控制性超排卵对胚胎植入前小鼠子宫内膜蛋白质表达的影响

目的研究控制性超排卵（COH）对胚胎植入前小鼠子宫内膜蛋白质表达的影响，探讨体外受精-胚胎移植时子宫内膜容受性的生物学标志物。方法将12只ICR雌性小鼠随机分为实验组和对照组，每组6只。实验组采取促排卵措施，对照组未作任何处理。通过双向电泳和质谱分析技术研究COH对小鼠子宫内膜蛋白表达的影响。结果实验组蛋白电泳图谱与对照组有明显差异，2倍以上差异表达蛋白总数为89个。截取其中16个蛋白质点进行了质谱分析，检测出9种有意义的差异表达蛋白。结论COH可导致子宫内膜多种蛋白质表达改变，通过筛选子宫内膜容受性的生物学标志物，可以为提高COH周期的胚胎种植率和妊娠率提供理论依据。     

不同用药方案对小鼠种植窗期子宫内膜白血病抑制因子及胞饮突表达的影响

目的:探讨不同用药方案对小鼠种植窗期子宫内膜白血病抑制因子(LIF)和胞饮突表达的影响.方法:将12只去势雌鼠及36只雌性未孕动情期小鼠分为激素替代治疗(HRT)组、超排卵组、控制性超排卵(COH)组和对照组.采用免疫组化SP法检测小鼠种植窗期子宫内膜LIF蛋白的表达;RT-PCR法检测小鼠种植窗期子宫内膜LIF mRNA的表达;扫描电镜观察胞饮突表达的变化.结果:4组小鼠种植窗期子宫内膜LIF mRNA及蛋白的表达差异均有统计学意义(F分别为5.978,4.788,P均<0.05).与对照组相比,HRT组、COH组和超排卵组LIF蛋白及mRNA表达均降低(P<0.01);HRT组高于COH组和超排卵组(P<0.01);COH组高于超排卵组(P<0.01).HRT组小鼠种植窗期子宫内膜胞饮突的发育在形态上与对照组类似,时相上较对照组发育略延后;COH组胞饮突的发育形态上较对照组受到抑制,时相上延迟于对照组;超排卵组胞饮突的发育明显受到抑制,时相上远远滞后于对照组.结论:3种用药方案均可使子宫内膜LIF和胞饮突的表达受到影响,使内膜容受性受到损害;在对小鼠子宫内膜容受性的改善方面,HRT优于COH和超排卵,COH优于超排卵.     

两种方案处理卵巢子宫内膜异位囊肿后对COH反应的比较

目的 比较体外授精-胚胎移植／卵细胞胞浆内单精子注射（IVF—ET／ICSI）前卵巢子宫内膜异位囊肿的两种处理方法对控制性促超排卵（COH）过程和结局的影响。方法 回顾性分析卵巢子宫内膜异位囊肿合并不孕患者IVF—ET／ICSI62个周期资料。按COH前处理方法不同分为两组，A组34个周期：用促性腺激素释放激素激动剂（GnRH-a）治疗2个周期后，经阴道穿刺抽吸子宫内膜异位囊肿，再进入COH过程；B组28个周期：腹腔镜手术剥除子宫内膜异位囊肿后进行COH。IVF—ET／ICSI过程按常规方法进行。比较两组的获卵数和卵子质量、临床妊娠率以及囊肿复发率。结果 B组获卵数稍低于A组，但无统计学意义。两组COH的天数、用药支数、受精率、卵裂率、优质胚胎数、临床妊娠率差异无显著性。A组1年内囊肿的复发率高于B组。结论卵巢子宫内膜异位囊肿患者在IVF—ET／ICSI前的两种处理方法对其结局的影响无差别。临床要依据患者的具体情况选择处理方法。     

不孕患者增生晚期子宫内膜厚度与雌激素受体α、妊娠关系的研究

目的 探讨子宫内膜厚度（EMT）与子宫内膜雌激素受体α（ERα）、临床妊娠率的关系.方法 选取2012年5月-2013年12月期间在广州市番禺何贤纪念医院就诊的80例不孕患者为研究对象,根据注射绒毛膜促性腺激素（HCG）当日,B超检查的EMT进行分组：子宫内膜薄型组35例,子宫内膜正常组45例.提取子宫内膜组织,以免疫组化法测定其ERα表达水平,观察两组患者的年龄、临床妊娠率、EMT、性激素水平、ERα表达水平的差异及各指标间的相关性.结果 子宫内膜薄型组患者年龄显著高于子宫内膜正常组;子宫内膜薄型组EMT及子宫内膜ERα表达水平显著低于子宫内膜正常组,差异具有统计学意义（P＜0.05或P＜0.01）;两组患者的临床妊娠率、性激素水平差异无统计学意义（P＞0.05） ;EMT与ERα表达水平呈正相关（P＜0.05）,与年龄、性激素水平、妊娠率均无显著相关性（P＞0.05）.结论 薄型子宫内膜女性的年龄较大,ERα表达水平低下.     

不同手术方式剥除卵巢子宫内膜异位囊肿对体外受精-胚胎移植术结局的影响

目的探讨不同手术方式剔除卵巢子宫内膜异位症囊肿对卵巢控制性超促排卵（controlledovarianhyperstimulation,COH）的反应及体外受精-胚胎移植术（invitrertilizationandembryotransfer,IVF-ET）助孕患者结局的影响。方法对67例既往开腹或腹腔镜确诊的子宫内膜异位症合并不育患者行体外受精-胚胎移植术COH和助孕结局进行回顾性分析。其中A组：21例曾行腹腔镜卵巢子宫内膜异位囊肿剔除术,B组：16例曾行开腹卵巢子宫内膜异位囊肿剔除术,C组：30例为未行囊肿剔除术的子宫内膜异位症患者。结果两种手术方式对COH中获卵数、受精率、优质胚胎数、移植胚胎数、妊娠率与对照组相比无显著性差异（P〉0.05）。促性腺激素用量及用药天数明显多于对照组;两种手术组的窦卵泡数均少于非手术组（P〈0.05）;FSH、E2均高于非手术组（P〈0.05）,而两种手术组间无显著差异（P〉0.05）。患者手术侧卵巢与未手术侧相比,卵巢虽小,但无显著性差异;窦卵泡数,HCG注射日直径≥14mm的卵泡数均明显少于对照组（P〈0.05）。结论不同手术方式剔除卵巢子宫内膜异位症囊肿对IVF-ET结局无明显影响,但可影响卵巢功能,减低卵巢储备能力。     

左炔诺孕酮宫内缓释系统对子宫内膜息肉术后 ER、PR 表达的影响

目的观察子宫内膜息肉术后宫腔内置入左炔诺孕酮宫内缓释系统（LNG-IUS）对子宫内膜息肉组织雌激素受体（ER）、孕激素受体（PR）表达的影响。方法子宫内膜息肉患者32例,施行宫腔镜引导下息肉摘除术后放置LNG-IUS。观察放置前后子宫内膜组织ER、PR的表达及检测血清尿促卵泡素（FSH）、黄体生成激素（LH）、雌二醇（E2）、孕酮（P）含量。结果放置LNG-IUS6个月后,子宫内膜组织ER、PR表达显著下调（P＜0．05）,FSH、LH、E2、P含量无显著变化（P＞0．05）。结论LNG-IUS可降低ER、PR在子宫内膜息肉中的表达。     

左炔诺孕酮宫内缓释系统对子宫内膜息肉 ER、PR 表达的影响

目的观察左炔诺孕酮宫内缓释系统对子宫内膜息肉雌激素受体（ER）、孕激素受体（PR）表达的影响,探讨其预防子宫内膜息肉复发的机制。方法经宫腔镜检查、术后病理证实为子宫内膜息肉的患者75例,随机分为两组：观察组41例,宫腔镜下内膜息肉摘除术后放置左炔诺孕酮宫内缓释系统;对照组34例,宫腔镜下内膜息肉摘除术后于月经后半周期口服黄体酮10 d。治疗6个月后,比较两组患者子宫内膜息肉的复发率,ER、PR在子宫内膜（或息肉）的表达及生殖激素的变化。结果治疗后观察组子宫内膜息肉复发率较对照组低（P＜0．05）,观察组子宫内膜ER、PR的表达显著下调（P＜0．05）,对照组ER、PR的表达无显著变化（P＞0．05）,两组患者生殖激素均不受影响（P＞0．05）。结论左炔诺孕酮宫内缓释系统可能通过调节ER、PR的表达而预防子宫内膜息肉复发。     

雌孕激素受体在子宫内膜癌、子宫内膜不典型增生及正常子宫内膜中不同表达的临床意义

为探讨子宫内膜雌激素受体（ER）、孕激素受体（PR）检测的方法及意义,用抗ER、PR单克隆抗体免疫组化SP法检测了26例子宫内膜癌、23例子宫内膜不典型增生、22例正常子宫内膜石蜡切片ER、PR的表达,结果显示,免疫组化SP法检测ER,PR阳性率在正常子宫内膜、不典型增生子宫内膜、子宫内膜癌组织中的分布不同。内膜癌ER、PR含量明显低于正常子宫内膜及不典型增生子宫内膜,正常内膜与不典型增生内膜ER、PR的表达无统计学差异,正常内膜与内膜癌、不典型增生与内膜癌ER、PR表达有统计学差异,反映了肿瘤的生物学行为。免疫组化ER、PR含量SP法测定对临床预后判断,指导治疗有一定的意义。     

关于不孕妇女子宫内膜雌﹑孕激素受体含量讨论与分析

目的对不孕妇女和正常生育妇女子宫内膜雌﹑孕激素受体（即ER和PR）阳性率测定,从而研究不孕妇女的雌﹑孕激素水平对受孕影响。方法将不孕妇女子宫内膜和正常生育妇女的子宫内膜分成3组进行测定阳性率。结果不孕妇女子宫内膜雌激素受体（ER）阳性率与正常生育妇女基本相同,而孕激素受体（PR）则阳性率明显低于正常生育妇女。结论在无排卵的不孕症患者子宫内膜中ER含量也正常,而PR含量则低于正常水平,如何提高激素含量,是治疗不孕症的一个重要环节。     

雌激素受体亚型ERα和ERβ在子宫内膜癌中表达的研究

目的通过对子宫内膜癌组织中α和ERβ表达水平的检测，探讨雌激素受体的表达在子宫内膜癌发生发展中的作用。方法用ERα及ERβ单克隆抗体免疫组化SP法测定57例子宫内膜癌及32例正常子宫内膜ERα和ERβ的表达，分析比较内膜癌与正常子宫内膜ERα和ERβ表达情况的差异、ERα和ERβ之间的关系以及与临床病理因素的关系。结果正常子宫内膜ERα表达阳性率为68．8％，高于子宫内膜癌（45．6％），P〈0．05。ERβ表达的阳性率在正常子宫内膜和子宫内膜癌中分别为56．3％、49．1％，两者差异无显著性。正常子宫内膜ERα表达阳性率增生期（93．3％）高于分泌期（50％），而ERβ表达阳性率分泌期（90％）高于增生期（40％）。子宫内膜癌中，分期越早、分化程度越高，ERα表达阳性率越高，在宫内膜样癌中的表达阳性率高于其他类型，无淋巴结转移者高于有淋巴结转移者。ERβ表达的阳性率在临床分期晚以及分化差者升高。ERα和ERβ在子宫内膜癌中的阳性表达率呈负相关。结论ERα和ERβ在正常月经周期对子宫内膜可能发挥不同的作用，在子宫内膜癌的发生发展中，ERα可能比ERβ起着更重要的作用，两者在其发展过程中的作用可能相反。     

Endometrial Collagen Fibril Hyperplasia is Associated with Implantation Failure in Women Undergoing IVF-ET

Objective To analyse the effects of controlled ovarian hyperstimulation （ COH） on the endometrial expression of collagen fibril （CF） during the peri-implantation period in patients undergoing IVF, and its relation to endometrial receptivity （ER） in repeated implantation failure（RIF）. Methods Peripheral blood and endometrial biopsies were obtained from 45 infertile women on days 5, 7 or 9 after oocytes retrieval or ovulation in a stimulated cycle （SC） and natural cycle （NC） respectively. CF was assayed by transmission electron microscope and quantified by modified Masson dyeing. The outcome of subsequent embryo transfer（ET） was observed. Results Levels of both E2 and progesterone were higher in the peripheral blood in SC than in NC. Also the expression of CF in the stroma in each secretory phase was increased significantly in SC （P 〈O.05）. After embryo transferring, expression levels of CF in the pregnancy group dropped between the mid- and late-secretory phase, but no change in the non-pregnancy group. In the same term, all patients undergone endometrial curettage had higher pregnancy rate than those without. Conclusion Imbalance of production and degradation of endometrial CF in the secretory phase resulting from COH may be the cause of defective ER and implantation failure in some RIF patients. Endometrial curettage may improve implantation rate by inducing appropriate CF hyperplasia and degradation.     

控制性促排卵前后外周血白细胞变化对妊娠结局的影响

目的探讨控制性促排卵(COH)前后外周血白细胞(WBC)变化对妊娠结局的影响。方法选择拟行体外受精-胚胎移植(IVF-ET)的患者136例,于COH前、HCG日检测外周血WBC浓度,分析WBC变化与妊娠结局的关系。结果妊娠组COH前(t=2.049,P=0.043)和HCG日(t=2.168,P=0.038)的WBC浓度均高于未妊娠组,HCG日外周血WBC浓度较COH前有明显增高(t=10.922,P=0.000),HCG日雌激素与COH后WBC浓度差值呈显著正相关(r=0.199,P=0.021)。结论在COH过程中,血雌激素升高的同时外周血WBC浓度也适度的升高将有利于胚胎的着床。     

基础FSH/LH比值与控制性超促排卵结果的关系

目的　探讨基础FSH/LH比值与控制性超促排卵结果的关系。方法　对 2 72 1个周期不孕症患者基础FSH/LH比值与控制性超促排卵结果进行回顾性分析。结果　随着基础FSH/LH比值的升高 ,控制性超促排卵结果逐渐变差 ,周期放弃率逐渐升高 ,差异具有显著性 (P <0 .0 5 )。基础FSH/LH比值≤ 2的患者周期放弃率低 ,可获得满意的控制性超促排卵结果。结论　基础FSH/LH比值可以用来作为判断超促排卵结果的预测值     

控制性超促排卵过程中雌激素水平对IVF-ET结局的影响

目的 研究控制性超促排卵(COH)过程中雌激素水平对于体外受精-胚胎移植(IVF-ET)治疗结局的影响.方法 回顾性分析472例采用黄体期长效GnRH-a降调节方案进行IVF-ET治疗患者的临床资料.计算COH过程中雌二醇(E2)水平的曲线下面积(AUC),以E:水平AUC(AUCE2)的百分位数定义卵巢反应并分组,比较各组一般情况及与IVF-ET治疗结局相关指标.结果 AUCE2第10和第90百分位数分别为3 347.0 pmol/L和14 414.3 pmol/L.472例患者分为卵巢低反应组(AUCE2≤3 347.0pmol/L,48例)、正常反应组(14 414.3 pmol/L>AUCE2 >3 347.0 pmol/L,376例)和高反应组(AUCE2≥14 413.3 pmol/L,48例).各组年龄、体质量指数、基础促卵泡激素水平、促性腺激素应用天数、移植日子宫内膜厚度和移植胚胎数等一般情况比较,差异均无统计学意义(P>0.05).与低反应组和正常反应组比较,高反应组获卵数和可冷冻胚胎数明显增多(P<0.01),中、重度卵巢过度刺激综合征的发生率较高(P<0.05);各组受精率、累计胚胎评分、优质胚胎率、临床妊娠率和种植率比较,差异均无统计学意义(P>0.05).结论 IVF-ET治疗COH过程中的持续超生理状态的E2水平,在一定范围内对于卵子和胚胎质量以及妊娠率和种植率无明显不良影响.     

促排汤序贯治疗对多囊卵巢综合征患者行控制性超促排卵的影响

目的探讨促排汤序贯治疗对多囊卵巢综合征(polycystic ovary syndrome,PCOS)患者行控制性超促排卵(controlled ovarian hyperstimulation,COH)的影响。方法将60例行COH的PCOS患者随机分为观察组和对照组,每组30例。其中,观察组中超重患者19人,体质量指数(body mass index,BMI)正常患者11人;对照组中超重患者20人,BMI正常患者10人。两组患者均采用COH(拮抗剂方案)治疗,观察组在对照组基础上采用促排汤序贯治疗,两组均治疗1个COH周期。观察两组促性腺激素(gonadotropin,Gn)使用总量和时间、获卵数、受精数、受精率、优质胚胎数、优质胚胎率及卵巢过度刺激综合征发生情况。结果观察组受精率、优质胚胎率高于对照组(P<0.05);观察组不同BMI患者COH各项指标差异均无统计学意义(P>0.05),但对照组中超重患者受精率显著低于BMI正常患者(P<0.05),优胚率较BMI正常患者有下降趋势(P=0.05);超重患者中观察组受精率和优胚率均高于对照组(P<0.05)。结论促排汤序贯可使PCOS患者在行COH中获得更高质量的胚胎,为进一步改善体外受精-胚胎移植结局奠定基础。     

反复控制性卵巢刺激对卵巢功能状态的影响

 【目的】评价在辅助生育技术治疗中反复控制性卵巢刺激对卵巢功能的影响。【方法】 回顾性分析1994年3月至2005年5月就诊于本中心接受IVF治疗行控制性卵巢刺激（COH）≥4个治疗周期的127例患者的病历资料（共508个周期），比较多次COH后基础激素水平的变化，以及不同治疗周期患者的取卵数和促性腺激素（Gn）的使用剂量，统计学方法采用t检验和重复测量资料的方差分析，P<0.05被认为有统计学意义。【结果】随着COH治疗周期数的增加，患者的年龄逐渐增加，比较各周期患者月经第3天FSH、LH、PRL、E2 、T的基础值，各激素水平之间并无统计学意义 (P=0.25~0.93)。与首次接受促超排卵周期相比较，促性腺激素（Gn）的使用剂量在第3、4、5、6、7、8治疗周期显著增加(P=0.0001~0.0084)，但是各周期患者取卵数并无统计学意义(P=0.21~0.61),在对年龄分组后比较各周期Gn的使用剂量也无统计学差异(P=0.12~0.94)。本研究还对一直在本院接受COH治疗≥7个周期的12名例患者进行自身对照的比较，发现随着COH周期数的增加，患者的Gn使用剂量也增加，但控制年龄因素的作用后，Gn的使用剂量则无统计学差异（P=0.13）。【结论】反复的COH治疗不会影响卵巢的储备功能, 接受多个周期COH治疗后的患者Gn使用剂量的增加是由于年龄因素所导致的。     

多囊卵巢综合征患者在控制性超排卵中的内分泌变化

目的:探讨抑制素B(Inhibin B)和胰岛素样生长因子Ⅱ(IGF-Ⅱ)与多囊卵巢综合征(PCOS)发病机制之间的关系。方法:采用酶联免疫吸附试验(ELISA)测定20例PCOS妇女和10例输卵管性因素不孕妇女控制性超排卵(COH)用药前基础血清,用药过程中(注射HCG前)血清和取卵日卵泡液(FF)中的Inhibin B和IGF-Ⅱ水平,同时采用放射免疫分析法(RIA)测定其中其他性激素水平。结果:用药后PCOS组血清Inhibin B值和IGF-Ⅱ值高于对照组(P>0.05);PCOS组卵泡液中Inhibin B和IGF-Ⅱ显著高于对照组(P<0.01);PCOS组卵泡液中IGF-Ⅱ与Inhibin B呈显著正相关(r=0.56,P<0.01)。结论:Inhibin B与IGF-Ⅱ作为重要的卵巢内局部自-旁分泌调节因子,可能参与了PCOS的发病过程。     

Association of controlled ovarian hyperstimulation treatment with down-regulation of key regulators involved in embryonic implantation in mice

The debate exists whether or not gonadotropin-releasing hormone(GnRH) analogs used in controlled ovarian hyperstimulation(COH) impair endometrial receptivity.Homeobox A11(Hoxa11),Meis homeobox 1(Meis1),cadherin 1(Cdh1),and catenin beta 1(Ctnnb1) are well known to be involved in successful implantation.In this study,the endometrial expression of Hoxa11,Meis1,Cdh1,and Ctnnb1 during the peri-implantation period was investigated in an in vitro fertilization(IVF) mouse model by real-time RT-PCR and Western blot to evaluate the relationship between Hoxa11,Meis1,Cdh1,and Ctnnb1 expression and the impact of the COH on endometrial receptivity.The mimic COH protocols included GnRH agonist plus human menopausal gonadotropin(HMG)(GnRH agonist group),GnRH antagonist plus HMG(GnRH antagonist group),and HMG alone(HMG group).The expression levels of Hoxa11,Meis1,Cdh1,and Ctnnb1 mRNA and protein were decreased in all of the COH groups.The expression levels of Hoxa11 and Ctnnb1 were the lowest in the GnRH agonist group,and those of Meis1 and Cdh1 were lower in the GnRH analog groups than the HMG group.There were positive correlations between the expression of Hoxa11 and Ctnnb1,as well as the expression of Meis1 and Cdh1 among all the groups.In conclusion,the COH protocols,particularly with GnRH analogs,suppressed Hoxa11,Meis1,Ctnnb1 and Cdh1 expression,in mouse endometrium during the peri-implantation period.Our data reveal a novel molecular mechanism by which the COH protocols might impair endometrial receptivity.     

控制性超促排卵中卵巢储备功能的预测

卵巢反应性取决于卵巢储备功能,而卵巢反应性是决定控制性超排卵成功与否的关键因素,从而进一步影响体外受精-胚胎移植的结局。故对卵巢储备功能的预测可指导选择更合理化的促排卵方案及药物,以改善妊娠结局。预测卵巢储备功能的方法有年龄、内分泌激素水平(包括基础卵泡刺激素、雌二醇等)、超声影像学检查、动力学实验等。现就卵巢储备功能的预测方法做一综述。     

Comparison of Effects of Recombinant FSH versus Highly Purified Urinary FSH for COH in the Outcome of IVF-ET

Objective To investigate the difference in the outcome of IVF-ET between the patients using recombinant FSH versus highly purified urinary FSH for controlled ovarian stimulation (COH). Methods A comparative retrospective analysis was performed between the patients undergoing IVF using recombinant FSH (rFSH) 562 cycles (rFSH group) versus using highly purified urinary FSH(uFSH) 555 cycles (uFSH group) for COH from August 2009 to July 2010. Main outcome measures included: duration of stimulation, total amount of FSH, E2 level on hCG injection day, number of oocytes collected, average number of frozen embryos, and the rate of cancellation, implantation, clinical pregnancy and miscarriage rate. Results uFSH group required a significantly higher total amount of FSH and a longer duration of stimulation than thouse rFSH group (19.3 ± 7.6 vs 18.3 ± 7.0 ampoules, P=0.02, and 9.1 ± 1.6 d vs 8.9 ± 1.5 d, P=0.04, respectively). There was no statistically significant difference in the implantation rate, clinical pregnancy rate and miscarriage rate between uFSH and rFSH groups (22.57% vs 20.16%, 38.15% vs 35.18%, and 10.6% vs 13.45%, respectively, P>0.05). The other measures including E2 level on hCG injection day, cancellation, number of oocytes collected, fertilization, average number of frozen embryos showed no difference between the two groups. Conclusion There is no significant difference in the outcome of IVF-ET between two groups in effects of recombinant FSH versus highly purified urinary FSH for COH.