江西地区儿童感染的乙型肝炎病毒全基因组序列分析

目的 初步调查江西地区乙肝疫苗免疫儿童感染的乙型肝炎病毒全基因组的分子特征。方法 收集江西省儿童医院11 445份乙肝疫苗免疫儿童血清标本,采用酶联免疫吸附试验检测HBV-M,抽提乙肝表面抗原(HBsAg)阳性血清中的HBV DNA,分3个相互重叠片段PCR扩增HBV基因并测序,采用ContigExpress软件对所测序列拼接成全基因组序列,分析各读码框核苷酸和氨基酸变化。对HBV不同基因型以及所获得的HBV全基因组的S基因序列进行系统进化树的构建以确定基因型。结果 11 445份血清样品中,检测出117份HBsAg阳性标本,进行分段重叠扩增并测序,最终拼接出58份完整的HBV基因组,均为B基因型和adw血清型。对各开放读码框进行序列比对发现PreS区存在散在分布的突变:如A2990C→H48P、A2999C→N51T、C3041T→P65L、C3097A→L84I和A3136G→T97A;S区突变集中在120~200aa,主要突变位点为C533A→P127T、A541C→Q129H、G588C→G145A、T753A→F200Y;前C区突变位点有A1814C/T1815C→M1P、G1896A→W28*,C区出现1例C1913A→P5T变异;P区出现散在分布的突变位点,未发现与耐药性有关的突变位点,其RT区YMDD核序也未发生变异;X区氨基端主要突变点为:G1437T/A→G22C/S、G1476A→G35R和G1503A/T/C/T1504G→V44I/F/L/C,羧基端突变集中在120~150aa,出现5例A1762T/G1764A→K130M/V131I突变。结论 了解分析儿童HBV全基因组的分子特征和突变情况,为疫苗免疫儿童感染乙肝的预防和治疗提供病毒学分子信息。     

儿童感染的乙型肝炎病毒S基因的分子特征

目的初步调查儿童感染的乙型肝炎病毒表面抗原的基因特征。方法收集10名HBV感染的儿童血清标本,抽提血清中的HBV DNA,采用PCR扩增HBV S基因并测序,利用Genotyping软件对PCR产物序列进行分型,并分析HBV S基因的突变情况。结果 10份血清标本中,扩增出HBV S基因并成功测序6份,其余4份扩增阴性不满足测序要求。6份PCR产物所测序列标本经Genotyping比对后,均属于B型,与NCBI收录的参考序列AF100309同源性最高;5例是adw,1例是ayw。HBV S基因中编码a抗原决定簇的核苷酸序列突变点分别为G529A、T531C、C534A、T562A、T581A、A589C。编码a抗原决定簇的氨基酸序列突变点分别为I126T、P127T、S143T、G145A。核苷酸突变点G529A、T562A不引起编码a抗原决定簇的氨基酸序列突变,为无义突变。而其他4点突变均可引起编码a抗原决定簇相应氨基酸序列发生改变。结论所调查儿童主要感染B基因型HBV;其感染的HBV S抗原a决定簇的氨基酸序列出现I126T、P127T、S143T、G145A的突变,可能是逃避乙肝疫苗诱导的免疫保护的一种...     

基于长期研究队列的广西隆安县乙型肝炎病毒准种研究

目的 明确广西隆安县队列HBs Ag无症状携带者感染的乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)准种序列长期演化特征。方法 收集9名广西隆安县队列HBs Ag无症状携带者2004年、2007年、2013年、2019年或2020年4个不同时间点血清样本。酶联免疫吸附测定法检测HBV血清学标志物；聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)荧光探针法检测HBV病毒载量；试剂盒提取HBV DNA;PCR法扩增HBV全基因组，进行二代测序；利用Mega等软件对所获得的序列进行生物信息学分析。结果 共获得23份血清样本，309条全长基因准种序列，每份标本平均获得(0.18±0.07)G测序数据量。55.55%(5/9)的研究对象携带的HBV毒株基因型在长期进化过程中发生了基因型转换，Pre S/S区系统进化树基因分型结果与全基因组分析结果完全一致；发现B/C、I/C重组体；各研究标本的Sn值范围为0～0.37,D值范围为0～0.11；共检出21种特殊单核苷酸/氨基酸突变位点(S区7种，X区2种，Pre C区3种，BCP区9种)和6种缺失突变，...     

经垂直传播的HIV-1 env区突变准种改变HLA限制性CTL表位的初步研究

目的探索经垂直传播HIV-1env区突变准种改变HLA限制性CTL表位的方式机制。方法从2对垂直传播的HIV-1感染者血清内提取HIV-1核酸，逆转录-套式PCR（RT-nestedPCR）扩增，产物克隆后，挑选阳性克隆行CSGE分析，对优势，劣势准种克隆测序分析，对氨基酸序列中可能的CTL表位进行分析。结果第一对母子：母亲YJ体内存在HIV-1准种env区CTL表位在其54d的女儿WYF体内都存在，而WYF体内存在一株突变准种，其CTL表位在YJ体内HIV-1准种中不存在；第二对母子：母亲CM和其12mo的儿子ZDB体内HIV-1env准种无相同的CTL表位。结论HIV-1在垂直传播后，随着时间的延长，母子之间HIV-1env区突变准种所导致HLA限制性CTL表位发生改变概率增大。     

乙型肝炎病毒“a”决定簇的变异对HBsAg定量的影响

目的为了明确乙型肝炎病毒"a"决定簇的变异对乙肝表面抗原(hepatitis B virus surface antigen,HBsAg)定量的影响。方法收集广州血液中心无偿献血者的乙肝HBsAg阳性血清标本,共41例;采用时间分辨免疫荧光法对乙肝HBsAg进行定量,根据HBsAg定量结果将标本分为两组:低HBsAg组(0.05~100 IU/mL)和高HBsAg组(100 IU/mL);提取乙型肝炎病毒DNA,采用高灵敏度巢式PCR扩增病毒DNA的S区,对S区"a"决定簇氨基酸序列进行比对。结果 41例乙肝HBsAg阳性标本中,以B基因型为主,占75.6%;C基因型占24.4%;对HBV病毒S区"a"决定簇氨基酸置换位点和置换率进行分析,没有发现低HBsAg组(0.05~100 IU/mL)和高HBsAg组(100 IU/mL)存在特异性的氨基酸置换位点。低HBsAg组与高HBsAg组S区中"a"决定簇的氨基酸置换率相比差异无统计学意义(P0.05)。结论乙肝病毒"a"决定簇的变异并不是影响HBsAg定量的主要因素。     

免疫失败儿童乙肝病毒S基因“a”抗原决定簇序列分析

目的: 探讨乙肝疫苗联合高效价乙肝免疫球蛋白母婴阻断免疫失败儿童病毒S基因"a"决定簇的变异情况.方法: 对30例经乙肝疫苗联合高效价乙肝免疫球蛋白母婴阻断免疫失败后血清表面抗原(HBsAg)阳性的儿童,采用聚合酶链反应方法(PCR)扩增其血清中HBV DNA S基因区,并对PCR产物直接标记测序.结果: 30例HBsAg阳性儿童有28例血清HBV DNA阳性,其中有8例出现了S基因"a"决定簇的变异,变异率为28.6%,第126位的异亮氨酸(Ile)被苏氨酸(Thr)替代2例,第134位苯丙氨酸(Phe)被异亮氨酸替代2例,第145位甘氨酸(Gly)被丙氨酸(Ala)替代4例.结论: 乙肝疫苗联合高效价乙肝免疫球蛋白母婴阻断免疫失败儿童中存在S基因"a"抗原决定簇变异.     

福州地区HBsAg-/HBVDNA+献血者乙肝病毒S区MHR变异特征分析

目的 分析福州地区HBsAg-/HBV DNA+献血者HBV的基因型及主要亲水区(MHR),尤其是其中"a"决定簇区氨基酸的变异情况,为进一步研究隐匿性乙肝病毒感染的发生机制提供参考.方法 对收集的2013年7月—2014年10月福州地区献血者的90874名献血者血液标本进行HBsAg ELISA与单人份核酸检测,对筛查出的HBsAg-/HBV DNA+标本,进行HBV DNA的提取和S区基因的扩增和测序.测序结果进行进化分型,分析MHR中氨基酸序列的变异情况.选取15例前期研究所得的HBsAg+/HBV DNA+标本的测序结果作为对照,比较两类标本在"a"决定簇区蛋白序列变异上的差异.结果 16份测序结果中B基因型15份,C基因型1份.15例标本中13例在MHR内共发生了33次氨基酸的变异,其中25次集中在"a"决定簇区,HBsAg-/HBV DNA+标该组"a"决定簇区的变异率要高于HBsAg+/HBV DNA+标该组.变异的形式主要为单个的氨基酸的点替换,另有7例标本在124位与125位氨基酸间发生了9个碱基的非移码插入,造成该位点间"TNR"3个氨基酸的插入.结论 福州地区献血者HBsAg-/HBV DNA+血液标本中HBV的基因型以B型为主,MHR的氨基酸变异主要集中在"a"决定簇区,有本地区的地域特点.研究中新发现的3个氨基酸"TNR"的插入变异,可能影响HBsAg的检出.     

HBsAg和HBsAb双阳性慢性乙肝患者血清中HBV基因型与S区突变的关系

目的 探讨HBsAg和HBsAb同时阳性（HBsAg＋/HBsAb＋）慢性乙肝患者血清中HBV基因型与S区氨基酸序列突变的关系.方法 将43例HBsAg＋/HBsAb＋慢性乙肝患者作为实验组,并选取35例HBsAg＋/HBsAb-慢性乙肝患者作为对照组,对血清中HBV DNA S区基因序列进行PCR扩增和测序,根据测序结果对患者的基因型进行分型并对S区氨基酸序列突变进行比对分析.结果 实验组中B基因型8例、C基因型35例,对照组中B基因型9例、C基因型26例.实验组C基因型患者的年龄[（50.2±16.3）岁]明显大于B基因型[（34.4±13.4）岁]（P=0.015）;实验组B基因型和C基因型的S区氨基酸突变率分别为0.77%和1.64%（P=0.005）;而对照组的B、C两种基因型的突变率分别为0.59%和0.49%（P=0.597）.同样为C基因型的两组患者,实验组S区氨基酸突变明显多于对照组（P=0.000）,而且实验组S区氨基酸突变大多分布在主要亲水结构区域（MHR）α决定簇的第一个环状结构区内;而B基因型只有少数患者有α决定簇内的突变.结论 HBsAg＋/HbsAb＋的乙肝患者C基因型较B基因型更易发生突变;且C基因型患者的氨基酸突变大多发生于S区的α决定簇内,可能正是由于此种突变使HbsAg的抗原性发生改变,最终导致了HbsAg和HbsAb同时阳性.     

HBsAg和HBsAb双阳性慢性乙肝患者血清中HBV基因型与S区突变的关系

目的 探讨HBsAg和HBsAb同时阳性（HBsAg+/HBsAb+）慢性乙肝患者血清中HBV基因型与S区氨基酸序列突变的关系。方法 将43例HBsAg+/HBsAb+慢性乙肝患者作为实验组,并选取35例HBsAg+/HBsAb-慢性乙肝患者作为对照组,对血清中HBV DNA S区基因序列进行PCR扩增和测序,根据测序结果对患者的基因型进行分型并对S区氨基酸序列突变进行比对分析。结果 实验组中B基因型8例、C基因型35例,对照组中B基因型9例、C基因型26例。实验组C基因型患者的年龄[（50.2±16.3）岁]明显大于B基因型[（34.4±13.4）岁](P=0.015);实验组B基因型和C基因型的S区氨基酸突变率分别为0.77%和1.64%（P=0.005）;而对照组的B、C两种基因型的突变率分别为0.59%和0.49%（P=0.597）。同样为C基因型的两组患者,实验组S区氨基酸突变明显多于对照组（P=0.000）,而且实验组S区氨基酸突变大多分布在主要亲水结构区域（MHR）α决定簇的第一个环状结构区内;而B基因型只有少数患者有α决定簇内的突变。结论 HBsAg+/HbsAb+的乙肝患者C基因型较B基因型更易发生突变;且C基因型患者的氨基酸突变大多发生于S区的α决定簇内,可能正是由于此种突变使HbsAg的抗原性发生改变,最终导致了HbsAg和HbsAb同时阳性。     

乙肝病毒表面抗原'a'决定簇变异对其抗原性的影响

目的探讨乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)阴性HBV感染的发生与HBsAg‘a’决定簇区变异的关系。方法对7例HBsAg阴性HBV感染者的HBVS基因区序列进行分析,并与GenBank/EMBL/DDBJ数据库中的不同基因型参考序列进行比较,分析‘a’决定簇区氨基酸的变化情况。结果7例感染者中5例为adr/C型,2例为adw/B型,未发现其它亚型及基因型的存在。3例感染者的毒株在主要亲水区(MHR)内未发现氨基酸变异,另外4例感染者的毒株均存在不同程度的氨基酸替代,包括单点和联合突变,变异位点包括Q101K、T116I、K122N、T126N、Q129R/N、T131A、C138Y、N146S、C147F。结论HBsAg‘a’决定簇区变异不是形成HBsAg阴性HBV感染的唯一原因,但确是形成HBsAg阴性感染的一个重要因素。     

人工全髋关节置换术的手术配合

目的：介绍人工全髋关节置换术的手术配合做法;方法：主要在手术配合的六个方面,解决防感染、防栓塞等问题。结果：30例人工全髋关节置换术均获成功,结论：手术配合是护士责任心和基本功的全面体现,对提高手术效果有至关重要的影响。     

麻疹的双相移位研究进展

近年新生儿、婴儿、成人麻疹患者逐年增加,临床表现一般仍较典型,成年人麻疹患者全身中毒症状较重。麻疹抗体检测结果阳性是主要的诊断依据。麻疹发病的双相移位的机理可能是,免疫保护力不足,婴儿出生时麻疹抗体力低。孕期母传胎的麻疹抗体减弱,母经乳汁传给婴儿的抗体减弱,成人麻疹抗体水平逐年下降。预防措施是怀孕前给予育龄妇女麻疹疫苗接种,鼓励母乳喂养,麻疹疫苗计划免疫适当提前,在成人追加麻疹疫苗的免疫,加强病毒变异的研究等。     

十二指肠损伤的治疗体会

目的：提高十二指肠损伤的诊治水平，方法：回顾总结该院1999年－2001年间收治的十二指肠损伤7例临床经验。结果：合并其他腹部脏器损伤86％（6／7），单纯十二指肠损伤14％（1／7）。损伤部位以十二指肠降部为多占71％（5／7），水平部和球部各占14％（1／7），术后并发症发生率28％（2／7）、病死率14％（1／7）。结论：掌握十二指肠损伤的特点，早诊断、早手术、术中认真探查，掌握好检查指征，选择合理恰当术式，加强术后管理，可提高治愈率。     

断指再植的护理体会

随着医疗水平的提高,显微手外科技术在各基层医院已得到广泛开展,所收治的此类患者在逐年增加.随机统计了近两年我院20份34指的病例,通过观察认为手术的成功与否不但取决于损伤的局部条件、术中的操作和术后的治疗,同时与术前、术后的护理也密不可分.对离断指及伤口的妥善处理,积极的术前准备和术后的精心护理,特别是术后对血运的密切观察,同时通过术前术后的健康教育使患者对该疾病的知识有了一定的掌握,认识了康复训练的重要性从而使功能达到最大限度的恢复.     

法乐氏四联症的外科治疗34例分析

目的：总结法乐氏四联症外科治疗经验。方法：共34例，年龄2～16岁，32例在中低温体外循环、胸部正中切口行法乐氏四联症根治术，1例在非体外循环下行改良B-T分流术，1例行根治术同时行双向Glenn分流术。结果：术后早期死亡1例，死亡原因为低心排综合征，无远期死亡。结论：本症应争取早日行根治术，肺动脉发育差者应行改良B-T分流术，右室发育不良者在行根治术同时行双向Glenn分流术，死亡原因以低心排综合征多见，应采取合适的手术方式及围术期多种方法预防。     

上颌骨牙源性囊肿刮除手术的疗效观察

目的探讨对上颌骨牙源性囊肿患者进行囊肿彻底刮除手术的临床疗效。方法对我科在2010年1月～2017年9月收治的73例上颌骨牙源性囊肿患者行囊肿彻底刮除手术治疗,对患者术区肿胀消退、术后伤口感染、伤口愈合、牙龈再附着、术后复发、骨质改建、骨质修复等情况随访观察。结果 73例患者术后肿胀消退时间为1～4 d。73例患者术后均未发生伤口感染,伤口均一期愈合。所有患者牙龈再附着情况好,术后均未见复发。术后未见并发症。骨质改建效果好,骨质修复的效果因影像学资料过少,缺乏客观依据,暂不下有效结论。结论对上颌骨牙源性囊肿患者进行囊肿彻底刮除手术,术后患者的恢复情况良好,值得在临床治疗上进行推广。     

妊娠晚期重度妊高征的监测

重度妊高征表现为高血压、蛋白尿、浮肿等症状 ,严重可以导致母婴死亡。对妊娠足月的重度妊高征 ,可以根据其临产与否及宫颈条件 ,立即决定其为阴道分娩或是剖宫产术。对于妊娠晚期的重度妊高征 ,因其胎龄不足月 ,胎儿生长发育及胎肺成熟度情况需通过一定时间的治疗 ,根据其病情变化来决定其治疗方案或终止妊娠的时机[1,2 ] 。这就需要我们对这一阶段的治疗进行监测 ,防止母儿并发症的发生。现将 2 0 0 0年至今我院收治妊娠晚期重度妊高征 30例的监测结果回顾分析如下。1　资料和方法1.1　研究对象　选择孕 31～ 36周重度妊高征 30例 ,其中 …