坎地沙坦对动脉粥样硬化大鼠肝功能的影响

目的探讨坎地沙坦对动脉粥样硬化大鼠肝功能的影响。方法通过给正常大鼠饲喂高脂饲料,建立动脉粥样硬化大鼠模型;将实验大鼠随机分为正常组、模型组、坎地沙坦低、中、高剂量组。12周后腹主静脉取血,检测各组肝功能各项指标。结果模型组大鼠肝功能主要指标（ALT、AST）较正常对照组显著升高（P〈0.01）;灌胃坎地沙坦12周后,坎地沙坦低、中、高剂量组肝功能主要指标明显改善,较模型组显著降低（P〈0.01）,其中中剂量组对肝功能指标改善的效果优于高、低剂量组。结论坎地沙坦能有效减轻动脉粥样硬化时的肝损伤,改善肝功能,尤以中剂量组效果显著。     

坎地沙坦对糖尿病肾病大鼠足细胞保护作用的研究

目的 探讨糖尿病肾病(diabetic nephropathy,DN)大鼠足细胞超微结构及其相关分子nephrin表达的变化,以及坎地沙坦对其干预的影响,为DN的防治提供理论依据.方法 选择健康雄性SD大鼠36只,按随机数字表法分为A组(正常对照组)、B组(DN组)和C组(DN+坎地沙坦组),每组12只.B、C组尾静脉注射链脲佐菌素(30 mg·kg-1)制备DN大鼠模型,于DN模型成模1周后将3组大鼠分别在代谢笼中喂养,C组给予坎地沙坦5 mg·kg-1·d-1灌胃,A组及B组给予等量生理盐水灌胃.用药后第4周和第7周检测各组大鼠的血糖、体质量、24 h尿蛋白和内生肌酐清除率(Ccr),于第7周取肾组织行光学显微镜及电子显微镜观察肾脏病理改变、RTPCR法检测nephrin-mRNA表达.结果 与A组比较:B组24 h尿蛋白排泄增多(P＜0.05),Ccr在7周时下降(P＜0.05);肾组织内nephrin-mRNA表达下调(P＜0.05);肾组织足细胞足突宽度增加并出现融合,肾小球基底膜增厚.与B组比较:C组24 h尿蛋白排泄量降低(P＜0.05),Ccr升高(P＜0.05);肾组织内nephrin-mRNA表达增加(P＜0.05),足细胞足突宽度及肾小球基底膜厚度变小.结论 DN时存在足细胞分子nephrin表达异常和超微结构改变,坎地沙坦对肾脏的保护作用机制可能是通过增加nephrin表达、改善足细胞超微结构而实现.     

坎地沙坦酯治疗老年轻、中度高血压65例

大量流行病学研究表明，血压升高是冠心病和脑卒中发病的独立危险因素，其发病率随年龄增长而增高，因此24h平稳降压，减少高压所至的靶器官损害和心脑血管危险是人们的追求目标。本文旨在观察国产坎地沙坦酯（维尔亚）治疗老年轻、中度高血压患者的临床疗效，现报告如下。     

坎地沙坦干预大鼠动脉粥样硬化血管形态的作用

目的 探讨坎地沙坦对动脉粥样硬化大鼠血管形态的影响。方法 通过给正常大鼠饲喂高脂饲料,建立动脉粥样硬化模型。将50只大鼠随机分为正常组,模型组,坎地沙坦低、中、高剂量组。12周后取相同部位主动脉分别进行固定、染色,在光镜及电镜下进行观察,并测量血管内膜、中膜厚度。结果 模型组与正常组相比主动脉出现动脉粥样硬化的形态学改变;与模型组相比坎地沙坦低、中、高剂量组动脉粥样硬化的形态学改变有所减轻。模型组与正常组相比,内膜与中膜厚度显著增加(P<0.01);与模型组相比,坎地沙坦中、高剂量组可明显减轻动脉内膜及中膜厚度(P<0.01)。结论坎地沙坦可减轻大鼠动脉粥样硬化形态学改变,减少血管内膜、中膜的增生。     

坎地沙坦联合用药治疗原发性原发高血压病的疗效观察

目的:探讨高血压病治疗的有效药物和方法,为临床用药提供依据.方法:用坎地沙坦酯片单用或联合其他抗高血压药物对120例原发性高血压(2级)患者进行治疗观察.结果:坎地沙坦+硝苯地平缓释片+氢氯噻嗪C组效果明显优于单服坎地沙坦组(A组)和坎地沙坦+氢氯噻嗪B组.结论:平稳降压,联合用药,保护靶器官.血压达标,能有效预防心脑血管事件的发生.改善高血压病人的生活质量.     

坎地沙坦酯治疗老年原发性高血压的疗效观察

目的 观察评价坎地沙坦酯治疗高血压的临床疗效和安全性.方法 采用随机平行对照,选择老年高血压患者102例,治疗组采用坎地沙坦酯4～8mg口服,1次/d,对照组采用依那普利5～10mg口服,2次/d,共8周.比较治疗前、治疗4周和8周末血压、心率、血常规、尿常规、血糖、肝肾功能、离子、血尿酸、临床表现变化.结果 治疗4周和8周后,治疗组疗效高于对照组(P＞0.05).治疗过程中对肝脏及肾脏功能、血糖、血脂无影响,无心脑血管意外发生.结论 坎地沙坦酯对治疗老年性高血压疗效确切,作用持久、缓和,对收缩压和舒张压有明显降低作用,是治疗老年性高血压较为理想的新型长效制剂.     

坎地沙坦对兔心肌缺血再灌注微血管功能障碍的影响

目的 探讨坎地沙坦预处理对兔心肌缺血/再灌注(I/R)微血管功能障碍的影响.方法 40只健康雄性新西兰大白兔随机分为假手术组、心肌I/R模型组、坎地沙坦低剂量组(0.5 mg/kg)、中剂量组(2.5mg/kg)、高剂量组(5.0mg/kg),每组8只.造模前各组灌胃给药2周.假手术组左前降支近端穿线但不结扎,其余4组予60min缺血,360min再灌注.取缺血梗死区心肌组织,HE染色后计算微血管腔内中性粒细胞数及心肌灶性出血发生率;采用硝酸还原酶法检测心肌组织一氧化氮(NO)水平,免疫组化法测定内皮型一氧化氮合酶(eNOS)表达;透射电镜观察毛细血管超微结构.结果 与模型组比较,坎地沙坦低剂量组、中剂量组、高剂量组微血管腔内中性粒细胞数、心肌灶性出血发生率均明显减少(P<0.01),心肌组织NO含量、eNOS表达均明显增加(P<0.01),并呈剂量依赖性;电镜示坎地沙坦低剂量组、中剂量组、高剂量组毛细血管内皮细胞肿胀均较模型组减轻.结论 坎地沙坦可上调eNOS的表达,升高NO水平,缓解血管内皮细胞肿胀,保护微血管的完整性,抑制中性粒细胞黏附聚集,缓解微血管堵塞,从而改善兔心肌I/R微血管功能障碍,且该作用具有一定的剂量依赖性.     

坎地沙坦酯对急性心肌梗死大鼠血管内皮功能的干预影响

目的：研究坎地沙坦酯（candesartan cilexetil,CAN）对急性心肌梗死（acute myocardial infarction,AMI）大鼠血管内皮功能的干预。方法：将大鼠随机分为AMI组、ＣＡＮ组和假手术组,干预2周后处死,检测血压（blood pressure,BP）、血一氧化氮（nitric oxide,NO）、血管紧张素Ⅱ（angiotension Ⅱ,AngⅡ）含量、一氧化氮合酶（nitric oxide synthase,NOS）活性、离体胸主动脉条片舒缩功能。结果：与假手术组比较,AMI组血清NO含量、NOS活性降低,胸主动脉内皮依赖性舒张（endothelium-dependent diastole,EDD）功能减退,血浆AngⅡ含量升高,差异有统计学意义（P=0.000 4）。经ＣＡＮ干预后血清NO含量、NOS活性升高达假手术组水平,胸主动脉EDD显著改善（P=0.0009）,同时血浆AngⅡ含量升高,各组ＢＰ并无明显变化。结论：ＣＡＮ在不影响ＢＰ的前提下显著改善大鼠AMI后的血管内皮功能。     

坎地沙坦酯对急性心肌梗死大鼠血管内皮功能的干预影响

目的:研究坎地沙坦酯(candesartan cilexetil,CAN)对急性心肌梗死(acute myocardial infarction,AMI)大鼠血管内皮功能的干预。方法:将大鼠随机分为AMI组、CAN组和假手术组,干预2周后处死,检测血压(blood pressure,BP)、血一氧化氮(nitric oxide,NO)、血管紧张素Ⅱ(angiotensionⅡ,AngⅡ)含量、一氧化氮合酶(nitric oxide synthase,NOS)活性、离体胸主动脉条片舒缩功能。结果:与假手术组比较,AMI组血清NO含量、NOS活性降低,胸主动脉内皮依赖性舒张(endothelium-dependent diastole,EDD)功能减退,血浆AngⅡ含量升高,差异有统计学意义(P=0.000 4)。经CAN干预后血清NO含量、NOS活性升高达假手术组水平,胸主动脉EDD显著改善(P=0.0009),同时血浆AngⅡ含量升高,各组BP并无明显变化。结论:CAN在不影响BP的前提下显著改善大鼠AMI后的血管内皮功能。     

氧化修饰低密度脂蛋白诱导巨噬细胞凋亡

通过观察凋亡细胞的核形态及特征DNA梯形图谱（DNAladder）．研究了氧化修饰低密度脂蛋白（Ox－LDL）诱导的巨噬细胞凋亡。结果显示：Ox－LDL可引起明显的巨噬细胞凋亡，表现在Ox－LDL处理的细胞核发生固缩，染色体DNA断裂的凝胶电泳图谱呈典型的梯形，正常和乙酰化LDL（N－LDL和AC－LDL）未引起明显的巨噬细胞凋亡。Ox－LDL引起的巨噬细胞凋亡具有浓度和时间效应且与其修饰程度有关，修饰程度越高，引起凋亡越明显．     

氧化低密度脂蛋白在2型糖尿病肾病发展中的变化及其意义

目的探讨氧化低密度脂蛋白（ox-LDL）通过直接作用和间接作用（内皮细胞-NO-血小板机制）对糖尿病肾病（DN）发生和发展的影响及意义。方法以24小时尿蛋白排泄率（UAER）将73例DM患者分成三组,用ELISA法测定其血清ox-LDL、一氧化氮（NO）及血管性假血友病因子（vWF）,并以25例正常人作对照。结果血浆ox-LDL浓度在2型DM组中与对照组比较显著升高（P〈0.01）,并且与尿蛋白呈显著性正相关（P〈0.01）,且ox-LDL与血NO呈负相关,与vWF呈正相关。结论ox-LDL是DN的危险因子,它通过直接作用和间接作用（内皮细胞-NO-血小板机制）加重DN,促使DN的发生和发展。     

内皮氧化低密度脂蛋白受体介导了氧化低密度脂蛋白对内皮细胞的损伤

目的：探讨氧化低密度脂蛋白（ｏｘｉｄｉｚｅｄ ｌｏｗ ｄｅｎｓｉｔｙｌｉｐｏｐｒｏｔｅｉｎ,ｏｘＬＤＬ） 血管内皮受体（ｌｅｃｔｉｎｌｉｋｅ ｏｘＬＤＬｒｅｃｅｐｔｏｒ,ＬＯＸ１）在ｏｘＬＤＬ致内皮细胞损伤中的作用及其机制。方法：放射配基结合及竞争抑制实验检测人脐静脉内皮细胞（ｈｕｍａｎ ｕｍｂｉｌｉｃａｌｖｅｉｎ ｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｃｅｌｌｓ,ＨＵＶＥＣｓ）存在ＬＯＸ１ 的高亲和位点,采用倒置相差显微镜观察细胞形态的改变,测定细胞及上清乳酸脱氢酶（ｌａｃｔｉｃ ｄｅｈｙｄｒｏｇｅｎａｓｅ,ＬＤＨ）活性,计算细胞死亡率,发色底物法检测内皮细胞培养液中的组织纤溶酶原激活物（ｔｉｓｓｕｅ ｐｌａｓｍｉｎｏｇｅｎ ａｃｔｉｖａｔｏｒ,ｔＰＡ） 和纤溶酶原激活物抑制剂（ｐｌａｓｍｉｎｏｇｅｎａｃｔｉｖａｔｏｒｉｎｈｉｂｉｔｏｒ１ ,ＰＡＩ１）的活性; 反转录聚合酶链反应检测ＬＯＸ１ ｍＲＮＡ 表达水平,Ｃａ２＋ 示踪测定细胞钙转运功能。结果：ＨＵＶＥＣｓ 存在ＬＯＸ１ 的高亲和位点［Ｂｍａｘ（５４ ±２０） ｎｇ／１０６ ｃｅｌｌｓ,Ｋｄ（２．０ ±０．６） ×１０－８ ｍｏｌ·Ｌ－ １］ ,单纯加入ｏｘＬＤＬ作用２４ ｈ      

2型糖尿病患者血清氧化型低密度脂蛋白和血液抗氧化能力分析

目的　通过对 5 0例 2型糖尿病患者血清甘油三酯 (TG)、胆固醇 (Chol)、高密度脂蛋白胆固醇 (HDL c)、低密度脂蛋白胆固醇 (LDL c)、氧化型低密度脂蛋白 (OX LDL)、载脂蛋白 (ApoA1、ApoB10 0 )及血液抗氧化能力 (AOC)分析 ,探讨2型糖尿病患者OX LDL与血液抗氧化状态的关系 ,寻找评价 2型糖尿病患者发生冠心病危险性的有效血液生化指标。方法　收集 5 0例经临床确诊的 2型糖尿病患者及 5 0例无心血管疾病、无糖尿病及无肾病人群的空腹血清 ,对血脂和血液AOC进行分析。结果　TG、Chol、HDL c、LDL c、ApoA1、ApoB10 0 两组比较无差异 (P >0 0 5 ) ;OX LDL 2型糖尿病组明显高于对照组 (P <0 0 1) ,血液AOC 2型糖尿病组明显低于对照组 (P <0 0 1)。结论　血清OX LDL及血液AOC分析有望成为评价 2型糖尿病患者发生冠心病危险性更灵敏、更有效的血液生化指标。     

氧化应激和植物凝集素样氧化型低密度脂蛋白受体1在氧化低密度脂蛋白上调内皮细胞自噬水平中的作用

目的 探讨氧化应激和植物凝集素样氧化型低密度脂蛋白受体1(LOX-1)在氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)上调人脐静脉内皮细胞(HUVEC)自噬水平中的作用.方法 用LOX-1 mAb及抗氧化剂维生素C(vitC)、vitE预处理ox-LDL作用的HUVEC;酶联免疫技术观察培养上清中丙二醛(MDA)、超氧化物歧化物(SOD)含量;免疫印迹技术检测自噬标记物LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ、beclin1及溶酶体膜蛋白2a(Lamp2a)蛋白含量.结果 ox-LDL作用在0.5 h和6 h能显著减少细胞培养上清中TSOD活力[0.5 h(32.73±1.09比40.16±1.28)U/ml;6 h(29.32±1.56比40.16±1.28)U/ml,均P＜0.01];增加其MDA含量[0.5 h(1.11±0.04比0.57±0.05)nmol/ml,P＜0.01;6 h(0.69±0.03比0.57±0.05)nmol/ml,P＜0.05],与上调自噬水平的高峰时间点相吻合,该作用能部分性被抗氧化剂vitC、vitE拮抗.ox-LDL诱导的LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ表达上调能被viC、vitE(0.5 h,vitC:3.11±0.02比4.31±0.50;vitE:3.46±0.19比4.31±0.50,均P＜0.05;6 h,vitC:1.44±0.05比2.31±0.16,P＜0.05)而非LOX-1 mAb抑制;LOX-1mAb能抑制ox-LDL诱导的Lamp2a表达上调(0.5 h,0.75±0.02比1.12±0.02,P＜0.01;6 h,0.88±0.02比1.06±0.04,P＜0.05),而vitC和ritE仅能抑制Lamp2a 6 h的表达上调(vitC,0.73±0.01比1.06±0.04,P＜0.01;vitE,0.84±0.02比1.06±0.04,P＜0.05).结论 100μg/ml ox-LDL上调HUVEC的自噬水平作用不依赖LOX-1受体途径,而是与氧化应激有关.自噬溶酶体形成的增加可能与LOX-1受体介导的ox-LDL入胞有关,氧化应激仪参与了晚期人胞后ox-LDL对自噬溶酶体形成增加的调节.

Abstract：

Objective Our previous studies found that 100 μg/ml oxidized low-density lipoprotein (ox-LDL) could up-regulate the autophagic level in human umbilical vein endothelial cells (HUVEC). The present study was conducted to observe the roles of oxidative stress and lectin-like oxidized low density lipoprotein-1 ( LOX-1 ) in the ox-LDL-induced up-regulation of autophagy. Methods Prior to the ox-LDL exposure, LOX-1mAb, vitamin C and vitamin E were used to study the roles of LOX-1 and oxidative stress in the activation of autophagy. The contents of total-superoxide dismutase (T-SOD) and MDA (malondialdehyde) in the culture medium were detected with enzyme linked immunosorbent assay. Western blot was employed to detect the levels of autophagic marker microtubule-associated protein light chain 3 ( MAP1-LC3 ) - Ⅱ/LC3- Ⅰ , beclinl and lysosome associated membrane protein 2a (lamp2a). Results After the ox-LDL exposure, the down-regulated level of T-SOD [0. 5 h (32. 73 ± 1.09 vs 40. 16 ± 1.28) U/ml,P ＜0. 01; 6 h ( 29. 32 ± 1.56 vs 40. 16 ± 1.28 ) U/ml, P ＜ 0. 01]and the up-regulated level of MDA [0.5 h(1.11 ±0.04 vs 0.57 ±0.05) nmol/ml, P＜0. 01; 6 h (0.69 ±0.03 vs 0.57 ±0.05) nmol/ml,P ＜0. 05]in culture medium were also significant at 0. 5 h and 6 h. The ox-LDL-induced increased ratio of LC3- Ⅱ/LC3- Ⅰ was reversed by the pretreatments of vitamin C and vitamin E (0. 5 h, vitC:3. 11 ±0. 02 vs 4.31 ±0.50, P＜0. 05; vitE: 3.46 ±0. 19 vs 4.31 ±0.50, P ＜0.05;6 h,vitC: 1.44 ±0.05 vs 2.31 ±0. 16,P ＜0. 05 ), but not LOX-1mAb. LOX-1 mAb decreased the ox-LDL-induced elevated level of lamp2a protein while vitamin C and vitamin E only inhibited the elevation of lamp2a at the timepoint of 6 h, but not 0. 5 h. Conclusion Oxidative stress, rather than LOX-1, plays an important role in the ox-LDL-induced upregulation of autophagy in HUVEC. The formation of autolysosomes is associated with the LOX-1-mediated endocytosis of ox-LDL. Oxidative stress only plays a minor role in the formation of autolysosomes induced by the engulfed ox-LDL.     

低密度脂蛋白对胰岛细胞功能的影响

目的:研究低密度脂蛋白对体外培养的胰岛细胞功能的影响.方法:体外分离培养Wistar大鼠胰岛细胞,并在低糖(2.8mmol/L)和高糖(16.7mmol/L)条件下与低密度脂蛋白(LDL)(从8mg/L开始)培养48h,应用放射免疫法测定葡萄糖刺激的大鼠胰岛细胞胰岛素分泌量.结果:①低糖刺激下,LDL对胰岛细胞的胰岛素分泌无明显影响,但在高糖刺激下,胰岛素分泌水平降低.②LDL和抗氧化剂维生素E,C共同培养48h,与LDL组比较,高糖刺激下胰岛素分泌水平增加.结论:胰岛细胞摄入LDL后发生氧化反应,损伤胰岛细胞功能,这一过程可被抗氧化剂抑制.     

氢气对氧化低密度脂蛋白诱导的内皮细胞凋亡的抑制作用

目的探讨氢气(H2)饱和培养液对氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导的内皮细胞凋亡的影响。方法人脐静脉内皮细胞株EA-hy926分为:ox-LDL组,ox-LDL+不同浓度H2组和正常对照组;流式细胞仪检测细胞凋亡率和细胞内ROS水平;Western blot检测NF-κB p65蛋白水平。结果 ox-LDL+H2组(氢浓度0.6 mmol/L)与ox-LDL组相比,细胞凋亡率明显降低[(2.48±0.21)%vs(4.01±0.39)%,P<0.01],细胞内ROS含量减少[(2.05±0.22)vs(5.32±1.04),P<0.01],NF-κB p65蛋白水平降低[(0.29±0.02)vs(0.66±0.07),P<0.01],且上述作用随H2浓度增加而增强。结论 H2饱和培养液可减少ox-LDL诱导的内皮细胞凋亡,其机制可能与减少ROS含量和抑制NF-κB激活有关。     

低密度及氧化低密度脂蛋白对内皮细胞分泌肾上腺髓质素的影响

目的探讨低密度及氧化低密度脂蛋白对内皮细胞分泌肾上腺髓质素(ADM)的影响.方法利用培养的内皮细胞株ECV-304细胞,分别与不同浓度的低密度(50 100mg/L)、氧化低密度脂蛋白(50 100mg/L)及低密度脂蛋白(50 mg/L) 氧化低密度脂蛋白(50 mg/L)进行孵育,24 h后分别收集培养上清及细胞,用放免分析检测上清及细胞内肾上腺髓质素的含量.结果低密度脂蛋白对肾上腺髓质素的分泌无影响,而氧化型低密度脂蛋白能明显刺激ADM的分泌,二者合用的作用接近于100mg/L的OX-LDL.结论OX-LDL可能具有氧化LDL使其成为OX-LDL的作用,ADM的分泌可能是对细胞损伤的一种反应.     

Ox-LDL对PLGF作用内皮细胞释放炎症因子的影响

目的探讨ox—LDL对胎盘生长因子-1作用人脐静脉内皮细胞ECV-304释放炎症因子IL-6、MMP-2表达的影响。方法在ox—LDL（25μg／mL）条件下,应用不同浓度的胎盘生长因子-1（20、40、80ng／mL）孵育ECV-304。对照组为单用ox—LDL孵育ECV-304。3h、6h、12h、24h后收集细胞上清液,ELISA法检测内皮细胞相关炎症因子IL-6、MMP-2的表达。结果在氧化损伤条件下,胎盘生长因子-1诱导炎症因子的表达呈时间、浓度依赖关系。结论氧化损伤是动脉粥样硬化的独立危险因素,而PLGF可上调炎症因子的表达,进一步促使疾病的恶化。     

氧化低密度脂蛋白对THP-1巨噬细胞CD36表达的影响

目的：观察氧化低密度脂蛋白（oxLDL）对THP—1巨噬细胞CD36表达和细胞胆固醇流人的影响，探讨CD36在巨噬细胞胆固醇流人中的作用？方法：用50mg／LoxLDL分别孵育THP—1巨噬细胞不同时间（0、12、24、36和48h），采用逆转录-聚合酶链式反应（RT—PCR）和Western印迹分别检测CD36 mRNA和蛋白质的表达；用油红O染色观测细胞内脂质蓄积情况；用液体闪烁计数法检测[^3H]胆固醇流人。结果：50mg／L oxLDL孵育THP-1巨噬细胞不同时间（0、12、24、36和48h），THP—1巨噬细胞CD36 mRNA及蛋白质表达上调，油红O染色可见细胞内脂滴逐渐增加，液体闪烁计数发现THP—1巨噬细胞胆固醇流人增加，分别为23．5％、27．8％、39．7％、44．1％和49．7％。结论：oxLDL可使THP-1巨噬细胞CD36表达上调，并使细胞胆固醇流人增加。