巴结转移组VEGF-CmRNA表达（1．6±0．5）高于未转移组（1．1±0．5）（t=2．196,P〈0．05）。Logistic回归模型显示HER-2、LVD和LVI是淋巴结转移的重要影响因子（均P〈0．05）。（3）Kaplan-Meier生存分析显示HER-2蛋白过表达、VEGF-C蛋白质过表达、高LVD和LVI均与患者低无病生存率有关（均P单〈0．05）。Cox风险比例模型分析显示：HER-2和LVI均是乳腺癌独立的预后影响因子（均P多〈0．05）。结论乳腺癌中HER-2过表达上调VEGF-C表达、促进淋巴管新生及肿瘤淋巴结转移是患者预后差的重要分子机制,VEGF-C表达、LVD和LVI是评估乳腺癌患者预后新的重要指标。     

早期宫颈鳞癌患者微淋巴管的分布及其临床意义

目的探讨早期宫颈鳞癌微淋巴管形成的临床意义。方法对35例Ⅰb、Ⅱa期的宫颈鳞癌患者的癌组织存档蜡块切片,用Podoplanin单抗免疫染色微淋巴管,图像分析系统定量分析癌内、癌周的淋巴管,并结合临床病理资料分析。结果(1)形态学观察示癌周淋巴管较癌内淋巴管粗大、密集。有淋巴结转移者,癌内淋巴管可见癌细胞。(2)宫颈鳞癌癌周淋巴管密度(LVD)为(31±10)条/mm2,癌内淋巴管密度为(20±10)条/mm2(P<0.01);癌周相对淋巴管面积(LVA)为(0.75±0.40)%,癌内LVA为(0.19±0.11)%(P<0.01)。(3)有盆腔淋巴结转移者的癌内及癌周的LVD、LVA分别为(29±7)条/mm2,(40±5)条/mm2,(0.27±0.10)%,(1.23±0.36)%,无淋巴结转移者为(16±8)条/mm2,(28±9)条/mm2,(0.16±0.09)%,(0.56±0.20)%,(P<0.01,0.01,<0.05及P<0.01)。(4)组织学分级Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ级者的癌周LVA及癌内LVD、LVA分别为(0.42±0.10)%,(9±3)条/mm2,(0.06±0.04)%;(0.77±0.37)%,(21±8)条/mm2,(0.21±0.09)%;(0.83±0.46)%,(22±11)条/mm2,(0.21±0.12)%。Ⅱ、Ⅲ级与Ⅰ级比较的P均<0.05,而Ⅱ、Ⅲ者间比较的P>0.05。结论早期宫颈鳞癌高淋巴管分布与淋巴结转移有关。     

VEGF-D在乳腺癌淋巴管生成中的作用及与预后的关系

目的探讨血管内皮生长因子D(VEGF-D)在乳腺癌淋巴管生成中的作用及其与临床病理指标及预后的关系。方法采用免疫组化法检测85例原发性乳腺癌VEGF-D的表达,以Podoplanin标记淋巴管内皮、计数淋巴管密度(LVD),采用RT-PCR法检测VEGF-D mRNA的表达。分析上述指标与临床病理指标及预后的关系。结果免疫组化检测显示,VEGF-D蛋白表达阴性5例(5.88%)、" "17例(20%)、" "34例(40%)、" "22例(25.88%)、" "7例(8.24%),其表达与淋巴结转移、临床分期相关(P<0.01),且导致较差的生存率(P<0.05)。LVD于不同表达程度的VEGF-D组间有显著差异(P<0.01),且随着VEGF-D表达的增加,LVD有上升的趋势。RT-PCR检测显示,VEGF-D mRNA在乳腺癌中的表达显著高于对照组(P<0.01),且其表达与淋巴结转移、临床分期和LVD相关(P<0.05)。结论VEGF-D在乳腺癌中具有一定的诱导淋巴管生成的作用,并与肿瘤的淋巴侵袭转移及预后相关。     

甲状腺乳头状癌VEGF-C表达与血管、淋巴管生成的关系

目的:探讨甲状腺乳头状癌(papillary thyroid carcinoma,PTC)中血管内皮生长因子(vascularendothelial growth factor C,VEGF-C)表达与血管、淋巴管生成的关系。方法:将72例PTC根据侵袭程度分为甲状腺乳头状微癌组、甲状腺内型乳头状癌组和甲状腺外型乳头状癌组;根据有无淋巴结转移分为淋巴结转移组和淋巴结无转移组。免疫组化SP法对PTC进行VEGF-C,CD105和血管内皮生长因子受体3(vascular endothelial growth factor receptor-3,VEGFR-3)标记,应用图像分析系统定量分析VEGF-C,计算出其阳性指数(positive index,PI)、显微镜下计数的微血管密度(microvessel density,MVD)和淋巴管密度(lymphaticvessel density,LVD)。结果:PTC淋巴结转移组VEGF-C的PI值(23.15±3.75)显著高于无转移组(14.54±2.93)(P<0.01);PTC微癌、腺内型、腺外型的MVD分别为35.25±2.06,41.75±5.46和52.58±4.16,随癌侵袭程度增加而增加(P<0.05);PTC微癌、腺内型、腺外型LVD分别为6.00±0.81,13.80±1.81和19.17±2.96,随癌侵袭程度增加而增加(P<0.05);淋巴结转移组的LVD(19.56±2.45)显著高于无转移组(12.48±2.84)(P<0.05);VEGF-C表达与MVD和LVD计数呈正相关(r=0.743,0.90,均P<0.01)。结论:VEGF-C,LVD与PTC的淋巴结转移有关;MVD,LVD与PTC侵袭有关;VEGF-C可能参与了血管、淋巴管生成。     

非小细胞肺癌中VEGF-C?PDGF-BB与淋巴管生成和淋巴结转移的关系

目的:探讨血管内皮生长因子C(VEGF-C)和血小板衍生生长因子BB(PDGF-BB)在非小细胞肺癌(NSCLC)中的表达与淋巴管生成和淋巴结转移的关系.方法:分别应用免疫组化SP法和Envision System法检测40例NSCLC和10例肺良性病变组织中VEGF-C和PDGF-BB的表达;应用淋巴管特异标志 Podoplanin 检测NSCLC中淋巴管密度(LVD),并做相关统计分析.结果:VEGF-C和PDGF-BB在NSCLC中阳性表达率均显著高于肺良性病变(VEGF-C:62.5% vs 10%,P<0.05;PDGF-BB:60% vs 10%,P<0.05).淋巴结阳性组的VEGF-C阳性表达率显著高于淋巴结阴性组 (94.1%vs 39.1%,P<0.05),但未发现PDGF-BB表达与淋巴结有关(76.5%vs 47.8%,P>0.05).NSCLC中淋巴结阳性组的LVD显著高于淋巴结阴性组(16.58±2.38vs 9.88±1.93,P<0.05),VEGF-C 和 PDGF-BB阳性表达组的LVD均显著高于阴性表达组(VEGF-C:14.74±3.62 vs 9.37±1.35,P<0.05;PDGF-BB:13.84±4.23 vs 11.06±2.90,P<0.05).NSCLC中 VEGF-C与PDGF-BB的表达具有显著相关性(rs=0.422,P<0.05).结论:淋巴管生成是淋巴结转移的一个重要因素;PDGF-BB参与了淋巴管生成,但对于促进淋巴结转移可能不是必要的:VEGF-C通过参与淋巴管生成而促进淋巴结转移,其预测NSCLC发生淋巴结转移可能性的价值优于PDGF-BB;PDGF-BB和VEGF-C在促进淋巴管生成的作用上可能具有相关性.     

食管癌组织中VEGF-C 表达量与淋巴管新生及 肿瘤组织生长的相关性

目的 研究食管癌组织中血管内皮生长因子C（VEGF-C）表达量与淋巴管新生、肿瘤组织生长的 相关性。方法 选取2012 年4 月-2015 年10 月在河北大学附属医院手术切除的食管癌组织作为临床标本,采 用免疫组织化学试剂盒对食管癌组织中VEGF-C、D2-40 进行染色,判读VEGF-C 的阳性表达率以及D2- 40 阳性表达的淋巴管密度（LVD）;采用荧光定量聚合酶联反应试剂盒测定Ki-67、Cyclin B1 的mRNA 含量。 结果 低未分化、TNM Ⅲ、Ⅳ、有淋巴结转移的食管癌组织中VEGF-C 阳性率、LVD 以及Ki-67、Cyclin B1 的mRNA 含量均高于中高分化、TNM Ⅰ、Ⅱ期、无淋巴结转移的食管癌组织;VEGF-C 阳性表达的食管 癌组织中LVD 以及Ki-67、Cyclin B1 的mRNA 含量均高于VEGF-C 阴性表达的食管癌组织。结论 食管癌 组织中高表达的VEGF-C 与淋巴管新生以及肿瘤组织生长密切相关。