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中国人丙型肝炎病毒2a型基因组C区基因cDNA的克隆及序列分析 总被引:6,自引:1,他引:5
测定陕西地区丙型肝炎病毒的C区基因序列,为进一步研究HCV的流行病学和开展HCV的诊治打下基础。方法;自行设计合成了两条正向引物和两条反向引物,用反转录PCR法从陕西地区1例NANB型肝炎患者血清中扩增出436bp的片段,将此片段克隆于PGEM-7Zf(+)中用全自动序列分析仪测序。 相似文献
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从广东省1例慢性丙型肝炎病人血清中提取HCVRNA,随机引物逆转录为cDNA后用HCV5’端非编码区(5’NCR)特异引物进行聚合酶链反应(PCR),扩增产物302bp,经补齐和提纯后插入pUC19质粒,获得的重组质粒pUN采用双脱氧链终止法测定核苷酸序列,与国内外多相株比较,核苷酸同源性介乎92.69%~100%,其中与HCVⅡ(1b)型的同源性最大,本文的测序结果可为引物设计提供依据,获得的H 相似文献
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目的 研究日本血吸虫重组疫苗,表达和制备血吸32ku抗原重组疫苗。方法 根据Merekelbach等报道的日本血吸虫中成虫32ku抗原完整编码序列设计引物,以日本血吸虫中国大陆株成虫mRNA为模板,采用逆转录—聚合酶链反应技术,扩增其32ku抗原完整编码区cDNA。将cDNA重组于pGEM-T easy载体上,转化大肠杆菌。结果 重组质粒经测序进行鉴定,结果与Merckelbach等报道的32ku抗原编码区cDNA进行比较,二序列一致。结论 32ku抗原在不同的地区异株间的32ku蛋白进化上存在高度保守性,因此32ku抗原可以作为重组疫苗的候选抗原。 相似文献
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自上海市及江苏省慢性丙型肝炎患者血清中分离丙型肝炎病毒(HCV)RNA,采用自行设计的引物,经逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR),获得长为694bp的C33c抗原基因cDNA,将其克隆于表达载体并作序列分析。结果表明,上海株HCV-S1及江苏株HCV-S2该区域核苷酸水平有很高的同源性(>99%),上海及江苏株HCV与美国原型HCV-1、日本株HCV-J及河北株HCV-HB在该区域核苷酸水平的差异分别为18.64%、5.55%及8.01%~8.17%,氨基酸水平的差异在2.31%~6.02%之间。上海株同一份血清三个独立克隆间核苷酸水平有0.6%~0.9%的差异。本实验为进一步表达C33c蛋白作好了准备。 相似文献
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饰胶蛋白(Decorin)基因的cDNA克隆与表达 总被引:5,自引:0,他引:5
目的 通过基因克隆技术获得饰胶蛋白基因cDNA克隆并表达。为研究饰胶蛋白的生物学功能及应用打基础。方法 应用PCR技术从T细胞cDNA文库获得饰胶蛋白全长基因cDNA片段。并克隆到pUC19载体中,采用Sanger双脱氧末端终止法测定全部cDNA序列,将测序正确的饰胶蛋白cDNA序列插入pGEX-4T-1表达载体中,经BamHI和EcoRI双酶切后1.2%凝胶电泳鉴定,IPTG诱导表达产物经SDS-PAGE分析。结果 克隆的饰胶蛋白cDNA序列与GenBank中AF138300记载的序列完全一致,所表达的融合蛋白质分子量与理论计算值(65.6KD)也一致并为可溶性蛋白。结论 本研究成功地克隆了饰胶蛋白基因和表达了GST-Decorin融合蛋白。 相似文献
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甲型肝炎减毒活疫苗(H2减毒株)口服免疫反应的研究 总被引:1,自引:0,他引:1
选自5个幼儿园和1个小学10个班级SGPT值正常,抗甲肝病毒(HAV)抗体阴性3-9岁儿童193名,进行8个不同批号的甲肝减毒活疫苗(H2减毒株),疫苗剂量为106.5TCID50,口服途径和皮下注射途径免疫的比较,8周血清检测结果表明:口服途径免疫组101名儿童全部未检测到甲肝抗体。皮下注射免疫组的92名儿童中88名(95.5%)有甲肝抗体反应。193名儿童8周SG-PT值全部正常。口服途径不感 相似文献
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卢令格 《首都医科大学学报》1997,18(3):238-241
以小鼠HrscDNA为探针从人胎盘cDNA文库中克隆出人HrscDNA,其全长为2910bp,所编码的蛋白质含777个氨基酸。人HrscDNA与小鼠HrscDNA间高度保守。推定的氨基酸序列含有锌指样结构域、脯氨酸丰富区及脯氨酸、谷氨酰胺丰富区。 相似文献