HMGB1在支气管哮喘和慢性阻塞性肺疾病患者中的表达及其意义

目的 探讨支气管哮喘及慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者诱导痰中高迁移率组蛋白B1( HMGB1)的表达及其与气道炎症的关系.方法 按标准纳入慢性持续期哮喘患者57例,稳定期的COPD患者30例,对照组(健康体检者)20例;完成哮喘控制问卷后,分别进行肺功能检测和诱导痰检查,记录第1秒用力呼气容积( FEV1)占预计值的百分比(FEV1％预计值),行诱导痰中性粒细胞分类计数,酶联免疫吸附法检测诱导痰HMGB1水平.结果 哮喘组、COPD组诱导痰HMGB1水平分别为(291±55)、(511±39) ng/L,显著高于对照组的(61±5)ng/L(均P＜0.01);在107例研究对象中,HMGB1的表达与FEV1％预计值呈反比;COPD组诱导痰HMGB1水平显著高于哮喘组(P＜0.01).嗜酸粒细胞哮喘组与非嗜酸粒细胞哮喘组HMGB1水平分别为(290 +55)、(292±54) ng/L,差异无统计学意义(P＞0.05).Ⅱ、Ⅲ级COPD患者HMGB1水平分别为(526±29)、(541±29 )ng/L,显著高于Ⅰ级的(471±18)ng/L(均P＜0.01).轻、中、重度持续期哮喘患者诱导痰中性粒细胞比例分别为(27±2)％、(36±4)％、(49±4)％,HMGB1水平分别为(227±16)、(312±14)、(347±11) ng/L,差异均有统计学意义(均P＜0.01).哮喘及COPD患者诱导痰中HMGB1与中性粒细胞比例均呈正相关(r值分别为0.880和0.132,均P＜0.01).年龄、性别、嗜酸粒细胞比例均不是影响HMGB1表达的显著性因素,诱导痰中性粒细胞比例和FEV1％预计值与HMGB1表达水平关系显著(t=-3.059,P =0.005).结论 HMGB1在支气管哮喘及COPD患者诱导痰中呈高表达,对气道炎症有增强作用.     

缺氧诱导因子-1α在支气管哮喘大鼠支气管肺组织中的表达

目的探讨缺氧诱导因子-1α在支气管哮喘大鼠模型支气管肺组织中的表达及意义。方法采用卵蛋白致敏诱导建立支气管哮喘大鼠模型,采用逆转录半定量PCR及免疫印迹技术检测正常对照组、阴性对照组、哮喘组和地塞米松组支气管肺组织中缺氧诱导因子-1α基因和蛋白表达的水平。结果与正常对照组比较,哮喘组缺氧诱导因子-1α基因和蛋白表达水平均显著增加,差异有显著性(P<0.05,P<0.05);与正常对照组比较,阴性对照组缺氧诱导因子-1α基因和蛋白表达水平没有明显改变,差异均无显著性(P>0.05,P>0.05);与哮喘组比较,地塞米松组中的缺氧诱导因子-1α基因和蛋白表达水平均显著性降低,差异有显著性(P<0.05,P<0.05),但与正常对照组比较,差异均无显著性(P>0.05,P>0.05)。结论缺氧诱导因子-1α可能参与支气管哮喘的发病机制且其表达的水平受地塞米松调节。     

芪仙汤对支气管哮喘小鼠肺组织FIZZ1 mRNA及蛋白表达的影响

目的:观察芪仙汤对哮喘小鼠肺组织中FIZZ1基因及蛋白表达水平的影响,探讨芪仙汤治疗哮喘的作用机制。方法:选用30只健康雌性BALB/c小鼠,采用随机数字表分为正常对照组(对照组)、支气管哮喘模型组(模型组)、芪仙汤治疗组(治疗组)。除对照组外均采用卵白蛋白(OVA)建立支气管哮喘小鼠模型。各组分别相应干预灌胃2周。从小鼠的一般情况、肺组织病理形态学(HE染色病理切片)指标评价支气管哮喘小鼠模型;采用RT-PCR检测肺组织FIZZ1基因mRNA表达水平,Western blot和免疫组化法检测肺组织FIZZ1蛋白表达水平。结果:HE染色结果显示,模型组小鼠肺组织较正常组嗜酸性粒细胞等炎症细胞浸润明显,气道壁及支气管平滑肌增厚明显;治疗组哮喘病理改变明显改善。RT-PCR、Western blotting、免疫组化结果均显示模型组FIZZ1表达水平显著高于对照组,治疗组小鼠肺组织中FIZZ1表达水平明显低于模型组,差异均有统计学意义(P0.05,P0.01)。结论:芪仙汤可能是通过下调小鼠肺组织FIZZ1表达起到治疗支气管哮喘的作用。     

哮喘大鼠模型支气管肺组织骨桥蛋白表达的变化及其调控机制的初探

目的 研究哮喘大鼠模型支气管肺组织骨桥蛋白(OPN)表达变化及其调控机制;探讨地塞米松(DXM)对哮喘大鼠模型支气管肺OPN表达的影响及其机制.方法 SD大鼠24只,随机分为正常对照组(A组)、哮喘模型组(B组)、DXM治疗组(C组).以卵蛋白(OVA)致敏和激发建立大鼠支气管哮喘模型,肺组织切片用于HE染色以观察支气管组织学变化;用免疫组织化学和免疫印迹法分析三组大鼠支气管肺组织中OPN的表达及ERK、p38的磷酸化水平.结果 B组大鼠支气管肺组织OPN表达较A组增加,DXM对其表达有明显抑制作用(P<0.05);B组支气管肺组织ERK磷酸化水平较A组明显增加,DXM对其磷酸化有明显抑制作用(P<0.05);而支气管肺组织p38磷酸化水平在B组与A组之间无明显变化,但C组p38磷酸化水平明显下降.结论 DXM对OPN表达的增加有抑制作用,其可能的机制是通过ERK信号通路影响OPN的表达.     

哮喘小鼠肺组织水通道蛋白5的表达及地塞米松对其的调节

目的:探讨支气管哮喘(哮喘)小鼠肺组织中水通道蛋白5(aquaporin 5,AQP5)和黏蛋白5AC(MUC5AC)的变化及地塞米松对其的调节作用.方法:雌性C57BL/6小鼠48只,随机分为对照组、哮喘组和地塞米松干预组,每组16只.测定各组小鼠肺组织病理变化及湿/干质量比值,应用实时定量PCR法测定其肺组织中AQP5和MUC5AC mRNA的表达,应用免疫组化法测定各组AQP5蛋白在肺组织中的分布,免疫印违法测定AQP5蛋白在肺组织中的表达.ELISA法测定各组支气管肺泡灌洗液中MUCSAC的含量.结果:哮喘组小鼠肺组织中AQP5表达较对照组明显降低[mRNA减少(42.5±3.6)%,蛋白质减少(64.3±8.2)%].而MUC5AC表达显著升高[mRNA升高(93.3±8.1)%;蛋白质水平升高(98.3±7.2)%].地塞米松分别负调节其表达(与模型组比较P＜0.05).结论:哮喘小鼠肺组织中AQP5表达明显降低可能与气道MUC5AC表达的升高有关,地塞米松对其显著负调节从而改善气道黏液高分泌、炎性浸润和肺水渗出的病理生理过程.     

支气管哮喘BALB/c小鼠肺组织及肺T细胞中Notchl的表达

目的研究支气管哮喘模型小鼠肺组织及其T细胞中Notch1基因的表达,探讨其与支气管哮喘发病的关系。方法卵清蛋白腹腔注射及雾化吸入建立BALB/c小鼠支气管哮喘模型(n=10)。于建模后24 h麻醉下放血处死动物,右肺组织分离T细胞并进行纯度鉴定,运用免疫组化染色观察左肺组织Notch1蛋白表达;半定量RT-PCR法检测左肺组织和右肺分离获得T细胞中Notch1 mRNA的表达。以腹腔注射和雾化吸入生理盐水的BALB/c小鼠作为对照(n=10)。结果免疫组化染色发现,哮喘模型组小鼠肺组织Notch1阳性染色程度明显强于对照组。半定量RT-PCR分析显示,哮喘模型组和对照组小鼠Notch1mRNA表达在肺组织分别为0.83±0.60和0.33±0.31,在肺T细胞中分别为0.36±0.20和0.11±0.21;组间比较均有显著差异(P<0.05)。结论Notch1在支气管哮喘发病环节中表现为促进作用,为研究支气管哮喘的发病机制提供了新途径。     

支气管哮喘BALB/c小鼠肺组织及肺T细胞中Notchl的表达

目的 研究支气管哮喘模型小鼠肺组织及其T细胞中Notchl基因的表达,探讨其与支气管哮喘发病的关系.方法 卵清蛋白腹腔注射及雾化吸入建立BALB/c小鼠支气管哮喘模型(n=10).于建模后24 h麻醉下放血处死动物,右肺组织分离T细胞并进行纯度鉴定,运用免疫组化染色观察左肺组织Notchl蛋白表达;半定量RT-PCR法检测左肺组织和右肺分离获得T细胞中Notchl mRNA的表达.以腹腔注射和雾化吸入生理盐水的BALB/c小鼠作为对照(n=10).结果 免疫组化染色发现,哮喘模型组小鼠肺组织Notchl阳性染色程度明显强于对照组.半定量RT-PCR分析显示,哮喘模型组和对照组小鼠Notchl mRNA表达在肺组织分别为0.83±0.60和0.33±0.31,在肺T细胞中分别为0.36±0.20和0.11±0.21;组间比较均有显著差异(P＜0.05).结论 Notchl在支气管哮喘发病环节中表现为促进作用,为研究支气管哮喘的发病机制提供了新途径.     

阿尔茨海默病小鼠Wnt信号通路相关蛋白表达水平及意义*

目的 分析阿尔茨海默病（AD）小鼠Wnt信号通路相关蛋白表达水平及意义。方法 96只C57小鼠随机分为实验组和对照组,每组48只。实验组为APP/PS1双转基因小鼠,分为1、3、5及12月龄4组（对应月龄处死）,每组12只;对照组为正常C57小鼠,也分为1、3、5及12月龄4组,每组12只。通过Morris水迷宫实验进行学习能力和记忆训练测试。处死小鼠获取脑组织海马标本,观察海马区病理变化。Western blotting检测Wnt信号通路相关蛋白β-连环蛋白（β-catenin）、糖原合成酶激酶-3β（GSK-3β）及海马区突触前蛋白（Synapsin1）、海马区突触后蛋白95（PSD-95）表达水平。结果 实验组1、3、5及12月龄小鼠逃避潜伏期、首次跨越原平台时间逐渐延长（P?<0.05）;且实验组均较对照组同月龄延长（P?<0.05）。实验组小鼠随着月龄增加,其细胞数量减少、体积缩小、间隙扩大现象越明显,颗粒细胞及锥体细胞破坏现象越严重,锥体细胞树突均变短。实验组1、3、5及12月龄小鼠β-catenin、GSK-3β蛋白表达水平依次降低,Synapsin1及PSD-95表达水平亦依次降低（P?<0.05）。实验组均较对照组同月龄小鼠β-catenin、GSK-3β、Synapsin1及PSD-95蛋白表达水平降低（P?<0.05）。结论 AD小鼠Wnt信号通路β-catenin、GSK-3β蛋白表达水平下降,可能与其海马区病理变化及突触前后蛋白表达水平下降相关,Wnt信号通路的失活可能加快AD病理过程。     

支气管哮喘小鼠肺组织SOCS-3 mRNA和Muc5ac蛋白的表达及其关系的研究

目的探讨支气管哮喘(以下简称哮喘)小鼠肺组织细胞因子信号抑制因子-3(SOCS-3)mRNA和粘蛋白基因Muc5ac蛋白的表达及其二者的相关性.方法制作小鼠哮喘模型,应用RT-PCR法测定哮喘组及对照组肺组织SOCS-3 mRNA的表达,应用免疫组织化学法测定两组气道粘蛋白基因Muc5ac蛋白的表达.结果小鼠哮喘组肺组织SOCS-3 mRNA的表达较正常组明显升高,两组分别为(0.9045±0.01444和(0.5010±0.0206),差异显著(P＜0.01);小鼠哮喘组气道粘蛋白基因Muc5ac蛋白的表达较对照组明显增高,两组分别为(0.1930±0.0047)和(0.1186±0.0061),差异显著(P＜0.01);哮喘组小鼠肺组织SOCS-3 mRNA与气道Muc5ac蛋白呈显著的直线正相关(p＜0.01).结论哮喘时肺组织SOCS-3 mRNA表达升高可能与气道Muc5ac蛋白的表达升高有关,从而促进了气道黏液过度分泌.     

择时服药治疗慢性支气管哮喘30例

自 1995年以来 ,笔者采用择时服药的方法治疗慢性支气管哮喘 30例 ,疗效显著 ,现介绍如下。1　临床资料选年龄 4 0岁以上 ,患病 2年以上 ,每年发病 3月以上的患者。其中男性 2 6例 ,女性 4例 ;年龄 5 2岁～ 78岁 ,平均 6 5岁 ;病程 5年～ 30年 ,平均 12年。2　治疗方法方药组在 :桃仁 10ｇ ,生、熟地黄各 30ｇ ,当归 2 0ｇ ,陈皮15ｇ ,制半夏 10ｇ ,茯苓 2 0ｇ ,甘草 15ｇ。服药方法与禁忌 :服药时选择秋季 ,病人无急性感染。服药时忌油腻、辛辣、甜食 ,少食盐 ,忌房事。服药 1周 ,每日 1剂 ,3次煎服。3　治疗结果服药后未再发作为治愈 ;服…     

阳和平喘颗粒干预支气管哮喘慢性持续期肺功能气道炎症的临床研究

目的：探讨阳和平喘颗粒干预气管哮喘慢性持续期肺功能气道炎症的临床研究。方法：60例患者随机分为联合组、中药组及西药组各20例。联合组给予阳和平喘颗粒加用舒利迭,中药组给予阳和平喘颗粒,西药组给予舒利迭治疗,3组疗程均为4 w。比较3组临床疗效及肺功能的变化。结果：3组肺功能指标各组较治疗前比较均有显著性差异（P〈0.01）;2 w后治疗前后比较,联合组FEV1%、FEV1/FVC、PEF指标较治疗前有显著改善（P〈0.05）,中药组、西药组FEV1/FVC、PEF指标较治疗前有改善（P〈0.05）。4 w后治疗前后比较,FEV1%、FEV1/FVC,MEF50%、MEF75%、PEF指标各组较治疗前比较均有显著性改善（P〈0.01）。结论：阳和平喘颗粒能够有效缓解慢性持续期哮喘患者的临床症状,能显著改善患者肺功能指标,减轻气道炎症,与舒利迭效果相近。     

CpG寡脱氧核苷酸在支气管哮喘免疫治疗中的潜在意义

支气管哮喘是由多种炎性细胞参与的呼吸道慢性炎性疾病,发病机制较为复杂,Th1/Th2比例失衡在支气管哮喘的发病中起着重要作用。寡脱氧核苷酸(CpG-ODN)作为非特异性免疫调节剂,可以使Th1表达上调,从而纠正Th1/Th2比例失衡。CpG-ODN不仅能够有效地抑制过敏性哮喘呼吸道炎症的发展,而且能够逆转这种已建立的炎症,因此,CpG-ODN可能成为治疗过敏性哮喘的一种新手段。     

慢性哮喘患者缓解期血清干扰素测定

采用微量病变细胞抑制法对51例慢性哮喘患者进行了血清干扰素水平测定。捡测发现慢性哮喘缓解组31例(60.8%)IFN≥1.0×10~3IU/L,20例(39.2%)<1.0×10~3IU/L明显低于正常人(2.230±0.447×10~3IU/L)。IFN水平与慢性哮喘病程和病毒等反复感染有一定关系,故IFN水平测定有可能作为观察慢性哮喘患者免疫调节功能的指标。     

支气管哮喘患者血浆内皮素测定及其临床意义

目的　评价支气管哮喘患者血浆内皮素水平及其临床意义。方法　测定 3 1例支气管哮喘患者急性发作期及其中 2 6例临床缓解期的血浆内皮素水平 ,同时测定急性发作期患者血氧分压变化情况。结果　支气管哮喘急性发作期血浆内皮素水平显著高于临床缓解期和正常对照组 (P <0 .0 1) ,血浆内皮素水平同血氧分压呈显著负相关 (r =— 0 .78,P <0 .0 1) ;临床缓解期血浆内皮素水平同正常对照组相比无显著差异 (P >0 .0 5 )。结论　支气管哮喘急性发作期血浆内皮素水平显著增高 ,其水平可以作为判断病情严重程度的一项有效指标。     

咳喘停贴剂穴位贴敷对慢性哮喘大鼠肺组织抑炎细胞因子的影响

目的 观察咳喘停贴剂穴位贴敷对慢性哮喘大鼠Th1下游抑炎细胞因子含量的影响.方法 将48只Wistar大鼠随机分成6组:正常组、模型组、布地奈德组、穴位假贴敷组、地塞米松组、穴位贴敷组,每组8只.用卵清蛋白致敏和激发的方法复制慢性过敏性哮喘大鼠模型.模型复制后各组给予相应的治疗,治疗14 d后观察各组大鼠支气管肺泡灌洗液(bronchial alveolar lavage fluid,BALF)中干扰素-γ(interferon-γ,IFN-γ)、白细胞介素-2(int erleukin-2,IL-2)和IL-12含量.结果 与正常组比较,模型组大鼠BALF中IFN-γ、IL-2、IL-12含量均明显降低(P＜0.05).与模型组比较,穴位假贴敷组BALF中IFN-γ、IL-2、IL-12含量无明显变化(P＞0.05);布地奈德组、地塞米松组、穴位贴敷组IFN-γ、IL-12含量明显升高(P＜0.05),IL-2含量呈升高趋势(P＞0.05),但3组之间IFN-γ、IL-2、IL-12含量比较,差异无统计学意义(P＞0.05).结论 咳喘停穴位贴敷治疗慢性哮喘大鼠的机制与调节呼吸道中抑炎细胞因子IFN-γ、IL-2、IL-12的分泌异常有关.     

脱敏汤治疗支气管哮喘慢性持续期疗效观察

目的:观察脱敏汤治疗肺脾肾亏虚证支气管哮喘慢性持续期的临床疗效。方法:将60例支气管哮喘慢性持续期患者随机分为观察组和对照组,每组30例。观察组采用脱敏汤治疗,对照组采用沙美特罗替卡松气雾剂吸入,治疗3个月。通过观察两组患者症状体征及肺功能的变化,评价脱敏汤治疗支气管哮喘慢性持续期的临床疗效。结果:观察组中医证候疗效总有效率优于对照组,差异有统计学意义(P0.05)。观察组和对照组组间比较,以及观察组和对照组组内比较,治疗后症状体征及肺功能改善明显,差异有统计学意义(P0.05)。结论:脱敏汤治疗肺脾肾亏虚证支气管哮喘慢性持续期疗效确切。     

支气管哮喘血浆内皮素水平及临床意义的研究

目的 :探讨支气管哮喘与内皮素 - 1 (ET - 1 )的关系 ;方法 :采用放射免疫法测定2 0例健康人和 36例支气管哮喘病人发作期与缓解期血浆ET - 1水平 ;结果 :轻度发作组发作期与缓解期相比无明显差异 (P >0 0 5 ) ;中度发作组与缓解期比明显升高 (P <0 0 5 ) ;重度发作期与缓解期比亦显著升高 (P <0 0 1 ) ;结论 :支气管哮喘发作期血浆ET - 1明显升高 ,且与病情程度相一致     

支气管哮喘与咳嗽变异性哮喘最大气道反应性的特点分析

目的研究对比支气管哮喘与咳嗽变异性哮喘之间最大气道反应性之间的差异性及其反应平台的分布情况。方法支气管哮喘组患者46例和咳嗽变异性哮喘组患者42例分别吸入较高浓度的乙酰甲胆碱作为支气管激发剂,当FEV1下降至激发前水平的50%或出现最大反应平台后终止实验,最终分析比较2组出现反应平台所占的比例及平台水平值。结果支气管哮喘组有16例患者出现反应平台所占的比例为34.8%,显著低于咳嗽变异性哮喘组24（57.1%）,反应平台的水平值支气管哮喘组显著高于咳嗽变异性哮喘组（P〈0.05）,但2组PC20无显著性差异。结论最大气道反应性可表明哮喘气道高的灵敏度与其临床表现和病情的严重程度有较大的相关性,且支气管哮喘的气道反应性显著高于咳嗽变异性哮喘。     

平喘方对哮喘模型小鼠pDC/cDC通路的干预作用研究

[目的]通过观察平喘方对支气管哮喘模型小鼠肺组织浆细胞样树突状细胞(plasmacytoid dendritic cell,pDC)/传统DC(conventional DC,cDC)通路各因子的影响,阐释平喘方治疗哮喘的机制及药物间的相互作用。[方法]将40只雄性BALB/c小鼠随机分为空白组、模型组、地米组和平喘方组,每组10只。采用10%鸡卵白蛋白(ovalbumin,OVA)致敏液腹腔注射致敏和5%OVA雾化吸入激发,建立BALB/c小鼠支气管哮喘模型。小鼠激发开始时按20mL/kg·d灌胃相应的药物,用药1周后处死小鼠,采集支气管肺泡灌洗液,以ELISA法检测支气管肺泡灌洗液中白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)、白细胞介素-17(interleukin-17,IL-17)、白细胞介素-23(interleukin-23,IL-23)及转化生长因子-β(transforming growth factor-β,TGF-β)的含量;分离小鼠肺组织,HE染色后镜下观察肺组织形态,Western blot检测肺组织中维甲酸相关孤儿受体(retinoid-related orphan nuclear receptor,RORγt)及叉头蛋白P3(forkhead box P3,FOXP3)的蛋白表达量;Real-time PCR测定肺组织中吲哚胺-2,3-二氧化酶(indoleamine-2,3-dioxygenase,IDO)、肿瘤坏死因子超家族4(tumor necrosis factor superfamily4,TNFSF4)的基因相对表达量;Masson染色检测肺组织胶原蛋白面积、气道平滑肌面积(airway smooth muscle area,WAm)、气道内壁面积(airway inner wall area,WAi)。[结果]与空白组比较,模型组支气管肺泡灌洗液中IL-6、IL-17、IL-23、TGF-β的含量以及肺组织中RORγt、TNFSF4表达均增高,FOXP3、IDO表达均降低,胶原蛋白面积、WAm、WAi均增加,差异有统计学意义(P＜0.05)。与模型组比较,地米组、平喘方组病理切片表现均有所改善,支气管肺泡灌洗液中IL-6、IL-17、IL-23、TGF-β的含量、肺组织中RORγt、TNFSF4表达均减低,FOXP3、IDO表达均增高,差异有统计学意义(P＜0.05);与地米组比较,平喘方组IL-17的含量、RORγt、TNFSF4、FOXP3、IDO的表达量及胶原蛋白面积、WAm、WAi差异无统计学意义(P＞0.05)。[结论]平喘方对pDC/cDC的干预可能是诱导气道免疫耐受的一个切入点,从而抑制T细胞表达失衡,改善气道炎症及气道重建。     

小青龙汤加减对支气管哮喘慢性持续期患者PEF的影响

目的 观察小青龙汤加减治疗支气管哮喘慢性持续期寒饮停肺证对患者肺功能呼气峰流速(PEF)值的影响.方法 将80例支气管哮喘慢性持续期患者随机分为治疗组和对照组各40例.2组均采用西药常规治疗,治疗组同时加服小青龙汤加减.两组疗程均为2周.观察两组治疗前后的PEF值变化.结果 治疗后两组患者的PEF值均有改善(P<0.01),但治疗组的改善优于对照组(P<0.01).结论 小青龙汤加减对支气管哮喘慢性持续期寒饮停肺证患者的PEF值有显著的改善作用.