抗原负载的树突状细胞疫苗与肿瘤免疫治疗

<正> 免疫识别与免疫逃避是恶性肿瘤发病机理及防治中的关键矛盾,它决定着免疫反应的有无和强弱。在重建免疫识别的方法中,树突状细胞(Dendritic clells,DC)负载肿瘤相关抗原已经成为肿瘤治疗研究的热点。 树突状细胞的生物学特性 1 DC的来源及分类 Steinman和Cohn1973年从小鼠脾脏中分离出来一种新型细胞,根据其最初从淋巴器官分离,且具有树状突起而被     

转输树突状细胞疫苗免疫脾淋巴细胞对小鼠骨髓瘤的继承性免疫 …

研究树突在瘤苗免疫小鼠淋巴细胞对实验性骨髓瘤的继承性免疫预防与治疗治疗的作用。方法先前用骨髓ＤＣ作为佐剂,研制了ＤＣ与肿瘤细胞的融合瘤苗,以及用灭活肿瘤细胞及其裂解产物体外脉冲的ＤＣ疫苗,并成功地诱导宿主产生抗肿瘤的免疫保护性反应,且对荷瘤动物具有免疫治疗作用。     

肿瘤疫苗研究进展

肿瘤疫苗研究进展温州医学院附属第一医院（３２５０００）王光汉王瓯晨综述李加枝审校近年来，由于肿瘤免疫学和细胞分子生物学的发展以及基因转移技术的不断成熟，对肿瘤疫苗的研究也不断深入，并开始了基因工程瘤苗的新时代。肿瘤疫苗因其避免了手术，放疗，化疗带来的...     

新城疫病毒La Sota株疫苗免疫治疗小鼠移植瘤的生存期观察

用昆明系小白鼠３０只，按单纯、分层随机法分成２组，治疗组于移 植瘤细胞的当天开始皮下或肌注新城疫病毒Ｌａ Ｓｏｔａ株疫苗。对照组小鼠的平均生存期为５４．４０天，治疗组为８１．９３天，两组差别有高度显著性（Ｐ〈０．００２）。结果表明新城疫病毒Ｌａ Ｓｏｔａ株疫苗具有一定的抗癌作用。     

七叶灵对 Lewis 肺癌细胞荷瘤小鼠作用的初步观察

为观察七叶灵(由生黄芪、女贞子、天花粉、黄精、石见穿、七叶一枝花、灵芝组成)对 Lewis 肺癌细胞(3LL)荷瘤小鼠的作用,将40只 C57小鼠以 3LL 细胞皮下接种(80×10/只),1周后随机均分为对照组(A)、化疗组(B)、化疗加中药组(C)和中药组(D)4组,并予相应的处理,A 组腹腔注射生理盐水,B、C 组腹腔注射环磷酰胺(CTX,0.2mg*d-1*只-1),连续2d,C、D 组以七叶灵煎剂灌胃(0.4ml*d-1*只-1),连续2个月.每周统计死亡率,测量肿瘤体积并换算成重量.结果第2,3周时,B、C、D 组肿瘤的重量明显低于 A 组,第4,5,6周仅 C组肿瘤重量低于 A组,但至第7周.各组于第48天开始出现死亡,A组于第28天全部死亡,B 组,至第63天全部死亡,C 组于第77天全部死亡,D 组于第132天才全部死亡,组间比较差异明显.提示,七叶灵能延长肿瘤鼠的生存时间,其与化疗药物合用能抑制肿瘤的生长.     

恶性黑色素瘤主动特异性免疫治疗的临床研究

目的:探讨冷冻后瘤苗回植联合免疫佐剂及生物制剂在恶性黑色素瘤患者免疫生物治疗中的临床意义。方法:对45例经前哨淋巴结活检证实不伴有区域淋巴结转移的临床I期肢端恶性黑色素瘤患者分别采用冷冻后瘤苗回植联合免疫佐剂及生物制剂治疗(观察组)(28例)与常规手术切除联合生物制剂治疗(对照组)(17例),观察两组治疗前后免疫功能变化,并评价3年总生存期及无瘤生存期。结果:主动特异性免疫治疗中位生存时间29个月,手术联合生物制剂治疗中位生存时间18个月(P<0.05)。治疗后主动特异性免疫治疗CD4,CD4/CD8较手术联合生物制剂治疗明显升高(P均<0.05)。主动特异性免疫治疗3年总生存期(91.3%)及无瘤生存期(87.5%);高于手术联合生物制剂治疗的71.3%及54.7%(P均<0.05)。结论:冷冻后瘤苗回植联合免疫佐剂及生物制剂的主动特异性免疫治疗在临床I期恶性黑色素瘤患者中可提高患者免疫功能,较手术联合生物制剂治疗明显延长患者生存时间。     

氯化汞对小鼠Lewis肺癌细胞周期的影响

目的：研究氯化汞MC对小鼠Lewis肺癌细胞周期的影响。方法：采用流式细胞仪检测了MC对小鼠Lewis肺癌细胞周期的影响。结果：Lewis肺癌细胞表现为G0／G1期细胞数呈剂量依赖性增加，S期细胞数呈剂量依赖性减少。结论：MC能诱导小鼠Lewis肺癌细胞周期阻滞，使进入S期的细胞数明显减少，DNA复制受阻，进而死亡。     

肿瘤疫苗对小鼠肝癌作用的研究

目的 :通过动物实验评价肿瘤疫苗对肝癌的防治作用 ,为临床应用提供实验依据。方法 :用小鼠肝癌细胞系MM45T .Li经过化学修饰制成肿瘤疫苗免疫小鼠 ,然后再用该细胞系接种于小鼠腋下。分别观察免疫鼠及未免疫小鼠的肿瘤生长情况 ,进行病理学检查 ;并用3H -TdR释放法检测小鼠脾细胞对MM45T .Li细胞的杀伤能力差异。结果 :①经肿瘤疫苗免疫的小鼠的肿瘤生长速度明显低于未免疫小鼠 ;②病理学检查发现免疫鼠肿瘤组织内大量淋巴细胞浸润 ,未免疫鼠内罕见淋巴细胞浸润 ;③3H -TdR释放实验显示免疫鼠脾细胞对MM45T .Li细胞的杀伤能力明显高于未免疫鼠。结论 :按我们现行方法制备的肿瘤疫苗能激活小鼠抗肝癌的免疫反应 ,抑制肝癌的生长 ,但完全保护作用尚不明确     

肿瘤坏死因子基因转导的肿瘤疫苗对小鼠机体免疫的影响

目的：用肿瘤坏死因子基因转导的人肝癌细胞作为肿瘤疫苗，研究其对小鼠机体免疫活性的影响。方法：小鼠分5组，采用经^60Co照射的含人肿瘤坏死因子基因的人肝癌细胞(BEL—7404—TNF—^60Co)、未经^60Co照射的含人肿瘤坏死因子基因的人肝癫细胞(BEL—7404—TNF)、经^60Co照射的人肝癌细胞(BEL—7404—^60Co)、未经^60Co照射的人肝癌细胞(BEL—7404)和生理盐水分别接种小鼠，用MTT法检测各组小鼠脾脏NK细胞活性，用SABC免疫组化法检测T淋巴细胞亚群。结果：肿瘤疫苗接种小鼠后，BEL—7404—TNF—^60Co组小鼠脾脏NK细胞活性及T淋巴细胞亚群CD4^ 、CD8^ 增高，与BEL—7404组、BEL—7404—^60Co组、生理盐水组相比差异有显著意义(P＜0．05、P＜0．01)。BEL—7404—TNF—^60Co组和BEL—7404—TNF组相比，NK细胞活性、T淋巴细胞亚群CD4^ 、CD8^ 均无显著差异(P＞0．05)。结论：肿瘤坏死因子基因转导的肿瘤疫苗具有提高小鼠机体免疫力的作用。     

新城疫病毒IV系疫苗抗小鼠移植瘤作用的实验研究

用新城疫病毒ＩＶ系疫苗免疫治疗小鼠腹水型肝癌移植瘤。结果：治疗组平均瘤重明显小于对照组（Ｐ〈０．０５）；治疗组淋巴细胞应答水平显著高于对照组（Ｐ〈０．０５）。表明新城疫病毒ＩＶ系疫苗具有抗移植瘤作用。     

Lewis全细胞肿瘤疫苗防治C57BL/6小鼠Lewis肺癌的实验研究

目的探讨Lewis全细胞肿瘤疫苗对小鼠Lewis肺癌的防治作用。方法用Lewis全肿瘤疫苗免疫C57小鼠4次,其中首次免疫用含弗氏佐剂油剂疫苗,第4次免疫的同时在小鼠右腋下接种Lewis肺癌细胞,定期观察小鼠成瘤情况及小鼠免疫状态变化。用流式细胞术检测疫苗组和对照组小鼠外周血CD4 T细胞,CD8 T细胞及CD19 B细胞百分比,以及CD4/CD8的变化。结果疫苗组与对照组小鼠成瘤率、成瘤时间、肿瘤大小差异均无显著性;疫苗组与对照组相比,其外周血CD4 、CD8 T淋巴细胞亚群的百分比差异无显著性,CD4/CD8比值的差异也无显著性,疫苗组外周血CD19 B淋巴细胞百分比略高于对照组,差异有显著性(P=0.014)。结论用Lewis肿瘤全细胞疫苗不能提高C57BL/6小鼠的T淋巴细胞免疫功能,可以提高其B淋巴细胞免疫,但不能使小鼠获得有效的免疫保护。     

巨噬细胞融合瘤苗对大鼠骨肉瘤的主动性免疫治疗

目的：探讨融合瘤苗在骨肉瘤免疫治疗中的应用潜力。方法：用ＵＭＲ１０６细胞系建立大鼠骨肉瘤动物模型,然后将该细胞系与大鼠巨噬细胞融合作为瘤苗应用于荷瘤大鼠,观察其抑制肿瘤生长和肺转移的效果。结果：在治疗６ＯＫ时治疗组和对照组相比,瘤重明显减小（Ｐ〈０．０１）;肺转移发生率降低（Ｐ〈０．０１）。结论：骨肉瘤细胞与巨噬细胞的两便瘤苗可望的骨肉瘤的治疗中发挥作用。     

NY-ESO-1抗原与肿瘤免疫治疗进展

NY-ESO-1抗原是肿瘤-睾丸抗原家族中的重要成员,在多种类型的肿瘤中广泛表达,并且是迄今发现的最具免疫原性的肿瘤抗原,可以在NY-ESO-1表达阳性的肿瘤患者体内引起自发性体液免疫反应和特异性T细胞免疫反应。因此,NY-ESO-1被认为是最好的肿瘤候选疫苗,在肿瘤免疫治疗中最具发展潜力。本文主要介绍了近年来有关NY-ESO-1抗原以及相关疫苗的研究进展。     

新城疫病毒主动特异性免疫疗法对乳腺癌患者免疫功能的影响

目的观察新城疫病毒主动特异性免疫疗法对乳腺癌患者免疫功能的影响。方法应用流式细胞术。检测乳腺癌患者在接种疫苗前后，其外周血单个核细胞（PBMC）中T细胞亚群CD3^＋、CD4^＋、CD8^＋及NK细胞中的CD16和CD57等免疫学指标变化。结果33例患者在术前及接种疫苗1-3周后的免疫学指标变化明显，其差异有显著性，P〈0．05。结论新城疫病毒主动特异性免疫疗法能显著提高乳腺癌患者的免疫功能，且毒副作用轻微。     

融合基因GM-CSF/IL-2转基因瘤苗在肝癌特异性免疫治疗中的应用

目的 制备人白细胞介素2(hIL-2)与鼠粒-单核细胞集落刺激因子(mGM-CSF)融合基因修饰的H22肝癌全细胞瘤苗,探索融合基因GM.CSF/IL-2转基因瘤苗,在肝癌主动免疫治疗中特异性抗肿瘤作用.方法 用含hlL-2与mGM-CSF融合基因的真核表达载体在体外转染H22肝癌细胞,制成疫苗,皮下接种Balb/c小鼠,同时建立Balb/c小鼠荷瘤模型,ELISA法检测H22/pcDNA3.1( ).GM-CSF/IL-2瘤苗免疫组小鼠与各对照组小鼠(分别接种H22/pcDNA3.1( )瘤苗、H22瘤苗、PBS)血清中IL-10、IFN- γ水平,观察小鼠存活期;同时用51Cγ释放法测定H22/pcDNA3.1( )-GM-CSF/IL-2瘤苗免疫组小鼠与各对照组小鼠(单纯荷瘤组、正常组)脾细胞对亲本H22肝癌细胞的杀伤活性.结果 成功制备了含有hIL2与mGM-CSF融合基因的H22肝癌瘤苗,转基因瘤苗免疫组小鼠的脾细胞在体外对亲本H22肝癌细胞的杀伤率为38.3%,显著高于对照组小鼠的脾细胞对亲本H22肝癌细胞的杀伤率(分别为13.6%和7.5%),也高于其对S180细胞的杀伤率(9.1%)(P＜0.05).转基因瘤苗免疫组小鼠血清IFN-γ较对照组明显升高(P＜0.01),血清IL-10较对照组明显降低(P＜0.01).同时,转基因瘤苗免疫组小鼠生存期亦有明显延长.结论 转染hIL-2与mGM-CSF融合基因的同系肿瘤细胞瘤苗可激发特异性细胞介导的免疫反应,改善抗肿瘤免疫反应,延长荷瘤小鼠生存期.     

妇科肿瘤疫苗的研究进展

肿瘤疫苗是妇科恶性肿瘤免疫治疗研究的热点之一。卵巢癌疫苗均为治疗性疫苗,主要包括克隆抗原疫苗、肿瘤细胞疫苗、基因工程肿瘤细胞疫苗、树突状细胞疫苗、抗独特型疫苗。子宫颈癌疫苗包括以人乳头瘤病毒为基础的多肽疫苗、载体疫苗、融合蛋白疫苗和嵌合疫苗及树突状细胞疫苗等治疗性疫苗和人乳头瘤病毒预防性疫苗。而子宫内膜癌疫苗报道很少。     

小细胞肺癌免疫治疗研究进展

小细胞肺癌(small cell lung cancer,SCLC)是一种恶性程度高、易转移的神经内分泌肿瘤,对放化疗敏感,但极易发生耐药且耐药后治疗手段有限.近年来,免疫治疗显现出了良好的抗肿瘤活性,特别是程序性死亡受体-1/配体-L1(programmed death receptor-1/ligand-Ll,PD...     

OVA基因修饰的树突状细胞疫苗抗裸鼠肺肿瘤效应研究

目的 探讨OVA基因修饰的树突状细胞疫苗(DC-OVA)在肿瘤模拟抗原OVA(ovabumin)的裸鼠肺癌模型体内抗肺肿瘤的效应。方法 裸鼠右肺原位接种携带OVA的Lewis肺癌细胞(Lewis lung cancer cell-OVA, LLC-OVA)悬液,建立裸鼠肺癌模型。获取DC,经基因转导制备DC-OVA疫苗。Western 印迹法检测OVA蛋白的表达。获取T细胞,进而制备DC疫苗系统(DC-OVA/T)。CCK8试剂检测DC-OVA刺激后T细胞的增殖。模型建立2周后,尾静脉注射DC-OVA/T。Micro-CT扫描荷瘤裸鼠的胸部,观察肺部影像。H-E染色观察肺部及肿瘤组织形态结构。IHC方法观察脾、淋巴结、肿瘤组织中CD8的表达;观察肿瘤组织中SOX2、BMI1的表达。ELISA法检测血清中IL-12水平。结果 Western印迹法在样本中检测出清晰的OVA条带。DC-OVA强有效地刺激了T细胞的增殖(P<0.05)。DC-OVA/T治疗4周,疫苗组裸鼠肺micro-CT未见明显肿瘤阴影;取材,裸眼可见疫苗组病灶减小,H-E染色显示疫苗组的肿瘤组织较少,肺组织形态较完整。疫苗组裸鼠的脾、淋巴结、肿瘤组织内CD8阳性表达均明显高于对照组(P<0.05,P<0.05,P<0.01),肿瘤组织中的SOX2、BMI1阳性表达明显低于对照组(P<0.05,P<0.05);血清中的IL-12含量较对照组明显升高(P<0.001)。结论 基因修饰的DC疫苗在裸鼠体内具有强大的抗肺癌效应,为临床治疗肺癌提供了新的实验依据。     

Active immunotherapy of allergic asthma with a recombinant human interleukin-5 protein as vaccine in a murine model

Background Eosinophils are highly related to allergic asthma inflammation. Interleukin (IL)-5 is the major chemokine of eosinophils, inhibition of the activity of IL-5 thus seems to be a potential approach to asthma therapy. The current study was performed to determine whether a recombinant human IL-5 protein as a xenogeneic vaccine has the capability of inducing anti-asthma activities.Methods Recombinant human IL-5 was used as a protein vaccine. Mouse asthma model was established to observe the anti-asthma activities. Lung histology was observed; eosinophils in blood and bronchoalveolar lavage were stained and counted. Airway hyperresponsiveness was determined by whole body plethysmograph. Antibody characters and cytokines were detected with enzyme linked immunosorbent assay (ELISA) and Western blot assay.Results Vaccination with recombinant human IL-5 protein as vaccine significantly reduced airway inflammation and airway hyperresponsiveness, and shifted the cytokine production from Th2 (IL-4) to Th1 (INF-γ) in mice allergic-asthma model. Immunization with recombinant human IL-5 protein vaccine bypassed the immunological tolerance and induced production of polyclonal antibodies that were cross-reactive with murine IL-5.Conclusions Active immunization with xenogeneic homologous IL-5 may be a possible therapeutic approach to the treatment of asthma and potentially of other eosinophilic disorders.     

小细胞肺癌免疫治疗临床和基础研究现状

小细胞肺癌（small cell lung cancer,SCLC） 恶性程度很高,患者一线治疗后很快复发转移,二线治疗可选药物少,治疗效果差。随着分子生物学发展,免疫治疗可能突破SCLC 治疗瓶颈,带来新希望。SCLC 的过继性免疫治疗及抗独特型疫苗治疗效果仍有争议,现多种临床实验正在进行中。基础研究发现BCL-2、Livin 基因有望成为SCLC 诊断和治疗的新靶点。