纳米雄黄对单纯疱疹病毒Ⅱ型的体外抗病毒活性

目的：探讨纳米雄黄对单纯疱疹病毒II型(herpes simplex virus Type II,HSV-2)的体外抗病毒活性。方法： 以阿昔洛韦作为阳性对照,采用噻唑蓝[3-(4,5-dimethyl-2-thiazolyl)-2,5-diphenyl-2-H-tetrazolium bromide,MTT]法观察 不同浓度(200.00,150.00,100.00,50.00,25.00,12.50,6.25,3.13,1.54,0.78,0.39和0 mg/L)纳米雄黄对正常非洲 绿源猴肾细胞(Vero细胞)作用48 h的细胞毒性;空斑法测定病毒滴度,建立病毒感染细胞模型,并采用细胞病变观 察和MTT结合的方法对不同浓度(20.00,10.00,5.00,2.50,1.25,0.63,0.31,0.15,0.08,0.04和0 mg/L)纳米雄黄在 预防、治疗及直接灭活病毒3种给药方式下的抗HSV-2活性进行评价。结果：纳米雄黄对正常Vero细胞的半数细胞毒 性浓度为37.15 mg/L,HSV-2病毒滴度为7.30 log PFUs/mL,纳米雄黄在预防、治疗和直接灭活病毒3种给药方式下对 HSV-2感染细胞的半数有效浓度分别为0.13,1.80和0.52 mg/L,对应的治疗指数分别为285.77,20.64和71.44,纳米雄 黄在预防给药下的治疗指数高于其治疗和直接灭活给药。结论：纳米雄黄在3种给药方式下均具有良好的抗HSV-2活 性,且预防给药的疗效较好。     

ELISA法检测单纯疱疹病毒Ⅱ型特异性抗体的临床应用研究

目的 探讨单纯疱疹病毒Ⅱ型（ＨＳＶ－２）感染的早期特异检测手段。方法 对５２例性病门诊的生殖器疱疹患者改良的ＥＬＩＳＡ方法进行了ＨＳＶ－ｇＤ２ＩｇＧ检测并同细胞分离方法进行对比观察。结果 病毒分离的阳性率为６９．２％,ＥＬＩＳＡ法检测抗体的阳性率６５％,两种方法检测结果差异无显著性。结论：ＥＬＩＳＡ法检测血清疱疹病毒ＩｇＧ抗体具有简便,快速,特异的优点,适合于临床大规模检测之有     

知母宁的体外抗单纯疱疹病毒Ⅱ型作用

目的 检测知母宁体外抗单纯疱疹病毒Ⅱ型(HSV-Ⅱ)作用。方法 以Vero细胞为宿主细胞，阿昔洛韦为阳性对照药物，采用中性红染色法测定不同药物加入方式下知母宁的体外抗HSV-Ⅱ有效率，并检测其抑制病毒作用的时效关系及对病毒感染性的影响。结果 知母宁表现出对HSV-Ⅱ 333的综合抑制作用和抑制病毒吸附后的后续复制增殖作用，其抗病毒有效率(ER％)最高达80％，这两种作用的半数有效浓度(EC50)均约为0．8mg／ml。知母宁浓度≥2．08mg／m1时能显著抑制HSV-Ⅱ，ER％最高达95％。知母宁还有较弱的预防病毒吸附作用。知母宁抗病毒作用的时效关系研究表明，随药物作用时间延长，低浓度药物抗病毒有效率呈减小趋势，在高浓度时(≥2．08mg／ml)其病毒抑制强度基本维持稳定。随药物作用时间延长，知母宁可明显削弱病毒的感染性，知母宁组病毒的-lg TCID50值较病毒对照组的下降值呈增大趋势，其下降百分比维持稳定，约为40％。结论 知母宁体外抗单纯疱疹病毒Ⅱ型效果好，且其抗病毒作用具有多个作用点。     

单纯疱疹病毒Ⅱ型与肿瘤

近年来对单纯疱疹病毒Ⅱ型(HSV-2)引起肿瘤的研究越来越深入,许多临床调查,动物实验和体外细胞培养等均证明了HSV-2确实能引起肿瘤。 1 HSV-2的结构特点 HSV-2呈球状,病毒的囊膜为脂蛋白,衣壳是对称二十面立方体,由162个子粒所组成。HSV属双股DNA病毒,DNA呈线状,二端可以连接成环状结构,后者与病毒的致癌作用及潜伏感染有关。在病毒增殖过程中产生的胸苷激酶(TK)也与潜伏感染有关。HSV-2DNA的分子量为10~8dalton,G+C含量约69％,碱基分布不均一,它是以编码     

黄芪水煎液抗I型单纯疱疹病毒的实验研究

目的 研究黄芪抗I型单纯疱疹病毒(HSV—I)的作用。方法 在人胚肺二倍体细胞系统中，采用对病毒所致细胞病变的抑制实验，观察黄芪水煎液抗HSV—I的药效。结果黄芪水煎液的半数抑制浓度为0．98μg/ml，最小有效浓度为1．95μg/ml，治疗指数为128。结论 黄芪有较显著的抗HSV—I作用，且对细胞毒性低。     

构建单纯疱疹病毒Ⅱ型胸苷激酶基因真核表达载体

从单纯疱疹病毒Ⅱ型（HSV－Ⅱ）Sav株感染的Hep-2细胞培养液和细胞裂解液中提取HSV－Ⅱ基因组DNSA，以此为模板，用PCR方法获取胸苷激酶（TK）基因，将获取的DNA片段克隆入真核表达载体pcDNA3中，筛选阳性克隆测序，结果表明：本研究获取的HSV－Ⅱ－TK基因全部编码区为1128bp，编码376个氨基酸，结果表明：本研究扩增出HSV－ⅡTK基因的全部编码区序列，并成功构建真核表达载体pcDNA3／TK.     

单纯疱疹病毒Ⅱ型胸苷激酶基因旁观者效应的实验研究

目的 :研究单纯疱疹病毒Ⅱ型胸苷激酶基因 (HSV -Ⅱtk)对人原发性肝细胞癌SMMC - 772 1的旁观者效应 .方法 :HSV -Ⅱtk基因通过阳离子脂质体Lipofectin介导 ,体外转染人原发性肝细胞癌SMMC -772 1,孵育 18h .取出细胞及上清液 ,对倍稀释 ( 2× ,4× ,8× ,16× ,3 2× )后分别加入另一 2 4孔板 .结果 :正常SMMC - 772 1细胞的浓度升高 ,亲本细胞的存活率随之降低 ,两者呈明显的负向相关关系 ;细胞组的OD值明显低于上清液组及空白对照组 (P <0 0 1) ;细胞组可见凋亡峰出现 ,而上清液组则无凋亡峰出现 .结论 :HSV -Ⅱtk基因对人原发性肝细胞癌SMMC - 772 1细胞具有旁观者效应 ,其作用机制可能与细胞紧密连接及细胞凋亡有关     

检测痕量单纯疱疹病毒Ⅱ型荧光定量PCR方法的建立

目的 建立一种高敏感度的检测痕量单纯疱疹病毒Ⅱ型(HSV-2)DNA的实时荧光定量PCR方法,为针对HSV-2潜伏感染的治疗性疫苗和抗病毒药物疗效提供一个评价方法。方法 依据HSV-2糖蛋白D(gD)基因序列,使用序列比对软件,选取其保守区序列设计引物及TaqMan探针并进行筛选;以gD基因重组质粒pcDNA3-HSV-2 gD作为标准模板,对该检测方法的反应条件进行优化,提高其检测特异性、敏感度和重现性。结果 该检测方法特异性好,检测的最低拷贝数可达到2个拷贝,线性范围为2×10⁰~2×10⁸拷贝/反应,是普通PCR敏感度的10³倍。该检测方法组间和组内变异系数均低于5%,说明该检测方法具有良好稳定性。结论 本研究建立的TaqMan实时荧光定量PCR方法用于检测痕量HSV-2 DNA具有特异、敏感、定量和重现性好的优点。     

田基黄对大鼠呼吸道及全身免疫功能的影响

目的 :研究田基黄对大鼠呼吸道及全身免疫功能的影响。方法 :将雄性重 2 0 0～ 2 5 0 g Wistar大鼠随机分成对照组与实验组 (每组 n =10 ) ,应用免疫学细胞技术 ,对大鼠呼吸道及全身免疫功能各项指标进行检测。结果 :田基黄能明显提高外周血中性粒细胞 (PMN)吞噬率 (75 .2± 3.9,83.5± 5 .1,P <0 .0 0 1)及 T淋巴细胞百分率 (6 4.8± 5 .4,72 .2± 3.1,P <0 .0 0 1) ;提高支气管肺泡灌洗液 (BAL F)中 T淋巴细胞百分率 (6 0 .4± 6 .3,6 8.8± 6 .5 ,P <0 .0 1) ;对外周血白细胞移行抑制指数 (MI) (0 .45 5± 0 .15 6 ,0 .439± 0 .148,P >0 .0 5 )及肺泡巨噬细胞 (AM)吞噬率 (4 1.8± 5 .8,48.2± 9.5 ,P >0 .0 5 )无明显影响。结论 :田基黄能提高大鼠全身的特异性和非特异性细胞免疫功能 ;对呼吸道局部免疫功能也有一定影响     

松蒿的生药学研究及在茵陈蒿汤中的鉴别

本文研究了松蒿Herba Phtheirospermume japonicum的原植物、性状、显微及理化鉴别性质。其粉末鉴别的突出特征是大而特异的腺毛。松蒿、茵陈、茵陈蒿的乙醇提取液在365nm紫外分析仪下分别呈紫色荧光、紫红色荧光、亮兰色荧光。三者甲酣提取液的薄层层析图谱明显不同。三者分别与栀子、大黄配伍的汤剂(茵陈蒿汤)的薄层层析图谱也不同。     

5—甲基硫代腺苷对培养鼠脑星形胶质细胞反应性胶质化的抑制

观察5—甲基硫代腺苷（5—MTA），作为碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）受体的酪氨酸激酶抑制剂，对反应性星形胶质化的影响。原代培养大鼠星形胶质细胞（AS）行机械刮伤后，应用免疫组织化学及原位杂交法检测增生细胞核抗原（PCNA）、胶质纤维酸性蛋白（GFAP)及其mRNA表达。结果：与对照组相比，损伤后1～2d，实验组AS胞体瘦小。突起短少，增生减弱（PCNA阳性细胞数减少，P＜001），GFAP-mRNA和GFAP表达减弱（P＜O01）。然而损伤后3d，两组的上述指标测定无明显差异。结论：5一MTA对反应性胶质化有可逆抑制作用。     

左旋吡喹酮与吡喹酮治疗慢性日本血吸虫病对比观察

左旋吡喹酮与吡喹酮治疗血吸虫病患者189例和75例。均按30mg/kg的剂量,顿服,治后3个月与6个月粪孵阴转率分别为84.3%、86.5%与71.6%、72.9%;累积阴转率分别为73.5%与60.2%。二组的疗效比较有非常显著差异(p<0.01)。左旋吡喹酮组的无反应率(70.4%)与吡喹酮组(69.1％)比较则无差异(p>0.05)。该两药毒副反应均轻而短暂,无需特殊处理,自行缓解。治疗前与治后肝、肾功能,心电图和血、尿常规检查均无明显变化。临床研究结果证明左旋吡喹酮单剂疗法的疗效优于吡喹酮。我们认为左旋吡喹酮可用于血吸虫病流行区大规模普治     

吡喹酮对日本血吸虫成虫皮层作用的扫描电镜观察

NIH 小鼠感染日本血吸虫尾蚴后35天,用吡喹酮300mg/kg 灌胃治疗,分别于用药后0.5、1、2、4、8、16和32小时经鼠门静脉收集成虫制备扫描电镜标本。用药后0.5～2小时虫体皮层已出现显著损伤,扫描电镜下观察到褶嵴肿胀、融合及类蜂窝样改变。4～8小时一些部位有小片状糜烂或溃破。16～32小时出现较广泛的大片区域坏死和剥脱现象。多于用药后0.5～4小时,虫体皮层的凹陷、洞穴或类蜂样损伤处有淋巴细胞、白细胞和红细胞粘附。     

五味润僵汤对胶原诱导性关节炎大鼠的治疗

目的:探讨蒙药五味润僵汤对胶原诱导性关节炎大鼠治疗。方法:建立Ⅱ型胶原诱导关节炎大鼠模型,采用酶联免疫吸附实验检测各组血清中的IL-6、IL-10。结果:Ⅱ型胶原诱导关节炎大鼠有明显的局部关节肿胀,蒙药五味润僵汤能抑制血清中的IL-6,而上调IL-10水平。结论:蒙药五味润僵汤对胶原诱导性关节炎大鼠有明显疗效。     

体外培养新生大鼠小脑的扫描电镜观察

用扫描电镜观察体外培养新生大鼠小脑颗粒细胞的增殖、迁移和分化。发现颗粒细胞从种植片的边缘沿纤维束或神经胶质细胞向周围迁移。培养的时间愈长,迁移的距离愈远,细胞也愈接近成熟。细胞的突起从无到有,由单突发展到多突。提示体外培养的小脑颗粒细胞仍保留体内细胞的一些生物学特性。     

免疫金银染色法对日本血吸虫31／32KD分子抗原的定位研究

应用免疫金银染色法（ＩＧＳＳ）和免疫酶染色法（ＩＥＳ）对日本血吸虫３ｌ／３２ＫＤ分子抗原进行了比较定位研究。结果证实了日本血吸虫３１／３２ＫＤ抗原是一种肠相关抗原，并进一步验证了常规制备的单特异抗血清用于抗原分析和来源定位的可行性。     

日本血吸虫未成熟卵可溶性抗原诱导抗卵免疫的初步研究

采用日本血吸虫未成熟虫卵可溶性抗原（ＳＩＥＡ）及成熟虫卵可溶性抗原（ＳＥＡ）分别免疫ＢＡＬＢ／ｃ小鼠，发现ＳＩＥＡ诱导小鼠产生显著的抗生殖及抗卵胚发育的免疫力；与对照组比较，ＳＩＥＡ免疫鼠在攻击感染后４６天，肝、肠组织内总虫卵数明显下降，成熟虫卵数和粪卵数分别降低了５９．９８％，６６．８６％和６６．９７％；粪卵下降程度与肝、肠组织中成熟虫卵的减少相一致，ＳＥＡ免疫后未呈现上述效应。     

小鼠阴道疱疹感染与Fas蛋白粘膜上皮细胞中的表达

目的　探讨HSV 2小鼠阴道粘膜面感染后的病理变化和诱导粘膜上皮细胞凋亡的表现,以及Fas蛋白的表达与细胞凋亡的相关关系,有助于阐明HSV 2感染后病毒与细胞相互作用的分子机理,为HSV 2病毒 感染疾病的诊断、治疗提供一定的实验和理论依据。方法将HSV 2接种于小鼠阴道,建立HSV 2阴道粘膜面直接感染动物模型,分不同天数处死,取其阴道固定于10%福尔马林。用HE染色、TUNEL染色研究HSV 2小鼠阴 道粘膜面感染后的病理变化和诱导粘膜上皮细胞凋亡的表现,用免疫组化法研究Fas蛋白分子在阴道上皮细胞中 的表达水平,分析与细胞凋亡的相关关系。结果小鼠阴道HSV 2感染后的粘膜上皮细胞病理学改变为:22份标本 中同时伴有细胞坏死、炎症浸润及凋亡细胞阳性表达,标本中可达粘膜上皮的1/4区域。这些形态改变从实验感 染的第1天至第11天均可见到。小鼠阴道感染HSV 2后,Fas蛋白从感染第3天起可见到表达(22/24)。凋亡细 胞指数与Fas阳性细胞指数呈正相关(r=0.9660,P<0.05)。结论HSV 2直接感染小鼠阴道后可同时引起炎症、 细胞溶解性坏死及诱导阴道上皮细胞凋亡。HSV 2感染小鼠阴道后阴道上皮细胞Fas分子呈高表达,与凋亡细胞 指数呈正相关,提示Fas对HSV 2诱导的粘膜细胞凋亡起上调作用;可进一步研究作为阴?