小鼠多瘤病毒荧光PCR检测方法的建立及其在裸鼹鼠感染情况调查中的应用

目的建立多瘤病毒荧光定量PCR检测方法,并对裸鼹鼠中多瘤病毒感染情况进行调查。方法比较NCBI中小鼠多瘤病毒(Genbank:NC_001515)的核酸序列,选择保守区域设计引物和探针,建立多瘤病毒的荧光定量PCR方法,对方法的敏感性和特异性进行验证。人工感染9只1日龄KM乳鼠,21 d后采集心、肝、脾、肺、肾、脑、胸腺、盲肠内容物和血液等组织脏器,用建立的荧光PCR方法进行检测,验证方法在应用中的有效性,最后用该方法检测62份裸鼹鼠的盲肠内容物样本。结果建立的检测方法特异性好,在以多瘤病毒为模板时出现明显的荧光信号,以猴空泡病毒、小鼠K病毒、小鼠微小病毒和大鼠细小病毒H-1株为模板时无荧光信号出现;方法的最低检出限为100 copies/μL;人工感染小鼠的心、肝、脾、肺、肾和盲肠内容物中均检测到多瘤病毒核酸,其中肺组织中含量最高,脑、胸腺和血液中未检出;62份裸鼹鼠的盲肠内容物样本经检测多瘤病毒为阴性。结论建立的多瘤病毒荧光定量PCR方法可有效检测动物组织中的多瘤病毒,对裸鼹鼠自然感染多瘤病毒的调查为实验用裸鼹鼠微生物标准的制定提供了参考。     

实验动物大、小鼠冠状病毒的血清学调查与分析

实验动物是冠状病毒的重要自然宿主,具有较高的感染率。它可以引起小鼠的病毒性肝炎(MHV),大鼠冠状病毒病(RCV)感染,大鼠涎泪腺炎,猫传染性腹膜炎,还能引起犬和兔的感染。因此,调查目前实验动物的冠状病毒感染情况,对探究SARS病的起源和开展SARS病的防治以及模型研究是十分必要的。1　材料和方法11　大小鼠血清的采集　用摘眼球采血方法对各有关单位的实验大、小鼠进行采血,分离血清并置-20℃以下冰箱保存待检。12　MHV和RCV抗体ELISA检测试剂盒　购自中国药品生物制品鉴定所,该试剂盒由抗原包被板、稀释液、阴性血清对照、阳性血…     

上海地区实验大小鼠肺支原体感染情况调查

目的 了解上海地区清洁级和SPF级实验大,小鼠肺支原体(Mp)的感染情况.方法 采集动物血清、气管中段,分别利用分离培养法、PCR法和ELISA法进行Mp检测.结果 仅SPF 级实验大鼠培养法呈阴性,其它级别大、小鼠三种方法检测结果皆有阳性.培养法检测实验小鼠和大鼠阳性率分别为2.9％和20％,PCR法的阳性率分别为21.4％和27.2％,ELISA法的阳性率分别为6.0％和21.5％.结论 上海地区清洁级和SPF级大鼠和小鼠中存在着不同程度的肺支原体感染.     

乌鲁木齐市2011-2012年度流感监测结果分析

目的对乌鲁木齐市流感监测结果进行分析,了解乌鲁木齐市流感流行动态,为流感防治提供科学依据。方法对2011年4月-2012年3月间乌鲁木齐市哨点医院的流感样病例(influenza-like illness,ILI)资料、流感疫情资料和病原学监测结果进行分析。结果 2011-2012年度全市哨点医院共报告流感样病例(ILI)27 848例,流感样病例就诊百分比(ILI%)平均为10.75%(27 848/259 062)。共采集流感样病例标本977份,核酸检测阳性148份,阳性率15.15%,其中B型104份、新甲型H1N1型22份、H3N2亚型21份、混合型1份。分离出流感病毒31株,分离率20.95%(31/148),以季节性流感B型为主,占64.52%。结论乌鲁木齐市2011-2012年度季节性流感高峰在1-3月,以B型流感病毒为主,H3亚型和新甲型H1N1亚型混合流行。加强流感的实时监测和及易感人群的防护,对我市流感的防控工作具有重要意义。     

台山市2002-2012年麻疹血清学检测与分析

目的分析2002-2012年台山市麻疹流行情况,为预防控制麻疹提供科学依据。方法对2002-2012年台山市麻疹疑似病例,采用ELISA法进行麻疹病毒血清IgM抗体检测,并对病例资料进行描述性分析。结果2002-2012年台山市共采集了疑似麻疹病例血清标本177例,麻疹病毒抗体阳性率为53．7％（95／177）;病例以8月龄～、5~岁和大于20岁年龄组所占比例较高,分别占20．0％、37．9％和28．4％。结论2002-2012年台山市麻疹疫情下降明显。病例主要为8月龄一和大于20岁人群。     

鲁山县2011年呼吸道MP—DNA感染情况调查分析

目的探讨鲁山县呼吸道感染患者肺炎支原体（MP）感染阳性率及男女、季节和年龄段的关系。方法回顾我院2011年全年在呼吸道门诊及儿科门诊就诊的成人及儿科患者11004例。用实时荧光PCR技术对MP-DNA进行检测,将筛查人群对性别、年龄和不同季节的阳性检出率进行比较分析。结果2011年的11004例患者中共检出MP-DNA阳性2400例,阳性率21．81％,支原体感染一年四季均可发生,但有季节性差异,冬季发病率最高,夏季最低,男女发病无明显差异,与年龄段关系明显,特别是14岁以上组阳性率为42．50％（51／120）,其次为1-3岁儿童感染率为26．47％,0-1岁以下儿童感染率最低为14．28％。结论支原体感染在每个年龄段均可发病,儿童发病有提前的趋势：成人也不可忽视,特别是对于长期不明原因的呼吸道感染患者的检测。     

垫江县中医院2012年度细菌耐药使用情况调查分析

目的:对垫江县中医院2012年度细菌耐药使用情况进行调查和分析。方法:回顾性分析本院2012年1～12月期间医院感染的细菌及耐药情况。结果:2012年本院共分离细菌1022株,其中革兰氏阴性菌520株,占50.88%,革兰阳性菌502株,占49.12%,革兰氏阴性杆菌对本院常用抗生素耐药性普遍高于革兰氏阳性杆菌,x2检验差异性显著,p<0.05,提示有统计学意义。结论:临床治疗感染性疾病应根据细菌培养结果合理使用抗生素,加强无菌化操作管理,掌握医院内细菌变化动态,从而减少医院感染。     

2011-2012年医院感染横断面调查分析

目的:了解我院医院感染的特点及动态,评估日常医院感染管理环节的控制效果,为完善医院感染质量控制循环体系提供依据.方法:对2011年12月28日和2012年5月23日0:00~24:00时的所有住院患者进行横断面医院感染现患率调查.结果:两调查日住院患者分别为1445例和1621例,现患率分别为6.23%和4.19%,发生感染例数分别为90例和68例,感染例次分别为95例次和73例次,例次率分别为6.57%和4.50%;医院感染部位均以下呼吸道感染为主,分别占66.32%和58.90%;医院感染病原菌分别以肺炎克雷伯菌和铜绿假单胞菌为主;抗菌药物日使用率分别为52.73%和42.57%.结论:连续进行现患率调查,掌握医院感染变化趋势,有针对性地调整医院感染管理工作的方向,从而不断提高预防和控制医院感染的管理水平.     

2012-2017年河北省围场县国家级人间布病监测点监测情况分析

目的了解2012-2017年围场县布病流行情况,为制定布病防控策略提供数据支持。方法收集2012-2017年围场县人间布病监测数据、健康知识知晓率和健康行为形成率调查问卷等资料,采用EPIDATA 3. 3. 2进行数据库建立和数据的录入;用SPSS 18. 0进行资料统计分析。结果 2012-2017年共进行流行病学调查7 941人,血清学监测3 277人,阳性395人,血检阳性率12. 05%,各年血检阳性率差异有统计学意义(χ~2=1. 729,P <0. 01);男性明显高于女性,且差异有统计学意义(χ~2=26. 988,P <0. 01)。6年来健康知识知晓率和健康行为形成率均呈现上升趋势。结论 2012-2017年围场县布病血清学检查阳性率呈下降趋势;重点人群的健康教育和行为干预是防控布病的有效途径;加大健康教育宣传力度、提高布病健康知识知晓率非常重要,且提高行为正确率是防控布病更有效的手段和措施。     

两种方法对上海及周边地区实验大小鼠螺杆菌携带情况的调查

目的了解上海及周边地区实验小鼠、大鼠螺杆菌携带情况,为我国实验动物等级及监测标准的制定提供参考和依据。方法 PCR法共检测了352只小鼠(清洁级101只,SPF级251只),101只大鼠(清洁级69只,SPF级32只);ELISA法共检测了88只小鼠(清洁级26只,SPF级62只),165只大鼠(清洁级84只,SPF级81只);并对其中88只小鼠、101只大鼠的PCR和ELISA法阳性检测率进行比较。结果 PCR法检测小鼠平均阳性率为35.8%(126/352),清洁级阳性率为51.5%(52/101),SPF级阳性率为29.5%(74/251);大鼠平均阳性率为70.3%(71/101),清洁级阳性率为69.6%(48/69),SPF级阳性率为71.9%(23/32);ELISA法检测小鼠平均阳性率为15.9%(14/88),清洁级阳性率为19.2%(5/26),SPF级阳性率为14.5%(9/62);大鼠平均阳性率为52.7%(87/165),清洁级53.6%(45/84),SPF级51.9%(42/81);88只小鼠PCR法阳性检测率为72.7%(64/88),ELISA法阳性检测率为15.9%(14/88);101只大鼠PCR法阳性检测率为70.3%(71/101),ELISA法阳性检测率为49.5%(50/101)。结论上海及周边地区实验大鼠、小鼠中皆存在着不同程度的螺杆菌感染,两种方法阳性检出率比较结果表明回盲部内容物PCR法较检测血清中抗螺杆菌抗体ELISA法更为敏感。     

蚕蚀性角膜溃疡与带状疱疹病毒感染的相关性研究

目的:探讨蚕蚀性角膜溃疡与水痘-带状疱疹病毒感染的相关性。方法:取48例临床确诊为蚕蚀性角膜溃疡的患者血样进行血清学检测。采用双抗体夹心酶联免疫法(TP-ELISA法)检测血清中特异性带状疱疹病毒抗体。结果:48例患者血清检测带状疱疹病毒感染均为阴性。结论:蚕蚀性角膜溃疡和带状疱疹病毒感染没有相关性。     

深圳市龙岗区2011～2012年流感样病例呼吸道病毒病原学分析

目的 了解深圳市龙岗区流感样病例病原学现况,为呼吸道传染病的预防控制提供依据. 方法 2011 ～2012年采用实时荧光定量PCR法,检测龙岗区801份流感样病例咽拭子样本的流感病毒、腺病毒、鼻病毒、副流感病毒、呼吸道合胞病毒、冠状病毒和人偏肺病毒等7种病毒共15个亚型. 结果 流感样病例的病毒总阳性率为52.4％(420/801),其中FLU-A检出率最高(27.8％),其后依次为FLU-B(15.7％)、HRV(3.6％)、ADV(2.2％)、RSV-A(1.0％)、PIV-1(0.6％)、RSV-B和CoV-OC43(0.4％)、CoV-229E和hMPV-A(0.2％)、hMPV-B(0.1％),而PIV-2、PIV-3、CoV-NL63和CoV-HKU1四个亚型未检出.7种常见呼吸道病毒检出率高峰分别在2011年2月(69.9％)和2012年1月(85.0％).7种常见呼吸道病毒以春夏季多发,春夏季与秋冬季比较差异有统计学意义(p＜0.05).FLU以春夏季多发,春夏季与秋冬季比较差异有统计学意义(P＜0.05); HRV以冬季多发,冬季与春夏秋季比较差异有统计学意义(P＜0.05);ADV、PIV、RSV、CoV、hMPV全年基本为散发分布.不同年龄组的病毒阳性率差别有统计学意义(P＜0.05),其中,其中0～4岁组7种常见呼吸道病毒均有检出,5岁以上组主要以FLU为主. 结论 加强常见呼吸道病毒监测对呼吸道传染病的防控具有重要意义.     

BK病毒相关性肾病的诊治特点及相关临床因素分析

目的 了解BK病毒相关性肾病(BKVAN)在肾移植受者中的发病情况,观察BKVAN的病理特点。方法 对1999年12月至2008年1月中山大学附属第一医院行移植肾穿刺活检的137份组织标本进行BK病毒的免疫组织化学染色,并对免疫组织化学阳性的肾组织标本及尿中脱落的肾小管上皮细胞进行透射电子显微镜检查,了解BKVAN的发病相关因素、临床表现、诊治特点及预后。应用Kaplan-Meier分析计算BKVAN患者1、3年移植肾存活率。结果 137份移植肾标本中共诊断BKVAN 16份（分属16例患者）,占11.7％。其中3份肾组织和7份尿沉渣肾小管上皮细胞核内发现直径为35 ～40 nm的病毒颗粒。16例BKVAN患者既往发生过急性排斥反应及使用过多/单克隆抗体者各7例,免疫抑制方案为他克莫司+酶酚酸酯的10例,14例表现为血清肌酐升高类似急性排斥反应。4例患者在使用强效免疫抑制剂后移植肾失功能,8例患者接受减少免疫抑制剂或转换免疫抑制剂治疗后肾功能得到改善,其余4例患者免疫抑制方案未予调整最终移植肾功能恶化或失功能。BKVAN受者1、3年移植肾存活率分别为81.3％、54. 2％。结论 对于移植后肾功能减退,尤其是有BKVAN高危因素者,要考虑到BKVAN的可能。而BKVAN的临床及病理表现与急性排斥反应相似,免疫组织化学方法或电镜可以鉴别。正确的、适量的减少免疫抑制剂强度治疗BKVAN效果好,相反可加快BKVAN的进展。     

某校大学生乙型肝炎血清学标志物检测结果分析

目的了解目前大学生乙型肝炎的感染情况,探讨在大学生中乙肝病毒血清标志物的表现模式及其构成比,不同模式的传染性及流行病学意义。方法采用分层抽样法抽取某校227名在校大学生,用酶联免疫试验方法（ELISA）检测血清乙肝病毒表面抗原（HBsAg）、乙肝表面抗体（抗-HBs）,乙肝病毒e抗原（HBeAg）,乙肝病毒e抗体（抗-HBe）,乙肝病毒核心抗体（抗-HBc）,同时配以相应的问卷调查,收集相关的信息。用卡方检验分析乙肝总阳性率与各因素的关系。结果 227份血清标本检共出HBV血清标志物171份,总阳性率为75.3%。其中HBsAg阳性率为3.1%,抗-HBs阳性率为72.2%,HBeAg阳性率为1.3%,抗-HBe阳性率为5.3%,抗-HBc阳性率为11.0%,同时组成9种血清学模式。分析发现与乙肝总阳性率有关的因素有：是否接种过乙肝疫苗（χ2=16.646,P〈0.05）,来自农村还是城市（χ2=4.239,P〈0.05）。结论调查的大学生HBsAg携带率低于全国平均水平,抗-HBs阳性率高于全国平均水平,乙肝疫苗的接种有效地降低了乙肝感染率。     

驻京部队2009-2012年新兵结核感染状况调查

目的了解近年来入伍新兵结核感染变化趋势,为部队防治结核病提供科学依据。方法于2009—2012年连续4年对驻京部队入伍男性新兵进行结核感染率调查,同时查验双上臂是否有卡介苗接种疤痕,计算结核自然感染率。结果入伍新兵结核菌素试验阳性率为48．5％一58．0％,平均为52．0％,新兵结核菌素试验阳性率呈缓降趋势。强阳性率为2．2％一4．1％,平均为3．0％,强阳性呈缓降趋势。新兵结核自然感染率为25．2％～27．5％,平均为26．3％,平均年感染率为1．59％。新兵自然感染率4年中差异无统计学意义（黔0．05）。结核感染率农村新兵为25．2％,城市新兵为27．7％。城市籍新兵自然感染率和年感染率高于农村籍新兵。结论结核自然感染率近年来无明显变化,是军队结核病发病率居高不降的主要原因。     

广西环江县2011～2012年食源性致病菌监测分析

目的了解环江县食品中食源性致病菌的污染状况,为食源性疾病的监测和预警提供科学依据。方法2011年和2012年共采集环江县食品样本10类186份,对沙门氏菌、志贺氏菌、阪崎肠杆菌、蜡样芽胞杆菌、单增李斯特菌、大肠埃希菌0157：H7、金黄色葡萄球菌、空肠弯曲菌、副溶血性弧菌9种食源性致病菌进行监测分析。结果186份食品中,检出食源性致病菌9株,总检出率4.8%。婴幼儿食品的污染情况最为严重,食源性致病菌的检出率为15.6%,其次是熟肉制品,检出率为9.4%,熟制米面制品检出率为4.5%,其它食品未发现食源性致病菌。结论蜡样芽胞杆菌对环江县食品的污染最为严重,其次是阪崎肠杆菌。婴幼儿食品、熟肉制品、熟制米面制品是导致食源性疾病的潜在高危食品。     

柳州市2011-2015年乙型流感病毒感染状况分析

目的：分析柳州地区人群乙型流感病毒(IVB)感染状况,为流感的防控提供依据。方法将2011年1月至2015年12月在柳州市柳铁中心医院就诊的13075例呼吸道感染患者纳入研究,采用间接免疫荧光法检测血清IVB-IgM抗体,分别按性别、年龄、季节、年份进行分组,统计分析各组IVB感染率。结果五年IVB总感染率为12.88%。男、女感染率分别为10.70%,16.97%,差异有统计学意义(P<0.05);各年龄组感染率比较差异有统计学意义(P<0.05),其中儿童（3~6岁）组感染率最高,达31.34%;各年份间感染率比较差异有统计学意义(P<0.05),2013年感染率高于其他年份;IVB感染率季节性比较差异有统计学意义(P<0.05),全年春夏季为乙型流感好发期。结论 IVB是柳州地区人群呼吸道感染的重要病原。IVB感染有年龄、性别、季节性差异,应针对性的制定预防措施。     

小鼠脑脊髓炎病毒自然感染调查以及人工感染小鼠试验

目的了解小鼠脑脊髓炎病毒(TMEV)自然感染情况,探究人工感染TMEV小鼠体内各脏器组织中病毒分布及血清抗体变化。方法采用酶联免疫吸附试验(ELISA)和荧光定量RT-PCR(qRT-PCR)检测方法对2010年~2015年广东地区采集的SPF级小鼠、开放环境饲养的小鼠以及野生褐家鼠临床样本进行TMEV检测。36只ICR小鼠经脑内接种TMEV BeAn病毒,每天观察动物的临床症状,在接种第0、3、7、10、17、21、31、39、46天每个时间点分别对3只动物安乐死,剖检并取血清和组织脏器样本进行TMEV检测。结果 SPF级小鼠TMEV抗体阳性率为5.29%(n=2834),核酸阳性率为27.27%(n=457);开放环境饲养的小鼠的抗体和核酸阳性率分别为71.95%(n=82)和53.66%(n=82);野生褐家鼠中核酸阳性率为25.93%(n=27)。TMEV阳性小鼠中仅有两只小鼠表现有明显的临床症状。盲肠内容物、粪便和脑是qRT-PCR检测的最佳选择样本。ICR小鼠脑内接种TMEV BeAn病毒后第3 d可在脑、心脏、肝脏、肺脏和胃中检测到病毒核酸,脾脏、肾脏和盲肠中未检测到病毒核酸。肝脏、心脏、肺脏和胃中的病毒在接种后第10天已完全清除,脑中的病毒一直持续存在到第46天试验结束。小鼠感染后第7天可以检测到抗体,随后抗体水平逐渐升高,接种后17 d抗体阳性率达100%,并一直到46 d都可以维持较高的抗体水平。人工感染小鼠呈隐性感染,临床上并未表现明显症状和眼观病理变化。结论广东地区实验小鼠和野生褐家鼠均存在TMEV感染,且感染率较高。小鼠接种TMEV BeAn毒株后呈隐性感染,感染小鼠第7天可以产生抗体且持续存在。病毒在感染小鼠肝脏、心脏、肺脏和胃中短时间存在,而在脑中长期存在。qRT-PCR与ELISA两种检测方法具有较好的一致性,qRT-PCR检测方法可作为实验动物国家标准的有力补充。     

山东省立医院2011-2013年门诊及住院患者乙型肝炎病毒感染状况分析

目的 分析山东省立医院门诊及住院患者乙肝五项定量检测结果,了解患者的乙肝感染状况,为乙肝的防治提供理论依据.方法 采用电化学发光免疫分析法对2011-2013年226 193例门诊及住院患者进行乙肝五项定量检测,分别按年份、性别、年龄和乙肝五项模式进行分组,应用SPSS 21.0统计软件进行统计分析.结果 共检出HBsAg阳性14 069例,HBsAg阳性率为6.22％(14 069/226 193).2011-2013年HBsAg阳性检出率分别为6.64％(4974/74 959)、6.18％ (4410/71 399)、5.87％ (4685/79 835),呈逐年下降趋势.男性HBsAg阳性检出率为7.43％(8855/119 181),明显高于女性的4.87％(5214/107012).0～19岁年龄组HBsAg阳性率最低,为1.28％ (364/28 355);30～39岁年龄组HBsAg阳性率最高,为8.21％ (2694/30 129).共检出12种乙型肝炎病毒感染模式,“乙肝小三阳”检出率最高,为60.63％ (8530/14 069);其次为“乙肝大三阳”,检出率为26.05％ (3665/14 069);再次为1、3、4、5阳,1、5阳,1、2、4、5阳,1、2、3、5阳,检出率分别为5.52％ (777/14 069)、2.84％ (400/14 069)、2.04％(287/14069)、1.26％(177/14069);还检出了6种罕见模式:1阳,1、2、3、4、5阳,1、3阳,1、2、5阳,1、2阳,1、2、3阳,检出率均低于1％,分别为0.80％(113/14069)、0.46％ (65/14 069)、0.23％(33/14069)、0.08％(11/14069)、0.07％ (10/14 069)、0.01％(1/14069).结论 山东地区乙肝感染具有性别差异、年龄差异,且呈逐年下降趋势,感染模式以小三阳和大三阳为主,多种感染模式并存.     

2012-2014年北京西城区家庭医生式服务调查分析

目的 了解居民对家庭医生式服务的认知度与签约率,为政府主管部门提供决策依据.方法 对2012-2014年北京西城区家庭医生式服务进行调查,采用方便抽样的方法,在社区卫生服务机构现场对患者开展问卷调查.结果 2012-2014年北京西城区居民对家庭医生式服务的认知度和签约率逐年上升.性别、年龄、户口、文化程度和是否患有慢性病是影响家庭医生式服务的认知度和签约率的主要因素.结论 建议加强家庭医生式服务的宣传力度,树立品牌家庭医生形象,创新运行机制,保障家庭医生式服务有力推进.