p27kip-1在支气管哮喘气道上皮组织中的表达及意义

【目的】探讨细胞周期素依赖性蛋白激酶抑制因子p27kip-1在支气管哮喘气道上皮组织中的表达及意义。【方法】60只雄性SD大鼠随机分为对照组与哮喘组,每组30只。用卵清蛋白(ovalbumin,OVA)致敏与激发建立大鼠哮喘模型。应用免疫组化SP法,检测对照组和哮喘组气道上皮组织中气道黏膜上皮细胞、p27kip-1的表达情况;测定两组气道上皮组织中气道平滑肌增生细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)的阳性计数。分离各组气道平滑肌细胞(airway smooth muscle cell,ASMC),以α-Actin抗体标记其核数。【结果】半定量评分显示,哮喘组气道黏膜上皮细胞及p27kip-1显著低于对照组(P<0.05),哮喘组PCNA阳性计数、ASMC核数显著大于对照组(P<0.01)。【结论】支气管哮喘时,p27kip-1在气道上皮组织中表达减少。通过上调p27kip-1在气道上皮组织表达可以抑制气道上皮组织中ASMC的增殖,为哮喘的防治研究提供了新思路。     

p21Ras对哮喘大鼠气道平滑肌细胞增殖的影响

目的观察p21Ras对哮喘大鼠气道平滑肌细胞增殖的影响。方法 14只SD大鼠,随机分为哮喘组和对照组,建立大鼠哮喘模型,采用酶消化法培养气道平滑肌细胞,免疫组织化学鉴定为平滑肌细胞,透射电镜观察细胞形态,分别取第3代对照组及哮喘组细胞,各自分为以下4个处理组,即对照组分为:a.对照空白组:不加任何干预剂;b.对照干预组;哮喘组分为:c.哮喘空白组;d.哮喘干预组。加入10mMFPTIII干预,流式细胞仪分析细胞周期分布,经Lev-ene’s方差齐性检验,按α=0.05水准,4组总体方差齐,组间比较采用Bonferron法检验,结果通过p21Ras干预后,哮喘空白组G0/G1期气道平滑肌细胞细胞(AMSC)比例显著低于对照空白组及哮喘干预组(P0.05);S期和S+G2/M期ASMC比例显著高于上述两组(P0.05);对照空白组与对照干预组差别不显著(P﹤0.05)。结论 p21Ras影响哮喘大鼠气道平滑肌细胞周期时相中G0/G1的比例,使其增殖受到抑制,提示p21Ras与哮喘气道平滑肌的增殖密切相关。     

细胞外信号调节蛋白激酶对哮喘大鼠气道平滑肌细胞周期的影响

目的探讨细胞外信号调节蛋白激酶(ERK)通道调控支气管哮喘大鼠气道平滑肌细胞(ASMC)增殖中的细胞周期机制。方法30只Wistar大鼠随机分为正常组和哮喘组,哮喘组采用卵清蛋白致敏和激发建立哮喘模型。取两组大鼠叶支气管ASMC进行原代培养,采用ERK激动剂表皮生长因子(EGF)和抑制剂PD98059干预哮喘组ASMC。用免疫组织化学法检测ASMC细胞周期蛋白CyclinD1和CDK2的表达;Western免疫印迹检测ERK1/2和磷酸化ERK1/2蛋白的表达,计算ERK活化率。结果哮喘组大鼠ASMC中CyclinD1、CDK2的表达和ERK活化率[76.15±4.88、92.30±7.95和(82.37±5.78)%]均较正常组[54.17±6.11、61.04±4.09和(49.91±3.26)%]显著升高(P均0.05)。经EGF处理后上述指标进一步升高[119.28±8.14、134.77±9.26和(91.57±5.32)%,P均0.05],经PD98059处理后显著降低[58.78±4.60、69.15±5.83和(54.01±4.12)%,P均0.05]。结论哮喘大鼠ASMC增殖活性增强。ERK1/2可通过诱导ASMC中CyclinD1和CDK2蛋白高表达,使细胞从G1期向S期发展,促进细胞增殖。     

地塞米松对哮喘小鼠气道平滑肌细胞增殖及转化生长因子β1表达的影响

目的探讨地塞米松干预对哮喘小鼠气道平滑肌细胞（ASMC）增殖及转化生长因子β1（TGF-β1）表达的影响。方法建立哮喘小鼠气道重塑模型,实验分为对照组、哮喘组和地塞米松组。测定支气管肺泡灌洗液（BALF）中嗜酸性粒细胞（EOS）计数及活性TGF-β1表达的变化,行HE染色及PCNA、TGF-β1免疫组化染色,图像分析测定管腔基底膜周长（Pbm）、气管壁总面积（WAt）、气道平滑肌面积（WAm）、ASMC核数（N）及TGF-β1在ASMC的灰度值。结果哮喘组EOS计数明显升高,出现管壁、平滑肌层明显增厚及ASMC增殖等气道重塑的特征,与TGF-β1的表达呈正相关。地塞米松组与哮喘组比较炎症反应减轻,管壁、平滑肌层增厚及ASMC增殖减少（P均小于0.05）,TGF-β1表达减弱（P〈0.05）。与对照组间比较差异无显著性（P均大于0.05）。结论反复的变应原吸入可导致气道重塑尤其是ASMC增殖,TGF-β1在ASMC增殖中可能具有重要作用,地塞米松干预可减缓气道重塑尤其是ASMC增殖的发生。     

氟伐他汀对哮喘气道重建防治的作用

目的　研究氟伐他汀 (Flu)对哮喘气道重建的防治作用并分析其机制 .方法　 1采用体外大鼠气道平滑肌细胞(ASMC)培养 ;2建立哮喘豚鼠气道重建模型并对这种模型采用雾化吸入和 po Flu进行防治 ;3分子杂交和免疫组织化学观察 Flu对气道平滑肌 H- ras表达的影响 .结果　 ASMC培养结果显示 Flu对于增生状态的 ASMC和对由组胺、血清刺激增生的 ASMC都有明显的抑制作用 ,且这种作用呈浓度依赖性 ;使用 Flu预防和治疗哮喘气道重建结果显示 ,无论预防或治疗组气道平滑肌厚度、气管基底膜厚度及气管粘膜变化等都与对照组有显著性差异 (P<0 .0 5 ) .Flu可以抑制ASMC中癌基因 H - ras的表达 .结论　 Flu能有效地预防和治疗哮喘气道重建     

β2受体下调细胞模型的构建研究

目的:通过沙丁胺醇刺激的方法构建细胞水平β2肾上腺素能受体(β2AR)下调的模型,为研究β2AR下调的分子生物学机制奠定基础。方法:取正常Balb/c小鼠气道平滑肌细胞(ASMC)进行原代培养(组织贴块法),第2～5代细胞经形态学及间接免疫荧光法进行鉴定,将第3～4代纯度在95%以上的ASMC随机分为2组:正常ASMC对照组和沙丁胺醇刺激组。采用RT-PCR和Western Blot分别检测对照组和沙丁胺醇刺激组β2AR mRNA及蛋白水平的表达。结果:(1)原代培养的ASMC呈典型的"峰谷"状生长,细胞浆内有与细胞纵轴平行的特异性平滑肌α-肌动蛋白丝的阳性表达,证实了平滑肌细胞的来源,并符合平滑肌细胞的形态学和生物学特性;(2)沙丁胺醇刺激组β2AR mRNA的表达较对照组降低(P<0.05),β2AR蛋白表达亦明显降低(P<0.05)。结论:成功构建了小鼠气道平滑肌β2AR下调的细胞模型,为进一步研究哮喘患者β2AR减敏的机制奠定了良好的基础。     

MicroRNA-34a 对小鼠气道平滑肌细胞增殖和ORMDL3 表达的影响

目的 探讨支气管哮喘小鼠模型中microRNA-34a（miR-34a）对气道平滑肌细胞（ASMC）增 殖与血清类黏蛋白1 样蛋白3（ORMDL3）表达的影响。方法 以卵清蛋白（OVA）诱导复制的小鼠哮喘 模型和培养的ASMC 为研究对象,筛选与ORMDL3 密切相关的miRNA ;利用miR-34a-mimic 使miR- 34a 过表达;用苏木精- 伊红染色和MTT 法探究其对ASMC 增殖的影响;实时荧光定量聚合酶链反应和 Western blot 检测ORMDL3 的表达变化。结果 OVA 诱导下小鼠气道组织中miR-34a 被抑制（P <0.05）。 miR-34a-mimic 可减少哮喘小鼠ASMC 异常增殖（P <0.05）;miR-34a-mimic 抑制ASMC 在490nm 下的光 密度值和相对细胞活性（P <0.05）;miR-34a-mimic 下调哮喘小鼠气道组织中ORMDL3 的表达,并抑制体 外培养ASMC 中ORMDL3 的表达（P <0.05）。结论 miR-34a 可抑制ASMC 的增殖和ORMDL 3 基因表达, 为今后哮喘发病机制的研究提供新的思路。     

维生素D对原代培养哮喘大鼠气道平滑肌细胞增殖的影响

目的:探讨维生素D对哮喘大鼠气道平滑肌细胞(airway smooth muscle cells,ASMCs)的抗增殖机制,并证明细胞周期蛋白D1(cyclin D1)在其抗增殖调控中的作用?方法:原代培养正常对照组和哮喘组大鼠ASMCs,取第3~5代细胞用于实验?总分为以下5组:正常对照ASMCs组?哮喘ASMCs组?哮喘ASMCs + 1 × 10-8 mol/L维生素D组?哮喘ASMCs + 1 × 10-7 mol/L维生素D组?哮喘ASMCs + 1 × 10-6 mol/L维生素D组?用四甲基偶氮唑盐(MTT)法?流式细胞术检测各组ASMCs增殖活性的变化;用逆转录-聚合酶链反应(RT－PCR)和蛋白质印迹(Western blot)检测不同组ASMCs cyclin D1 mRNA和蛋白的表达?结果:① 哮喘ASMCs组G0/G1期细胞比例(80.01 ± 2.55)%明显少于其他各组,S期(8.31 ± 0.42)%和G2/M期(11.21 ± 1.43)%比例增加,MTT法检测其吸光度值增高(0.78 ± 0.04),提示ASMCs增殖明显增强?其中各值分别与正常对照ASMCs组[(90.15 ± 3.02)%?(5.41 ± 0.62)%?(4.38 ± 0.56)%?0.22 ± 0.04]相比,有显著性差异(P < 0.001);同时哮喘ASMCs组与哮喘ASMCs + 1 × 10-6 mol/L维生素D组各值[(89.08 ± 2.81)%?(5.58 ± 0.92)%?(4.61 ± 1.12)%?0.38 ± 0.02]相比,其差异有统计学意义(P < 0.001);与哮喘ASMCs + 1 × 10-7/1 × 10-8 mol/L维生素D组相比,差异也有统计学意义(P < 0.01);②在cyclin D1 mRNA和蛋白表达水平上,哮喘ASMCs组与正常对照ASMCs组?哮喘ASMCs + 1 × 10-6 mol/L维生素D组分别相比较均偏高,差异显著(P < 0.001);③在各不同剂量维生素D作用组,分别在细胞增殖活性检测?cyclin D1 mRNA和蛋白表达水平上,大剂量维生素D组作用均优于最小剂量组,差异有统计学意义(P < 0.001),显示维生素D的抗增殖作用有明显剂量-效应相关性?结论:哮喘组大鼠ASMCs增殖明显,维生素D可以通过调节cyclinD1表达发挥其对哮喘大鼠ASMCs的抗增殖作用?     

TGF-β1对哮喘大鼠气道平滑肌细胞增殖的影响研究

目的：探究TGF-β1对哮喘大鼠气道平滑肌细胞（ASMC）增殖的影响,进一步揭示哮喘的发病机制。方法建立大鼠慢性哮喘模型,原代分离培养大鼠ASMC,将细胞分为正常组、哮喘组、TGF-β1组和TGF-β1＋PD-98059组,以CCK-8法检测细胞增殖,Western blot法检测caveolin-1和p- ERK1/2蛋白表达。结果 TGF-β1组细胞增殖较正常组和哮喘组明显（均P＜0.01）;TGF-β1＋PD-98059组细胞增殖较TGF-β1组减低,但较哮喘组仍明显（均P＜0.05）。TGF-β1组p- ERK1/2表达量较正常组和哮喘组增加;TGF-β1＋PD-98059组p- ERK1/2表达量较TGF-β1组减少,但较哮喘组表达量仍有所增加（均P＜0.05）。TGF-β1组caveolin-1表达量较正常组和哮喘组减少（均P＜0.05）;TGF-β1＋PD-98059组caveolin-1表达量较TGF-β1组增加（P＜0.05）。结论 TGF-β1可以下调caveolin-1蛋白的表达量,激活ERK通路,从而促进哮喘大鼠ASMC的增殖,引起气道重塑。     

反义c-myc寡核苷酸对大鼠气道平滑肌细胞周期的阻滞作用

目的: 观察反义c-myc寡核苷酸对大鼠气道平滑肌细胞周期的影响. 方法: 大鼠气道平滑肌细胞原代培养后,以Lipofectin将反义、正义和错配c-myc寡核苷酸导入平滑肌细胞,流式细胞技术检测细胞周期,免疫组织化学方法检测cyclin D1和cyclin E的表达. 结果: 反义c-myc寡核苷酸可明显抑制大鼠气道平滑肌细胞通过S期,正义及错配c-myc寡核苷酸对细胞周期无明显影响;反义c-myc寡核苷酸抑制了大鼠气道平滑肌细胞cyclin D1和cyclin E的表达. 结论: 反义c-myc寡核苷酸可抑制大鼠气道平滑肌细胞通过S期,抑制cyclin D1和cyclin E 的表达.     

病案信息管理发展趋势

目的探索病案信息管理未来发展方向。方法将病案信息管理过程中所涉及的问题进行分析。结果病案信息管理在医疗、教学、科研、医院管理、医疗保险、法律等起着举足轻重的作用。结论病案信息管理发生显著的变化,向数字化、高智能化的电子病案方向发展。     

强迫症的亚型探讨与疗效比较

目的：探讨认知行为心理治疗（CBT）在强迫症（OCD）患者各亚型治疗中的有效性和规律性。方法：本研究为临床对照研究。符合入组标准的强迫症患者按患者自愿原则分为两组,治疗观察3、6个月。疗效评定分别运用Yale-Brown强迫量表,自拟的自评好转程度量表和临床疗效评定。结果：认知行为心理治疗合并药物治疗组31例,临床有效率70.9%,其中治愈率1.8%。单纯药物治疗组24例,临床有效率33.3%。Yale-Brown强迫量表在6个月两组有显著性差异（P〈0.05）。其中强迫症亚型（怕脏型、反复检查型和反复担心型）的疗效比较,怕脏型在治疗3个月末两组间自评量表评分有显著性差异（P〈0.05）;反复担心型在治疗6个月末两组间Yale-Brown强迫量表总分有显著性差异（P〈0.05）;反复检查型两组间无统计学差异。结论：认知行为心理治疗合并药物治疗强迫症的疗效明显优于单纯药物治疗。强迫症的亚型在治疗中的有效性次序为：反复担心型〉怕脏型〉反复检查型。     

谈文学审美过程对医务人员自身素质的影响

文学是为满足人的审美需求而产生、存在和发展的。文学以其对美的寻求、揭示、建构和表现,丰富着人们的精神世界,彰显着自身存在的价值。正如席勒所说：＂审美是人性的完成＂。文学和医学是两种互补的认识方式,文学可以说是医学的原动力。文学审美过程是促使医务人员自我完善的过程,可以提高医务人员的综合素质;促进医务人员的医患伦理建构。     

常见脉象寸口部光电血管容积图的参数分析

为了研究不同脉象与血管容积图的关系,应用“BC－4型”定量式光电血管容积仪对432例受检者（包括正常脉象和10种常见病脉）进行寸口脉光电血管容积图检测,同步进行血流动力学参数分析。结果表明,与正常脉象比较,种种病脉在寸口脉血管容积图上均显示出各种脉象的参数特征,而血流动力学指标的变化反映了不同脉象形成的心血管病理生理特点。提示寸口部光电血管容积图参数为各类病理脉象的临床诊断提供了客观化依据。     

加强病历书写的质量监控确保病案质量

目的针对住院病案缺陷的常见原因，提出解决方法。方法对2007年上半年出院病案进行质量检查。结果抽查病历924份，病历缺陷924份，共2540项次。结论加强医师的法制观念，加强责任感，强化基本功讪练，实行病案质量四级监控，杜绝缺陷病案归档上架，确保病案质量。     

拓展利用病案资源 突出病案服务功能

从病案信息利用的范围及病案信息利用的管理两大方面阐述了病案在信息时代所处的地位及其利用价值,同时就拓展病案利用价值提出了一些建议。     

从我院病案利用情况观病案资料管理的重要性

目的探讨医院病案管理的重要性。方法对我院2004年11月1日至2005年10月31日病案资料使用情况和复印情况进行了分析。结果总结出病案在五大方面的作用,医院管理决策者和领导可利用病案信息对医院未来发展进行预测,并制定发展目标。结论病案资料客观、真实地记录了病人诊疗情况,为医院保险机构、执法部门、医学科研、教学发展提供有价值的原始信息资料。     

应用缝匠肌治疗髌骨外侧移位

目的 应用缝匠肌前移治疗因髌韧带外侧紧张、内侧松弛、Q角大于正常所引起的髌软骨软化症、髌骨半脱位及复发性髌骨脱位。方法 游离缝匠肌下1/3段,止点不切断,移至髌骨前固定,建立髌骨向内的可变拉应力,使Q角变小。结果 治疗髌软骨软化症8例10膝,随访7例8膝,髌股关节痛消失;髌骨半脱位7例9膝,随访6例7膝,髌骨无再半脱位;复发性髌骨脱位15例18膝,随访12例13膝,髌骨无再脱位。结论 本方法设计合理、操作简单,适应髌骨向外侧移位的治疗。     

加强地震伤员病历质量管理的探讨

目的探讨地震伤员病历质量管理的方法。方法（1）首先网上快速检查每份病历书写的质量情况；（2）针对病历书写存在的问题进行分析；（3）针对存在的问题进行病历的管理。结果有效提高了地震伤员病历的内涵质量。结论地震伤员的病历管理以军字一号工程电子病历实时监控管理的方式最好，传统终末病历管理的方法价值不大。