PCR扩增法检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的mecA基因

[摘要] 目的 应用mecA基因PCR扩增法检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)。方法 对临床分离的84株金黄色葡萄球菌,应用mecA基因PCR扩增法鉴定MRSA,并与苯唑西林纸片扩散法和头孢西丁纸片扩散法进行比较。结果 84株金黄色葡萄球菌中, 41株金黄色葡萄球菌的mecA基因扩增呈阳性,其中有1株表现为对苯唑西林敏感;苯唑西林纸片扩散法检出42株阳性,其中有2株mecA基因呈阴性. 头孢西丁纸片扩散法与PCR扩增法的试验结果完全符合。结论 mecA基因PCR扩增法可以准确、快速判定MRSA。     

mecA、femA基因PCR联合扩增法检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌

目的 探讨mecA、femA基因PCR联合扩增快速检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的敏感性及特异性。方法 用纸片扩散法及mecA、femA基因PCR联合扩增检测178株葡萄球菌中的MRSA，并与琼脂稀释法的结果比较。结果 纸片扩散法筛检MRSA(耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌，MRCNS)的敏感性、特异性分别为94．4％(89．5％)、92．4％(73．7％)。在金黄色葡萄球菌中若以mecA基因阳性为判定MRSA的指标，则敏感性、特异性分别为91．7％、95.5％。在178株葡萄球菌中若以mecA、femA基因阳性作为判定MRSA的指标，特异性提高到97．9％．结论 PCR mecA、femA基因联合扩增既可用于筛检MRSA，又可免去常规生化鉴定，具快速、特异性强的优点。     

耐甲氧西林金黄色葡萄球菌基因多态性分型研究

目的研究耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）的基因多态性分型特征，为控制感染提供分子流行病学依据。方法利用一条10bp随机引物，建立随机引物多态性（RAPD）分析方法，并利用这一方法对44株MRSA进行基因分型的研究。结果44株MRSA中有30株产生RAPD指纹图谱，经电泳得到2．8条片段，可分为5个型，其中Ⅲ型菌株占50％。结论通过RAPD分型研究，可了解MRSA的基因型流行特征，为控制感染提供分子流行病学依据。     

耐甲氧西林金黄色葡萄球菌耐药性分析

目的了解耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的耐药情况,为临床合理用药提供参考。方法收集2005年1月至2007年12月临床分离的460株金黄色葡萄球菌,经培养鉴定,采用纸片扩散法(K-B法)测定10种非β-内酰胺类抗菌药物的耐药情况。结果460株金黄色葡萄球菌中,检出耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)242株,占52.61%,甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌(MSSA)218株,占47.39%;2005~2007年MRSA对复方磺胺的耐药率相对稳定在71.4%~77.5%之间,对红霉素、克林霉素、庆大霉素、左旋氧氟沙星、四环素和利福平的耐药率基本处于上升状态。MRSA对红霉素、克林霉素、庆大霉素、左旋氧氟沙星、四环素和利福平的耐药率明显高于MSSA相应的耐药率(P<0.001)。MRSA对呋喃妥因耐药率明显高于MSSA(P<0.001),对复方磺胺敏感率耐药率二者差异无统计学意义(P>0.05)。药敏结果显示,MRSA和MSSA菌株均对万古霉素和替考拉宁敏感。结论MRSA具有多重耐药特征,万古霉素和替考拉宁可作为治疗MRSA感染的首选药物,呋喃妥因和复方磺胺可作为次选药物。     

耐甲氧西林金黄色葡萄球菌SCCmec分型研究

目的检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌SCCmec基因分型,初步了解MRSA分子流行病学特征,从而进一步指导临床感染MRSA的治疗,更好地控制MRSA引起的感染,并减少耐药株的出现。方法以MRSA菌株65株为研究对象,使用多重PCR扩增技术检测SCCmec基因分型,PCR产物进行琼脂糖电泳凝胶检测,阳性株进行基因测序,与目的基因进行比对。结果65株MRSA的SCCmec基因分型均为Ⅲ型。结论我院耐甲氧西林金黄色葡萄球茵SCCmec基因分型,均为SCCmec-Ⅲ型,尚未发现CA-MRSA菌株。     

耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的检测及耐药性分析

目的 分析耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的临床感染现状及耐药性.方法 采用美国MicroScan全自动细菌分析仪鉴定细菌种类,并用纸片扩散法进行药敏试验.结论 2006～2007年共分离出金黄色葡萄球菌270株,其中,耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)174株,检出率为64.4%.所有的分离株对万古霉素都敏感;MRSA对 红霉素、克林霉素、庆大霉素、复方磺胺、利福平和左旋氧氟沙星的耐药率分别为94.8%、71.8%、67.8%、85.1%、15.5%和48.9%.结论MRSA的分离率显著增高,耐药性严重,临床细菌室应高度重视MRSA的检测.     

耐甲氧西林金黄色葡萄球菌spa分型研究

[目的]分析耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的分子流行病学特征.[方法]收集自2020年10月至2022年3月间分离的MRSA,采用PCR方法进行spa基因扩增,对扩增后的产物行琼脂糖凝胶电泳及成像后进行序列测定.将序列测定结果与数据库进行比对得出分型结果,并结合临床资料和药物敏感性试验结果进行分析.[结果]所分离的63株MRSA中共检测出25种spa型别,其中t2460型最为常见,占36.5%;其次为t005型,占14.3%. t2460-MRSA对甲氧苄啶-磺胺甲唑敏感,t005-MRSA对甲氧苄啶-磺胺甲唑耐药(P<0.001);t2460-MRSA对四环素的耐药率为91.3%,明显高于t005-MRSA的11.1%(P<0.001).[结论]t 2460是MRSA的优势型别,t2460-MRSA与t005-MRSA对甲氧苄啶-磺胺甲恶唑和四环素的耐药率间有明显差异.     

耐甲氧西林金黄色葡萄球菌与慢性鼻窦炎

随着广谱抗生素广泛应用于临床，耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）已成为院内感染的重要致病菌，由其感染导致慢性鼻窦炎已不可忽视。因此，对其生物学特性、耐药机制以及导致慢性鼻窦炎的机制进行研究，制订出准确、快速检测方法和有效的治疗方案非常必要，作者就近年来这些方面研究进展作一概述。     

斑点杂交法检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌耐药基因mecA的临床研究

目的 探讨斑点杂交技术检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌耐药基因mecA的应用价值.方法 设计mecA基因特异性引物,用地高辛标记;制备mecA基因探针,运用斑点杂交方法、聚合酶链反应（PCR）法检测mecA基因.结果 100例临床分离的金黄色葡萄球菌中共检出mecA基因阳性32例,阳性率为32％; PCR方法检出阳性36例,阳性率为36％.结论 通过斑点杂交技术可以方便、特异地检测出耐甲氧西林金黄色葡萄球菌mecA基因.     

双重实时荧光PCR快速检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌方法的建立

目的:建立一种能快速检测金黄色葡萄球菌,同时能快速鉴别是否具有耐甲氧西林基因的双重实时荧光PCR方法.方法:以金黄色葡萄球菌特异NUC基因的保守区为靶区域设计特异引物和TaqMan荧光探针,同时针对耐甲氧西林特异MecA基因设计另一对引物和探针;2条探针的5′端标记不同荧光报告基团(FAM和HEX),3′端标记荧光淬灭...     

Heterogeneous vancomycin-intermediate among methicillin resistant Staphylococcus aureus

Background

Hetero-resistance vancomycin intermediate Staphylococcus aureus (hVISA) is phenotype, which on in-vitro susceptibility test is vancomycin susceptible (VSSA) but has a minority population of vancomycin intermediate (VISA). hVISA is responsible for vancomycin treatment failure. Population Analysis Profile- Area under Curve (PAP-AUC) is a test for detection of hVISA; however, this test is unsuitable for clinical microbiology laboratory. Tests, such as Brain Heart Infusion Agar with 6 μg/ml vancomycin (BHIA6V), E test and Macromethod E Test (MET) are available; however reported to have variable results.

Methods

58 clinical isolates of Methicillin resistant S aureus (MRSA) having MIC of vancomycin more than 1 μg/ml by E test and agar dilution were analyzed by PAP-AUC, BHIA6V and MET.

Result

The prevalence of hVISA was 6.9%. hVISA isolates were having vancomycin E test MIC >2 μg/ml. Sensitivity of BHIA6V, MET and E test with MIC >2 μg/ml were 0.75, 0.67 and 1.0 respectively; however, positive predictive values (PPV) were 0.43, 0.4 and 0.27 respectively with PAP-AUC. PAP-AUC ratio correlated with MIC by E test and MET.

Conclusions

There is need for screening MRSA isolates showing in-vitro vancomycin susceptibility ≤2 μg/ml by agar dilution method for detection of hVISA. PAP-AUC test is unsuitable for routine laboratory testing. BHIA6V, MET and E test can be used for screening, however have low PPV.     

应用荧光定量聚合酶链反应技术快速筛查重症监护室耐甲氧西林金黄色葡萄球菌定植者

目的建立耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(methicillin resistant Staphylococcus aureus,MRSA)荧光定量PCR快速检测方法,筛查重症监护室(intensive care unit,ICU)MRSA定植者。方法采集患者感染部位标本或鼻咽拭子标本,快速提取总DNA后应用荧光定量PCR方法检测标本中nuc和mecA基因,对于双阳性结果报MRSA阳性,采取早期干预措施。结果建立的荧光定量PCR方法灵敏度高(4 CFU/反应)、快速、准确率100%。采取筛查和干预降低了ICU的MRSA感染率。结论应用荧光定量PCR对MRSA早期筛查及干预,有助于早发现、早诊断、早隔离、早治疗,可有效防止或终止MRSA导致的医院感染暴发流行。