自体脂肪移植及生长因子治疗小型猪Ⅲ度烧伤创面的实验研究

目的:观察自体脂肪移植和生长因子对小型猪Ⅲ度烧伤创面愈合的影响,以探讨脂肪组织在皮肤损伤修复中的作用。方法:4只小型猪背部各制备8个面积为5 cm×5 cm的Ⅲ度烧伤创面,3 d后创面切痂,并随机分为自体脂肪移植治疗组、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)治疗组、表皮生长因子(EGF)治疗组和空白对照组。于烧伤后3、10、17、24 d分别测量创面面积和创腔容积,并组织学观察创面愈合情况。结果:自体脂肪移植治疗组、bFGF和EGF治疗组创面面积在治疗后8、15和22 d比空白对照组明显缩小(P<0.05),创腔容积在治疗后8和15 d也比空白对照组明显缩小(P<0.05);烧伤后第10 d,自体脂肪移植治疗、bFGF和EGF治疗组比空白对照组肉芽形成明显,且毛细血管胚芽与成纤维细胞数量也比空白对照组显著增多,第24 d,自体脂肪移植治疗组和bFGF治疗组新生表皮较厚,并形成上皮角,EGF治疗组新生表皮薄,无上皮角形成,空白对照组创面再上皮化不完全,伤口仍未完全愈合。结论:自体脂肪移植有促进血管生成和深度烧伤创面修复与愈合的作用。     

bFGF与MSCs自体移植对猪皮肤创面PCNA和Ⅷ-R Ag表达的影响

目的 研究碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor,bFGF)和骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)自体移植对小型猪全层皮肤缺损创面增殖细胞核抗原(PCNA)和Ⅷ因子相关抗原(Ⅷ-R Ag)表达的影响.方法 6只小型猪背部中线两侧各制备4个面积为2.54 cm2的圆形全层皮肤缺损创面,将创面分为bFGF治疗组、MSCs治疗组、bFGF MSCs治疗组、生理盐水对照组(共4组,每组12个创面).分别取不同时段创面组织,进行常规染色,并采用免疫组化方法检测PCNA和Ⅷ-R Ag的表达情况.结果 伤后7 d各组创面均形成肉芽组织,以bFGF MSCs治疗组的血管形成最为丰富.PCNA表达量增加,伤后7 d达到高峰,主要位于肉芽组织中,持续至14 d PCNA表达开始下降,而且在各个时间点,均以bFGF MSCs治疗组的PCNA阳性细胞百分率为最高(P＜0.05).伤后7 d,Ⅷ-R Ag染色的阳性细胞百分率明显高于其余3个组.结论 bFGF协同自体移植的MSCs可使皮肤创面PCNA和Ⅷ-R Ag的表达增加,促进肉芽组织生成,缩短创面愈合时间.     

骨髓间充质干细胞促进大鼠皮肤创面愈合的作用及机制研究

目的 探讨骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)对大鼠皮肤创面的促愈作用及机制,为临床皮肤损伤修复提供新的治疗方法.方法 建立大鼠背部皮肤全层切割伤模型,将大鼠分为2组:空白对照组,MSCs处理组,分别于伤后3、6、9、12 d采用大体观察,常规组织学检查观察2组大鼠背部皮肤伤口愈合状况及RT-PCR观察转化生长因子(TGF-β1)、表皮生长因子(EGF)mRNA在愈合中的变化特点.结果 MSCs处理组大鼠皮肤愈合快,愈合指数高,创伤后第3天MSCs处理组大鼠皮肤TGF-β1上调明显,第6天EGF上调明显.结论 MSCs能促进大鼠皮肤创面愈合,其机制可能与其引起各种生长因子的合成和分泌有关.     

EGF和bFGF联合应用治疗深Ⅱ度烧伤患者早期创面的效果

目的 观察联合应用碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)与人表皮生长因子(EGF)对深Ⅱ度烧伤患者早期创面愈合的影响.方法 选择四肢烧伤患者136例,随机分为4组,联合用药组39例,EGF组34例,bFGF组37例,对照组26例,分别观察比较各组的创面愈合率、完全闭合时间及肉芽组织成熟度.结果 伤后7,11,14,17 d联合用药组创面愈合率高于其他组(P<0.05);伤后7,11,14 d EGF组和bFGF组高于对照组(P<0.05);联合用药组创面比EGF组、bFGF组和对照组提前闭合,差异均非常显著(P<0.05),EGF组和bFGF组与对照组相比均提前愈合(P<0.05).处理后第14天,联合用药组创面肉芽组织生长情况明显优于其他3组(P<0.05).结论 局部联合应用EGF和bFGF可通过协同作用加速深Ⅱ度烧伤患者早期创面愈合.     

小鼠深Ⅱ度烫伤创面愈合过程中内源性表皮生长因子的变化规律及其意义

目的　探讨内源性表皮生长因子 (EGF)的变化规律及其与创面愈合的关系。方法　采用免疫组织化学、核酸分子杂交及图象分析等方法 ,分别在蛋白质和转录水平检测深Ⅱ度烫伤创面愈合过程中 ,小鼠体内EGF主要合成器官EGF及其mRNA的表达。结果　颌下腺EGF的表达量于伤后 1d较对照组明显降低 (P <0 .0 1) ,伤后 5d恢复至伤前水平并持续至伤后 2 1d ;其mRNA的表达强度伤前和伤后均为弱阳性～阳性。肾脏EGF的表达量于伤后 1d～ 5d较对照组明显降低 (P <0 .0 1) ,伤后 7d ,其表达量高于对照组并持续到伤后 2 1d(P <0 .0 1) ;其mRNA的表达强度伤前和伤后 3d均为弱阳性 ,伤后 7d～ 2 1d增强为阳性。伤后十二指肠EGF的表达量始终低于对照组 (P <0 .0 1) ;其mRNA的表达强度较对照组减弱。结论　在小鼠深Ⅱ度烫伤创面愈合过程中 ,颌下腺合成的EGF参与早期组织修复 ,肾脏合成的EGF参与创面的后期修复 ,十二指肠合成的EGF未参与皮肤烫伤创面的修复。     

芦荟凝胶外涂对大鼠浅度烫伤创面愈合及其相关因子表达的影响

目的:研究芦荟对大鼠浅度烫伤创面愈合及表皮生长因子(EGF)、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)表达的影响。方法:建立大鼠浅度烫伤模型,制备芦荟凝胶。实验动物分两组:自然愈合组(对照组);芦荟凝胶组(试验组)。通过免疫组化染色及图像分析,测定伤后2、6、10、18、24d的创面愈合率及创面组织中EGF、bFGF的表达。结果:1创面愈合率:芦荟凝胶组在10、18、24d各时相点的创面愈合率较自然愈合组高,差异有显著性(P<0.05)。尤以24d时相点更明显(P<0.01)。2EGF的表达:芦荟凝胶组总体的EGF表达量高于自然愈合组,差异有显著性(P<0.05)。芦荟凝胶组伤后10、18d时EGF表达高于自然愈合组,差异有显著性意义(P<0.05)。3bFGF的表达:芦荟凝胶组总体的bFGF表达量高于自然愈合组,差异有显著性(P<0.05)。芦荟凝胶组伤后18、24d时bFGF表达高于自然愈合组,差异有显著性意义(P<0.05)。结论:芦荟凝胶外涂对大鼠浅度烫伤的愈合有促进作用,其机制可能与促进EGF、bFGF的表达有关。     

EGF和bFGF联合应用治疗深Ⅱ度烧伤患者早期创面的临床研究

目的 观察联合应用碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)与人表皮生长因子(EGF)对深Ⅱ度烧伤患者早期创面愈合的影响。 方法 选择2003～2008年入院治疗的四肢烧伤患者136例,随机分为4组,联合用药组39例,EGF组34例,bFGF组37例,对照组26例,分别观察比较各组的创面愈合率、完全闭合时间及肉芽组织成熟度。结果 伤后7,ll,l4,l7d 联合用药组创面愈合率高于其他组(P <0．05);伤后7,11,l4d EGF组和bFGF组高于对照组(P <0．05);联合用药组创面比EGF组、bFGF组和对照组提前闭合,差异均非常显著(P<0．05), EGF组和bFGF组与对照组相比均提前愈合(P<0．05)。处理后第14天,联合用药组创面肉芽组织生长情况明显优于其他3组（p<0.05）。结论 局部联合应用EGF和bFGF可通过协同作用加速深Ⅱ度烧伤患者早期创面愈合。     

丹参-丝蛋白多功能创面敷料对大鼠浅二度创面释放生长因子的影响

目的：观察丹参-丝蛋白多功能创面敷料用于大鼠浅二度烧伤创面覆盖后对局部表皮生长因子（EGF）、碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）和血小板衍生生长因子（PDGF）释放的影响。方法：SPF级雄性SD大鼠40只,体重230~250 g。将动物随机分为4组,每组10只动物。所有动物于背部造成浅二度皮肤烫伤。创面分别覆以消毒凡士林纱布,丝蛋白创面敷料,丹参注射液纱布,丹参-丝蛋白多功能敷料,外敷无菌纱布包扎。于手术术后3 d处死取材,采用组织培养和比色法测定创面组织释放EGF、bFGF以及PDGF-AB水平,并通过HE和Masson染色对创面组织坏死程度进行形态学观察。结果：实验组与对照组创面组织释放EGF、bFGF以及PDGF-AB水平有明显差异（P均〈0.01）。而实验组中丹参注射液组与丝蛋白敷料组无明显差异,丹参-丝蛋白敷料组与其他2组有明显差异。结论：丹参-丝蛋白多功能敷料能促进大鼠浅二度烫伤创面局部生长因子的释放,对创面的愈合有促进作用。     

丝蛋白敷料对大鼠浅二度创面的疗效研究

目的:观察大鼠二度烫伤创面应用丝蛋白创面敷料覆盖后的疗效?方法:SPF级雄性大鼠20只,体重230~250 g,随机分成对照组和实验组?76℃热水烫伤10 s,形成8 cm × 5 cm浅二度烫伤创面?腹腔注射平衡液5 ml抗休克处理?对照组创面覆盖消毒凡士林纱布,实验组创面覆盖丝蛋白创面敷料,外用无菌纱布包扎固定?手术后3 d行创面取材,组织培养后测定其释放表皮细胞生长因子(EGF)?碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)?血小板衍生生长因子-AB(PDGF-AB)及白细胞介素-8(IL-8)的水平,并通过HE和Masson染色对创面组织坏死程度进行形态学观察?结果:实验组与对照组创面组织EGF?bFGF?PDGF-AB及IL-8的表达水平有明显差异(P均 < 0.01)?结论:丝蛋白创面敷料覆盖大鼠浅二度烧伤创面能促进局部生长因子的释放,抑制炎性因子的表达,有效抑制创面炎症反应并且对大鼠浅二度烫伤创面的愈合有促进作用?     

猪深Ⅱ度烫伤早期磨痂术后创面组织学改变及CK和EGFR表达

目的 建立猪深Ⅱ度烫伤模型,观察早期磨痂术创面的组织学改变及细胞角蛋白(CK)和表皮生长因子受体(EGFR) 的表达.方法 选用实验用小型猪制备深Ⅱ度烫伤模型,于烫伤早期(烫伤后3h)分别实施磨痂术(磨痂组,n=96)、常规削痂术治疗(削痂组,n=96)和SD-Ag保痂处理(SD-Ag组,n=96).记录各组创面愈合时间;于烫伤后12h和1、2、3、5、7、10、20d分别采集创面皮肤样本,HE染色和免疫组化染色分别观察创面组织学变化及CK和EGFR表达.结果 磨痂组创面愈合时间明显短于削痂组和SD-Ag组(P<0.05).组织学观察发现,与削痂组和SD-Ag组比较,磨痂组烫伤后3、5 d真皮深层组织炎细胞浸润和毛细血管淤滞较轻,皮肤附件破坏较少.免疫组化染色显示,烫伤后5、7 d磨痂组CK和EGFR表达较削痂组和SD-Ag组显著,保留皮肤附件较多,创面上皮化快,新生表皮厚.结论 深Ⅱ度烫伤创面实施早期磨痂术可保留较多皮肤附件,通过提高局部CK和EGFR释放而使创面上皮化提前,加速创面愈合并改善愈合质量.     

孵育鸡蛋膜对深Ⅱ度烧伤创面bFGF、EGF表达的影响及意义

目的:研究孵育鸡蛋膜对大鼠深Ⅱ度烧伤创面碱性成纤维细胞生长因子(Basic fibroblast growth factor,bFGF)、上皮生长因子(Epidermal growth factor,EGF)表达的影响及意义.方法:以鸡蛋膜、暴露处理为孵育鸡蛋膜对照,测定伤后7、14、21 d创面愈合率、创面羟脯氨酸含量、EGF和bFGF表达量.结果:孵育鸡蛋膜在各时间点愈合率高于暴露组,伤后7 d EGF,bFGF表达高于对照组.结论:孵育鸡蛋膜对深Ⅱ度烧伤创面愈合有促进作用,其促愈机理与覆盖孵育鸡蛋膜后创面EGF,bFGF表达增高相关.     

坏死组织对深二度烧伤创面进行性加深的影响

目的　为探讨深二度烧伤创面坏死组织持续存在对创面组织进行性损害的影响。方法　将7例施行削痂手术的深Ⅱ度烧伤患者创面分为手术前、手术后、和坏死组织存在的未手术创面，并分别获取创面组织标本，测定创面组织释放IL－8、EGF、bFGF、PDGF-AB水平以及观察组织形态学变化。结果　7例未手术创面组织在体外组织培养中释放IL-8水平较削痂手术后创面水平有明显升高（P<0.001）；同时,未手术创面EGF、bFGF、PDGF-AB水平与其配对的削痂手术后创面比较均呈明显降低（P<0.05-<0.005）。局部组织形态学观察亦显示，坏死组织存在的未手术创面除有大量中性粒细胞浸润外，坏死范围较手术前扩大，残留的少量皮肤附件因炎症扩大而消失，而削痂后创面的炎性反应较未手术和手术前有明显减轻，无坏死范围的进一步扩大，甚至可见新生肉芽形成和部分表皮修复。结论　创面坏死组织持续存在不仅是创面愈合过程的抑制因素，而且还可能因炎症反应加强或持续存在而导致创面进一步加深，使创面愈合更为延迟。削痂手术作为一种去除坏死组织的主动手段，对促进创面愈合有积极意义。     

坏死组织对深二度烧伤创面进行性加深的影响

目的　为探讨深二度烧伤创面坏死组织持续存在对创面组织进行性损害的影响。方法　将 7例施行削痂手术的深Ⅱ度烧伤患者创面分为手术前、手术后、和坏死组织存在的未手术创面 ,并分别获取创面组织标本 ,测定创面组织释放IL - 8、EGF、bFGF、PDGF AB水平以及观察组织形态学变化。结果　 7例未手术创面组织在体外组织培养中释放IL 8水平较削痂手术后创面水平有明显升高 (P <0 0 0 1) ;同时 ,未手术创面EGF、bFGF、PDGF AB水平与其配对的削痂手术后创面比较均呈明显降低 (P <0 0 5 - <0 0 0 5 )。局部组织形态学观察亦显示 ,坏死组织存在的未手术创面除有大量中性粒细胞浸润外 ,坏死范围较手术前扩大 ,残留的少量皮肤附件因炎症扩大而消失 ,而削痂后创面的炎性反应较未手术和手术前有明显减轻 ,无坏死范围的进一步扩大 ,甚至可见新生肉芽形成和部分表皮修复。结论　创面坏死组织持续存在不仅是创面愈合过程的抑制因素 ,而且还可能因炎症反应加强或持续存在而导致创面进一步加深 ,使创面愈合更为延迟。削痂手术作为一种去除坏死组织的主动手段 ,对促进创面愈合有积极意义。     

骨髓间充质干细胞修复兔皮肤缺损创面的实验研究

目的研究骨髓间充质干细胞(MSCs)参与皮肤缺损创面修复重建表皮的可能性,为组织工程化皮肤提供新的种子细胞来源。方法自体来源的骨髓MSCs应用5-溴脱氧尿嘧啶(BrdU)标记后,以Ⅰ型胶原为载体植入兔背部左侧全层皮肤缺损创面(治疗组),右侧全层皮肤缺损创面仅植以Ⅰ型胶原作为对照组。于术后6、12天观察创面收缩率,记录愈合时间;术后4、5周切取创面中央再生皮肤组织,行常规病理和BrdU免疫组织化学染色检测,进行对比研究。结果创面收缩率,治疗组>对照组(P<0.05);愈合时间,治疗组<对照组(P<0.05)。常规病理检测治疗组再生皮肤表皮层明显增厚,细胞数目显著增多;免疫组化检测,在治疗组再生皮肤附件毛囊内层以及表皮基底层、棘层可见BrdU阳性标记细胞。结论骨髓间充质干细胞在全层皮肤缺损创面可能分化为表皮细胞参与表皮重建并具有促进创面愈合的作用。     

EGF、bFGF对兔自体穿透角膜移植伤口愈合的影响

目的 观察表皮生长因子（EGF）、碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）对自体家兔穿透性角膜移植（PKP）术后伤口愈合的影响。方法 利用家兔自体穿透性角膜移植模型,采用测量伤口愈合强度、液闪计数、AgNORs染色、VG染色和电镜等方法,观察家兔PKP术后伤口愈合情况。结果 （1）EGF、bFGF、EGF bFGF点眼均能增加伤口所能承受的极限压力和∧3H-TdR的掺入率。（2）bFGF和EGF bFGF点眼能刺激伤口处成纤维细胞及其所分泌的胶原纤维呈比较规则的排列。结论 （1）EGF、bFGF、EGF bFGF点眼均能增加PKP术后伤口愈合的强度,增加伤口愈合时DNA的合成。（2）术后14d以后EGF和bFGF联合点眼对伤口愈合的促进作用仅相当于单独用bFGF点眼的水平。（3）bFGF能提高PKP术后伤口愈合的质量。     

磨痂术对大鼠浅Ⅱ°烫伤创面愈合的影响

【目的】观察检测磨痂术对于促进大鼠浅Ⅱ°烫伤创面愈合的效果及作用机制。【方法】将大鼠随机分为实验组和对照组,每组48只。于每组大鼠背部制作1个创面,实验组创面致伤后立即在无菌条件下行磨痂术;对照组创面致伤后在无菌条件下行保守换药治疗。标本制备后第3、7、10天观察各组大鼠创面大体愈合情况及各组大鼠创面愈合情况的差别。并使用免疫组化法检测各组大鼠创面生长因子（表皮生长因子、碱性成纤维细胞生长因子）变化的情况。【结果】第3、10天,实验组创面愈合情况明显优于对照组;第3、7、10天,实验组bFGF明显高于对照组;第10天,EGF明显高于对照组。【结论】磨痂术对于大鼠浅Ⅱ°烫伤创面具有促进愈合作用。     

碱性成纤维细胞生长因子对糖尿病烧伤难愈创面修复的影响

观察碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）对糖尿病患者烧伤难愈创面修复的影响。22例、27个糖尿病烧伤超过6周未愈合的创面,经清创后按150u/cm2创面应用外源性bFGF,每日1～2次,对照治疗前、后创面愈合情况。结果显示27个慢性难愈合创面在应用bFGF后,4周内全部愈合,总有效率达100%。提示bFGF能明显改善糖尿病烧伤难愈创面的修复环境,加速创面愈合。     

邦愈生物敷料在烧伤创面的临床应用

目的 为烧伤创面的修复寻求良好的生物覆盖材料。方法 通过应用邦愈生物敷料和洗必太酒精猪皮覆盖三度烧伤切削痂手术创面、深浅二度烧伤面以及感染创面的比较，观察两种生物敷料与创面贴附是否紧密、溶解、占位、脱水、积液积血情况，以及坏死组织脱落快慢和创面愈合时间。结果 邦愈生物敷料是一种较为理想的生物覆盖材料，其效果与同种异体皮相近。