降钙素基因相关肽对高血压性勃起功能障碍大鼠阴茎海绵体平滑肌细胞增殖及表型转化的影响

目的探讨降钙素基因相关肽（CGRP）对高血压性勃起功能障碍（ED）大鼠阴茎海绵体平滑肌细胞（CCSM）增殖及表型转化的影响。方法选取20只自发性高血压Wistar大鼠（SHR）及10只同系正常血压健康大鼠（WKY）,测量大鼠尾部动脉收缩压,通过颈部皮下注射阿朴吗啡后观察大鼠阴茎勃起情况,SHR大鼠中无阴茎勃起的归为高血压勃起功能障碍（HBP-ED）组,出现阴茎勃起的归为高血压（HBP）组,WKY大鼠归为对照组。取各组大鼠阴茎海绵体平滑肌组织行细胞原代培养。不同浓度（1、10和100nmol/L）CGRP作用于培养的细胞后,采用MTT法检测细胞增殖情况,采用实时荧光定量PCR法检测各组细胞碱性调宁蛋白（Cnn1）和骨桥蛋白（OPN）mRNA表达水平。结果不同浓度CGRP均可抑制高血压性ED大鼠CCSM的增殖,且抑制程度随CGRP浓度增加而加剧。当CGRP作用的终浓度为100nmol/L时,HBP组和HBP-ED组CnnlmRNA表达水平较组内0nmol/L浓度均上调（均P＜0.05）,OPNmRNA表达水平较组内0nmol/L浓度均下调（均P＜0.05）。结论CGRP可抑制高血压性ED大鼠CCSM的增殖,可使高血压性ED大鼠CCSM表型发生逆转化,即由合成型向收缩型转化。     

粉防己碱对糖尿病性勃起功能障碍大鼠勃起功能的影响

目的探讨粉防己碱(tetrandrine,Tet)对糖尿病性勃起功能障碍大鼠勃起功能的影响及机制。方法 24只糖尿病性勃起功能障碍(Erectile dysfunction,ED)大鼠随机分为Tet组(n=8)、罂粟碱组(n=8),另选取8只大鼠作为阴性对照组,Tet组和罂粟碱组分别在阴茎海绵体注射Tet和罂粟碱,阴性对照组注射等容量生理盐水,观察各组大鼠阴茎海绵体内压的改变以及环磷酸腺苷(cAMP)的变化,观察各组阴茎勃起次数和勃起率的改变。结果罂粟碱组和Tet组阴茎海绵体内压和cAMP含量明显高于阴性对照组(P<0.05),ED对照组、罂粟碱组和Tet组平均勃起次数和勃起率均明显低于阴性对照组(P<0.05或P<0.01)。结论 Tet行阴茎海绵体注射可有效松弛阴茎海绵体平滑肌,改善阴茎勃起功能,其机制可能与提高阴茎海绵体内cAMP含量有关。     

BKca下调RhoA/ROCK信号通路改善糖尿病大鼠阴茎勃起功能

目的：观察大电导钙激活钾通道（big conductance Ca2+-activated K+ channel,BKca）对糖尿病勃起功能障碍（diabetes mellitus-induced erectile dysfunction,DMED）大鼠阴茎海绵体平滑肌RhoA/ROCK信号通路的影响。方法：实验大鼠分为空白对照组8只,DMED组8只,NS1619组（DMED治疗组）7只,NS1619组大鼠采用特异性BKca激活剂（NS1619）阴茎海绵体注入2周。观察各组勃起行为,并电刺激检测阴茎海绵体内压（intracavernous pressure,ICP）/平均动脉压（mean arterial pressure,MAP）,取各组阴茎海绵体平滑肌检测肌张力,采用Western blot和定量PCR（real-time PCR）方法检测RhoA、ROCK1、ROCK2表达,反应RhoA/ROCK信号通路差异,同时检测MYPT-1表达反应肌球蛋白轻链磷酸酶（myosin light chain phosphatase,MLCP）磷酸化程度。结果：成功构建DMED大鼠模型,NS1619组大鼠与DMED组大鼠比较,勃起次数和ICP/MAP明显改善（P=0.025、0.024）,阴茎海绵体平滑肌舒缩顺应性提高（P=0.031、0.024）并且RhoA、ROCK2以及肌球蛋白磷酸酶靶向结合亚基（myosin phosphatase target subunit,MYPT）-1蛋白和mRNA表达水平下调（P=0.029、0.003、0.002）,但仍未达到正常对照组大鼠水平（P=0.018、0.040、0.003）,ROCK1表达无明显差异（P=0.533）。结论：DMED大鼠因RhoA/ROCK信号通路上调和MLCP磷酸化增强导致阴茎海绵体平滑肌舒缩顺应性降低以致勃起功能障碍发生,激活BKca可以通过下调RhoA/ROCK信号通路和抑制MLCP磷酸化,改善勃起功能。     

海绵体内注射shIGFBP-3对糖尿病性勃起功能障碍大鼠勃起功能的影响

目的:观察海绵体内注射shIGFBP-3后大鼠阴茎海绵体内压和海绵体平滑肌密度的变化,评价其对大鼠糖尿病性勃起功能障碍的治疗效果.方法:30只SD大鼠随机分为3组,每组10只.造模成功后,各组分别海绵体内注射pGPU6/GFP/Neo shIGFBP-3,pGPU6/GFP/Neo-randomer shRNA和生理盐水.注射3个月后测量大鼠海绵体内压评价大鼠勃起功能,Masson法检测大鼠阴茎海绵体平滑肌密度的变化,Western blot检测阴茎海绵体中IGFBP-3蛋白的表达.结果:shIGFBP-3组大鼠海绵体内压为(112±16) mmHg,高于randomer shRNA组(63±11) mmHg和对照组(59±12) mmHg,差异有统计学意义(P＜0.05).与randomer shRNA组和对照组相比,shIGFBP-3组大鼠阴茎海绵体平滑肌的密度明显上升,差异均有统计学意义(P＜0.05);Western blot显示shIGFBP-3组中IGFBP-3蛋白表达较其他两组明显减少.结论:shIGFBP 3基因注射可能提高糖尿病性勃起功能障碍大鼠的阴茎海绵体内压及改善阴茎海绵体平滑肌的密度.     

糖尿病性勃起功能障碍大鼠阴茎海绵体平滑肌细胞α-肌动蛋白的表达及意义

目的了解糖尿病性勃起功能障碍大鼠阴茎海绵体平滑肌细胞Ot一肌动蛋白（actin）的表达及意义。方法利用链脲佐菌素（STZ）制作糖尿病及糖尿病性勃起功能障碍模型,40只SPF级SD雄性大鼠,先按时间随机分为两组（每组20只）,分别是注射STZ后7周组和4周组,再按处理因素即给予大鼠腹腔注射STZ（60mg／kg）是否成模,分为对照组（未注射STZ,5只）、成糖尿病性勃起功能障碍模型组、成糖尿病性非勃起功能障碍组、未成模组。利用免疫组化SP染色法对不同处理组的标本进行α-肌动蛋白的研究,利用免疫组化SABC染色法对不同处理组的标本进行肌间线蛋白的研究,利用原位杂交技术检测不同组别骨桥蛋白（OPN）mRNA含量的改变。图像分析利用彩色图文分析系统,第三人进行图像分析及数据采集,测量随机每高倍镜视野下累积光密度（IOD）,以IOD的值反映组织切片中相应阳性物质的表达程度。结果糖尿病性勃起功能障碍组IOD均小于对照组、糖尿病非勃起功能障碍组及未成模组（均P〈0．05）,糖尿病非勃起功能障碍组的IOD小于对照组和未成模组（P〈0．05）,不同时间点间的IOD不存在显著性差异（F＝3．801,P＝0．62）,交互效应不显著（F＝1．549,P=0．225）。免疫组化染色不同时间点间的IOD不存在显著性差异（F=0．052,P=0．821）,各处理组间的IOD不存在显著性差异（F=0．045,P=0．987）,交互效应不显著（F=0．572,P=0．639）。OPN mRNA原位杂交染色不同时间点间的IOD不存在显著性差异（F=1．288,P=0．266）,交互效应不显著（F=1．819,P=0．168）,糖尿病性勃起功能障碍组的IOD均大于其余三组（P均〈0．001）。糖尿病非勃起功能障碍组的IOD大于对照组和未成模组（P均〈0．001）。对照组的IOD与未成模组未见显著差异（P=0．873）。结论糖尿病可以引起阴茎海绵体平滑肌的表型转化;阴茎海绵体平滑肌表型转化可以导致勃起功能障碍。     

小电导型钙激活钾通道在自发性高血压大鼠阴茎海绵体中的表达

目的:探讨高血压对小电导型钙激活钾通道(SKCa)在大鼠阴茎海绵体中表达的影响及意义?方法:选用同龄雄性自发性高血压大鼠(SHR)及同系正常血压大鼠(WKY)各8只,10%利多卡因麻醉后连续检测海绵体内压(ICP)及平均动脉压(MAP),并用5 V电刺激海绵体神经(CN)记录ICP/MAP值变化?运用Western blot 和逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)技术检测阴茎海绵体组织中SKCa蛋白和mRNA表达?结果:5 V电刺激后SHR组ICP/MAP值显著低于WKY组(0.31 ± 0.04 vs 0.76 ± 0.06),SKCa蛋白和mRNA的表达在SHR组(0.18 ± 0.01?0.39 ± 0.01)较WKY组(0.49 ± 0.02?0.81 ± 0.08)明显降低,差异具有统计学意义(P < 0.05)?结论:高血压可以降低大鼠勃起功能,这可能与自发性高血压大鼠阴茎海绵体组织中SKCa表达下降密切相关?     

糖尿病大鼠阴茎海绵体组织中核因子κB表达的研究

目的:观察糖尿病雄性SD大鼠阴茎海绵体组织中核因子-κB(NF-κB)活性的变化以及分布,探讨糖尿病性勃起功能障碍(ED)发病机制.方法:将成年雄性SD大鼠40只分为3组:A组为正常对照组(10只),B组为糖尿病4周组(14只),C组为糖尿病12周组(16只),采用腹腔注射STZ法制作糖尿病模型.B组大鼠于4周后,A组、C组大鼠于12周后通过注射阿朴吗啡后评价勃起功能,并取阴茎海绵体组织免疫组化EnVision法分析NF-κB的分布与表达,同时采用电泳迁移率变动分析法(EMSA)进行NF-κB活性检测.结果:B组、C组大鼠勃起功能水平较A组显著降低(P＜0.05),其海绵体组织中NF-κB活性显著高于A组(P＜0.05),且NF-κB表达随病程延长呈现逐渐增强趋势;糖尿病性大鼠阴茎海绵体组织中NF-κB主要分布在内皮细胞中,平滑肌细胞和其他细胞中分布较少.结论:糖尿病大鼠阴茎海绵体组织中NF-κB活性及分布与正常相比有明显差异,且与糖尿病病变程度有密切关系,提示NF-κB在糖尿病性ED发病中可能起重要作用.     

动脉性阴茎勃起功能障碍大鼠模型的建立及发生机制

目的：建立动脉性阴茎勃起功能障碍（ED）动物模型,并探讨其发生机制。方法：选取雄性Wistar大鼠30只,通过结扎大鼠双侧髂内动脉设立实验组(n=15),采用假手术设立对照组(n=15)。饲养4 周后,对2组大鼠行注射阿朴吗啡(APO)实验和电刺激海绵体神经 (ICP) 实验,评价其勃起功能;利用电镜观察2组大鼠阴茎海绵体平滑肌细胞的超微结构;采用免疫组织化学方法检测2组大鼠阴茎组织中一氧化氮合成酶（NOS）的表达。结果：在APO实验中实验组大鼠的勃起次数明显少于对照组(P<0.01);大鼠打哈欠次数两组之间无变化（P>0.05）;在ICP实验中实验组ICP增幅明显低于对照组(P<0.01);电镜显示实验组大鼠阴茎海绵体平滑肌细胞超微结构发生基底膜增厚、细胞膜平整、空泡增多、核固缩和染色质积聚改变;免疫组织化学结果显示实验组阴茎组织中NOS染色弱于对照组。结论：采用结扎雄性大鼠双侧髂内动脉方法建立ED 动物模型较为简便、可行且可靠;动脉性ED的发生与阴茎组织细胞超微结构改变和NOS低表达有关。     

高脂血症大鼠阴茎海绵体中NF-kB/ICAM-1表达与勃起功能障碍相关性研究

目的通过实验探讨高脂血症大鼠阴茎海绵体中NF-kB(核转录因子)与ICAM-1(Intercellular Adhesion Molecule-1)表达与勃起功能障碍相关性,进一步完善高脂血症性勃起功能障碍理论依据和临床诊疗。方法实验用雄性30只WISTAR大鼠,按随机分组法分三组,其中A组10只大鼠给予正常饮食为正常对照组,其余20只为HLP(高脂血症)模型组,分别是B组高脂血症非干预组,C组为PDTC(吡咯烷二硫代氨基甲酸酯)干预组。造模成功后首先对所有大鼠进行阿扑吗啡(APO)实验,观察各组大鼠阴茎勃起情况,后将大鼠麻醉解剖,测定阴茎海绵体内压(ICP),比较各组大鼠ICP。双抗体夹心ELISA法测定阴茎组织中ICAM-1的含量,Western Blot法测定阴茎组织中NF-kB含量并进行统计学处理。结果与正常A组比较,B、C组大鼠血脂明显升高,ICP、阴茎勃起次数减少,阴茎海绵体组织中NF-kB、ICAM-1含量均增高,经干预后C组与B组相比,NF-kB、ICAM-1的含量有显著性降低(P0.05)有差异性,具有统计学意义(P0.05)。结论高脂血症可导致大鼠勃起功能障碍,且阴茎海绵体中NF-kB、ICAM-1表达上调,并与勃起功能障碍程度呈正相关。     

糖尿病大鼠阴茎勃起功能的变化及胰岛素的治疗作用

目的:探讨糖尿病对大鼠阴茎勃起功能的影响,胰岛素是否能提高糖尿病大鼠阴茎勃起功能。方法:应用雄性SD大鼠腹腔内注射链脲佐菌素()制造糖尿病动物模型,用胰岛素对糖尿病大鼠进行干预治疗周,再通过观察各组大鼠注STZ8射阿朴吗啡()后的阴茎勃起情况来评价其勃起功能。APO结果:糖尿病组(组)大鼠阴茎勃起率、阴茎勃起次数较对照D组(组)明显降低(CP),用胰岛素治疗组(组)上述指标明显高于组(<0.01DMDIDP),较组低(<0.01CP),阴茎<0.01勃起功能与HbA1呈显著负相关。C结论:糖尿病严重损害阴茎勃起功能,胰岛素治疗可提高糖尿病大鼠阴茎勃起功能。     

糖尿病性阴茎勃起功能障碍动物模型的建立

目的：探讨糖尿病性阴茎勃起功能障碍动物模型的建立方法。方法：应用雄性SD大鼠腹腔内注射链脲佐菌素（STZ）制造糖尿病动物模型。饲养8周，16周，再通过观察各组大鼠注射阿朴吗啡（APO）后的阴茎勃起情况来评价其勃起功能。结果：与C组（对照组）相比，D组（糖尿病组）阴茎勃起次数明显降低，C组与STZ组（注射STZ后不成模组）各病程大鼠的阴茎勃起率为100%，且两组的阴茎勃起次数无显性差异。结论：阿朴吗啡诱发大鼠阴茎勃起实验可用于评价糖尿病大鼠的勃起功能。     

老年大鼠勃起功能及阴茎组织中nNOS神经纤维的改变

目的　研究老年大鼠勃起功能及阴茎海绵体组织中神经型一氧化氮合酶 (nNOS)神经纤维数量的改变。方法　 16只雄性SD大鼠按不同月龄分为年轻组 ( 3个月龄 ,8只 )和老年组 ( 18个月龄 ,8只 ) ,颈部皮下注射阿朴吗啡评价其勃起功能 ,并采用免疫组化SP法检测大鼠阴茎组织中nNOS神经纤维的数量。结果　与年轻组相比 ,老年组大鼠勃起次数及勃起率明显减少 ,差异有显著性意义 (P <0 .0 5 ) ;老年组大鼠阴茎海绵体组织中nNOS神经纤维的数量明显减少 ,差异有极显著性意义 (P <0 .0 1)。结论　老年大鼠的勃起功能明显下降 ,其发病机制可能与阴茎海绵体组织中nNOS神经纤维的数量减少有关     

中老年男性高血压患者勃起功能障碍相关因素分析

目的探讨中老年男性高血压患者勃起功能障碍(ED)的相关因素。方法选择257例40~70岁男性原发性高血压患者,记录其年龄、高血压病程、血压、有无靶器官损伤、体质量指数和腰围等情况,采用国际勃起功能指数-5评估勃起功能,抑郁自评量表(SDS)评估抑郁状态及严重程度,单因素和多因素Logistic回归分析ED与相关因素的关系。结果 257例原发性高血压患者中ED 188例(73.15%),ED患者SDS评分(47.49±10.74)显著高于国内常模(41.88±10.57)(P<0.01)。Logistic回归分析显示:中年男性(40~59岁)高血压患者病程、脉压、靶器官损伤、抑郁程度与ED的关联有统计学意义(P<0.05);老年男性(60~70岁)高血压患者病程、脉压与ED的关联有统计学意义(P=0.00)。结论高血压病程长、脉压大且伴有靶器官损伤和抑郁的中老年男性需考虑ED的可能性。     

艾灸对DM性ED大鼠阴茎勃起功能及AGEs影响的研究

目的 研究艾灸对糖尿病(DM)性阴茎勃起功能障碍(ED)的作用及其对阴茎晚期糖基化终产物(AGEs)的影响.方法 以链脲佐菌素(STZ)诱导DM大鼠模型,再以阿朴吗啡(APO)阴茎勃起实验筛选DM性ED大鼠模型,随机分为模型组、艾灸组,另设一正常对照组.艾灸组取肾俞穴、三阴交穴,以麦粒灸施治,观察艾灸对DM性ED大鼠阴茎勃起、血糖、阴茎晚期糖基化终产物(AGEs)的影响.结果 艾灸对DM性ED大鼠血糖有一定的改善作用;能较明显改善其阴茎勃起功能;能改善阴茎中AGEs水平.结论 艾灸对DM性ED大鼠阴茎勃起功能有一定作用,这种作用与艾灸改善血糖及阴茎AGEs水平有一定相关性.     

连续与间断西地那非干预对糖尿病大鼠阴茎海绵体影响的实验研究

目的观察并比较连续及间断西地那非（SDF）干预对糖尿病大鼠阴茎勃起功能及组织病变影响的异同。方法雄性SD大鼠70只,60只腹腔注射STZ诱发糖尿病,10只注射生理盐水作正常对照。成功诱发糖尿病大鼠53只,分为糖尿病组（DM组,25只）、SDF连续治疗组（SDL组,14只）,SDF间断治疗组（SDS组,14只）。SDL组大鼠给予SDF 2mg·（kg·d）^-1灌胃,连续给药12周,SDS组大鼠在阿朴吗啡（APO）诱导阴茎勃起实验前给予SDF 20mg·（kg·d）^-1灌胃,连续给药3d。分别在糖尿病造模成功后的第4、8、12周进行APO诱导阴茎勃起试验,12周时光镜、透射电镜下观察各组大鼠阴茎组织病变情况。结果 DM组阴茎勃起功能随病程延长进行性下降,与正常对照组相比勃起率及勃起次数差异均有统计学意义（P〈0.05或P〈0.01）。SDL组及SDS组大鼠阴茎勃起功能变化趋势同DM组,但与DM组相比,4周、8周时SDL组及SDS组各期勃起次数及勃起率均有不同程度改善;4周时SDL组及SDS组勃起次数均高于DM组（SDL组P〈0.05,SDS组P〈0.01）;8周时仅SDS组勃起次数高于DM组（P〈0.01）。SDS组与SDL组相比各期阴茎勃起指标差异无统计学意义（P〉0.05）。DM组阴茎组织光镜、电镜下病理损坏明显,与之相比SDL组损伤程度更为严重,SDS组较DM组无明显变化。结论连续及间断SDF干预对早期糖尿病大鼠勃起功能均有显著改善作用,但随病程延长此作用明显下降,且连续SDF干预的改善作用消减更为明显。间断SDF干预对糖尿病大鼠阴茎组织病理改变无明显影响,而长期连续SDF干预则加重糖尿病大鼠阴茎海绵体病理损害程度。     

维药伊木萨克片对大鼠性功能与阴茎组织中一氧化氮合酶活性的影响

目的:探讨维药伊木萨克片对雄性大鼠阴茎勃起功能的影响及其机制。方法:取具有正常性功能SD雄性大鼠20只,随机分为正常对照组(n=10)和伊木萨克组(n=10),用等量溶剂与伊木萨克片(250mg·kg-1.d-1)分别对2组大鼠连续干预6周后,进行阿朴吗啡(APO)阴茎勃起实验和交配实验,并检测阴茎海绵体窦压(ICP);用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测阴茎组织中的一氧化氮合酶(NOS)活性。结果:(1)与正常对照组比较,伊木萨克组阴茎勃起所需时间显著缩短(P<0.01),插入次数明显增加(P<0.01),且基础ICP值与电刺激诱导ICP值均显著升高(P<0.05);(2)NOS活性在伊木萨克组显著高于正常对照组(P<0.01)。结论:维药伊木萨克片能够显著提高正常大鼠的阴茎勃起功能,其机制与提高NOS活性有关。     

粉防己碱治疗糖尿病性勃起功能障碍的研究

目的研究粉防己碱治疗糖尿病性勃起功能障碍（ED）的效果。方法选择月龄、体重以及身体其它的各项指标均相同的45只健康雄性大鼠作为研究对象,随机分为糖尿病组、正常组以及治疗组,对糖尿病组以及治疗组进行建模处理,对正常组进行常规喂养,对三组大鼠的性勃起功能进行比较。结果糖尿病ED大鼠组阴茎海绵体MaxICP/MAP明显低于正常大鼠组（P〈0.05）;治疗组阴茎海绵体MaxICP/MAP明显高于糖尿病组（P〈0.05）。结论利用粉防己碱来对糖尿病性勃起功能障碍进行治疗时,主要是通过对钙通道进行阻滞,来确保阴茎的勃起功能正常,且疗效相对较好,可以临床推广。     

雄激素补充对老龄大鼠勃起功能及阴茎海绵体nNOS表达的影响

目的 探讨雄激素补充对老龄大鼠勃起功能及阴茎海绵体神经型一氧化氮合酶(nNOS)表达的影响.方法 20只18个月龄SD大鼠随机均分成A、B两组,10只2个月龄SD大鼠为C组.A组给予十一酸睾酮[20 mg/(kg·d)]灌胃,B、C组给予相同剂量的生理盐水灌胃,均8周.于8周末观察阿朴吗啡(APO)皮下注射与大鼠海绵体...