雪旺氏细胞的体外培养及鉴定

采用分散培养法对新生SD大鼠的坐骨神经进行体外培养，成功地培养出了细胞．用抗S-100、抗Fibronectin抗体进行了免疫学鉴定，证实所培养的细胞为雪旺氏细胞。并对雪旺氏细胞的形态进行了观察。     

脑组织提取液对体外培养雪旺氏细胞影响的观察

目的：了解脑组织提取液对体外培养雪旺氏细胞的影响。方法：酶消化法培养的雪旺氏细胞分烃 加脑组织提取液组,对细胞形态和数量进行观察比较。结果：体外培养的五氏细胞在加入脑组织提取液后细胞增殖加快,并出现细胞突出起细长（为对照组的２－３倍）,互相延伸等形态学改变。结论：雪旺氏细胞在接触脑组织提取液后,表现为细胞增殖加快,突起生长明显的功能活跃状态。     

人雪旺氏细胞的培养及吞噬麻风菌的观察

体外培养了6例人胚外周神经的雪旺氏细胞,均经传代繁殖,1例传至第11代,存活期达110天。雪旺氏细胞与麻风菌混合培养,定期取出部分细胞进行抗酸染色观察。感染10小时后,可见少量(10％)细胞吞噬了抗酸菌。72小时后吞菌细胞数达到高峰(95％以上),在细胞内可形成菌团——麻风球。电镜下雪旺氏细胞表面的微绒毛间及胞浆内见有多量麻风菌。96小时后,雪旺氏细胞出现明显变性及坏死,但细胞内的麻风菌却无明显改变。     

雪旺氏细胞和成纤维细胞体外培养的实验研究

目的：本实验通过雪旺氏细胞（Ｓｃ）和成纤维细胞（Ｆｂ）不同培养方法的研究来获得不同比例共存的雪旺氏细胞和成纤维细胞。方法。分散培养（１）差速贴壁法。（２）阿糖胞苷自理法。观察（１）相差显微镜，（２）Ｓ－１００免疫细胞化学染色。（３）细胞计数。结果：被Ｓ－１００染色染上雪旺氏细胞在相差显微镜下观察到的活体雪旺氏细胞的开矿是一致的，细胞呈梭形，经差速壁法和阿糖包苷处理后３天雪旺氏细胞所占比例为９５％，     

人体正中神经雪旺氏细胞培养

目的：对引产的28周死亡胎儿的正中神经的雪旺氏细胞（Schwann Cell SC)培养，获得增殖的SC。方法：组织块反复种植法。结果：正中神经SC培养能良好的生长存活。结论：人体SC培养获得成功。     

雪旺氏细胞促进中枢神经系统修复和再生

<正>当周围神经(Peripheral Nerve,PN)损伤和再连接时,轴突可以成功地长入远侧残端,最终使神经功能在相当程度上得到恢复,而成年哺乳动物中枢神经系统(Central Nervous System,CNS)的轴突损伤后的再生往往失败。     

雪旺氏细胞体外培养方法研究

为在短时期内培养大量的雪旺氏细胞,本文对目前常用的两种培养方法进行了比较。方法：采用植块反复种植法和酶消化法分别进行雪旺氏细胞的体外培养。结果表明两种方法都能得到雪旺氏细胞。但酶消化法所培养的雪旺氏细胞生长一致,相同条件下达到一定细胞数量所需时间短于植块反复种植法。酶消化法比植块反复种植法更适用于大量雪旺氏细胞的培养。     

嗅神经鞘细胞与雪旺氏细胞在脊髓损伤修复中的作用

雪旺氏细胞和嗅神经鞘细胞都能分泌多种神经营养因子、细胞外基质及黏附因子,提供有利于脊髓神经轴突再生的微环境,且两者都能促进轴突的再髓鞘化和再生.嗅神经鞘细胞具有在中枢神经系统内长距离迁移的能力,能够促进神经轴突穿越移植物-宿主界面重新进入中枢神经系统,其与星型胶质细胞相容性也更好.而雪旺氏细胞在促进轴突髓鞘形成的能力上可能更强.该文就两者在脊髓损伤修复中的作用进行综述,以促进中枢神经再生机制的研究,并为进一步修复脊髓损伤奠定理论基础.     

雪旺氏细胞在中枢神经系统损伤修复中的新思路

中枢神经系统损伤后的再生修复问题一直是神经科学领域关注的重点。中枢神经系统修复由是多种因素与机制介导的一系列复杂过程,神经元的存活与功能的恢复主要取决于中枢神经系统的自身修复能力。过去人们认为神经元不能修复,而近年来研究表明,雪旺氏(Schwann)细胞在此过程中能起     

雪旺氏细胞源活性物质对周围神经再生影响的实验研究

采用１６４０培养液体外培养ＳＤ乳鼠雪旺氏细胞，吸取其培养液，内含雪旺氏细胞分泌的活性物质。以硅胶管桥接３组ＳＤ大白鼠２ｃｍ有神经缺损，第一组硅胶管内注入雪旺氏细胞培养液，第２组注入１６４０培养液，第３组空白对照，术后４个月第１组，第２组髓鞘直径，动作电位传导速率比较差异有极显著性（Ｐ〈０．０１），实验结果显示雪旺氏细胞泊活性物质对周围神经再生有益。     

雪旺细胞在脊髓损伤中的研究进展

脊髓损伤（SCI）后的再生和修复仍是目前一大难点,目前研究认为其原因可归结为：神经元内在的再生能力不足、髓鞘再生困难、缺乏生长促进因子、在损伤区缺乏组织桥等,而雪旺细胞是周围神经的胶质细胞,包绕周围神经形成髓鞘,可分泌多种神经营养因子、细胞外基质、细胞粘附分子等,近几十年来,有关雪旺细胞治疗脊髓损伤的研究甚多,本文就此做一综述。     

Differentiation of rat embryonic neural stem cells promoted by co-cultured Schwann cells

Objective To explore the factors which induce differentiation of embryonic neural stem cells. Methods Rat embryonic neural stem cells were co-cultured with newborn rat Schwann cells in serum-free medium. The phenotype and specific-markers including tubulin-β, glial fibrillary acidic protein (GFAP) and galactorcerebroside (GalC), were domonstrated by phase contrast microscopy and double immunofluorescence staining. Results Overall, 80%±5% of neural stem cells protruded several elongated processes and expressed tubulin-β antigen at high levels, while 20±3% of them protruded several short processes and were GalC or GFAP positive. Conclusion The factors secreted by Schwann cells could induce rat embryonic neural stem cell to differentiate.     

施万细胞培养与纯化研究进展

施万细胞是组织工程修复损伤神经的种子细胞,获得大量且高纯度的施万细胞对组织工程学至关重要。施万细胞的培养纯化技术日趋完善,近年来出现了三维培养,纯化方法为免疫选择法、抗有丝分裂法、神经刺激因子法等,最近比较新的提纯方法有磁性活细胞纯化法、条件培养基纯化法、层粘连蛋白纯化法等。施万细胞的培养和提纯方法已取得初步进展,目前尚有许多问题有待解决,如周期长、细胞活性低、在传代培养中细胞生物学特性不稳定等。     

雪旺细胞源神经营养因子对脊髓损伤的保护作用

目的：观察雪旺细胞源神经营养因子（Ｓｃ－ＮＴＦｓ）对损伤脊髓组织的作用。方法：以７．５ｇ物体从１０ｃｍ高处落下致的大鼠Ｔ１０脊髓，伤后５，３０，６０ｍｉｎ在务局部分别注入Ｓｃ－ＮＴＦｓ５０μｌ对照组给予等量生理盐水，２４ｈ后一半动物取伤段脊髓标本测水及离子含量，另一半动物３周后神经功能检查，结果：脊髓损伤后组织水肿Ｎａ＾＋Ｃａ＾＋离子浓度升高，Ｋ＾＋，Ｍｇ＾２＋离子浓度降低，Ｓｃ－ＮＴＦｓ可显改     

Induction of functional recovery by co-transplantation of neural stem cells and Schwann cells in a rat spinal cord contusion injury model

Objective To study the transplantation efficacy of neural stem cells （NSCs） and Schwann cells （SC） in a rat model of spinal cord contusion injury. Methods Multipotent neural stem cells （NSCs） and Schwann cells were harvested from the spinal cords of embryonic rats at 16 days post coitus and sciatic nerves of newborn rats, respectively. The differential characteristics of NSCs in vitro induced by either serum-based culture or co-culture with SC were analyzed by immunofluorescence. NSCs and SCs were co-transplanted into adult rats having undergone spinal cord contusion at T9 level. The animals were weekly monitored using the Basso-Beattie-Bresnahan locomotor rating system to evaluate functional recovery from contusion-induced spinal cord injury. Migration and differentiation of transplanted NSCs were studied in tissue sections using immunohistochemical staining. Results Embryonic spinal cord-derived NSCs differentiated into a large number of oligodendrocytes in serum-based culture upon the withdrawal of mitogens. In cocultures with SCs, NSCs differentiated into neuron more readily. Rats with spinal cord contusion injury which had undergone transplantation of NSCs and SCs into the intraspinal cavity demonstrated a moderate improvement in motor functions. Conclusions SC may contribute to neuronal differentiation of NSCs in vitro and in vivo. Transplantation of NSCs and SCs into the affected area may be a feasible approach to promoting motor recovery in patients after spinal cord injury.     

脊髓半横断损伤大鼠微囊化施万细胞移植后的组织学观察

目的:观察脊髓半横断损伤大鼠植入微囊化施万细胞(Schwann Cells,SCs)后的组织学变化。方法:制备施万细胞及微囊化施万细胞悬液,建立T10脊髓右半横断损伤的大鼠模型,并随机分为A组(单纯损伤组,50只)、B组(SCs移植组,50只)、C组(微囊化SCs移植组,50只),分别于损伤处植入吸附有10μL DMEM培养液、SCs悬液、微囊化SCs悬液的明胶海绵,采用BBB评分观察大鼠后肢运动功能恢复情况,并制备脊髓标本切片通过染色在光镜下观察其组织学变化。结果:C组BBB评分、髓鞘结构和数量的改善情况均优于A、B组(P<0.05,P<0.01)。结论:微囊具有免疫保护作用,微囊化施万细胞可更有效地促进大鼠脊髓神经元修复和轴突髓鞘化。     

大鼠原代背根神经元和雪旺细胞在随机及有序排列聚甲基丙烯酸甲酯电纺纳米纤维上共培养的形态学

目的: 探讨聚甲基丙烯酸甲酯(PMMA)电纺纳米纤维支架的拓扑线索对于大鼠原代背根神经元(DRGn)培养及其与雪旺细胞(SCs)共培养的影响。 方法: 构建具有随机分布和轴向有序排列拓扑结构的PMMA电纺纳米纤维,分别为随机和有序PMMA电纺纳米纤维组,以PMMA薄膜作为对照组;分离纯化大鼠原代DRGn和SCs,与上述各组PMMA电纺纳米纤维共培养;利用慢病毒技术转染荧光蛋白基因作为显色方法,观察PMMA电纺纳米纤维的拓扑线索对于DRGn神经突生长的影响,在共培养实验通过荧光图像的快速傅立叶转换(FFT)及半高全宽值(FWHM)的计算,定量分析电纺纤维对DRGn神经突和SCs细胞突起的接触引导作用。 结果: 大鼠原代DRGn和SCs均能够顺利在PMMA材料上贴壁并生长;与PMMA薄膜组比较,随机和有序PMMA电纺纳米纤维组DRGn平均神经突数量及神经突长度差异无统计学意义(P>0.05);共培养实验中,电纺纤维的拓扑线索对于 DRGn神经突和SCs细胞突起的生长均具有明显的接触引导作用,与PMMA薄膜组和随机PMMA电纺纳米纤维组比较,有序PMMA电纺纳米纤维组DRGn和SCs的FWHM值均明显降低 (P<0.01),有序PMMA电纺纳米纤维能够在空间上促成DRGn神经突和SCs细胞突起建立共定位。 结论: 有序PMMA电纺纳米纤维具有作为脊髓损伤(SCI)后植入性支架材料的潜力,其拓扑线索有可能加速SCs的轴突髓鞘化过程。     

神经营养因子3基因转染的施万细胞在脊髓损伤大鼠中的实验研究

目的探讨神经营养因子3基因转染的施万细胞在脊髓损伤大鼠中的作用,以进一步了解其在脊髓损伤治疗中的应用价值。方法将90只健康Wistar大鼠采用Allen打击法建立脊髓损伤模型,将其随机分为A组（空白对照组）30只、B组（神经干细胞移植组）30只和C组（神经干细胞联合神经营养因子3基因转染的施万细胞移植组）30只。三组大鼠分别于移植前、移植后1、3个月进行BBB评分、皮质诱发电位及神经功能相关指标评估及比较。结果移植后1、3个月B组和C组的BBB评分中0～7分比例（B组：70％、60％,C组：50％、30％）、皮质诱发体感和运动电位[B组皮质诱发体感电位：（201．37±23．06）、（227．63±26．48）μV,C组皮质诱发体感电位：（241．36±27．34）、（278．53±31．46）μV;B组皮质诱发运动电位：（150．23±22．67）、（193．57±27．18）μV,C组皮质诱发运动电位：（186．72±26．83）、（242．57±30．56）μV],均优于A组[90％、90％,皮质诱发体感电位：（53．86±6．75）、（56．96±7．35）μV,皮质诱发运动电位：（32．64±4．07）、（34．15土4．12）μV]。另外,B、C组神经功能相关指标也均明显优于A组,而C组则优于B组,且C组移植后3个月神经功能指标水平明显优于移植后1个月。差异均有统计学意义（均P〈0．05）。结论神经营养因子3基因转染的施万细胞在脊髓损伤大鼠中的作用较佳．有利于脊髓损伤的改善,对改善患者的感觉、运动等指标均发挥着积极作用。     

冷冻预处理温度对胎兔许旺细胞免疫原性的影响

目的探讨不同维持温度冷冻预处理超深低温保存对胎兔许旺细胞免疫原性的影响。方法设未冷冻处理细胞为对照组,实验组细胞设计冷冻维持温度为-30℃,-35℃,-40℃,-45℃,-50℃,-55℃,-60℃,-65℃,-70℃,10%二甲基亚砜（DMSO）为低温保护剂,对胎兔许旺细胞进行冷冻预处理,液氮中保存48h,复温,培养48h后培养液中加入IFN-γ（100U/ml）继续培养72h,流式细胞仪检测许旺细胞MHC-Ⅱ分子的表达率。结果流式细胞仪检测显示各实验组-30℃至-70℃许旺细胞MHC-Ⅱ分子的表达率依次分别是：7.59±0.91,10.43±0.90,14.35±0.73,16.80±0.73,15.41±0.71,14.50±0.73,10.92±0.89,8.36±0.68和5.26±0.76,对照组为35.98±1.06,统计学显示实验组MHC-Ⅱ表达率和对照组之间有显著性差异（P〈0.01）。结论不同维持温度冷冻预处理超深低温保存能降低胎兔许旺细胞的免疫原性。     

人脐带间充质干细胞作为维持人胚胎干细胞生长饲养层细胞的研究

目的寻找可以维持人胚胎干细胞未分化生长的人源性细胞作为饲养层细胞,从而解决使用鼠源性细胞作为饲养层带来的安全问题。方法尝试以人脐带间充质干细胞作为饲养层细胞来培养人胚胎干细胞,检验其是否可以维持人胚胎干细胞的未分化生长状态。用胶原酶消化法分离人脐带间充质干细胞,光镜下观察细胞形态;流式细胞仪检测其表面标志;诱导人脐带间充质干细胞向成骨细胞和脂肪细胞进行分化。将人胚胎干细胞系H1接种于丝裂霉素C灭活后的人脐带间充质干细胞上,每隔5d进行一次传代。培养20代后,对人胚胎干细胞特性进行相关检测,包括细胞形态、碱性磷酸酶染色、相关多能性基因的表达、分化能力。结果从人脐带中分离出的间充质干细胞为梭形,呈平行排列生长或漩涡状生长;细胞高表达CD44、CD29、CD73、CD105、CD90、CD86、CD147、CD117,不表达CD14、CD38、CD133、CD34、CD45、HLA-DR;具有分化成脂肪细胞和成骨细胞的潜能。人胚胎干细胞在人脐带间充质干细胞饲养层上培养20代后,继续保持人胚胎干细胞的典型形态,碱性磷酸酶染色为阳性,免疫荧光染色显示OCT4、Nanog、SSEA4、TRA-1-81、TRA-1-60的...