中国内江猪的氟烷基因型

为了给医学实验用猪的选育工作提供相关资料,作者采用聚合酶链反应结合限制性内切酶（ＰＣＲ－ＲＦＬＰ）技术对２５头中国内江猪的氟烷基因型进行了检测,结果２５头内江猪氟烷基因型均为阴性纯合子。从而提示中国内江猪有可能成为医学实验动物及猪→人异种移植的选育猪种之一;ＰＣＲ－ＲＦＬＰ法是鉴别猪氟烷基因型的可靠又简便的方法。     

嗜肺巴氏杆菌蛋白及抗原图谱初步分析

为了应用ＲＦＬＰ分析猪线粒体ＤＮＡ Ｄ－ｌｏｏｐ的多态性。应用ＰＣＲ对西双版纳近交系小耳猪、广西巴马小型猪、贵州小型香猪、大约克夏猪、荣昌猪和长白猪血液总ＤＮＡ样品中线粒体ＤＮＡ控制（ｍｔＤＮＡ Ｄ－ｌｏｏｐ）进行扩增,２３种限制性内切酶消化,琼脂糖凝胶电泳检测。结果发展ｍｔＤＮＡ Ｄ－ｌｏｏｐ酶切多态性贫乏。因此根据现用酶,应用ｍｔＤＮＡ Ｄ－ｌｏｏｐ ＰＣＲ－ＲＦＬＰ分析,尚不能做猪品种品系鉴     

PCR—RFLP用于HLA—DQA1基因分型的方法建立

目的 建立一种简便、快速、价廉的ＨＬＡ－Ⅱ类基因分型方法，即ＰＣＲ－ＲＦＬＰ（Ｒｅｓｔｒｉｃｔｉｏｎ Ｆｒａｇｍｅｎｔ Ｌｅｎｇｔｈ Ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍ）。方法 通过对４０例正常献血员及３０例系统性红斑狼疮（ＳＬＥ）患者ＨＬＡ－ＤＱＡ１基因的分型，介绍ＰＣＲ－ＲＦＬＰ的原理，具体方法及应注意的问题。结果 正常献血员与ＳＬＥ患者有明显不同的基因型别。结论 ＰＣＲ－ＲＦＬＰ分型方法更易为一般实验     

应用巢氏PCR-RFLP直接检测结核病临床标本中结核分支杆菌链霉素耐药基因型

目的：了解结核分支杆菌链霉素耐药基因突变情况,建立快速检测耐药突变株的方法。方法：通过ＰＣＲ－ＳＳＣＰ、ＰＣＲ－ＲＦＬＰ和巢氏ＰＣＲ－ＲＦＬＰ分析４０株结核分支杆菌临床分离株和１５例临床标本的ｒｐｓＬ基因突变的部位和性质。结果：１０株药物敏感株的ｒｐｓＬ双链泳动正常、并可被ＭｂｏⅡ消化;３０株耐ＳＭ分离株中,２５株双链泳动异常,２４株不被消化;１５例临床标本中,常规ＰＣＲ扩增７例ｒｐｓＬ阳性,巢氏ＰＣＲ１５例均阳性,４例ｒｐｓＬ双链泳动异常、并不被ＭｂｏⅡ消化。结论：通过常规ＰＣＲ－ＳＳＣＰ和ＰＣＲ－ＲＦＬＰ可快速检测结核分支杆菌耐ＳＭ分离株４３位密码子点突变,而通过巢氏ＰＣＲ－ＲＦＬＰ可直接检测大多数临床标本中结核分支杆菌ＳＭ耐药基因型。     

应用巢氏PCR—RFLP直接检测结核病临床标本中结核分支杆菌链霉？…

目的：了解结核分支杆菌链霉素耐药基因突变情况,建立快速检测耐药突变株的方法。方法：通过ＰＣＲ－ＳＳＣＰ、ＰＣＲ－ＲＦＬＰ和巢氏ＰＣＲ－ＲＦＬＰ分析４０株结核分支杆菌临床分离株和１５例临床标本的ｒｐｓＬ基因突变的部位和性质。结果：１０株药物敏感株的ｒｐｓＬ双链泳动正常、并可被ＭｂｏⅡ消化;３０株耐ＳＭ分离株中,２５株双链泳动异常,２４株不被消失;１５例临床标本中,常规ＰＣＲ扩增７例ｒｐｓＬ阳性,巢氏     

三个封闭群小鼠线粒体DNAPCR-RFLP分析

目的：分析ＫＭ等３个封闭群小鼠线粒体ＤＮＡ（ｍｔＤＮＡ）的多态性,探讨实验小鼠的遗传监测方法。方法：ＰＣＲ－ＲＦＬＰ技术,即ＰＣＲ技术结合限制性内切酶片段长度多态分析（Ｒｅｓｔｒｉｃｔｉｏｎ ｆｒａｇｍｅｎｔ ｌｅｎｇｔｈ ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍ,ＲＦＬＰ）。结果：ｍｔＤＮＡ Ｄ－Ｌｏｏｐ、ｔＤＮＡ１基因、ＤＮ３基因片段经ＨａｅⅢ、ＨｉｎｆⅠ、ＥｃｏＲⅤ、ＨｉｎｄⅢ、ＨｐａⅠ、ＢａｍＨⅠ、Ａｐａ     

错配PCR—RFLP检测乙型肝炎病毒X基因／C基因启动子变异

设计错配ＰＣＲ－限制性片段长度多态性分析（ＰＣＲ－ＲＦＬＰ）检测中国ＨＢＶ毒株Ｃ基因启动子（ＢＣＰ）区第２个ＡＴ丰富区的一对点突变；核苷酸（ｎｔ）１７６２的碱基由Ａ→Ｔ和１７６４的碱基由Ｇ→Ａ变异。结果发现在３２例慢性ＨＢＶ感染者中ＢＣＰ变异者有１０例总检出率为３１．２％。提示在我国ＨＢＶ毒株ＢＣＰ区这一联合估变较常见。ＰＣＲ－ＲＦＬＰ技术与序列分析结合，对于研究这一新发现的热点变异与临床的关系具     

一个氨基甙类抗生素致聋家系线粒体DNA序列分析

目的：通过对一个氨基甙类抗生素致聋家系１１名成员的线粒体ＤＮＡ进行分析，探讨该病的遗传方式及与线粒体ＤＮＡ突变的关系。方法：对１１名成员外周血线粒体ＤＮＡ进行ＰＣＲ－ＲＦＬＰ及测序分析。结果：８例标本的ＰＣＲ－ＲＦＬＰ结果异常，测序表明其均存在１５５位点Ｃ－Ｔ突变。结论：氨基甙类抗生素致聋与线粒体ＤＮＡ突变有关，该家系呈典型母系遗传。     

吉林地区正常汉族人群载脂蛋白E基因多态性分布状态的研究

目的：研究载脂蛋白（Ａｐｏ）Ｅ基因多态性在吉林地区正常汉族人群中的分布状态。方法：应用聚合酶链反应－－限制性片段和蔗多态性（ＰＣＲ－ＲＦＬＰ）方法先扩增出ＡｐｏＥ基因第４外显子内的２２７ｂｐ片段，继以限制性切酶Ｃｆｏｌ酶解消化，８％聚丙烯酰胺凝胶电泳，最后银染显带判定基因型，度计算等位基因频率。结果；本实验共检测分析了２０６例吉林地区正常汉族人的ＡｐｏＥ基因型及等位基因频率。结果表明合子ε３／３基     

PON2基因遗传多态性与月经周期过长的关系

目的 研究月经失调遗传易感性。方法 对某纺织厂４９９名新婚女工进行健康调查；用ＰＣＲ－限制性片段长度多态性（ＰＣＲ－ＲＦＬＰ）检测ＰＯＮ２基因型，采用Ｌｏｇｉｓｔｉｃ回归分析评价ＰＯＮ２基因遗传多态性与月经周期过长的关系。结果 在未调整环境因素条件下，ＰＯＮ２ Ａ１４８Ｇ杂合子基因型有增加月经周期过长危险度的趋势，但差异无显著性，而Ａ１４８Ａ纯合子基因型可明显增加月经周期过长危险度（Ａ１４８Ｇ：Ｏ     

中国内江猪胰腺组织异种抗原的研究

为获取临床猪→人异种胰腺移植的基础资料，分别采用植物凝集素ＢＳＩＢ４，健康人血清，人类血型抗原Ａ，Ｂ，Ｈ物质单克隆抗体免疫组化法检测１０头内江猪胰腺组织中异种移植抗原的表达。结果显示：内江猪胰腺组织中血管内皮，导管上皮细胞表达α－Ｇａｌ；部分胰岛细胞，胰腺外分泌细胞和所有导管上皮细胞均表达人类血型Ａ抗原。结论；人体内存在抗内江猪胰腺组织部分细胞的天然抗体；内江猪胰腺组织异种移植抗原的表达情况有可能     

巢氏PCR—RFLP和多重PCR检测HBV基因型、基因亚型方法的比较

目的:建立HBV基因型和亚型的分型方法,并分析相关的两种方法特异性和敏感性。方法:采用型特异性引物的巢氏PCR-RFLP和六种主要的HBV型特异性引物和亚型特异性引物的多重PCR方法,分别检测了100例患者标本。结果:两法不一致率为50%(27/54)。型特异性引物巢氏PCR-RFLP法检测出B基因型41例(41%),C基因型25例(25%),B C基因型34例(34%),B j亚型3例(7.3%),Ba亚型为38例(92.7%),Cs亚型为21例(84%),Ce亚型为3例(12%),1例C型未分出亚型(4%)。多重PCR法检出B型18例(33.3%),C型7例(13%),B C混和型5例(9.3%),B2亚型2例(11%),C1亚型2例(28.5%)。巢氏PCR-RFLP法型检出率100%亚型检出率98.5%,多重PCR法型检出率55.6%,亚型检出率仅为16%,前者高于后者(P<0.05)。结论:巢氏PCR-RFLP鉴定HBV基因型、基因亚型较多重PCR敏感性高,重复性好,但耗时长,费用高。     

中外六个猪种FUT1基因多态性研究

目的对6个中外猪种共245头猪的FUT1基因进行了研究。方法采用PCR-RFLP技术。结果与结论Hin6I位点上，大白猪、长白猪、杜洛克猪3个外来猪种均存在多态，且以敏感型（GG型和AG型）居多；山西黑猪、太原花猪、马身猪3个本地猪种的所有检测样品都表现为GG型。     

Limitations of the infant mouse test for Escherichia coli heat stable enterotoxin.

A study was undertaken to evaluate the response of different test systems to preparations of heat-stable enterotoxin (ST) derived from Eschericihia coli strains recovered from diarrheal disease of humans, pigs and calves. Sterile broth culture supernatants of enterotoxigenic strains of E. coli were heated at 65 degrees C for 30 minutes and tested for the presence of heat-stable enterotoxin. Three test systems, namely, ligated intestine of weaned pigs, ligated intestine of rabbits and the infant mouse test were used in attempts to detect ST in the culture supernatants. Two patterns of reaction were observed in response to ST-containing preparations: either the preparation elicited a response in the three tests or the preparation elicited a reaction only in the ligated pig intestine. A response in all three tests were observed for 5/5 human ST-producing E. coli, 5/5 bovine enterotoxigenic E. coli, 5/5 "atypical" porcine enterotoxigenic E. coli, 3/3 St(+)LT(-) porcine E. coli of serogroup O138:K81 and 4/24 LT(+)ST(+) porcine E. coli. A response only in the ligated pig intestine was obtained with 5/5 ST(+)LT(-) porcine E. coli belonging to serogroups other than O138:K81 and to 20/24 ST(+)LT(+)E. coli from pigs. The results are consistent with the view that there are two kinds of ST, one of which (ST1) reacts in all three tests and the other (ST2) which reacts only in the ligated pig intestine. The findings underscore the limitations of the infant mouse test as a means of detecting ST in porcine isolates of E. coli, since the test fails to detect ST produced by a large number of these E. coli strains. There appeared to be a relationship between kind(s) of ST produced and the animal species from which the producing organism was recovered.     

Reevaluation of the Correlation between Angiotensinogen Gene M235T Polymorphism and Familial Essential Hypertension Using MS-PCR Technique

Renin- angiotensin system( RAS) candidat-ing gene,such as angiotensinogen( Ag T) as wellas angiotensin- converting enzyme( ACE) genepolymorphism were thought to have positive association with various cardiovasculardiseases.In1 992 ,Jeunemaitre[1] detected a microsatellitepolymorphism in the region of the an-giotensinogen gene which has linked to occur-rence of essential hypertension.Further analysisled to detection of several mutations in the cod-ing region of angiotensinogen gene[2 ] . Ma…     

XRCC1 Arg399Gln与老年性年龄相关白内障的关联研究

目的探讨XRCC1Arg399Gln与老年性年龄相关白内障的相关性。方法应用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)技术检测260例年龄相关白内障患者和276例年龄相匹配正常对照者的XRCC1基因Arg399Gln。结果病例组XRCC1Arg399Gln A等位基因频率和GA+AA基因型频率在病例组明显升高于对照组,G等位基因频率和GG基因型频率在对照组明显升高(P<0.05)。结论 XRCC1Arg399Gln与宁夏人群老年年龄相关性白内障存在关联性。     

人→猪脾块移植嵌合细胞的体内转归

目的：建立人→猪异种移植物抗宿主反应（GVHD）模型来模拟猪→人异种移植时人免疫系统对猪的攻击。方法：以中国内江猪为实验动物，经环磷酰胺静注行免疫抑制后，腹膜腔内植入人脾块悬液，术前、术后定期采集猪外周血行血常规检查监测猪被免疫抑制程度。行流式细胞术检查监测人细胞在猪外周血中嵌事情况，行细胞介导的淋巴细胞毒试验动态监测人抗猪和猪抗人的细胞毒活性。结果：各试验猪存活良好，给药后4d各猪外周血白细胞总数可降至正常值的15％左右，移植后第2天和第2周左右，人细胞在猪体内可形成两个较明显的嵌合高峰，尽管人抗猪淋巴细胞毒性于术后2周时有明显升高，但在术后1个月内猪抗人淋巴细胞毒性始终明显高于人抗猪淋巴细胞毒性。结论：人→猪脾块移植后，受猪体内的供受细胞呈现一个两元（猪细胞、人细胞）三态（微嵌合、宿主抗移植物反应、移植物抗宿主反应）的动态平衡过程。     

妊娠期糖尿病与HLA-DQA1基因多态性相关性的研究

目的:探讨妊娠期糖尿病(GDM)的易感性与HLA-DQA1基因多态性的关系。方法:采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)技术检测35例GDM患者(GDM组)及35例正常妊娠晚期妇女(对照组)的HLA-DQA1基因多态性频率。结果:GDM组孕妇与对照组孕妇相比较,HLA-DQA1*0201基因频率明显升高(22.86%vs11.43%),差异有显著性(P<0.05)。结论:HLA-DQA1*0201基因在天津及秦皇岛地区汉族GDM患者中频率较高,可作为GDM易感基因的候选基因,未发现GDM的保护基因。     

白色念珠菌临床株基因分型及耐药性研究

目的：了解白色念珠菌的基因分型情况以及不同基因型白色念珠菌的药敏试验结果。方法：应用聚合酶链反应（PCR）扩增白色念珠菌25S核糖体DNA基因内含子区,可转座I型内含子插入片段的数目及大小的不同使得扩增产物不同,根据产物片段大小和数目分型。采用K-B法对不同基因型进行白色念珠菌药敏分析。结果：临床分离的121株白色念珠菌经PCR分为三型：A型83株,B型27株,C型11株。A型为最常见的基因型,B型、C型白色念珠菌对唑类抗真菌药物的耐药率显著高于A型菌株,对其他抗真菌药物的耐药率差异无显著性。结论：不同型别的白色念珠菌耐药谱可能与特定基因型有一定相关性。