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相似文献
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1.
目的:探讨敏感性和特异性好的沙眼衣原体(Chlamydia trachomatis,CT)感染的诊断方法.方法:肺炎患儿鼻咽拭子标本分别经细胞培养及质粒探针连接酶链反应分析;计算TC和G-LCR法敏感性、特异性、阳性预测值、阴性预测值,比较两种方法在检测CT感染中的差异.结果:按扩大金标准,真阳性共49例,阴性共344例.TC法假阴性12例,配对χ2检验显示:G-LCR-ELISA与TC比较差异显著,G-LCR优于TC.结论:LCR方法是一种快速而准确的检测CT方法,LCR法敏感性高于TC,LCR法特异性高.  相似文献   

2.
应用连接酶链反应检测沙眼衣原体DNA   总被引:1,自引:1,他引:0  
韦红  刘官信 《重庆医学》2003,32(12):1648-1649
目的 建立检测沙眼农原体感染的具有高度敏感性和特异性的缺口—连接酶链反应—酶联免疫吸附测定法。方法 根据CT主要外膜蛋白稳定区设计2对互补探针并分别对其两端标记生物素和地高辛,对6种CT标准株、鹦鹉热衣原体标准株和其他细菌进行Gap—LCR反应并以ELISA和EB染色电泳检测扩增产物以比较两者的检测限度。结果Gap LCR可检出6种CT标准株并不与其他细菌发生交叉反应,ELISA可检出10fg DNA模板的扩增产物,较EB电泳法敏感10倍。结论 Gap—LCR—ELISA是一高度敏感特异的检测CT感染的核酸扩增技术,是适宜于我国广大医疗基层单位进行大规模CT分子流行病学研究的极具前景的方法。  相似文献   

3.
目的:探讨用核酸扩增(PCR)-液相杂交法检测沙眼衣原体DNA的效果。方法:用PCR-液相杂交法对616份临床标本进行了沙眼衣原体检测,并与培养法比较,对与培养法结果不相符合的标本及部分阴性标本进行连接酶链反应(LCR)复检。结果:PCR-液相杂交相法检测沙眼衣原体特异性良好。灵敏度达到0.1fg,临床标本沙眼衣原体DNA阳性检出率为27.6%,显著高于培养法的6.3%(P<0.001)。以培养法为标准,此法的灵敏度为100%。以LCR法为标准,此法的灵敏度为97.2%,特异度为80.7%,2者具有较好的相符性。结论:PCR-液相杂交法检测沙眼衣原体DNA操作简便,特异性强,灵敏度高,适合临床应用。  相似文献   

4.
目的 采用TaqMan探针建立检测沙眼衣原体的实时荧光定量PCR(real-time PCR)方法.方法 根据沙眼衣原体外膜蛋白A的基因(ompA)序列设计引物和探针,以克隆的ompA部分基因片段作DNA模板,建立实时荧光定量检测方法.结果 建立的荧光定量PCR检测方法的最低检出限为5 copies/反应,检测线性范围100107线性关系良好(r2=0.997),比巢式PCR敏感100倍;且与鹦鹉热衣原体、淋球菌、解脲脲原体、大肠杆菌等病原菌DNA以及人基因组DNA均无交叉反应,表明该方法具有良好的特异性.以巢式PCR作参比,建立的荧光定量PCR法检测沙眼衣原体的阳性符合率为100.00%,阴性符合率为95.09%,总符合率为96.81%.结论 建立的检测沙眼衣原体实时荧光定量PCR具有特异性强和敏感性高的特点,可快速检测样本中微量沙眼衣原体DNA,适用于对沙眼衣原体进行大规模筛选.  相似文献   

5.
荧光定量PCR检测生殖道内沙眼衣原体感染的应用   总被引:1,自引:0,他引:1  
目的 评价DNA定量测定技术在生殖道衣原体感染诊断中的应用价值.方法 比较荧光定量DNA测定与传统检测手段对衣原体感染的检测结果.结果 用荧光定量PCR法测定DNA来检测沙眼衣原体(CT)感染,其敏感性和特异性均比传统的方法高.结论 CT-DNA定量测定不宜用作短期判愈,在沙眼衣原体诊断中具有巨大的潜力.  相似文献   

6.
目的 :研究能否用阴道口部位标本代替宫颈标本检测沙眼衣原体 (CT)。方法 :分别用 PCR法和立明法 (Clearview)对 2 31例性病高危人群的宫颈拭子、阴道口拭子及尿液标本进行检测。结果 :以6种检测方法中任何 2种结果同时阳性为金标准 ,宫颈拭子、阴道口拭子及尿液 3种标本 PCR法的敏感性和特异性分别是 86 .8%和 99.4 8% ,84 .2 %和 10 0 % ,6 3.2 %和 99.4 8% ;立明法的敏感性和特异性分别是 81.6 %和 10 0 % ,4 7.4 %和 10 0 % ,10 .5 %和 10 0 %。结论 :对女性 CT检测可以用阴道口拭子代替其它部位标本进行 PCR检测  相似文献   

7.
目的评价衣原体抗原快速免疫法(C-C快速法)对泌尿生殖道标本中沙眼衣原体的检测效果.方法将70份待检标本以C-C快速法进行检测,并与聚合酶链反应(PCR)为标准作比较.结果 C-C快速法的敏感性为62%,特异性为96%.结论 C-C快速法检测沙眼衣原体虽有较高的特异性,但敏感性较低.  相似文献   

8.
基因扩增法检测肺炎衣原体DNA的研究   总被引:1,自引:0,他引:1  
本研究采用聚合酶链式反应(PCR),建立检测肺炎衣原体DNA的实验诊断方法。结果显示,采用肺炎衣原体PstⅠ编码区的两对特异性引物(HL-1-HR-1和HM-1-HR-1)进行扩增,两株肺炎衣原体(TW-183和CM-1)均可见437bp和229bp的特异性扩增带,而沙眼衣原体和鹦鹉热衣原体扩增结果为阴性。检测敏感性为100fg左右。该研究技术的建立,为肺炎衣原体的早期诊断和流行病学调查提供了一种快速、敏感、特异的新方法。  相似文献   

9.
目的:探讨McCoy细胞培养和聚合酶链反应(PER)两种检测方法在诊断新生儿沙眼衣原体感染的优缺点。方法:应用McCoy细胞培养和PCR检测334例新生儿肺炎鼻咽部拭子中沙眼衣原体,并对沙眼衣原体肺炎新生儿进行临床分析。结果:334例新生儿感染性肺炎中证实沙眼衣原体肺炎为68例,占20.4%。以扩大金标准判断,细胞培养和PER的敏感性分别为88.2%和95.6%,特异性分别为:100.0%和99.6%。新生儿沙眼衣原体感染与分娩方式明显相关,产道获得感染是主要感染途径,此外,宫内感染也可存在。结论:沙眼衣原体是新生儿肺炎的重要病原菌,PER可快速、敏感、特异地诊断沙眼衣原体感染。  相似文献   

10.
PCR快速检测细菌16S rRNA基因的初步研究   总被引:5,自引:0,他引:5  
目的:建立检测细菌16SrRNA基因的PCR方法。方法:以细菌16S rRNA基因为靶序列。利用计算机软件primer5.0,Bioedit设计2条引物-pml.,pm2并建立相应的PCR方法。采用该PCR方法扩增实验室保留菌株的16srRNA基因,以人类外周血白细胞基因组DNA、HBV—DNA阳性血清以及白色念珠菌为对照。检测该实验方法的特异性;采用倍比稀释的方法进行该实验方法的敏感性实验。结果:用引物pml,pm2对17个不同菌株进行PCR扩增。均得到371bp左右长度的DNA片段。特异性实验表明,此通用引物与人类基因组DNA、真菌及病毒无交叉反应。敏感性实验表明。用pml,pm2引物进行的PCR扩增可检测出20CFU/ml,结论:16S rRNA基因PCR检测方法具有特异、敏感、快速的特点。  相似文献   

11.
采用聚合酶链反应(PCR)对134例慢性前列腺炎病人的前列腺液进行沙眼衣原体DNA重复序列检测,结果阳性率为29.1%(39/134)。非慢性前列腺炎其他泌尿生殖道疾病患者的前列腺液15例作为对照,均未出现阳性反应。用PCR检测沙眼衣原体敏感性高(检测3.85pgDNA,在引物扩增片段517bp仍有可见的扩增信号),特异性强(与数种细菌、病毒、支原体、弓形虫均未出现沙眼衣原体待异性沉淀带),提示本法可用于临床诊断,在一定程度上替代培养技术,成为监测沙眼衣原体感染的实验室手段。  相似文献   

12.
用Nested聚合酶链反应(Nested PCR)法检测嗜肺军团菌种。Nested PCR法所用的两对寡核苷酸引物按编码24 kDa嗜肺军团菌表面抗原的基团片段序列设计的。用此两对引物对实验的军团菌种和非军团菌种细菌DNA进行扩增,只有嗜肺军团菌种DNA被扩增,而其他军团菌种和非军团菌属细菌没有被扩增。第1步和第2步PCR分别检测到最小量为10pg和10 fg的靶DNA。对不同量的嗜肺军团菌配制成的痰标本进行检测,能检测到0.1cfu/ml的嗜肺军团菌,只需12h。这些结果显示Nested PCR法检测嗜肺军团菌特异性强,敏感性高。此方法为从临床标本和环境材料中早期、快速检测到嗜肺军团菌提供了有效的工具。  相似文献   

13.
建立检测沙眼衣原体的PCR方法,计算机辅助设计的引物位于编码沙眼衣原体主要外膜蛋白(MOMP)的基因区内,扩增产物为144bp。该引物具有高度的特异性和敏感性,其最小检出量为5fg。应用该引物检测了52份宫外孕组织中沙眼衣原体DNA,测得宫外孕患者沙眼衣原体的阳性率为40.4%,明显高于对照组的12.5%(P<0.01),从DNA水平证实在宫外孕组织内存在沙眼衣原体  相似文献   

14.
16 SrRNA基因聚合酶链反应检测细菌感染的研究   总被引:1,自引:0,他引:1  
目的:探索快速可靠的检测细菌感染的新方法。方法:通过自行设计合成的细菌16SrRNA基因高度保守区引物,对20 种标准菌株、12 种27 株临床分离的细菌株、人基因组DNA及巨细胞病毒进行聚合酶链反应(PCR)扩增。结果:对所测细菌株均获得371 bp 扩增产物,而与人基因组DNA、巨细胞病毒无交叉阳性反应,PCR最低能检测lpg 大肠杆菌DNA。结论:建立了用共同引物PCR扩增以判断是否存在细菌感染的方法,该方法检测快速,敏感性和特异性高。  相似文献   

15.
从剖宫者产羊水和宫颈标本中检出沙眼衣原体的研究   总被引:2,自引:0,他引:2  
目的;三文通过检查配对母胎标本中的沙眼衣原体(Cr),拟探讨Ct垂直传播的机制。方法:应用细胞培养,聚合酶链反应(PCR)检查配对对母胎标本(宫颈、羊水、新生儿睑结膜)中的沙眼衣原体(Cr)。结果:102例剖宫产配对母胎标本中,宫颈、羊水、新生儿睑结膜均为阳性有24例。宫颈阴性、羊水、新生儿睑结膜阳性共6例。宫颈阳性、羊水、新生儿睑结膜阴性共4例。宫颈、羊水、新生儿睑结膜均为阴笥有68例。孕妇的C  相似文献   

16.
Objective To establish a multiplex polymerase chain reaction (M-PCR) assay for simultaneous detection of pathogens causing genital ulcer disease (GUD). Mothods Based on the gene-specific region of the following pathogens: Chlamydia trachomatis omp l/ompb, herpes simplex virus (HSV) DNA polymerase, Treponema pollidum tpp47, Haemophilus ducreyi 16s rRNA, four sets of primers were designed and an M-PCR assay was developed to detect four pathogens in one test. The assay was evaluated with diagnostic result of golden standard for each pathogen. Results Of the 51 clinical samples, M-PCR showed slightly higher positive rate (47.1%) of HSV than cell culture (23.6%). Meanwhile, the positive rate of T. pallidum detected by M-PCR and dark-field microscopy was 19.6% (10/51) and 15.7% (8/51), respectively. Only one sample was positive for H. ducreyi and no sample was positive for C. trachomatis detected by both M-PCR assay and culture. Conclusion This primary study indicated that M-PCR assay can simultaneously and rapidly detect the four etiologic pathogens causing GUD.  相似文献   

17.
ObjectiveToinvestigatetheverticaltransmissionrateofChlamydiatrachomatis(CT)inChongqing,China.MethodsSpecimenstakenfrom278wome...  相似文献   

18.
目的:评价聚合酶链反应(PCR)直接检测无菌性体液中真菌结果可靠性。方法:采用真菌通用引物,通过PCR对96份临床无菌性体液扩增菌DNA,同时对这些标本进行细菌、真菌培养。结果:PCR诊断无菌性体液真菌感染与培养法完全一致,培养出细菌的标本PCR检测真菌PCR检测真菌DNA均阴性。结论:PCR直接检测无菌性体液中真菌敏感、特异、快速、准确,但不能代替培养法。  相似文献   

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