肝癌瘤苗激活的TIL对K562细胞杀伤活性的研究

目的：为也提高ＴＩＬ的抗肿瘤细胞活性。方法；使用冷冻方法制成肝癌瘤苗。用于激活ＴＩＬ，观察基杀伤Ｋ５６２细胞活性的改变。结果：经瘤苗激活的ＴＩＬ在培养扩增１０天，２０天，３０天和４０天对Ｋ５６２细胞的杀伤率均有明显提高，其中以培养扩增３０天时为最高。     

肝癌瘤苗激活的肿瘤浸润性淋巴细胞对血清sIL-2R水平的影响及意义

目的：为了探讨肝癌瘤苗激活的肿瘤浸润性淋巴细胞（ＴＩＬ）对原发性肝癌（ＰＨＣ）患者血清可溶性白介素－２受体（ｓＩＬ－２Ｒ）的影响及意义,方法：使用冷冻方法制成肝癌瘤苗,用于激活ＴＩＬ。对２２例原发性肝癌患者使用经肝癌瘤苗激活的ＴＩＬ治疗,并应用双抗体夹心ＥＬＩＳＥＡ法检测治疗前后ｓＩＬ－２Ｒ水平变化以及与对照组相比较,结果：用经肝癌瘤苗激活的ＴＩＬ治疗者,其血清ｓＩＬ－２Ｒ水平下降幅度最大。用未经     

肿瘤浸润性淋巴细胞的体外培养及对肿瘤细胞的杀伤作用

目的：观察肿瘤浸润性淋巴细胞（ＴＩＬ）体外扩增速度及对肿瘤细胞的杀伤作用。方法：肿瘤组织经处理后，用淋巴细胞分离液可分离得到ＴＩＬ，用含ｒＩＬ２的完全培养基培养ＴＩＬ，并作ＴＩＬ对肿瘤细胞的杀伤率。结果：培养４０ｄ的黑色素瘤ＴＩＬ，扩增达９７７３倍。ＴＩＬ对黑色素瘤、卵巢囊腺癌、大网膜转移性腺癌和癌性腹水等自体瘤细胞的效靶比例为４０∶１时，培养１５ｄ的ＴＩＬ对肿瘤细胞的杀伤作用明显高于２０∶１；当效靶比例相同（２０∶１）时，培养２０ｄ的ＴＩＬ对肿瘤细胞的杀伤作用高于１５ｄ，而在４０∶１时培养２０ｄ与１５ｄ的杀伤率无差别。ＴＩＬ对Ｋ５６２肿瘤细胞株也有较强的杀伤作用。结论：ＴＩＬ在含ｒＩＬ２的完全培养基中可大量扩增，ＴＩＬ对肿瘤细胞的杀伤作用与效靶比例及培养时间有关。     

树突状细胞激活的肿瘤浸润性淋巴细胞体外对自体肝癌细胞杀伤活性的研究

目的:探讨树突状细胞(DC)激活的肿瘤浸润性淋巴细胞(TIL)体外对自体肝癌细胞杀伤活性.方法:从肝癌患者外周血获取DC,应用粒/巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)、白细胞介素-4(IL-4)和肿瘤抗原激活DC,然后用DC来激活TIL,观察TIL在体外对自体肝癌细胞的杀伤活性.结果:DC激活的TIL具有很高的对自体肝癌细胞杀伤活性,杀伤率为(89.39±3.05)%,明显高于未经DC激活的TIL、CD激活的T淋巴细胞和未经DC激活的T淋巴细胞对自体肝癌细胞的杀伤率.结论:肝癌患者外周血DC能诱导TIL产生高效而特异的抗肝癌免疫.     

树突状细胞激活的肿瘤浸润性淋巴细胞体外对自体肝癌细胞杀伤活性的研究

目的探讨树突状细胞(DC)激活的肿瘤浸润性淋巴细胞(TIL)体外对自体肝癌细胞杀伤活性.方法从肝癌患者外周血获取DC,应用粒/巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)、白细胞介素-4(IL-4)和肿瘤抗原激活DC,然后用DC来激活TIL,观察TIL在体外对自体肝癌细胞的杀伤活性.结果DC激活的TIL具有很高的对自体肝癌细胞杀伤活性,杀伤率为(89.39±3.05)%,明显高于未经DC激活的TIL、CD激活的T淋巴细胞和未经DC激活的T淋巴细胞对自体肝癌细胞的杀伤率.结论肝癌患者外周血DC能诱导TIL产生高效而特异的抗肝癌免疫.     

原发性膀胱癌肿瘤浸润淋巴细胞体外抗肿瘤作用的研究

目的探讨原发性膀胱癌肿瘤浸润淋巴细胞（ＴＩＬ）的体外抗肿瘤作用。方法采用ＬＤＨ释放法。结果该ＴＩＬ对自体肿瘤靶细胞的最高杀伤活性第３０天时为７２．４％,且呈现一定的靶细胞特异性。结论膀胱癌ＴＩＬ在体外经ＩＬ－２培养后对自体肿瘤细胞具有明显的杀伤活性,并显示一定的靶细胞特异性     

恶性肿瘤胸腹水中TIL的体外扩增及抗肿瘤作用

目的 探讨恶性肿瘤胸腹水中肿瘤浸巴细胞（ＴＩＬ）的体外诱导扩增及其抗肿瘤作用。方法 用不连续密度梯度离心法从９例癌性胸水和６例癌性腹水中提取ＴＩＬ进行体外导培养，同时用ＭＴＴ单波长比色法测定ＴＩＬ的活性。结果 ＴＩＬ对自体肿瘤靶细胞的杀伤活性达７６５％以上，且呈现一定的靶细胞特异性，体外扩增可达１１００倍。结论ＴＩＬ对肿瘤细胞有明显的杀伤活性，共活性高峰期在诱导培养的７－１５ｄ。     

恶性肿瘤胸腹水中TIL的体外扩增及抗肿瘤作用

①目的探讨恶性肿瘤胸腹水中肿瘤浸润淋巴细胞（ＴＩＬ）的体外诱导扩增及其抗肿瘤作用。②方法用不连续密度梯度离心法从９例癌性胸水和６例癌性腹水中提取ＴＩＬ进行体外诱导培养，同时用ＭＴＴ单波长比色法测定ＴＩＬ的活性。③结果ＴＩＬ对自体肿瘤靶细胞的杀伤活性达７６％以上，且呈现一定的靶细胞特异性，体外扩增可达１１００倍。④结论ＴＩＬ对肿瘤细胞有明显的杀伤活性，其活性高峰期在诱导培养的７～１５ｄ．     

原发性肝癌肿瘤浸润淋巴细胞的抗肿瘤活性

对原发性肝癌的肿瘤浸润淋巴细胞进行了研究。用中性红摄入法测其对靶细胞的杀伤活性，ＡＰＡＡＰ桥联免疫酶标法测ＴＩＬ的亚型。结果表明：经ＩＬ－２体外诱导的ＰＨＣ－ＴＩＬ具有较哟的抗肿瘤活性，且较ＡＫ细胞明显强，ＰＨＣ－ＴＩＬ对自体肿瘤的杀伤活性明显高于对同种异体肿瘤的杀伤活性。     

肝癌瘤苗激活的TIL对原发性肝癌患者免疫功能的影响

目的：探讨经肝癌瘤苗激活的TIL对原发性肝癌（下称肝癌）患者免疫功能的影响。方法：使用冷冻方法制成肝癌瘤苗，用于激活TIL。并钭经肝癌瘤苗激活的TIL用于26例肝癌患者的治疗，检测治疗前后其CD3、CD4、CD8、CD4／CD8比值，并与对照组相比较。结果：应用经肝癌瘤苗激活的TIL治疗的肝癌患者，其CD3、CD4、CD8、CD4／CD8比值明显升高，CD8则明显下降，经与对照组比较差异有统计学意义（P＜0．01）。结论：应用经肝癌瘤苗激活的TIL治疗肝癌患者，能明显提高肝癌患者的免疫功能。     

肝癌疫苗激活的TIL细胞对原发性肝癌患者的NK细胞活性的影响及意义

目的：探讨经肝癌疫苗激活的肿瘤浸润性淋巴细胞(tumor infiltrating lymphocytes,TIL)对原发性肝癌患者NK细胞活性的影响。方法：使用冷冻方法制成肝癌疫苗，用于激活TIL细胞。对26例原发性肝癌患者使用经肝癌疫苗激活的TIL细胞治疗，检测其治疗前后．NK细胞活性的变化，并与对照组相比较。结果：应用肝癌疫苗激活的TIL细胞的患者，其NK细胞活性明显提高。结论：应用肝癌疫苗激活的TIL细胞，能明显地提高原发性肝癌患者的NK细胞活性。     

肝癌癌周组织淋巴细胞和TIL的分布及抗瘤活性的研究

目的：研究肝癌癌周组织淋巴细胞和肝癌TIL的分布及抗瘤活性，方法：用冷胶原酶消化分离法来分离肝癌癌周组织淋巴细胞及肝癌实质部和中心部TIL并测定它们的获得率，用^3T-TdR释放法测定它们对自体肝癌细胞的杀伤活性。结果：肝癌实质部TIL获得率最高，肝癌癌周组织淋巴细胞获得率次之，肝癌中心部TIL获得率最低，它们对自体肝癌细胞的杀伤活性从高到低则分别为肝癌实质部TIL，肝癌中心部TIL和肝癌癌周组织淋巴细胞，结论：肝癌癌周组织和肝癌组织不同部位的淋巴细胞分布有所不同，它们的抗瘤活性也各不相同，为了获得数量多和抗瘤活性高的淋巴细胞，应尽量从肝癌实质部来分离获取。     

肝癌癌周组织淋巴细胞和TIL的分布及抗瘤活性的研究

目的研究肝癌癌周组织淋巴细胞和肝癌TIL的分布及抗瘤活性。方法用冷胶原酶消化分离法来分离肝癌癌周组织淋巴细胞及肝癌实质部和中心部TIL并测定它们的获得率。用     

PHA及rhIL－2对新鲜分离肝癌细胞体外实验观察

本文从本院外科８例肝脏病人，合并肝门静脉高压行肝叶切除的肝组织，分离培养肝癌细胞。其中４例见肝癌细胞生长。对其中１例新鲜分离肝癌细胞中加入植物血凝素（ＰＨＡ）及重组人白细胞介素－２（ｒｈＩＬ－２），培养３天后发现，原来成片成堆生长的肝癌细胞逐渐减少，细胞结构破坏，７－９天后在细胞消失，周围淋巴细胞增多。未加ＰＦＡ及ｒｈＩＬ－２３例肝癌细胞生长旺盛，而周围淋巴细胞却逐渐减少消失。提示：ＰＨＡ及，ｒｈＩＬ－２对肝癌细胞周围淋巴细胞有刺激生长作用，对自体肝癌细胞有抑制作用。     

葡萄球菌肠毒素A脂质体激活肿瘤浸润淋巴细胞抗肿瘤活性的实验研究

目的　研究葡萄球菌肠毒素 A(SEA)脂质体 (L- SEA)体外激活肿瘤浸润淋巴细胞 (TIL)抗肿瘤的活性。方法　从 5例原发性肝癌患者癌组织中分离培养 TIL,分别以 L- SEA、SEA和 IL- 2刺激后 ,观察 TIL 的增殖曲线 ,EL ISA法检测细胞因子的分泌 ,流式细胞仪检测细胞亚群的变化 ,MTT法检测 TIL 的肿瘤杀伤活性。结果　L- SEA、SEA及 IL- 2均能有效刺激 TIL 的增殖 ,最高增殖倍数分别为 4 2 .5、5 1、12 .5倍。除第 4 d L- SEA组 TIL 的IFN- γ水平低于游离 SEA组外 ,此两组的细胞因子分泌没有显著性差异 (P>0 .0 5 ) ,且都高于 IL- 2组。 L- SEA刺激后 ,TIL 的 CD8+细胞亚群增殖更快 ,CD4 +细胞 / CD8+细胞出现倒置。经过 L- SEA培养后的 TIL 能有效杀伤Hep G- 2肿瘤细胞。结论　 L- SEA仍然具有游离 SEA的刺激 TIL 增殖、分泌细胞因子、杀伤肿瘤细胞的活性。     

Induction of antitumor activity and experimental expansion of human lung cancer-infiltrating lymphocytes.

In order to look for effector cells which are more efficient and less toxic than LAK cells induced from PBL for use in adoptive immunotherapy, we studied the antitumor activity and in vitro expansion of tumor infiltrating lymphocytes (TIL) from human lung cancers and compared their cytological properties with those of autologous PBL. The results showed: 1) Large numbers of TIL could be obtained from lung cancer tissue, approximately 1-5 x 10(8)/g tumor tissue, with an average TIL to tumor cell ratio of 2.3:1 (21 samples). 2) Fresh TIL were not cytotoxic against either NK-sensitive or -resistant tumor targets. After culturing for 6 to 8 d in the presence of rIL-2, TIL showed significant cytotoxicity and were able to kill autologous and allogeneic tumor targets and fresh solid tumor targets. 3) When maintained in the presence of rIL-2, TIL were able to continue proliferating and expanding for more than 2 mon, with expansion indices of 4-512. TIL stopped proliferating following the disappearance of autologous tumor cells in the culture. 4) Chronological studies revealed that the cytotoxicity appeared after 4 days in culture and reached a peak on the 14th day, and cultured TIL remained cytotoxic for at least 4 wk.     

IL-2激活的TIL对自体肿瘤细胞的杀伤活性及其与LAK细胞活性的比较

肿瘤浸润性淋巴细胞(TIL)经白细胞介素2(IL-2)体外培养后具有很强的体内外抗肿瘤作用,且有一定的靶细胞特异性,其抗肿瘤效果强于淋巴因子激活的杀伤细胞即LAK细胞(P<0.01)。从瘤体中新鲜分离到的TIL对自体肿瘤细胞的杀伤活性极低,经IL-2体外培养后,其杀伤活性逐渐增高,以培养至7～25d的杀伤活性最强,这与IL-2使TIL分泌3种抗癌淋巴因子包括IL-2、IFN-γ、淋巴毒素(LT)增加有关。体外培养25d后,TIL的抗肿瘤活性下降,实验表明这与培养过程中TIL的Lyt-2~+细胞(Tc)减少而L3T4~+细胞(T_H)增多有关。TIL经冻存复苏和IL-2体外培养后仍保持很强的抗肿瘤活性,冻存前后比较未见显著差异(P>0.05),这为间断地运用TIL治疗复发性、晚期肿瘤提供了一条可行的途径。