HL－RNA对X线照射小鼠脾细胞丝裂原诱导的增殖反应的影响

本实验测定了不同浓度ＨＬ－ＲＮＡ在离体与活体条件下对Ｘ射线照射小鼠脾细胞丝裂原诱导的增殖反应的影响。结果表明，在离体条件下，ＨＬ－ＲＮＡ对照后脾细胞ＣｏｎＡ诱导的增殖反应有明显的抑制作用，并且随ＨＬ－ＲＮＡ浓度的增加抑制作用增强。而不同浓度的ＨＬ－ＲＮＡ对活体照后小鼠脾细胞ＣｏｎＡ和ＬＰＳ诱导的增殖反应有促进作用，当ＨＬ－ＲＮＡ浓度大于６．２５ｍｇ／ｋｇ体重时，照射组与对照组有明显差异。同时测定ＨＬ－ＲＮＡ诱导血清照后小鼠脾细胞ＣｏｎＡｆｏＬＰＳ诱导的增殖反应也明显增强。提示，ＨＬ－ＲＮＡ在体内外对照射小鼠脾细胞的增殖反应有不同作用。     

HL—RNA对X线照射小鼠脾细胞丝裂原诱导的增殖反应的影响

本实验测定了不同浓度ＩＬ－ＲＮＡ在离体与活体条件下对Ｘ射线照射小鼠脾细胞丝裂原诱导的增殖反应的影响。结果表明，在离体条件下，ＩＬ－ＲＮＡ对照后脾细胞ＣｏｎＡ诱导的增殖反应有明显的抑制作用，并且随ＨＬ－ＲＮＡ浓度的增加抑制作用增强。而不同浓度的ＨＬ－ＲＮＡ对活体照后小鼠脾细胞ＣｏｎＡ和ＬＰＳ诱导的增殖反应有促进作用，当ＨＬ－ＲＮＡ浓度大于６．２５ｍｇ／ｋｇ体重时，照射组与对照组有明显差异。同时测量Ｈ     

改进SDS-Phenol法快速提取细胞总RNA

比较改进ＳＤＳ－Ｐｈｅｎｏｌ法与常用的ＡＧＰＣ法提取细胞之总ＲＮＡ优缺点,方法：同时采用两种方法对同批稳定培养的一株淋巴瘤细胞系进行总ＲＮＡ提取,以收获ＲＮＡ拉量和纯度为比较指标,并用甲醛变性电泳验证ＳＤＳ－Ｐｈｅｎｏｌ法提取ＲＮＡ的完整性。     

草果知母汤对点燃癫痫模型生长抑素mRNA的影响

运用脑组织原位杂交法，观察戊四唑点燃癫痫模型脑组织中ＳＳｍ ＲＮＡ 的表达及草果知母汤作用后的变化。结果：与正常对照组相比，模型组脑皮层ＳＳｍ ＲＮＡ 的含量明显升高（ Ｐ＜０－０１） ，海马中ＳＳｍ ＲＮＡ 的含量明显降低（ Ｐ＜ ０－００１） ；与模型组相比，西药组（ 苯巴比妥） 及中药组（ 草果知母汤） 皮层ＳＳｍ ＲＮＡ 含量明显降低（ Ｐ＜ ０－０５） 。降低皮层组织ＳＳｍ ＲＮＡ 的含量，可能是草果知母汤抗癫痫的作用途径之一。     

RNA－RNA原位杂交检测和定量分析心肌中肠道病毒RNA

ＲＮＡ－ＲＮＡ原位杂交检测和定量分析心肌中肠道病毒ＲＮＡ上海医科大学中山医院上海市心血管病研究所彭天庆，杨英珍本研究以同位素Ｓ标记肠道病毒特异的柯萨奇Ｂ－３病毒（ＣＶＢ３）的负股ＲＮＡ为探针作原位杂交对多种心肌石蜡切片进行肠道病毒ＲＮＡ检测，同时结合...     

RT-PCR结合地高辛标记定量检测猴免疫缺陷病毒RNA

从感染猴免疫缺陷病毒（ＳＩＶ）的恒河猴血浆和培养细胞株中分别纯化病毒ＲＮＡ，经逆转录－聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）扩增ＳＩＶｇａｇ基因特异的ＤＮＡ片段。将ＲＴ－ＰＣＲ产物用地高辛标记，检测灵敏度比凝胶电泳和斑点杂交提高１００倍。用已知拷贝数的ＲＮＡ作为定量标准，可估计待测样本中ＳＩＶＲＮＡ的拷贝数。     

大黄蟅虫丸对难治性肾病综合征抗凝血酶Ⅲ影响

本文对２９例难治性肾病综合征（ＲＮＳ）患者抗凝血酶Ⅲ（ＡＴ－Ⅲ）检测，运用大黄　虫丸治疗并与复方丹参片作对照。结果表明：ＲＮＳ患者ＡＴ－Ⅲ水平明显降低，与正常对照组比较有显著性差异，且与血浆蛋白（ＡＬＢ）呈正相关与尿蛋白定量呈明显负相关，用大黄　虫丸治疗后ＲＮＳ患者ＡＴ－Ⅲ水平恢复正常，治疗前后比较有显著性意义。     

HCV慢性患者干扰素治疗前后血清HCV RNA水平的变化

目的 探讨丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）基因含量与干扰素疗效的关系。方法 采用“ＥＬＩＳＡ模式”化的ＨＣＶ－ＲＮＡ聚合酶链反应－杂交定量（ＰＣＲ－Ｈｙｂ）检测了１９例慢性丙型肝炎患者α－干扰素治疗前后的血清中的ＨＣＶ－ＲＮＡ的水平。结果 ３ＭＵ、６ＭＵα－干扰素治疗,分别是１１例、８例,完全反应者分别占７２．５％、７５％,部分及无效反应者分别占２７．５％、２５％（Ｐ〉０．０５）。两种剂量的完全反应者治疗前     

慢性丙型肝炎患者（2＇，5＇）寡腺苷酸合成酶的活性测定

目的：了解慢性丙型肝炎患者（２＇，５＇）寡腺苷酸合成酶（２－５ＡＳ）活性在干扰素治疗过程中的动态变化及意义。方法：ＰＥＩ－ＣＥＬＬＵＬＯＳＥ薄板层析法。结果：（１）慢性丙型肝炎患者２－５ＡＳ基础水平比正常人显著升高（Ｐ＜０．０１）；（２）ＩＦＮα治疗结束后ＨＣＶＲＮＡ持续阳性的病人２－５ＡＳ基础水平比ＨＣＶＲＮＡ转阴的病人要高（Ｐ＜０．０５）；（３）ＩＦＮα治疗效果较好，ＨＣＶＲＮＡ转阴的病人２－５ＡＳ水平在用药后２４ｈ比ＨＣＶＲＮＡ未转阴的病人上升得更高（Ｐ＜０．０１）；（４）用药后１个月２～５ＡＳ水平与ＩＦＮα治疗效果无显著相关性（Ｐ＞０．０５）。结论：２－５ＡＳ可以作为评价干扰素治疗效果的１个机体反应指标。     

血液透析患者丙型肝炎病毒感染状况调查

对７５例透析病人共１０４例血清作抗－ＨＣＶ检测，并对其中１６例共２３份血清作ＨＣＶ－ＲＮＡ检测。结果显示抗－ＨＣＶ阳性率为８１．３３％，抗－ＨＣＶ阴性患者虽有５６．２５％ＨＣＶ－ＲＮＡ阳性。     

应用PAGE技术分析武汉市婴幼儿轮状病毒分子流行病学特征

对1996年4月～1997年3月期间就诊于武汉市儿童医院的1683例门诊腹泻患儿粪便标本进行了轮状病毒RNA的聚丙烯酰胺凝胶电泳分析。在515份标本中检出了轮状病毒RNA,阳性率为30.60%。所检出的轮状病毒2个组中,以第二亚组多见,占98.25％,2个亚组又可进一步分为五种电泳型,即S、L1、L2、L3、L4型,5种电泳型中以L1型为主,占轮状病毒RNA阳性病例的56.12%。对患儿临床表现、年龄与阳性率进行比较发现,呕吐、咳嗽、粪检时镜下脂肪球的发生均与轮状病毒感染密切相关(P<0.005),且发病以2岁内为易感年龄。     

RNA干扰沉默S100A2和E-cadherin基因后对胃癌细胞增殖和侵袭力的影响

 目的研究RNA干扰沉默S100A2和E-cadherin基因后对胃癌细胞增殖和侵袭力的影响。方法采用RNA干扰技术,在E-cadherin和S100A2表达阳性的MNK45细胞同时沉默E-cadherin和S100A2基因表达,逆转录聚合酶链反应和Western blot检测干涉效果,MTT 和Transwell检测细胞生长和侵袭力的变化。结果小干扰RNA明显抑制MKN45 细胞E-cadherin和S100A2 的表达;干涉第11天,E-cadherin和S100A2蛋白表达下降,细胞生长速度和细胞侵袭力明显增加。结论E-cadherin和S100A2蛋白具有抑制细胞增殖和侵袭的功能,可作为抑癌因子参与胃癌的发生与转移。     

肺吸虫和血吸虫总RNA的提取及电泳分析

目的为构建肺吸虫ｃＤＮＡ文库，获得目的重组抗原，用以肺吸虫病的诊断，而制备卫氏肺吸虫的总ＲＮＡ。方法采用改进的一步法（Ａ和Ｂ）提取了卫氏肺吸虫成虫的总ＲＮＡ，同时提取了日本血吸虫成虫及其虫卵、小鼠肝脏的总ＲＮＡ。结果人睾丸组织的总ＲＮＡ经琼脂糖凝胶电泳，观察到方法Ａ所提取的肺吸虫、血吸虫及其虫卵的总ＲＮＡ在凝胶上只有一条略大于１８Ｓ的条带。用方法Ｂ提取的肺吸虫以及血吸虫的总ＲＮＡ则出现２条条带，其中１条色淡，并略小于２８Ｓ，另１条色深，并略大于１８Ｓ。结论肺吸虫的Ｌ－ｒＲＮＡ中也存在切口现象。     

适用于转录组测序的人参根总RNA提取方法的筛选

目的 筛选适用于转录组测序的人参根组织总RNA提取方法.方法 以15年生长白山人参为研究对象,比较RNAiso Plus法、Trizol法、改良CTAB法、植物总RNA提取试剂盒、多糖多酚总RNA提取试剂盒(RNA prep Pure Plant Kit)提取人参根组织总RNA,利用琼脂糖凝胶电泳、Aligent 2100 Bioanalyzer对5种方法提取的总RNA进行质量检测.结果 Trizol法和RNAiso Plus法均能提取到总RNA,1%琼脂糖凝胶电泳显示28S、18S条带清晰稳定,D(γ)260 nm/D(γ)280 nm和D(γ)260 nm/D(γ)230 nm值均在2.0左右.Trizol试剂法提取总RNA的28S条带亮度明显高于18S,所得RNA浓度达485.66 ng/μL,经Aligent 2100 Bioanalyzer检测,28S条带亮度是18S的2倍.RNA prep Pure Plant Kit试剂盒及植物总RNA提取试剂盒提取RNA的条带模糊、弥散,RNA降解严重.改良CTAB法无法完成人参根组织总RNA的提取.结论 Trizol试剂法提取的人参根组织总RNA浓度、纯度及完整性与其他方法相比效果最佳,能满足转录组测序的要求,是人参根组织总RNA提取的首选方法.     

10-23型脱氧核酶对HBV S、C基因体外切割作用研究

目的:探讨10-23脱氧核酶(10-23 DRz)对HBV S基因及C基因体外转录产物的特异性切割作用.方法:分别构建含有HBV S基因或C基因的重组质粒,以线性化的重组质粒为模板,体外转录获得相应HBV S基因RNA及C基因RNA.设计并合成针对HBV S基因的DRz-hbvs-1和针对C基因的DRz-hbvc-1,观察其对靶RNA的体外切割作用.结果:DRz-hbvs-1及DRz-hbvc-1能对各自相应的靶RNA进行有效的特异性切割;无DRz对照组及反义寡核苷酸对照组均未见特异性切割.结论:10-23 DRz能特异性切割HBV S基因及C基因体外转录产物.     

2种提取大鼠肝RNA方法的比较

目的建立大鼠肝RNA的提取方法,为逆转录酶聚合酶链式反应(RT-PCR)、Northern blot以及cDNA文库构建等分子生物学实验奠定基础。方法用Trizol法和异硫氰酸胍提取法提取大鼠肝RNA,紫外分光光度计测定RNA产量及纯度,琼脂糖凝胶电泳验证RNA的完整性。结果采用Trizol方法提取的RNA的OD260/OD280比值为2.28,异硫氰酸胍方法提取的RNA OD260/OD280比值为1.74。采用Trizol法提取RNA的产量高于异硫氰酸胍提取法,电泳分析18 s、28 s条带完整。结论Trizol提取的大鼠肝RNA纯度、收率都优于硫氰酸胍方法提取的RNA。     

灵芝多糖对S180荷瘤小鼠肿瘤细胞核酸及其细胞周期的影响

目的 研究灵芝多糖对S180荷瘤小鼠肿瘤细胞核酸及其细胞周期的影响,探讨其抗肿瘤作用的可能机制.方法 分别给荷S180腹水瘤小鼠灌胃灵芝多糖(400,200,100mg/kg·b.w.)、生理盐水、或皮下注射环磷酰胺(25 mg/kg·b.w.),1次/d,连续9 d.观察腹水瘤细胞RNA、DNA含量,RNA/DNA比值以及细胞周期的改变.激光扫描共聚焦显微镜技术和吖啶橙(AO)荧光染色技术检测肿瘤细胞DNA和RNA荧光强度.流式细胞仪和碘化丙啶荧光染色技术分析肿瘤细胞的细胞周期.结果 与生理盐水组比较,灵芝多糖各剂量组的RNA、DNA含量有不同程度的减少,中剂量组(200mg/kg)具有统计学意义(P=0.000);灵芝多糖各剂量组的RNA/DNA比值均下降(P=0.003,0.000,0.008),说明灵芝多糖减少在体肿瘤细胞RNA的含量比DNA更为明显.环磷酰胺使肿瘤细胞的RNA和DNA含量均下降(P=0.000),但对RNA/DNA比值没有影响.灵芝多糖各剂量组使G0/G1期细胞百分数增加(P=0.003,0.000,0.000),而环磷酰胺作用相反(P=0.000).灵芝多糖对S期细胞的百分率没有影响,而环磷酰胺使S期细胞的百分率减少(P=0.011).灵芝多糖各剂量组使G2/M期细胞百分数下降(P=0.014,0.049,0.016),而环磷酰胺作用相反(P=0.000).结论 灵芝多糖对在体S180肿瘤细胞DNA和RNA含量及细胞周期的影响与环磷酰胺不同;通过动员机体的免疫功能,抑制肿瘤细胞DNA和RNA的复制与合成,从而影响其细胞周期的正常运转,可能是灵芝多糖抑制肿瘤细胞生长的机制之一.     

一种椎间盘组织总RNA提取的改良方法

目的改进传统常规法在椎间盘组织中总RNA提取,获得高质量的椎间盘组织总RNA。方法健康成年Newsland白兔,完整取出椎间盘组织,随机分RNA传统方法组和酶消化改良组。传统组,按Trizol法提取总RNA;酶消化改良组,加入0.2%Ⅱ型胶原酶,置于细胞培养箱消化数小时,加入含小牛血清的PBS液终止,离心收集细胞。余步骤同传统组。结果传统组,电泳结果未见28S和18S条带,5S条带部分可见;A260/280比值在1.5左右,蛋白多糖污染重。而酶消化组,电泳结果可见清晰的28S、18S和5S条带,且28S条带的亮度约是18S的两倍;A260/280比值在1.8～2.0之间,无蛋白污染,此法提取的RNA,逆转录后可用于扩增β-actin基因。结论酶消化改良法可望成为椎间盘组织总RNA提取的好方法。RNA片断完整,纯度高,无蛋白污染,不影响后续基因表达（RT-PCR）的分析,并且重复性好,可以推广。     

硫代反义寡脱氧核苷酸在树体内对HDV复制与表达的抑制作用

目的：在树（Ｔｕｐａｉａ）体内观察硫代反义寡脱氧核苷酸（Ｓ－ＡＳＯＤＮ）对ＨＤＶ复制、表达的抑制作用。方法：树同时接种ＨＢＶ阳性血清０．１ｍｌ、ＨＤＶ阳性血清０．３ｍｌ后，将１６只ＨＤＶ／ＨＢＶ感染成功的树随机分为两组，给药组８只树按每只每次经尾静脉注射Ｓ－ＡＳＯＤＮ３ｍｇ，隔日１次，共７次。对照组中２只注射等量生理盐水，另６只不作处理。注射后５、１０、１５、２５ｄ取血及肝组织采用免疫组化、斑点杂交及原位杂交法检测ＨＤＶＡｇ及ＨＤＶＲＮＡ。结果：于注射结束时（１５ｄ）给药组有７只树肝内ＨＤＶＡｇ及ＨＤＶＲ－ＮＡ转为阴性，对照组８只树中仅１只转为阴性。停止使用Ｓ－ＡＳＯＤＮ１０ｄ后，给药组２只阴转树肝内又可检出ＨＤＶＡｇ和ＨＤＶＲＮＡ，对照组仍有７只可检出。结论：Ｓ－ＡＳＯＤＮ在树体内能有效抑制ＨＤＶ复制及表达，但作用并不完全，可能与用药剂量不足，时间不够长及仅用硫代修饰尚不能直接导向靶基因有关     

介导含硫多肽类抗生素耐药的23S rRNA甲基转移酶NHR的生化功能

目的 研究23S rRNA甲基转移酶-硫链丝菌肽抗药性RNA甲基转移酶(thiostrepton-resistance-RNA methyltransferase,TSR)和23S rRNA甲基转移酶-那西肽抗药性RNA甲基转移酶(nosiheptide-resistance-RNA methyltransferase...