小鸡FDM后极部巩膜成纤维细胞TGF-β2mRNA表达的动态变化

目的研究小鸡形觉剥夺性近视眼(FDM)后极部巩膜成纤维细胞转化生长因子-β2(TGF-β2)mRNA表达的时间动态变化,以阐明高度近视眼后极部巩膜细胞外基质(ECM)主动重塑的可能分子机制.方法60只1 d龄来亨雏鸡,用半透明塑料眼罩单眼遮盖制备FDM动物模型(FDM组),对侧眼为自身对照眼(SC组).另外,随机选取相同数目的同龄正常小鸡作为正常对照(NC组).于第4、7、14、21和30天检测眼轴长度与屈光度后处死小鸡,取后极部巩膜成纤维细胞层,采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)一步法检测TGF-β2mRNA表达,并分析其与眼轴长度、屈光度变化的相关性.结果单眼遮盖后,TGF-β2mRNA表达显著下调,呈时间依赖性,其中以遮盖4～14d最显著,14 d后下降减缓,稳定于极低水平.不同时间遮盖组与其对照组比较,差异有显著性(P＜0.001);除遮盖21 d与30 d后组间无明显差别外,各不同时间FDM组组间差异有显著性(P＜0.001).相关分析显示,TGF-β2mRNA表达与眼轴长度、屈光度变化间存在显著相关性(r分别为-0.951,0.951,P＜0.001).结论形觉剥夺可显著降低小鸡后极部巩膜成纤维细胞TGF-β 2 mRNA表达,呈时间依赖性,提示TGF-β 2可能为FDM后极部巩膜ECM重塑的早期启动因子.     

EGF与bFGF对体外大鼠巩膜成纤维细胞增殖的影响

目的研究表皮生长因子（EGF）和碱性成纤维生长因子（bFGF）在体外对大鼠巩膜成纤维细胞生长的影响。为进一步了解近视发生的分子机制提供依据。方法采用植块法培养大鼠巩膜成纤维细胞。细胞经传代纯化鉴定后,取第3～4代细胞加入不同浓度的EGF（0．1～200ng／mL）、bFGF（0．1～50ng／mL）。分别培养24、48、72h用四甲基偶氮唑盐（MTT）法检测细胞的增殖密度。观察不同浓度、时间下细胞增殖情况。结果发现0．1～100ng／mL的EGF和0．1～50ng／mL的bFGF对大鼠巩膜成纤维细胞均有明显的促增殖作用,且呈剂量相关性。结论一定浓度的EGF、bFGF对体外培养的大鼠巩膜成纤维细胞的生长具有促进作用。     

TGF-β3对病理性瘢痕中成纤维细胞增殖凋亡的影响

目的 探讨TGF-β3,对病理性瘢痕成纤维细胞增殖-凋亡的作用.方法 收集病理性瘢痕标本58例、正常瘢痕标本42例和正常皮肤30例.采用免疫组织化学法检测TGF-β3、PCNA,以及TINEL检测标本中成纤维细胞凋亡水平.结果 TGF-β3在病理性瘢痕组织中的表达低于正常瘢痕组织(P＜0.05),而正常皮肤组织中TGF-β3呈阴性表达.而PCNA在病理性瘢痕成纤维细胞中表达水平与正常瘢痕及正常皮肤相比明显增高(P＜0.05),正常瘢痕中成纤维细胞PCNA表达情况亦高于正常皮肤(P＜0.05);另一方面,病理性瘢痕中成纤维细胞凋亡水平较正常瘢痕降低(P＜0.05).而正常皮肤与正常瘢痕间无显著性差异(P＞0.05);病理性瘢痕组织中成纤维细胞增殖指数增殖指数与TGF-β3呈负相关关系(P＜0.05).结论 TGF-β3可能是通过调节瘢痕组织中成纤维细胞的增殖和/或凋亡水平,来实现对瘢痕形成的调节.TGF-β3,表达水平的失控可能是病理性瘢痕形成的重要诱因之一.     

碱性成纤维细胞生长因子和转化生长因子-β在近视家族胎儿巩膜的表达

目的：通过检测相同胎龄父母近视程度不同的胎儿后极部巩膜碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor,bFGF)和转化生长因子-β(transforming growth factor-beta,TGF-β)的表达水平,探讨bFGF和TGF-β在人类近视遗传和近视形成过程中是否发挥作用。方法：对16例14周以下引产的胎儿,按父母无近视和父母近视＞-4.00D分为对照组和实验组,每组8例,免疫组化和RT-PCR方法检测后极部巩膜bFGF和TGF-β的表达,确定两组是否存在差异。结果：两组bFGF和TGF-β在巩膜中均有表达,实验组BFGF的表达较对照组高,两者比较差异有统计学意义(P＜0.05),实验组TGF-β的表达较对照组低,两组比较差异有统计学意义(P＜0.05)。结论：近视家族胎儿在巩膜发育阶段就有bFGF和TGF-β的某些改变,bFGF和TGF-β在人类近视的形成和遗传中可能发挥一定作用,是近视多基因遗传因素中的相关因素之一。     

形觉剥夺性近视模型大鼠巩膜成纤维细胞中TGF-β1表达及Wnt/β-catenin信号通路的调控作用

目的：构建形觉剥夺性近视（FDM）大鼠模型,阐明FDM大鼠巩膜成纤维细胞中转化生长因子β1（TGF-β1）的表达及其与Wnt/β-连环蛋白（β-catenin）信号通路的关系。方法：40只大鼠随机分为对照组和FDM模型组,每组20只,FDM模型组大鼠建立FDM模型。测定大鼠眼轴长度;取大鼠眼球分离巩膜组织,采用Western blotting法和逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）法测定大鼠巩膜组织中TGF-β1蛋白和mNRA表达水平。分离培养对照组和FDM模型组大鼠巩膜成纤维细胞,对照组大鼠巩膜成纤维细胞作为对照组,FDM模型组大鼠巩膜成纤维细胞分为FDM组和FDM+Dickkopf相关蛋白1（DDK1）组（加入DDK1培养）,采用Western blotting法和RT-PCR法测定各组大鼠巩膜成纤维细胞中TGF-β1、3型核糖核酸酶（DCL3）、结肠腺瘤样息肉蛋白（APC）、糖原合成酶激酶3β（GSK3β）、p21-GSK3β和β-catenin蛋白及mRNA表达水平。结果：与对照组比较,FDM组大鼠眼轴长度均明显增加（P<0.05）,巩膜组织中TGF-β1蛋白和mRNA表达水平均明显降低（P<0.01）。对照组、FDM组和FDM+DDK1组大鼠巩膜成纤维细胞中GSK3β蛋白和mRNA表达水平比较差异无统计学意义（P>0.05）,TGF-β1、DCL3、APC、p21-GSK3β和β-catenin蛋白及mRNA表达水平比较差异有统计学意义（P<0.01）;与对照组比较,FDM组大鼠巩膜成纤维细胞中TGF-β1、APC蛋白和mRNA表达水平降低（P<0.05）,DCL3、p21-GSK3β、β-catenin蛋白和mRNA表达水平升高（P<0.05）;与FDM组比较,FDM+DDK1组大鼠巩膜成纤维细胞中TGF-β1、APC蛋白和mRNA表达水平升高（P<0.05）,DCL3、p21-GSK3β、β-catenin蛋白和mRNA表达水平降低（P<0.05）。结论：FDM模型大鼠巩膜成纤维细胞中TGF-β1表达水平降低,其水平受Wnt/β-catenin信号通路调控。     

紫杉醇对TGF-β1促人Tenon's囊成纤维细胞增殖的影响

目的:研究转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)促人Tenon's囊成纤维细胞(human Tenon's capsulefibroblasts,HTFs)的增殖作用及紫杉醇对该增殖作用的影响.方法:用TGF-β1(0～50 ng/ml)作用于体外培养的HTFs,...     

LE540对视网膜色素上皮bFGF及TGF-β_2的影响

目的：观察全反式视黄酸β受体阻断剂LE540对培养的豚鼠视网膜色素上皮细胞（RPE）分泌碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）及转化生长因子-β（2TGF-β2）的影响。方法：胰蛋白酶消化法培养原代豚鼠RPE细胞,角蛋白免疫组织化学染色鉴定为阳性后,传2代细胞后用于实验。不同实验组分别加入10×10-6 mol/L的全反式视黄酸ATRA和5×10-6 mol/L的LE540,设试剂对照。ELISA检测ATRA及LE540作用2 h、4 h、6 h、8 h、16 h后TGF-β2和bFGF的分泌量。结果：ELISA结果显示：（1）加入ATRA后,实验组TGF-β2的分泌量与对照组比较明显增加,而bFGF的分泌量明显减少（P〈0.05）。（2）加入LE540后,实验组较对照组RPE分泌TGF-β2均明显减少（P〈0.05）,差别有统计学意义。同时bFGF的分泌量没有明显变化（P=0.178）。结论：全反式视黄酸能通过视黄酸β受体途径促进视网膜色素上皮细胞分泌TGF-β2,同时通过其他途径能抑制bFGF的分泌。提示有可能通过阻断视黄酸β受体来控制近视的进展。     

bFGF和TGF-β_1对人牙龈成纤维细胞生物学作用的影响研究

目的探讨碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)和转化生长因子-β(1TGF-β1)单独及联合应用时对人牙龈成纤维细胞(HGF)增殖及I型胶原的分泌和糖胺多糖(glycosaminoglycan,GAG)合成的影响。方法体外培养HGF,MTT法动态检测两种生长因子单独及联合作用后的增殖效应;羟脯氨酸试剂盒消化法及阿利新蓝法分别检测最佳增殖浓度时上清液中I型胶原及糖胺多糖含量。结果第3天开始bFGF和TGF-β1促进HGF增殖,第5天最显著(P0.05),bFGF和TGF-β1的浓度分别为10 ng/mL和1 ng/mL时增殖效应最佳,联合作用更显著(P0.05);最佳增殖浓度时TGF-β1促进I型胶原分泌,而bFGF起抑制作用(P0.05),联合应用时TGF-β1的促进作用占优势,但作用减弱(P0.05);最佳增殖浓度时bFGF和TGF-β1促进GAG合成(P0.05),联合应用时更显著(P0.05)。结论除bFGF单独作用时抑制I型胶原的合成外,bFGF和TGF-β1单独及联合应用时能促进HGF增殖和细胞外基质的合成。     

bFGF与阿朴吗啡对形觉剥夺性近视抑制效果的比较研究

目的:通过药物实验比较bFGF与阿朴吗啡对形觉剥夺性近视的抑制效果,探讨此两种药物抑制近视的作用机理.方法:半透明的塑料眼罩遮盖法建立72只出生2d的健康艾维因雏鸡FDM模型,随机分为8组:正常对照组8只(A),FDM组16只(B),FDM+bFGF200ng 8只(C),FDM+bFGF500ng 8只(D),FDM+bFGF1000ng 8只(E);FDM+阿朴吗啡200ng 8只(F),FDM+阿朴吗啡500ng 8只(G),FDM+阿朴吗啡1000ng 8只(H).单眼遮盖1w后所有实验动物检影验光,取A组及随机取B组8只鸡给予腹腔麻醉后处死,取出眼球,游标卡尺测眼轴,并取后极部固定备用.C、D、E、F、G、H,6组单眼遮盖1w后,右眼行结膜下注射1w后检影验光,游标卡尺测眼轴,取后极部观察其形态学变化.结果:鸡形觉剥夺1w后近视形成,眼轴延长.药物治疗1w后C、D、E、F、G、H各组与B组右眼屈光度眼轴前后径及赤道径,两两比较差异均有统计学意义;C、D、E各组间两两比较C组与D、E两组差异均有统计学意义;F、G、H各组间眼轴与屈光度两两比较差异均有统计学意义.近视鸡视网膜各层变薄,光镜下可见病理性改变.结论:bFGF与阿朴吗啡均能明显抑制形觉剥夺性近视的发展,阿朴吗啡对形觉剥夺性近视的抑制效果呈剂量相关性,相比之下bFGF对形觉剥夺性近视的抑制效果更佳.     

bFGF、NGF对高温影响神经细胞存活的保护作用

目的：研究高温对原代培养神经细胞存活的影响以及bFGF和NGF对高温处理后神经细胞存活的保护作用。方法：应用神经细胞原代培养、MTT、NSE-ELISA测定技术。结果：①高温处理后神经细胞活性明显降低;②外源性bFGF、NGF均不同程度地增加了神经细胞活性,其抗体均不同程度地使神经细胞活性降低,但二者联合应用神经细胞活性增加不明显;③NSE-ELISA检测结果与MTT检测结果一致,但特异性和敏感性更高。结论：外源性bFGF和NGF对高温处理后神经细胞存活具有保护作用。     

形觉剥夺性近视与碱性成纤维细胞生长因子研究进展

近视是眼科的常见病,因发病机制不明,目前尚无有效的病因治疗方法。近几十年来实验性近视动物模型的建立引起了国内外学者的广泛兴趣,建立形觉剥夺性近视动物模型来研究其发病机制及其与各种生长因子的相互作用,有了很多突破性的进展。碱性成纤维细胞生长因子是一种阳离子多肽,具有广泛的生物学效应,如刺激增殖,具有趋化作用,参与创伤修复。多种研究表明,碱性成纤维细胞生长因子可以在一定程度上抑制剥夺性近视的形成和发展。现将二者之间的关系予以综述。     

bFGF、NGF对高温影响神经细胞存活的保护作用

目的 :研究高温对原代培养神经细胞存活的影响以及bFGF和NGF对高温处理后神经细胞存活的保护作用。方法 :应用神经细胞原代培养、MTT、NSE ELISA测定技术。结果 :①高温处理后神经细胞活性明显降低 ;②外源性bFGF、NGF均不同程度地增加了神经细胞活性 ,其抗体均不同程度地使神经细胞活性降低 ,但二者联合应用神经细胞活性增加不明显 ;③NSE ELISA检测结果与MTT检测结果一致 ,但特异性和敏感性更高。结论 :外源性bFGF和NGF对高温处理后神经细胞存活具有保护作用。     

bFGF、TGF-β1在唾液腺黏液表皮样癌组织中的表达及意义

目的 探讨碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)、转化生长因子-β1(TGF-β1)在唾液腺黏液表皮样癌组织中的表达及意义.方法 采用免疫组化SP法检测正常唾液腺组织以及高分化、中分化和低分化黏液表皮样癌组织中bFGF、TGF -β1蛋白的表达.结果 bFGF、TGF-β1在正常唾液腺中的阳性表达率低于在黏液表皮样癌组织中的阳性表达率(P均＜0.05).在中分化和低分化黏液表皮样癌组织中,bFGF蛋白表达率高于高分化黏液表皮样癌(P<0.05),TGF-β1蛋白表达率低于高分化黏液表皮样癌(P<0.05); 而bFGF、TGF-β1分别在中分化和低分化黏液表皮样癌组织中的蛋白表达率差异均无统计学意义.TGF-β1的表达与bFGF呈负相关(r=-0.471,P=0.0003).结论 TGF-β1的表达可能抑制黏液表皮样癌的发生,而bFGF的表达则可能促进黏液表皮样癌的发生,二者之间呈负相关.     

京尼平苷对大鼠前列腺成纤维细胞增殖的影响

【目的】研究京尼平苷对大鼠前列腺成纤维细胞增殖的影响,并探讨其机制。【方法】培养SD大鼠前列腺成纤维细胞,取对数生长期的细胞随机分成4组：对照组、京尼平苷10mg/L、20mg/L和40mg/L组。不同浓度的京尼平苷孵育大鼠前列腺成纤维细胞48h后,采用MTT法检测细胞增殖,流式细胞仪检测细胞凋亡,ELISA法测定Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原与转化生长因子β1（TGF-β1）蛋白的含量。【结果】与对照组比较,京尼平苷20mg/L和40mg/L可显著抑制大鼠前列腺成纤维细胞的增殖（P〈0.01）,促进其凋亡（P〈0.01）,同时减少TGF-β1的分泌和胶原的合成（P〈0.05或P〈0.01）。【结论】京尼平苷可抑制大鼠前列腺成纤维细胞的增殖,可能与其减少TGF-β1的分泌和胶原的合成、促进前列腺成纤维细胞的凋亡有关。     

TGF-β1对IL-1β诱导人牙周膜成纤维细胞分泌HGF影响的研究

目的研究转化生长因子-β1（TGF-β1）、白细胞介素-1β（IL-1β）干预人牙周膜成纤维细胞后HGF的基因表达的水平变化,为HGF网络调控人牙周膜成纤维细胞功能的研究提供新资料。方法分别采用IL-1β梯度浓度、IL-1β最佳干预浓度和TGF-β1梯度浓度干预第5代人牙周膜成纤维细胞,并运用RT-PCR法检测人牙周膜成纤维细胞中HGF的基因表达。结果经IL-1β单独作用,人牙周膜成纤维细胞中HGF的基因表达水平上调,并优选出IL-1β的最佳干预浓度为10ng/ml（P〈0.05）;当一定浓度的TGF-β1和10ng/ml的IL-1β共同作用于人牙周膜成纤维细胞后,该细胞中HGF的基因表达水平比单独IL-1β作用组低（P〈0.05）。结论 TGF-β1能够抑制IL-1β所诱导的人牙周膜成纤维细胞中HGF的基因表达。     

IGF-I和TGF-β1对幼年及成年兔关节软骨细胞增殖和代谢的作用

目的观察IGF-I和TGF-β1对幼年及成年兔关节软骨细胞增殖和代谢的作用。方法采用体外培养兔关节软骨细胞的方法,利用3H-TdR和35S-Na2SO4掺入分别反映软骨细胞增殖和基质蛋白多糖的合成,应用TUNEL法检测软骨细胞的凋亡。结果随年龄增加,关节软骨细胞凋亡增加,同时增殖和蛋白多糖的合成能力下降,而且对IGF-I和TGF-β1的反应性亦呈年龄相关下降。但是IGF-I和TGF-β1均可能在一定程度上以剂量依赖方式促进软骨细胞3H-TdR和35S-Na2SO4掺入增加。结论外源性IGF-I和TGF-β1在体外可促进不同年龄兔关节软骨细胞增殖和基质合成,提示外源性生长因子在骨关节炎的防治上可能有一定意义。     

阿托伐他汀对TGF-β1诱导的大鼠肺成纤维细胞分化的影响

【目的】观察阿托伐他汀对肺纤维化大鼠的肺成纤维细胞增殖的影响及其对TGF-β1诱导的大鼠肺成纤维细胞表型分化的影响。【方法】建立Wistar大鼠肺纤维化模型,1周后取肺组织进行成纤维细胞原代培养,细胞经鉴定后以不同浓度的阿托伐他汀对试验组细胞进行干预,采用MTT法测定细胞增殖情况;TGF-β1诱导细胞分化,同时给予不同浓度阿托伐他汀干预,免疫细胞化学染色（SP）法检测药物对肌成纤维标志物-αSMA表达的影响。【结果】MTT结果显示：各剂量组中不同干预天数所测得的OD值之间存在显著差异（P〈0.01）。各时间点所测OD值与不同用药物剂量之间存在交互作用（P〈0.01）。各剂量组对细胞的抑制作用之间存在显著差别（P〈0.01）。免疫细胞化学染色结果显示：药物因素对-αSMA的表达量有影响（P〈0.01）,区组因素对-αSMA的表达量有影响（P〈0.01）。【结论】阿托伐他汀可抑制肺纤维化大鼠肺成纤维细胞的增殖,同时可抑制TGF-β1诱导的成纤维细胞的分化,这主要表现在抑制细胞增殖、改变其形态、减少肌成纤维细胞的标志性产物-αSMA的产生上。     

黄芪对人肾间质成纤维细胞增殖和转化生长因子-β1表达的影响

目的：探讨黄芪对肾间质纤维化改善的作用机制。方法：体外培养人肾间质成纤维细胞（KFB），传至3代后分为3组：对照组（常规培养），血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）培养组（在培养液中分别加入10^-8mol／L、10^-7mol／L和10^-6mol／L的AngⅡ），黄芪注射液干预组（分别于培养液中加入10^-6mol／L的AngⅡ和10mg／L、20mg／L和40mg／L黄芪注射液）。作用48h后，各组用MTT比色法测定细胞增殖情况，用ELISA法测定细胞培养上清液中TGF-β1的水平。结果：AngⅡ可促进KFB增殖，刺激TGF-β1的分泌，且呈剂量依赖性（r分别为0.612和0.723，P〈0.05）；黄芪注射液可抑制AngⅡ的上述作用，且呈剂量依赖性（r分别为-0．561和-0．689，P〈0．05）。结论：黄芪可以通过抑制成纤维细胞增殖和TGF-β1的分泌，延缓肾间质纤维化进展。     

TGF-β1对口腔鳞癌相关成纤维细胞FAP表达的影响

目的 探讨转化生长因子-β1(TGF-β1)对癌相关成纤维细胞(CAFs)中成纤维细胞活化蛋白(FAP)表达的影响.方法 应用10 ng/ml的TGF-β1作用于CAFs细胞,设置正常成纤维细胞(NFs)和未经处理的CAFs细胞作为对照组,采用RT-PCR和Western blot法检测细胞中FAP的蛋白和mRNA表达情况.结果 FAP在NFs中几乎不表达,而在CAFs中FAP的mRNA和蛋白表达均增加.与NFs组和CAFs组相比,10 ng/ml的TGF-β1能够明显促进CAFs细胞分泌FAP,作用12、24 h后FAP mRNA和蛋白的相对表达量差异有统计学意义(P＜0.05).且随着作用时间的延长,FAP的表达持续升高,24 h较12 h表达增加,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 TGF-β1能够促进CAFs中FAP的表达,在肿瘤上皮-间质交互作用中扮演着重要角色.