紫草素对人胎肾小球系膜细胞增殖、凋亡及细胞外基质的影响

目的：研究紫草素对人胎肾小球系膜细胞(MC)增殖、凋亡及细胞外基质的影响。方法：采用人胎肾细胞培养法、MTT法、流式细胞仪及免疫组化的方法。结果：紫草素0．05、0．10、0．50及1，00mmol／L浓度对培养24、48、72h人MC有明显抑制作用；紫草素明显抑制高糖诱发的人MC细胞凋亡；紫草素0．05、0．10、0．50μg/ml显著抑制系膜基质层粘连蛋白(LN)、纤维连接蛋白(FN)及胶原Ⅳ(CoⅣ)的生成。结论：紫草素具抑制人MC增殖、细胞外基质生成及细胞凋亡作用。     

益肾蠲湿合剂对肾小球系膜细胞分泌细胞外基质的调节作用

①目的观察自拟中药复方益肾蠲湿合剂对肾小球系膜细胞（glomerular mesangial cell,GMC）分泌细胞外基质的抑制作用。②方法将1×10^-3、1×10^-2和1×10^-1mg/mL益肾蠲湿合剂的提取液作用于含10%血清DMEM培养的GMC,分别于24、48和72h后收集培养上清,采用Elisa法检测上清中透明质酸（hyaluronic acid,HA）、纤维连结蛋白（FN）及Ⅳ型胶原（ColⅣ）含量。③结果 10%血清促进了GMC分泌HA、FN和ColIV,但这种作用可明显被不同浓度的益肾蠲湿合剂所抑制,并且其抑制程度随药物浓度的增加而增加。④结论益肾蠲湿合剂可以抑制体外培养的GMC分泌HA、FN和ColIV,推测这种作用是其治疗慢性肾小球疾病的主要机制之一。     

脂多糖诱导大鼠肾小球系膜细胞增殖和分泌细胞外基质的研究

目的观察脂多糖（LPS）对大鼠肾小球系膜细胞（GMC）增殖及分泌细胞外基质（ECM）的作用。方法建立体外培养的大鼠GMC,鉴定后用于实验。实验分为两组：对照组和LPS诱导组。甲基噻唑基四唑（MTT）比色法测定24h和48h两个时点两组系膜细胞的增殖情况;ELISA法测定6h、12h和24h系膜细胞培养上清液中ECM蛋白含量;荧光半定量反转录PCR（RT-PCR）法检测ECM中层黏连蛋白（LN）β2 mRNA表达的变化。结果（1）LPS组和对照组GMC增殖情况间差别有显著性意义（P〈0.05）;（2）正常培养的大鼠GMC可分泌一定量的ECM,LPS组在各时点分泌ECM量与对照组间差别有显著性意义（P〈0.01）;（3）正常培养的大鼠GMC有微量LNβ2 mRNA表达,LPS组在各时点LNβ2 mRNA表达量与对照组间差别均有显著性意义（P〈0.01）。结论从蛋白和mRNA两个水平同时观察到ECM成分（如FN、LN和ColⅣ）的增加,说明在系膜增殖性肾炎中ECM明显增加并起主要作用。     

高糖培养的大鼠肾小球系膜细胞中NO的变化及其对细胞外基质的影响

目的 探讨高糖培养的肾小球系膜细胞中一氧化氮（NO）合成的变化,以及上述变化对细胞外基质的影响.方法 体外培养大鼠肾小球系膜细胞,按干预方法分为正常组（NG组,5.56 mmol·L-1 DMEM）,高糖组（HG组,25 mmol·L-1 DMEM）、一氧化氮供体组（SNP组,5.56 mmol·L-1 DMEM＋100 μmol·L-1 SNP）、NO清除剂组（C-PTIO 组,25 mmol·L-1 DMEM＋200 μmol·L-1 C-PTIO）,以Griess比色法测定培养上清中NO水平;用ELISA法测定培养上清中Ⅳ型胶原、层黏蛋白含量.结果 高糖培养条件下上清中NO增多（P〈0.05）,Ⅳ型胶原、层黏蛋白含量增加（P〈0.01）,应用C-PTIO可显著降低上清中NO的含量,Ⅳ型胶原、层黏蛋白的含量也降低.结论 高糖可诱导大鼠肾小球系膜细胞产生NO,异常增多的NO又可导致系膜细胞中Ⅳ型胶原、层黏蛋白的积聚.     

蜕皮甾酮对高糖培养大鼠肾小球系膜细胞增殖及其细胞外基质含量的影响

目的：观察蜕皮甾酮对高糖环境下大鼠肾小球系膜细胞（MCs）增殖、细胞外基质的影响。方法：体外培养大鼠MCs细胞株,分低糖组、高糖组、高糖＋蜕皮甾酮组（EDS组）,分别作用12、24、48h,MTT法检测细胞增殖活力,ELISA法检测细胞上清中FN的含量。结果：与低糖组比较,高糖组12h、24h、48h MCs增殖显著增快（P〈0.01）,FN含量明显增加（P〈0.05）;与低糖组比较,EDS在浓度〉1×10-5mol/L时MCs增殖显著减慢（P〈0.01）;与高糖组比较,EDS 1×10-6mol/L组各时间点及1×10-7mol/L组24h、48h MCs增殖显著减慢（P〈0.05或P〈0.01）,EDS 1×10-6mol/L组各时间点FN含量均有降低（P〈0.05或P〈0.01）;EDS 1×10-10、1×10-8mol/L组各时间点FN含量差异无统计学意义（P〉0.05）。结论：①蜕皮甾酮在浓度〉1×10-5mol/L时对MCs有明显的细胞毒性作用。②蜕皮甾酮可抑制高糖诱导的MCs增殖。③蜕皮甾酮能减少高糖培养大鼠MCs细胞外基质的增加。     

LEF 对肾小球系膜细胞增殖及分泌细胞外基质的影响

目的: 探讨来氟米特对转化生长因子－β1刺激的大鼠肾小球系膜细胞( GMCs) 增殖及细胞外基质
( ECM) 分泌的影响。方法: 体外培养大鼠肾小球系膜细胞,分正常对照组,TGF－β1( 5 ng /mL) 刺激组,TGF－β1 +
LEF( LEF 浓度分别为5μmol /L、25μmol /L、50μmol /L、100μmol /L) 组,培养24h、48h 和72h 后,MTT 法观察各组
肾小球系膜细胞在不同时间点的增殖情况; ELISA 法测定各组培养细胞上清液中纤连蛋白的含量。结果: ( 1) 与
对照组相比,TGF－β1可刺激系膜细胞增殖,不同浓度的LEF 均可以抑制TGF－β1刺激的系膜细胞增殖( P＜0．05) ,48h 后抑制作
用稳定。( 2) TGF－β1刺激组细胞上清液中纤连蛋白含量明显高于对照组( P＜0．05) ,不同浓度的LEF 组纤连蛋白含量明显低于TGF－β1
组( P＜0．05) 。结论: 来氟米特可以抑制TGF－β1刺激的肾小球系膜细胞的增殖,减少细胞外基质的分泌,为其治疗慢性肾脏病提供理论依据。     

系膜细胞的功能对肾小球滤过作用的影响

系膜细胞有两种类型即肾小球内系膜细胞和肾小球外系膜细胞，研究表明系膜细胞内有收缩系统存在，肾上球内系膜细胞与收缩功能有密切的关系，肾小球外系膜细胞功能的改变在管－球反馈的信号转导中起关键作用。此外，系膜细胞还有吞噬及产生并分泌多种生物活性物质等功能。其中系膜细胞的收缩在调节肾小球血液动力学如滤过系数和管－球反馈的变化方面可能具有重要的生理意义。     

IL—1β对人肾系膜细胞合成和分泌细胞外基质的影响

目的：探讨IL－1β对人肾小球系膜细胞合成和分泌细胞外基质（ECM）的影响。方法：利用ELISA法和放免法分别检测IL－1β对人肾小球系膜细胞刺激后培养上清FN、PCⅢ、Ⅳ．C的水平。结果：IL－1β对人肾小球系膜细胞合成和分泌FN、PCⅢ、Ⅳ．C具有明显的刺激作用（与对照组相比,P＜0．05）,在刺激24h时的作用最强。结论：IL－1β可能通过增加FN、PCⅢ、Ⅳ．C的合成和分泌,引起ECM的积聚,致肾组织进行性纤维化和硬化。     

补肾活血法对肾小球系膜细胞MMP-2及TIMP-2表达的影响

摘要: 目的 观察补肾活血法组方中药对基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、膜型基质金属蛋白酶-1（MT1-MMP）、基质金属蛋白酶组织抑制剂-2（TIMP-2）在高糖培养的肾小球系膜细胞（GMC）中表达的影响。方法 将体外培养的GMC分为高糖组（30mmol/L）、正常糖组（5.4 mmol/L）和高糖+补肾活血组方中药组。采用酶联免疫吸附法（ELISA）测定GMC上清液中Ⅳ型胶原的分泌;免疫细胞化学法及流式细胞仪（FCM）检测MMP-2、MT1-MMP、TIMP-2的蛋白表达。结果 与正常糖组比较,随着培养时间的延长,高糖组细胞培养上清液中Ⅳ型胶原分泌明显增加,MMP-2、MT1-MMP表达减少,TIMP-2表达升高（p<0.01）。补肾活血法组方中药可以上调MMP-2的表达,下调TIMP-2的表达。结论 补肾活血法组方中药可以加速细胞外基质降解,减少细胞外基质积聚,从而防治肾小球硬化。     

补肾活血法对肾小球系膜细胞MMP-2、TIMP-2表达的影响

摘要: 目的 观察补肾活血法组方中药对基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、膜型基质金属蛋白酶-1（MT1-MMP）、基质金属蛋白酶组织抑制剂-2（TIMP-2）在高糖培养的肾小球系膜细胞（GMC）中表达的影响。方法 将体外培养的GMC分为高糖组（30mmol/L）、正常糖组（5.4 mmol/L）和高糖+补肾活血组方中药组。采用酶联免疫吸附法（ELISA）测定GMC上清液中Ⅳ型胶原的分泌;免疫细胞化学法及流式细胞仪（FCM）检测MMP-2、MT1-MMP、TIMP-2的蛋白表达。结果 与正常糖组比较,随着培养时间的延长,高糖组细胞培养上清液中Ⅳ型胶原分泌明显增加,MMP-2、MT1-MMP表达减少,TIMP-2表达升高（p<0.01）。补肾活血法组方中药可以上调MMP-2的表达,下调TIMP-2的表达。结论 补肾活血法组方中药可以加速细胞外基质降解,减少细胞外基质积聚,从而防治肾小球硬化。     

活血通脉片对高血压患者血脂、血液流变和细胞流变性的临床疗效观察

目的　观察中药复方制剂活血通脉片对高血压伴高脂血症患者的临床疗效 .方法　 6 2例高血压伴高脂血症患者 ,分为活血通脉片组 (n=31)和藻酸双脂钠组 (n=31) ,分别给予活血通脉片和藻酸双脂钠 ,于服药前 ,服药 4wk测定患者血清 TC,TG,HDL - C,L DL - C,血液流变及细胞流变相关指标 .结果　活血通脉片能降低 TC,L DL- C(P<0 .0 1) ,可明显降低血清 TG水平、升高 HDL- C(P<0 .0 5 ) ,降低全血粘度、血浆粘度、纤维蛋白原、红细胞聚集性 ,提高红细胞变形能力 (P<0 .0 5～ 0 .0 1) ,其作用强于藻酸双脂钠组 .结论　活血通脉片具有活血化瘀作用 ,可明显改善高血压伴高脂血症患者的血脂、血液流变、细胞流变异常状态 ,可用于高血压伴高脂血症患者的预防和治疗 .     

活血通脉片对实验性SD大鼠急性血瘀证血液流变性的影响

目的　研究中药复方制剂活血通脉片 (HXTMT)对SD大鼠急性血瘀证的影响 .方法　用 HXTMT混悬液给予SD大鼠灌胃 1wk,第 7日同时对大鼠皮下注射 2次 1g·L- 1 肾上腺素 0 .2 m L ,其间进行 1次寒冷刺激 (冰水 ,0℃ ) 5min,于第 8日晨复制成血瘀实验模型 ,并采血测定血液流变学各指标 .结果　 HXTMT能明显降低全血粘度 (ηb)、血浆粘度 (ηp)、纤维蛋白原 (Fib) (P<0 .0 1)及红细胞比容 (HCT) (P<0 .0 5 ) ;缩短红细胞电泳时间 (EET) (P<0 .0 5 ) ,提高红细胞电泳率 (EEM) (P<0 .0 1) ;亦能明显增强红细胞变形性 (DI)(P<0 .0 5 ) ,降低红细胞聚集指数 (AI) (P<0 .0 1) .结论　HXTMT具有改善血液流变性作用 ,能防治高粘血症和缺血性心脏病     

温润通脉方治疗大鼠心律失常模型的实验研究

目的 探讨温润通脉方治疗大鼠心律失常的作用及相关机制,为其临床的进一步应用提供实验依据.方法 SD雄性大鼠32只,随机分为正常组、模型组、西药组(即普萘洛尔组)、复方组(即温润通脉方组),每组8只,正常组和模型组采用生理盐水灌胃(2 mL/200 g),西药组采用普萘洛尔溶液灌胃(0.54 mg/200 g),复方组采用温润通脉方灌胃(1.17 g生药/200 g),药物干预7d后,制备乌头碱诱发大鼠心律失常模型,颈动脉采血及取心脏组织,检测血清及心脏组织SOD、MDA、NO含量.结果 复方组能提高血清SOD含量,与模型组相比差异有统计学意义(P＜0.05).复方组能降低组织NO含量,和模型组相比差异有统计学意义(P＜0.01).结论 复方组即温润通脉方能增加SOD活力,提高NO含量,表明其可能通过清除氧自由基,提高抗氧化酶活性及抗脂质过氧化能力等途径,发挥减轻心律失常发生的作用.     

芪丹通脉片对大鼠心肌细胞Ca2+及超微结构的影响

目的探讨芪丹通脉片(QDTM T)对急性心肌缺血的防治作用。方法SD大鼠ig QDTM T(2 g/kg)两周后,sc异丙肾上腺素(Iso,5 m g/kg)诱导急性心肌缺血模型。通过透射电镜观察心肌超微结构的变化;用比色法测定心肌组织及心肌细胞线粒体中C a2 水平及心肌细胞线粒体中C a2 -ATPase活力的变化。结果大鼠igQDTM T两周后,sc Iso所造成的心肌超微结构的损害明显减轻;心肌细胞线粒体中C a2 -ATPase活力增加,而心肌组织及心肌细胞线粒体中C a2 水平显著降低(P<0.01)。结论QDTM T可能是通过抑制心肌细胞线粒体中钙超载及保护心肌细胞超微结构,达到防治急性心肌缺血的目的。     

细胞外基质对离体大鼠睾丸支持细胞的影响

本实验利用组成细胞外基质的两种糖蛋白──纤维粘连蛋白和层粘连蛋白，以及来源于肝、肺组织的两种生物基质，在体外研究了细胞外基质对大鼠支持细胞的贴壁和铺展及形态的影响。结果证明两种糖蛋白均能促进支持细胞的贴壁和铺展。来源于肺组织的生物基质能在体外保留体内支持细胞的柱状细胞形态，而来自肝组织的生物基质则没有这种特性。     

血糖钳方法评价调脂降糖片对2型糖尿病大鼠胰岛素抵抗的增敏作用

目的:采用血糖钳方法评价调脂降糖片在2型糖尿病大鼠胰岛素抵抗的增敏作用。方法:采用一次性腹腔注射小剂量链脲佐菌素(30mg/kg体重)配合高糖高脂饲料喂养建立2型糖尿病胰岛素抵抗大鼠模型。用调脂降糖片干预治疗,以二甲双胍作为阳性对照。8周后采用血糖钳技术检测大鼠葡萄糖输注率(GIR),并测定大鼠空腹血糖(FBG)、空腹胰岛素水平(FINS)、血清游离脂肪酸(FFA)、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG),胰岛素敏感指数(ISI)。对大鼠的胰岛素敏感性和脂代谢进行评估。结果:与未治疗的2型糖尿病大鼠比较,调脂降糖片大小剂量治疗后大鼠ISI、GIR明显增加,而TC、TG、FINS、FFA显著下降,其作用与二甲双胍基本相同。结论:调脂降糖片可增加2型糖尿病大鼠胰岛素敏感性,并改善糖脂代谢异常。     

复方黄连降糖片对2型糖尿病大鼠IRS-1基因表达的影响

目的：探讨复方黄连降糖片治疗2型糖尿病的可能作用机制。方法：对链脲佐菌素注射加高脂饮食诱导的2型糖尿病模型大鼠,给予复方黄连降糖片治疗8周。氧化酶法测定血糖,放射免疫双抗体法测定血清胰岛素,RT—PCR法测定大鼠肝脏、骨骼肌和脂肪组织IILS-1 mRNA的表达及Western blot法测定肝脏、骨骼肌和脂肪组织IRS-1蛋白的表达。结果：复方黄连降糖片治疗组大鼠的血糖和血清胰岛素均有所下降,各组织IRS-1的基因表达均显著提高。结论：复方黄连降糖片可能通过提高外周组织IRS-1的基因表达,从而对2型糖尿病起到治疗的作用。     

肾炎康复片对TGF-β_1诱导下肾小球系膜细胞增殖及细胞外基质合成的影响

目的：观察肾炎康复片对转化生长因子-β1（transforming growth factor,TGF-β1）诱导下肾小球系膜细胞增殖及细胞外基质成分表达的影响。方法：体外培养正常大鼠肾小球系膜细胞,分为正常对照组,TGF-β1刺激组,TGF-β1加肾炎康复片低剂量组（100 mg·L^-1）、中剂量组（200 mg·L^-1）、高剂量组（500 mg·L^-1）。分别利用甲基噻唑基四唑法（metyl thiazolyl tetronzolium,MTT）观察肾炎康复片对TGF-β1诱导细胞活力的影响;双抗体夹心ABC-ELISA法检测细胞上清I型胶原（Col I）、纤维连接蛋白（FN）的含量。结果：TGF-β1可以显著增加大鼠肾脏系膜细胞活力,TGF-β1刺激组Col I、FN表达量较正常对照组明显升高（P〈0.05）;TGF-β1加肾炎康复片各剂量组的Col I、FN均低于TGF-β1刺激组（P〈0.05）。结论：肾炎康复片能抑制TGF-β1诱导的细胞活力及肾小球细胞外基质（ECM）的合成。提示抑制TGF-β1刺激GMC分泌细胞外基质是肾炎康复片治疗慢性肾小球疾病的重要机制之一。     

复方黄连降糖片对KK-ay小鼠肝胰岛素受体及其基因表达的影响

为研究复方降糖片(主药：大黄、黄连、肉桂)治疗2型糖尿病的机理．雄性KK-ay小鼠分为模型组、中药组、西药组．饲以高脂饲料．同时后两组分别给予相应药物治疗；另取雄性C57BL小鼠作对照．饲以普通饲料。两周后测定各组动物的空腹血糖、血清胰岛素．肝细胞胰岛素受体(IR)、IR-mRNA表达。结果：模型组血糖、血清胰岛素明显增高．IR减少、IR-mRNA下降；与模型组相比．中药组血糖降低．IR、IR-mRNA升高．且这种作用与西药(吡格列酮)不完全相同。提示：复方黄连降糖片提高IR-mRNA的表达、增加肝细胞膜的IR数量．可能是其治疗糖尿病的机理之一。     

养心通脉片对胰岛素抵抗综合征血脂及甲襞微循环的影响

目的 观察养心通脉片对胰岛素抵抗综合征(IRS)血脂水平及甲襞微循环(NFM)的影响。方法 养心通脉片治疗组33例，二甲双胍片对照组34例，两组均服药2个月，于治疗前后测定血脂水平及NFM指标。结果 治疗组与对照组均能明显增加高密度脂蛋白、降低低密度脂蛋白，而养心通脉片还能明显降低总胆固醇和甘油三脂。在改善IRS甲襞微循环的指标方面两组临床疗效相当。结论 养心通脉片与二甲双胍片均能明显改善IRS血脂水平及NFM的指标，而养心通脉片在降脂方面疗效较优。