浅谈实验室细菌菌种的保存

在微生物学、环境科学、分子生物学、毒理学、酶学、疫苗制备、药品生产等等领域的实验过程中，都需要应用各种细菌，储备标准菌种、参考菌种、特殊菌种是必不可少的，下面就几种实验室菌株的保存方法简述如下。     

药敏试验结果在细菌鉴定中的应用

随着对细菌耐药性研究的不断进展，抗菌药物敏感试验结果与细菌种类之间的关系亦越来越密切。通过一些药敏试验结果可以修正或者确认某些菌种；同样，利用已知的菌株鉴定亦可以推测所试菌株的抗生素敏感表型，现总结如下。     

棉棒吸附法保存菌种方法探讨

在微生物实验室中,菌种的保存是一项不可缺少的重要工作.在日常工作中从样品中分离出的有价值菌株需要进行分析研究,诊断用品的制备,菌苗的生产,药物的抑菌试验等都需要保存一套比较完整的菌种.现在常用的菌种保存方法有培养基保存法、真空冷冻干燥法等,不论哪种方法均以保存时间长、菌种不变异,操作简便为最佳标准.由于工作的需要于2000年8月-2005年 2月,经多次试验摸索出以棉棒为载体的大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞杆菌、沙门氏菌、志贺氏菌等棉棒菌种保存法,同时与冷冻真空干燥法进行了比较,通过不同保存时间对细菌存活率菌落形态、染色、生物反应的观察比较,证实棉棒保存法与真空冷冻干燥法结果相同令人满意,该方法简便,且易于掌握,适用于基层疾病预防控制中心的菌种保存工作,有实际推广应用价值.     

1,844株临床菌株的药物敏感试验

抗菌药物的广泛应用,导致耐药菌株日趋增多。细菌对抗菌药物的敏感试验结果是临床选用有效抗菌药物的重要依据,也是了解细菌对抗菌药物敏感程度的可靠依据。本文就1,844株临床菌株对常用抗菌药物的敏感试验结果报道如下。     

介绍二种简便的菌种保存方法

菌种是所有与微生物有关的专业教学、科研、质控以至生产的必要条件。而菌种的保存是医学微生物实验室的一项重要工作。在细菌实验室中，用于研究材料的是某一系统的微生物-菌株。每株菌种的性质各个相同，其基础的研究和病原微生物的研究必须依靠菌种的重复实验。要使菌种长期保存，保持遗传性     

连续5年血液培养的细菌分布情况及耐药结果分析

目的:了解医院血培养菌谱变化并对抗菌药物的耐药情况进行分析,为临床治疗菌血症和败血症提供实验室依据。方法:采用美国BD公司的BACTEC9120进行血液培养,细菌鉴定用法国生物梅里埃的API系列和VITEK2仪器,药敏实验采用K-B纸片扩散法,用2006版临床及实验室标准研究院(CLSI)标准对结果进行判定,药敏结果用WHONET5.3软件进行分析,数据统计用SPSS11.5软件。结果:11874份血液与骨髓标本,阳性标本数1789瓶,阳性率为15.1%。1468例患者培养阳性,细菌38种1375株,其中革兰阳性球菌743株,占分离菌株的50.7%,革兰阴性杆菌565株,占分离菌株的38.5%;真菌8种93株,占分离菌株的6.3%。葡萄球菌、肠球菌、大肠埃希菌、铜绿假单胞菌、肺炎克雷伯菌药敏结果,除葡萄球菌对万古霉素100%敏感外,其余抗菌药物均有不同程度的耐药。结论:血培养分离的细菌菌种多样化,以革兰阳性菌为主,分离前几位的细菌耐药率较高,提示临床医生应多做血培养,得到病原学资料,并对细菌进行耐药性监测,以便合理应用抗菌药物。     

军队师以上干部感染病原菌分布及药物敏感性分析

目的了解军队师以上干部感染病原菌分布及药物敏感性情况,指导临床合理选择抗菌药物。方法分离细菌经鉴定后,采用微量肉汤稀释法进行药敏试验,采用SPSS 17.0软件进行统计分析,按临床实验室标准化协会(CLSI)判断药物敏感率。结果 420株病原菌经鉴定有59种,其中革兰阴性菌358株,占85.24%;分离率前10位的菌株有315株(占75.00%),以大肠埃希菌和铜绿假单胞菌为首;分离前5位的细菌中肺炎克雷伯菌对抗菌药物的敏感率较高,而大肠埃希菌、铜绿假单胞菌、金黄色葡萄球菌和鲍氏不动杆菌仅对少数几种抗菌药物敏感,对多种抗菌药物的敏感率<60%。结论军队师以上干部感染病原菌以革兰阴性菌为主,对病原菌敏感的抗菌药物种类少且常呈多药耐药,及时掌握该就医群体常见病原菌及药敏情况可为感染治疗提供有力的依据,有助于临床合理选用抗菌药物。     

2008-2010年血培养细菌分布与耐药性变迁

目的了解我院2008-2010年血培养细菌的菌种分布、科室分布及耐药变迁特点,为临床合理使用抗生素提供依据。方法患者血液培养标本经BACTEC9050血培养仪培养,分离所得菌株用美国德灵公司Microscan-walkaway96全自动微生物鉴定仪进行菌株鉴定和药敏实验。结果连续三年凝固酶阴性葡萄球菌分离率居首位,大肠埃希氏菌居第二位,肺炎克雷伯菌、金黄色葡萄球菌、鲍曼/溶血不动杆菌、铜绿假单胞菌是导致血液感染的主要病原菌;大肠埃希氏菌和肺炎克雷伯菌对亚胺培南100%敏感,对哌拉西林/他唑巴坦、阿米卡星较敏感,但对两药耐药率呈逐年上升趋势;各类抗菌药物对鲍曼不动杆菌和铜绿假单胞菌耐药率较高,呈逐年上升趋势,且出现泛耐药菌株;血培养阳性球菌中未发现耐万古霉素和利奈唑胺的金黄色葡萄球菌、凝固酶阴性葡萄球菌和肠球菌。结论血液培养的细菌种类多样,且分离率居前几位细菌的耐药率较高。临床和实验室应加强血流感染细菌的耐药性监测。     

鲁西南地区产超广谱β—内酰胺酶菌株的调查及药敏分析

目的 了解鲁西南地区产超广谱β-内酰胺酶菌株的产生情况及其对常用抗菌药物敏感性。方法 对我院细菌室标本中分离到的肠杆菌科及铜绿假单胞菌,采用纸片扩散法进行ESBL检测,同时比较了亚胺培南等12种常用药物对82株细菌的体外抗菌作用。结果 肠杆菌科细菌产ESBL株1997－1999年分别为3％、7％、29％;铜绿假单胞菌产ESBL株1997－1999年分别为9％、11％、16％,在12种抗菌药物中,亚胺培南的体外抗菌活性最好,总的敏感率为100％,其次为阿米卡星。结论 鲁西南地区产ESBL,菌株有逐年增多的趋势。     

细菌药敏试验与临床疗效的探讨

近年来,由于各种抗菌药物的大量应用,尤其是广谱及超广谱抗菌药物的应用,造成了耐药性突变菌株的大量出现,临床上表现为经验用药失败率增高,盲目大剂量治疗也易造成药物中毒.因此,临床微生物实验室的一项重要任务就是对病原菌进行药物敏感试验,测定细菌对药物的敏感程度,这对临床医师合理选用抗菌药物,及时有效地控制感染,预防耐药菌株的出现,具有重要的临床意义.针对这一问题,笔者谈几点自己的见解.