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相似文献
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1.
流式细胞术检测γδT细胞内细胞因子的方法学探讨   总被引:1,自引:1,他引:0  
目的:建立流式细胞术检测细胞内细胞因子的方法,对活化的γδT细胞内细胞因子进行检测分析.方法:用佛波醇酯(PMA)和离子霉素(IM)刺激活化外周血单个核细胞(PBMC),Brefeldin A(BFA)阻断细胞内分子的分泌,37℃、5%CO2培养5h后,流式细胞术检测细胞内细胞因子.结核分枝杆菌低分子多肽抗原(Mtb)活化PBMC,增殖培养10天后获得较高比例的γδT细胞,用PMA和IM活化γδT细胞,检测γδT细胞内的IL-2.结果:流式细胞术检测细胞内细胞因子的方法,对活化后γδT细胞内IL-2检测获得良好的结果,阳性率可达45.68%.结论:流式细胞术检测细胞内细胞因子,能很好地检测γδT细胞单个细胞水平上细胞因子的产生,是研究γδT细胞内细胞因子的一个较好的方法.  相似文献   

2.
杨晓敏  董德琼 《重庆医学》2013,(24):2951-2952
检测继发型肺结核患者和社区获得性肺炎患者血清中的血管活性肠肽(VIP)水平变化,及与Th1型细胞因子γ-干扰素(IFN-γ)、Th2型细胞因子白细胞介素-4(IL-4)的相关性,探讨VIP在肺部感染性疾病鉴别诊断中的价值。  相似文献   

3.
目的:培养针对髓鞘碱性蛋白( MBP)特异的SD大鼠T淋巴细胞,对其表型和细胞因子分泌特征进行鉴定。方法将MBP免疫SD大鼠,收集回流淋巴结,制备成单细胞悬液,在RMPI 1640培养液中用MBP反复刺激获得MBP特异性T细胞(MBP-T)。然后用3H-胸腺嘧啶核苷(3H-TdR)掺入法测定其对MBP刺激的反应性,用流式细胞术鉴定其表型和细胞因子的产生。结果当 MBP抗原存在的情况下,MBP-T的3 H-TdR掺入量明显增加。流式细胞术检测表明MBP-T主要为CD3+ CD4+的T淋巴细胞(98%),并可以产生干扰素γ(IFN-γ)和白细胞介素10(IL-10)等细胞因子。结论 MBP免疫SD大鼠的回流淋巴结细胞,经过体外扩增可以获得 MBP 特异性的 T 细胞,其表型主要为 CD3+CD4+,并可以产生Th1和Tr1型细胞因子。  相似文献   

4.
随着核能技术在肿瘤和骨髓移植病人的医疗性照射、同位素示踪、辐照加工及核电等领域的广泛应用,辐射事故的发生也随之增加。此外,平时核设施遭到破坏或战争时期的核袭击,均可发生大量的急性辐射损伤(尤其是骨髓造血功能的损伤)病人。近十多年来,应用细胞因子来改善辐射造血损伤获得良好的疗效。然而,细胞因子的用药对象、  相似文献   

5.
谷氨酰胺对人外周血单个核细胞细胞因子表达的影响   总被引:3,自引:0,他引:3  
Yang C  Wang XY  Li WQ  Li N  Li JS 《中华医学杂志》2008,88(7):449-452
目的 探讨谷氨酰胺(Gln)对内毒素(LPS)刺激下健康人外周血单个核细胞(PBMC)细胞因子表达的影响.方法 取健康志愿者新鲜外周血,利用密度梯度离心法提取单个核细胞,观察内毒素刺激单个核细胞表达肿瘤坏死因子(TNF-α)和白细胞介素(IL)系列(IL-1β、IL-4、IL-6、IL-8、IL-10),酶联免疫吸附法(ELISA)检测上清中细胞因子的表达,SuperArray基因芯片技术检测细胞中细胞因子mRNA的表达,同时分别使用1、8、10和15 mmol/L Gln预处理单个核细胞0.5 h和2 h后观察细胞因子在蛋白以及基因水平的表达.结果 LPS刺激PBMC后观察部分细胞因子表达明显增强;1 mmol/L Gln组细胞因子表达无变化,8 mmol/L Gln预处理后TNF-α、IL-1β、IL-8和IL-10表达下降(P<0.05),15 mmol/L Gln组炎症介质表达均有显著下降(P<0.01).但与未受LPS刺激组相比炎症介质表达仍有增高(P<0.05).Gln预处理2 h组细胞因子表达的抑制较0.5 h明显增强(P<0.05),并且存在时间和剂量的依赖性.结论 Gln能够下调LPS刺激下PBMC细胞因子的过表达.  相似文献   

6.
目的:从健康人外周血中诱导高纯度树突状细胞(DC)。方法:将外周血单个核细胞用贴壁法分离出单核细胞,经多细胞因子联合诱导出DC。结果:培养8~9d后即可获得大量高纯度的成熟DC,经流式细胞仪检测,所得细胞中高表达共刺激分子和粘附分子,表现为成熟DC的特征。结论:利用多细胞因子组合可从外周血诱导大量成熟DC,为DC的临床应用提供依据。  相似文献   

7.
卵巢癌细胞因子基因治疗   总被引:1,自引:0,他引:1  
程蓓  谢幸  叶大风 《浙江医学》2000,22(11):699-701
卵巢癌起病隐匿、进展快,缺乏有效的早期诊断手段,约70%的患者一经发现即已为晚期。虽然近年来手术、化疗和放疗获得重大进展,但晚期卵巢癌的五年生存率仍长期徘徊在20%~30%[1],人们在努力寻找一种新的更有效的治疗方法来改善其预后。其中细胞因子治疗是研究的热点,但细胞因子在体内半衰期短,需反复大剂量给药,导致剂量限制性毒副反应,限制了其临床应用。细胞因子基因治疗(cytokinegenetherapy)是指通过基因转染技术,选择编码细胞因子或其受体基因为目的基因,将其导入肿瘤细胞或免疫细胞,这些细胞因子的细胞在…  相似文献   

8.
目的探讨并分析不同条件培养液对脐血CD+ 34 细胞的体外扩增效应及影响因素。方法利用 4种条件培养液 (胎儿肌肉、胎盘组织、外周血、脐血单个核细胞 )对脐血CD+ 34 细胞进行 2周的体外扩增 ,并和三细胞因子组合 :干细胞因子 (stemcellfactor ,SCF)、血小板生成素 (thrombopoietin ,TPO)、flt 3配基 (flt 3ligand ,FL) ,对脐血CD+ 3 4 细胞扩增结果进行了比较 ;利用ELISA方法检测 4种条件培养液中细胞因子 [白细胞介素 1(interleukin 1,IL 1)、白细胞介素 6 (interleukin 6 ,IL 6 )、FL、TPO]的浓度。结果脐血单个核细胞条件培养液及细胞因子组合对脐血CD+ 3 4 细胞均有明显的扩增效应 ,脐血组优于细胞因子组合 ;4种条件培养液中 ,脐血组细胞因子FL的含量明显高于其余条件培养液组。结论脐血条件培养液可作为体外培养扩增脐血CD+ 34 细胞有效而廉价的扩增剂 ;细胞因子FL可能是造成不同条件培养液对脐血CD+ 34 细胞体外扩增结果差异的主要因素  相似文献   

9.
目的探讨CD4+细胞计数和Th1/Th2细胞因子与HIV/AIDS病程进展的相关性。方法利用流式细胞术及ELISA法检测15例HIV感染者和26例AIDS患者外周血CD4+细胞及Th1/Th2细胞因子水平。结果与正常组比较,AIDS组中CD4+细胞数与Th1细胞因子(IFN-γ)水平显著下降(P<0.01),而Th2细胞因子(IL-4)水平显著升高(P<0.01)。HIV组CD4+细胞数较正常组显著下降(P<0.01),Th1细胞因子(IFN-γ)与Th2细胞因子(IL-4)水平无显著性变化(P>0.05)。随着AIDS病情的加重,Th1细胞因子水平降低与CD4+细胞绝对数降低呈显著正相关(P<0.001),Th2细胞因子水平增高与CD4+细胞的绝对数降低呈显著负相关(P<0.01)。结论人体感染HIV后,CD4+细胞计数和Th1/Th2细胞因子水平在评估AIDS的疾病严重程度中可作为一个重要指标。  相似文献   

10.
目的 获得干细胞因子的cDNA以利于进一步对干细胞因子的重组表达进行研究。方法 利用RT-PCR技术,从中国妇女早期妊娠的蜕膜和绒毛膜组织总RNA中扩增得到660bp的干细胞因子cDNA,克隆入质粒pGEM-4z载体构建了pGSM重组质闰,将已测定序列的cDNA亚克隆入pET-11c质粒,得到干细胞因子的重组表达质粒pESM。结果 证实所 获序列是外显子6缺失的膜结合型干细胞因子cDNA,且其分子量与预期的一致。结论 成功克隆了膜结合型干细胞因子的cDNA。  相似文献   

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