体外血脑屏障模型的建立及发展

1885年德国人Paul Ehrlich第一次证明了脑血管的通透性与非神经性血管不同,其后的研究者们相继认识到血和脑之间有屏障存在,并称之为血-脑屏障(blood-brain barrier,BBB).血脑屏障是一个以脑微血管内皮细胞(brain micro-vascular endothelial cell,BMEC)、星形胶质细胞(Astrocyte)和周细胞(Pericyte)共同构成的结构的和功能的屏障,它调节分子进出大脑以维持神经的微环境.脑微血管内皮细胞以细胞间的紧密连接(tight junction,TJ)为主要特征、缺少窗口结构、低胞饮作用、无Weible-Palade小体,这些其他血管内皮细胞所不具备的特征,使其成为BBB的主要结构基础,也是BBB的功能基础,可以保护大脑不被血液内的微生物和毒素的伤害.     

血脑屏障体外模型的建立与评价

血脑屏障由脑微血管内皮细胞、星形胶质细胞（astrocyte,As）足突、基底膜及周皮细胞组成.脑微血管内皮细胞是BBB主要结构基础,As对维持BBB的完整性起重要作用].本研究采用人脐静脉内皮细胞（HUVEC）与小鼠As共培养构建BBB体外模型,并对其形态及屏障功能进行鉴定,以期成为体外研究物质（包括药物）经BBB通透的一种简便而可靠的工具.     

脑水肿对大鼠血脑屏障内皮细胞膜表面ICAM—1表达量的影响

采用液氮冷冻Ｗｉｓｔａｒ大鼠－侧大脑制成血管源性脑水肿模型，将大怀脑冷冻中心制成冠状面冰冻切片，运用免疫组化染色观察脑水肿组及对照组白质脑屏障内皮细胞表面ＩＣＡＭ－１蛋白表达量的变化 。     

大鼠脑微血管内皮细胞与星形胶质细胞共培养血脑屏障体外模型的建立

[目的]建立大鼠脑微血管内皮细胞与星形胶质细胞共培养血脑屏障体外模型。[方法]采用原代培养脑微血管内皮细胞与星形胶质细胞共培养方法建立血脑屏障体外模型。[结果]星形胶质细胞与脑微血管内皮细胞共培养可提高血脑屏障特异性酶——γ-谷胺酰胺转肽酶、碱性磷酸酶的表达,提高脑微血管内皮细胞跨细胞间电阻。[结论]成功建立脑微血管内皮细胞与星形胶质细胞共培养血脑屏障体外模型,而且较单层内皮细胞模型更接近在体状态。     

杀菌性/通透性增加蛋白模拟肽对内毒素休克模型家兔动脉血压影响的研究

杀菌性／通透性增加蛋白(Bactericidal/permeability increasing protein,BPI)是一种存在于人及哺乳动物中性粒细胞嗜天青颗粒中带正电荷的蛋白质，具有较强的杀灭革兰阴性菌(Gramnegative bacteria，GNB)及中和内毒素(Lipopolysaeeharide,LPS)的能力，对严重GNB感染具有一定疗效。通过多年的研究，本室采用计算机分子模拟技术设计合成了BP1模拟肽，本研究拟通过观察BP1模拟肽对平均动脉压、脉压的影响，以了解其抗内毒素休克功效。     

清开灵有效组分对大鼠脑微血管内皮细胞体外缺血再灌注损伤模型核转录因子-κB的影响

目的：建立大鼠脑微血管内皮细胞体外缺血再灌注损伤模型,探讨清开灵有效组分牛胆酸、猪胆酸、黄芩苷、栀子苷和珍珠母对其的保护作用是否与调节核转录因子-κB（nuclearfactor—kappa B,NF—κB）活化有关。 方法：体外培养大鼠脑微血管内皮细胞（microvascular endothelial cell,MVEC）,氧糖剥夺法模拟缺血再灌注损伤,建立体外缺血再灌注损伤模型。随机分为模型组、尼莫地平组、猪胆酸组、黄芩苷组、栀子苷组、珍珠母组和牛胆酸组,并设正常MVEC为正常对照组,每组设6孔。使用免疫细胞化学法观察NF—κB蛋白表达情况并进行图像分析。 结果：光学显微镜下观察,正常组MVEC胞核的位置形成空腔,胞浆内见淡棕黄色均匀颗粒。模型组NF—κB细胞核的染色强度明显高于胞浆,活化后移位至细胞核;用药各组NF-κB在胞浆近胞核处有少量阳性表达,在胞核的表达明显弱于模型组。对各组MVECNF-κB表达强度的图像分析显示,模型组胞核与胞浆的透光度比值低于正常对照组,差异有统计学意义（P〈0．01）,用药各组透光度比值显著高于模型组（P〈0．05,P〈0．01）。 结论：清开灵有效组分可能通过拮抗NF—κB活化抑制内皮细胞损伤。     

基于IGF-1/PI3K/Akt信号通路探讨象皮生肌膏对压力性损伤大鼠模型的影响及机制研究

目的 通过动物实验观察并基于类胰岛素一号生长因子（insulin-like growth factors-1, IGF-1）/磷脂酰肌醇3激酶（phosphoinositide3-kinase, PI3K）/蛋白激酶B(protein kinase B, Akt)信号通路探讨象皮生肌膏对压力性损伤大鼠模型的影响。方法 将40只SD大鼠（SPF级,雌雄各半）复制压力性损伤大鼠模型,造模成功后随机均分为模型组（生理盐水纱布外敷）、阳性对照组（三乙醇胺乳膏外用）、象皮生肌组（象皮生肌膏外用）、联合给药组（三乙醇胺乳膏与象皮生肌膏联合外用）。另取10只健康SD大鼠作为空白组,仅同部位置入磁性装置,不予施加压力。实验过程中,每天记录各组大鼠愈合情况。实验结束时,HE染色法观察创面病理性损伤情况,ELISA法检测血清肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α, TNF-α)、白细胞介素-1β(interleukin-1β, IL-1β)、白细胞介素-6(interleukin-6, IL-6)水平,Western blot法及RT-PCR法检测创面组织中PI3K、Akt、哺乳...