磷脂酶A2在模拟高原梭曼中毒性脑损伤中的变化

目的 探讨磷脂酶A2（PLA2）在缺氧复合梭曼中毒脑损伤的作用机制。方法 应用微量滴定，放免法从动物整体水平观察了高原缺氧，梭曼中毒单一与复合致伤后12、24、48h大鼠脑组织含水率（WCB）、伊文思蓝（EB）含量，PLA2的活性，环磷酸腺苷（cAMP)含量的变化。结果 高原中毒组脑组织伊文思蓝含量，PLA2的活性，ADP、AMP、cAMP含量在中毒后24、48h明显高于平原中毒组，高原对照组和正常对照组，应用钙通道阻断剂尼莫地平可明显降低PLA2活性，减轻缺氧中毒后脑组织水肿。结论 磷脂酶A2、腺苷酸环化酶的激活可能参与高原缺氧复合梭曼中毒脑损伤。     

缺氧条件下梭曼中毒大鼠脑G蛋白及cAMP-PKA信号系统的变化

目的 探索G蛋白及cAMP－PKA信号系统在缺氧条件下梭曼毒性升高机制中的作用。方法 Western blot检测Giα、Gqα含量、cAMP浓度及PKA活性升高，Giα下降，缺氧条件下梭曼中毒与单纯梭曼中毒组有显著差别；阿托品可对抗PKA活性的升高。在所观察的三个脑区中，以纹状体变化最为明显。结论 G蛋白及其介导的cAMP－PKA信号系统参与了缺氧条件下梭曼毒性升高的形成机制。     

缺氧复合梭曼中毒大鼠左心室±dp/dtmax变化

目的:探讨缺氧条件下梭曼中毒大鼠左心室压力的变化特点.方法:以大鼠急性梭曼中毒为实验模型,采用电生理学方法,在常氧和缺氧条件下,对比观察不同剂量梭曼中毒后大鼠心脏功能指标(HR、LVP、±dp/dtmax、LVEDP)的变化.结果:缺氧和梭曼中毒单一及复合作用均可造成大鼠心脏功能不同程度的损害,表现为心脏功能指标明显抑制;缺氧对心脏舒张功能的影响更为明显,梭曼中毒对心脏收缩功能的抑制严重.结论:缺氧和梭曼中毒同时作用于机体,对心脏功能可产生明显的复合损伤效应,表现形式有相加作用和协同作用.     

缺氧条件下梭曼中毒大鼠心脏毒性效应胆碱能机制的研究

目的 探讨胆碱能系统在缺氧复合梭曼中毒心脏毒性效应增强机制中的作用。方法 实验大鼠随机分为正常对照组、高原缺氧组、平原中毒组和缺氧中毒组。利用RT—PCR技术检测心肌m2受体mRNA的表达，Western blot检测抑制性G蛋白含量，放射免疫法测定cAMP浓度及酶放射化学分析测定AC、PKA活性。结果 与平原中毒组相比，缺氧条件下梭曼中毒m2受体表达增强，Gi含量明显降低，cAMP浓度及AC、PKA活性显著升高。结论 复合损伤引起的m2受体表达增强和cAMP—PKA信号系统的异常升高，可能是高原缺氧条件下棱曼中毒心脏毒性效应增强的重要原因之一。     

缺氧复合梭曼中毒PC12细胞中［Ca2+］、cAMP、CaM和Ca2+/CaM-PK Ⅱ的变化

目的 观察缺氧复合梭曼中毒的大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤PC12细胞内游离钙的浓度［Ca∧2 ］、cAMP、钙调蛋白（CaM）和钙调蛋白Ⅱ（Ca∧2 /CaM-PK Ⅱ）的变化。方法 采用放免技术,从细胞水平进一步观察缺氧复合梭曼中毒对PC12细胞的毒性、细胞内［Ca∧2 ］变化、cAMP、CaM和Ca∧2 /CaM-PK Ⅱ的变化。结果 缺氧中毒组PC12细胞cAMP、CaM含量在中毒后24h明显高于单纯中毒组、缺氧对照组和正常对照组;缺氧中毒组PC12细胞Ca∧2 /CaM-PK Ⅱ活性在中毒后24h明显低于单纯中毒组、缺氧对照组和正常对照组。结论 ［Ca∧2 ］、cAMP、CaM和Ca∧2 /CaM-PK Ⅱ在缺氧复合梭曼中毒PC12细胞损伤机制中起了重要的作用。     

M乙酰胆碱受体在缺氧复合梭曼中毒大鼠脑损伤中的作用研究

目的探讨毒蕈碱样乙酰胆碱受体(M受体)在缺氧复合梭曼中毒脑损伤中的作用。方法实验大鼠随机分为正常对照组、梭曼中毒组、缺氧组和缺氧复合梭曼中毒组。利用受体放射性配基结合法、Western blot、放射免疫和酶放射化学分析分别检测皮层、海马和纹状体M受体密度和亲和力、Gia蛋白含量、cAMP浓度及PKA活性。结果与平原中毒组相比,缺氧复合梭曼中毒组皮层和纹状体Bmax增加,海马和纹状体Kd值降低;复合致伤组皮层、海马和纹状体Gia蛋白含量分别比单纯梭曼中毒组降低了15．48％、8．56％和28．20％;各脑区cAMP浓度及PKA活性显著升高,分别较梭曼中毒组升高了79．51％、84．75％、52．92％和78．93％、44．32％、39．05％;M受体阻断剂阿托品可部分阻断梭曼中毒和／或缺氧所致的PKA活性的升高。结论复合致伤引起的M受体上调,cAMP-PKA信号系统的异常增强,在缺氧复合梭曼中毒脑损伤中可能是缺氧复合梭曼中毒毒性效应增强的重要原因之一。     

谷氨酸在模拟高原梭曼中毒性脑损伤的作用研究

目的 探讨谷氨酸（Chutamic acid.Glu)在缺氧复合梭曼中毒脑损伤的作用机制。方法 采用氨基酸分析和放免技术，研究高原缺氧，梭曼中毒单一与复合致伤后12、24、48h脑组织Glu和CaM含量的变化以及钙／钙调蛋白激酶Ⅱ（Ca^2 /CaM-PKⅡ）活性的影响及其机制。结果 缺氧复合梭曼中毒组脑组织Glu,CaM含量在中毒后24h明显高于单纯中毒组、缺氧对照组和正常对照组；缺氧中毒组脑组织Ca^2 /CaM-PKⅡ活性在中毒后24h明显低于单纯中毒组、缺氧对照组和正常对照组；而N－甲基－D－天冬氨酸（NMDA）受体损坏抗剂地佐环平（MK－801）和钙通道拮抗剂尼莫地平（Nimodipine)可对抗这种改变。结论 高原缺氧复合梭曼中毒后Glu的兴奋毒引起脑损伤和Ca^2 /CaM-PKⅡ的活性下降，主要由NMDA受体介导和胞外Ca^2 内流增加有关。     

缺氧复合梭曼中毒大鼠脑损伤的药物保护研究

目的　研究抗胆碱能药物解磷复方和红景天对低压缺氧复合梭曼中毒大鼠脑损伤的作用效果。方法　 72只Wistar大鼠分为缺氧对照、缺氧复合梭曼中毒、解磷复方治疗和解磷复方与红景天复方治疗等共 4组。动物梭曼 ( 72 μg kg ,sc)中毒后置低压舱内 ( 62kPa)缺氧 48h ,于 12、2 4、48h等时间点处死动物取脑组织。用生化法测脑组织伊文思蓝(evansblue ,EB)含量和磷脂酶A2 (phospholipase ,PLA2 )活性 ,放射免疫法测钙调蛋白 (Calmodulin ,CaM)含量。结果　缺氧复合梭曼中毒明显升高大鼠脑组织EB含量、PLA2 活性和CaM含量。抗胆碱能药物解磷复方能明显降低缺氧复合梭曼中毒引起的大鼠脑组织EB含量、PLA2 活性和CaM含量变化 ,解磷复方和红景天组成的抗毒复方进一步加强上述作用。结论　解磷复方和解磷复方加红景天复方均可对抗缺氧复合梭曼中毒引起的脑损伤 ,后者作用比前者强     

模拟高原缺氧条件下梭曼中毒的神经毒作用

通过模拟高原缺氧复合梭曼中毒，观察缺氧，梭曼中毒复合效应的神经毒作用。方法：通过低压舱模拟３０００ｍ高原缺氧；梭曼皮下注射中毒造成不同程度的高原缺氧复合梭曼中毒的实验动物模型，以惊厥活动的定量分析为指标，观察神经毒效应，通过梭紧中毒有，无惊厥大鼠血气变化的对比研究，探讨惊厥与缺氧，代谢性酸中毒的关系。结果：１．单纯模拟３０００ｍ米高原缺氧６ｈ在小鼠未诱发严重惊厥；２．梭曼皮下注射中毒５０ｍｇ／ｋｇ     

缺氧复合梭曼中毒对PC12细胞凋亡及IL-1β、IL-6水平的影响

目的观察缺氧复合梭曼中毒对PC12细胞的毒性效应及IL-1β、IL-6的变化规律.方法制备缺氧复合梭曼中毒细胞模型,以MTT比色、流式细胞仪、ELISA和放免法分别测定细胞存活率、凋亡率及培养液IL-1β和IL-6活性.结果梭曼中毒和缺氧致伤组细胞存活率明显下降,细胞凋亡率明显升高,复合致伤组细胞存活率和凋亡率变化更为明显,且与梭曼中毒组相比具有显著性差异(P＜0.05);梭曼中毒和缺氧致伤后IL-1β、IL-6活性均明显增加,梭曼中毒组在致伤后12 h达到高峰,缺氧致伤组在伤后6 h即达到高峰,而后逐渐下降,至伤后24h仍显著高于对照组;复合致伤组IL-1β和IL-6活性升高更为明显,在致伤后6 h达到高峰,显著高于正常对照组(P＜0.01)和同时相点梭曼中毒组(P＜0.05),较同时相点梭曼中毒组IL-1β和IL-6活性增加1.25和2.16倍.结论缺氧复合梭曼中毒导致PC12细胞凋亡增加,复合致伤所致的IL-1β和IL-6水平的升高在缺氧复合梭曼中毒的毒性效应中具有重要作用.     

缺氧条件下梭曼中毒对大鼠脑M受体的影响

目的 探讨高原缺氧条件下梭曼中毒大鼠脑组织乙酰胆碱酯酶（ＡＣｈＥ）活性和毒蕈碱性乙酰胆碱（Ｍ）受体变化规律。方法 以ＤＴＮＢ法和受体放射性配基结合法检测大鼠皮层、海马及纹状体ＡＣｈＥ活性和Ｍ受体密度及亲和力。结果 缺氧使大鼠脑组织ＡＣｈＥ活性不同程度升高,缺氧２４ｈ海马和纹状体Ｍ受体 分别增加１０．４％和２５．３％,Ｍ受体的亲和力分别增加５５．６％和３０．３％。单纯梭曼中毒和缺氧复合梭曼中毒均显著     

急性缺氧条件下氰化钠中毒对大鼠脑组织能量代谢的影响

目的探讨急性高原缺氧条件下氰化钠中毒对大鼠脑组织能量代谢的影响。方法雄性sD大鼠，分为平原组和高原组。平原组动物在本地常规实验室内处理。高原组动物放置于模拟4000m海拔高度的低压舱内3d后开始实验。为大鼠腹腔注射氰化钠（NaCN）3．6mg／kg染毒，于0、0．5、1、2、4、6h6个时相点麻醉后断头取脑。以干湿质量法测定脑组织含水量，伊文思蓝法检测脑组织血管通透性，高效液相色谱（high performance liquid chromatography，HPLC）法测定大鼠脑纹状体和海马组织腺苷三磷酸（adenosine triphosphate，ATP）、腺苷二磷酸（adenosine diphosphate，ADP）和腺苷-磷酸（adenosine monophosphate，AMP）含量。结果与平原组比较，高原缺氧环境氰化钠中毒大鼠脑组织含水量增加，纹状体和海马组织ATP和ADP含量减少，AMP含量增加。结论高原缺氧可导致大鼠脑组织腺苷酸能量代谢障碍，缺氧条件下氰化钠中毒可进一步加重脑组织能量代谢障碍，同时脑水肿也进一步加重。     

DMAP治疗犬急性失血复合氰中毒的实验研究

本实验观察了DMAP治疗不同程度的急性失血复合致死量氰中毒的效果。犬分别经股动脉急性失血至动脉收缩压9.33、6.67和5.33kPa造成轻、中、重度急性失血后复合iv NaCN2.5mg/kg中毒。对照组为轻度失血复合氰中毒不治疗,全组动物均在5 min内死亡;DMAP治疗各组在复合氰中毒后3 min iv DMAP 2 mg/kg治疗,动态监测血流动力学变化并同步作血气分析及MHb测定。结果发现,DMAP用于轻度失血复合氰中毒的治疗,有快速强效的心血管功能兴奋作用,起到挽救生命的效果;随失血程度加重,抗氰治疗难以奏效。血气分析及MHb测定结果表明,急性失血复合氰中毒时应用DMAP治疗可因过高的MHb浓度形成而严重影响血液携氧功能,提示在急性失血复合氰中毒时不用MHb形成剂类抗氰药为宜。     

缺氧条件下梭曼中毒对大鼠心肌M2受体mRNA表达的影响

目的 探讨缺氧条件下梭曼中毒大鼠心肌M2胆碱能受体表达的变化。方法 采用半定量RT－PCR法分别检测缺氧、梭曼中毒以及缺氧条件下梭曼中毒大鼠心肌M2受体mRNA的表达。结果 与正常对照组比较，缺氧组大鼠心肌M2受体mRNA表达增强，但相差并不显著；单纯梭曼中毒组和缺氧中毒组大鼠M2受体在致伤后各时间点表达明显减弱，但与单纯梭曼中毒组比较，缺氧中毒组大鼠心肌M2受体mRNA的表达在致伤后12h和24h明显增强（P＜0.05)。结论 M2受体对有机磷毒剂非常敏感，缺氧条件下大鼠心肌M2受体的表达相对于平原中毒组有所增强，可能是高原战区神经性毒剂加重心脏功能损害的一个重要原因。     

氰化物对大鼠脑单胺类递质的影响

大鼠腹腔注射NaCN中毒后3,5、10、30、45和60min用荧光法分别测定脑内多巴胺(DA)、去甲肾上腺素(NE)、5-羟色胺(5-HT)和5-羟吲哚乙酸(5-IHAA)含量。结果表明,中毒后脑内以上4种单胺含量呈剂量依赖性下降,45min时,低剂量NaCN(2.36mg/kg)中毒动物脑内DA和NE含量显著升高。氰化物中毒惊厥时伴有脑内单胺类递质含量的显著降低。提示脑内单胺类递质的变化在氰化物中枢毒理作用中可能具有重要意义。     

急性重复缺氧对BALB／C小鼠缺氧耐受性的影响

观察重复缺氧对ＢＡＬＢ／Ｃ小鼠缺氧耐受性的影响。结果在密闭缺氧的重复作用下，ＢＡＬＢ／Ｃ小鼠第１次缺氧的耐受时间平均为１７．３ｍｉｎ，第２、３、４次缺氧的耐受时间分别为第１次的３、６、７倍。第４次重复缺氧后，小鼠在低氧分压和氰化钾作用下的存活时间分别较正常对照小鼠增加２６倍与２．６倍。结果提示，急性重复缺氧显著增加ＢＡＬＢ／Ｃ小鼠对缺氧的耐受性。     

急性低压低氧对小鼠学习记忆能力及海马组织一氧化氮和内皮素-1水平的影响

目的 探讨模拟高原急性低压低氧环境对小鼠学习记忆行为及脑组织含水量、海马组织一氧化氮（Nitric oxide,NO）和内皮素-1（Endothelin-1,ET-1）的影响.方法 将小鼠随机分为常压常氧组和低压低氧组（模拟海拔6000 m 8 h）,用Morrs水迷宫测定小鼠的空间学习记忆能力;用干湿质量法测定脑组织含水量的变化;用酶联免疫吸附法观察其海马组织NO和ET-1的变化.结果 与常压常氧组比较,低压低氧组小鼠寻找平台的潜伏期延长[常压常氧组：（26.39±8.44）s,低压低氧组：（44.60±7.80）s,P＜0.01],目标象限停留时间减少[常压常氧组：（22.98±6.14）s,低压低氧组：（19.78±2.74）s,P＜0.05],脑组织含水量增加（P＜0.05）,海马组织NO[常压常氧组：（2.37± 1.07） μmol/gProt,低压低氧组：（4.48±1.45）μmol/gProt,P＜0.01]和ET-1水平增高[常压常氧组：（38.87±6.17） ng/L,低压低氧组：（52.09±6.75） ng/L,P＜0.01].结论 急性低压低氧环境小鼠学习记忆能力下降,这可能与急性低压低氧所致的脑水肿、海马组织NO和ET-1水平增加有关.     

缺氧复合梭曼中毒对PC12细胞中IL-4、IL-8和TPK活性的影响

目的研究缺氧复合梭曼中毒PC12细胞中白介素-4、白介素-8(IL-4、IL-8)和酪氨酸蛋白激酶(TPK)活性的变化.方法采用ELISA法和放射免疫技术检测缺氧复合梭曼中毒PC12细胞的IL-4、IL-8和TPK活性.结果单纯梭曼中毒PC12细胞胞浆、胞核的TPK以及IL-4、IL-8活性在中毒2 h升高,12 h活性水平最高,24 h活性降低.缺氧复合梭曼中毒组PC12细胞胞浆、胞核的TPK以及IL-4、IL-8活性在缺氧中毒2 h升高,6 h最高,12 h活性降低,各时相点均明显高于正常对照组.结论提示酪氨酸蛋白激酶、IL-4、IL-8参与缺氧复合梭曼中毒所致脑损伤的发病机制.