扶正化瘀319方药物血清对肝星状细胞Ⅰ型胶原及转化生长因子β1表达的影响

目的：探讨扶正化瘀３１９方抗肝纤维化的主要作用机理。方法：分离正常大鼠肝星状细胞，并伟代培养。用扶正化阏９方给 正常大鼠灌胃，药物血清，温育培养细胞。胶原酶消化法测定细胞内外胶原生成率，ＥＬＩＳＡ 培养上清的Ｉ型胶原含量，免疫细胞化学染色、图像分析半定量转化生长因子β１（ＴＧＦβ１）蛋白表达，ＲＴ－ＰＣＲ法分析Ｉ型前胶原、ＴＧＦβ１ｍＲＮＡ的表达量。结果：扶正化瘀３１９方药物血清能明显抑制肝星状细     

扶正化瘀319方药物血清对肝星状细胞Ⅰ型胶原及转化生长因子β1表达的影响

目的：探讨扶正化瘀３１９方抗肝纤维化的主要作用机理。方法：分离正常大鼠肝星状细胞,并传代培养。用扶正化瘀３１９方给正常大鼠灌胃,制备药物血清,温育培养细胞。胶原酶消化法测定细胞内外胶原生成率,ＥＬＩＳＡ法测定培养上清的Ⅰ型胶原含量,免疫细胞化学染色、图像分析半定量转化生长因子β１（ＴＧＦβ１）蛋白表达,ＲＴＰＣＲ法分析Ⅰ型前胶原、ＴＧＦβ１ｍＲＮＡ的表达量。结果：扶正化瘀３１９方药物血清能明显抑制肝星状细胞的细胞内外胶原生成率,抑制细胞的Ⅰ型前胶原基因表达及其胶原分泌,抑制肝星状细胞ＴＧＦβ１与蛋白表达。结论：扶正化瘀３１９方能明显抑制肝星状细胞的活化,对肝星状细胞Ⅰ型前胶原及ＴＧＦβ１ｍＲＮＡ表达的抑制可能是该方抗肝纤维化的主要作用机理。     

中药复方防治二乙基亚硝胺诱发大鼠肝癌的病理学研究

以ＤＥＮ诱发大鼠肝癌为模型,观察肝癌前期（１４周）和肝癌期（２０周后）大鼠肝组织病理形态、ＧＧＴ组化及ＡＦＰ免疫组化的改变,以及扶正化瘀３１９方和养阴柔肝方 癌的作用,结果表明,ＧＧＴ组化、ＡＦＰ免疫组化检测是实验性肝癌较灵敏而有价值的检测手段,其定量分析意义更大。而扶正化瘀３１９方和养阴柔肝方能抑制肝癌癌前期病主煌发生与发展,延缓肝癌的形成。     

中医药抗肝纤维化临床与基础研究进展

本文首先介绍肝纤维化的现代医学研究进展，包括病理机制与诊断方法等；回顾中医学对肝纤维化的研究过程及其认识，指出我国的肝纤维化临床治疗学研究已经跻身世界前列。继而介绍我国抗肝纤维化新药与经过多中心临床试验的中药制剂，包括扶正化瘀方、复方鳖甲软肝片、复方861合剂等。接着介绍抗肝纤维化中药一扶正化瘀方的多途径作用机制与物质基础，如抗肝纤维化作用机制包括抗肝细胞脂质过氧化损伤与肝细胞凋亡、抑制肝星状细胞活化、改善肝窦毛细血管化等，而且针对肝纤维化的不同病理阶段，该方具有各自的药物配伍特点，目前已知该方的主要药效成分包括丹酚酸B、苦杏仁甙与虫草组分等。最后，展望中医药抗肝纤维化发展前景，一方面加强临床试验，提高临床研究水平，促进其国际化；另一方面，开展中医药治疗肝硬化的，临床与基础研究，发展肝硬化的中医病机与治法新理论。     

复肝抗纤方抗肝纤维化拆方实验研究

目的：研究复肝抗纤方在肝纤维化治疗中不同药物的配伍机制。方法：采用四氯化碳实验性肝纤维化模型并以复肝抗纤方全方及拆方干预，与复方鳖甲软肝片对照，测定肝功能、血清透明质酸，并通过光镜观察肝组织病理变化，用苏木素一伊红（HE）和VG染色，判定炎症和肝纤维化程度并记分。结果：活血利水组、化痰散结组分别对ALT、AST有明显降低作用，全方组及活血化瘀组对丙氨酸氨基转移酶（ALT）、门冬氨酸氨基转移酶（AST）都有明显降低作用，全方组及各拆方组对肝细胞炎症活动度、肝纤维化程度均有明显改善。结论：复肝抗纤方有较好的改善肝功能、抗肝纤维化作用，其中活血利水组长于降低ALT，而化痰散结组长于降低AST，全方组则有综合效果。     

“化纤复肝方”对慢性乙型肝炎患者血清细胞因子和肝纤维化指标的影响

目的：观察中药复方化纤复肝方对慢性乙型肝炎患者血清细胞因子的影响，探讨其可能的作用机制。方法：选取62例肝纤维化患者随机分为治疗组32例，对照组30例，对照组采用护肝降酶等药综合治疗．治疗组在此基础上加用化纤复肝方煎服，治疗6个月后观察2组患者血清细胞因子及肝纤维化指标的变化。结果：治疗组降低慢性乙型肝炎患者血清细胞因子水平及血清肝纤维化指标明显优于对照组。结论：化纤复肝方良好的抗肝纤维化疗效可能与其抑制相关细胞因子的水平有关。     

中医药论治肝纤维化的概况

综述近年来辨证论治肝纤维化的主要证型，详细论述这些证型的理论来源，病机特点，遣方用药，并提出中医药诊治肝纤维化在理论以及遣方用药上还有待进一步研究。     

抗纤软坚冲剂精简方防治肝纤维化的研究

目的:观察抗纤软坚冲剂精简方抗肝纤维化的作用.方法:应用四氯化碳和小牛血清白蛋白建立大鼠肝纤维化模型,以抗纤软坚冲剂和抗纤软坚冲剂精简方防治复合性免疫损伤大鼠肝纤维化,通过病理细胞学,证明抗纤软坚冲剂及其精简方抗肝纤维化的作用.结果:抗纤软坚冲剂及精简方都能明显抑制肝纤维化.结论:抗纤软坚冲剂及其精简方对大鼠肝纤维化模型都具有抗肝纤维化作用,其精简方同样是防治肝纤维化的有效药物.     

中药抗肝纤维化的细胞和分子机理研究进展

肝纤维化的形成与发展是极其复杂的过程，近年来国内外学者在抗肝纤维化研究领域取得了可喜的成效，尤其是中医药理论在抗肝纤维化中的应用，更加体现了中华医学的民族特色。由于西药抗肝纤维化疗效的局限性，中药抗肝纤维化研究日益受到广泛重视，近10多年来，中医药抗肝纤维化治陪研究取得较大进展，中药复方如小柴胡汤、扶正化瘀方、复方     

“化纤Ⅱ方”抗慢性病毒性肝炎肝纤维化临床观察

运用“化纤Ⅱ方”治疗肝炎肝纤维化20例，观察其对肝纤维化指标的影响，及其临床疗效，并设立对照组16例，进行比较。结果显示“化纤Ⅱ方”可显著降低透明质酸（HA）、Ⅲ型前胶原（PCⅢ）、Ⅳ型胶原（IV-C）及层粘蛋白（LH），表明其能减轻胶原纤维增生程度，具有抗纤维化的作用；“化纤Ⅱ方”能明显减轻症状，改善肝功能，临床有效率达85％，明显好于对照组56％；提示“化纤Ⅱ方”有改善肝炎肝纤维化的作用。     

扶正化瘀方促进二甲基亚硝胺肝纤维化大鼠肝窦毛细血管化逆转作用的实验研究

目的:探讨临床有效的抗肝纤维化扶正化瘀319方(下称319方)对肝纤维化、肝硬化常见病理变化肝窦毛细血管化的逆转作用。方法:采用二甲基亚硝胺(DMN)4周12次腹腔注射制备大鼠肝纤维化模型。造模成型后分为模型对照组与319方治疗组,用药4周;获取血清与肝组织,作病理组织学、电镜超微结构、免疫组化、肝组织羟脯氨酸含量及肝功能观测。结果:正常组大鼠肝窦内皮细胞外周胞浆很薄,有许多小窗孔,内皮下未见基底膜。模型组大鼠肝窦扭曲、狭窄,内皮细胞胞浆窗孔减少或消失,有明显的基底膜出现;肝组织可见出血性坏死,门脉区大量的结缔组织增生,纤维间隔向小叶内伸展,肝组织Hyp含量显著增高;肝窦壁第Ⅷ因子相关抗原、α-平滑肌肌动蛋白、LM及Ⅳ型胶原阳性染色较正常大鼠均显著增强,且范围较广。与模型对照组比较,319方治疗组肝窦扭曲、狭窄程度及内皮窗孔减少和消失程度轻,基底膜较薄或不连续,部分肝窦结构接近正常;肝细胞变性坏死程度轻,肝组织内纤维间隔明显减少,Hyp含量显著降低(P<0.05);肝窦壁第Ⅷ因子相关抗原、α-平滑肌肌动蛋白、LM及Ⅳ型胶原阳性染色均显著减弱,分布面积图像分析结果均显著降低(P<0.05)。结论:扶正化瘀319方可显著促进肝纤维化、肝硬化常见病理变化肝窦毛细血管化的逆转。     

扶正化瘀319方对二甲基亚硝胺所致大鼠肝纤维化及其白蛋白基因表达的影响

目的:观察扶正化瘀319方(简称319方)对大鼠肝纤维化及其白蛋白基因(Alb mRNA)表达的影响。方法:采用二甲基亚硝胺腹腔注射诱发的大鼠肝纤维化模型,分模型组、319方组、秋水仙碱组,分别治疗3周。进行血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、血清门冬氨酸氨基转移酶(AST)活性和血清白蛋白(Alb)含量、肝组织蛋白、羟脯氨酸(Hyp)含量的检测及肝组织病理学观察、Alb 表达分析。结果:较之模型组,319方组肝组织蛋白含量增高.Hyp 含量显著降低,肝纤维化程度改善明显,其结果与秋水仙碱趋势一致。此外该方可显著提高肝脏 Alb mRNA 的表达。结论:319方有显著促进胶原降解和改善肝细胞功能的作用。     

肝纤退黄方合654-2注射液治疗肝硬化伴顽固性黄疸临床观察

目的：观察肝纤退黄方合654—2注射液治疗肝硬化伴顽固性黄疸的疗效,并进行理论探讨。方法：选择60例透明质酸(HA)大于400ng／ml以上同时伴有一氧化氮(NO)增高的肝硬化伴黄疸患者,随机分为实验组和对照组观察治疗3个月。实验组用肝纤退黄方合654—2注射液治疗,对照组用常规疗法。结果：实验组可明显使胆红素(TB)多数复常,球蛋白(GLB)、HA、No降至接近正常水平;40％门静脉原宽度缩小,50％维持不变;30％脾厚度缩小,40％不变。1年后随访：实验组22例中20例上述指标保持稳定,2例复发;对照组24例中7例保持稳定,10例发生脾功能亢进,2例发生肝癌,5例再发。结论：肝纤退黄方合654—2注射液治疗肝硬化伴顽固性黄疸具有良好疗效。     

Therapeutic efficacy of Traditional Chinese Medicine 319 recipe on hepatic fibrosis induced by carbon tetrachloride in rats

Background/aims

Hepatic fibrosis is a consequence of severe liver damage that occurs in many patients with chronic liver diseases. TCM 319 recipe is a Chinese Medicine formula which consists of six Chinese herbs. In this study, we investigated the anti-fibrotic efficacy and mechanisms of TCM 319 recipe.

Methods

Hepatic fibrosis in rats was induced by carbon tetrachloride (CCl₄). 34 male adult SD rats were allocated into five groups (group 1—concomitant CCl₄ and TCM 319 recipe for 8 weeks; group 2—CCl₄ for 4 weeks and then CCl₄ and TCM 319 recipe for 4 weeks; group 3—CCl₄ alone for 8 weeks; group 4—TCM 319 recipe only for 8 weeks; group 5—untreated controls). After 8 weeks of treatment, serum ALT assay, liver tissue histological examination and immunostaining were carried out to examine the liver function and fibrosis degree. The expression levels of platelet derived growth factor (PDGF-B), PDGF-Rβ, and transforming growth factor-beta 1 (TGF-β1) were measured by quantitative RT-PCR and western blot.

Results

TCM 319 recipe reduced liver injury and attenuated hepatic fibrosis in group 1 compared with that in group 3. TCM 319 recipe suppressed the mRNA expression of tissue inhibitor of metalloproteinase 1 (TIMP-1). In addition, treatment with TCM 319 recipe significantly down-regulated mRNA expression of PDGF-B and PDGF-Rβ, and it also suppressed protein expression of PDGF-Rβ and TGF-β1.

Conclusions

TCM 319 recipe extracts could attenuate hepatic fibrosis induced by CCl₄ in rats. The anti-fibrotic effect of TCM 319 recipe is associated with the down-regulation of mRNA expression of TIMP-1, PDGF-B and PDGF-Rβ, and with the suppression of protein expression of PDGF-Rβ and TGF-β1.     

扶正化瘀方对博莱霉素诱发大鼠肺间质纤维化的干预作用

目的：探讨扶正化瘀方对肺纤维化的干预作用.方法：采用博莱霉素诱导肺间质纤维化模型,分别观察各组大鼠的死亡率、肺系数、肺组织羟脯氨酸（Hyp）含量以及肺组织形态学变化.结果：与模型对照组比较,扶正化瘀方能显著降低大鼠肺系数和肺组织Hyp含量,改善肺组织纤维化程度.结论：扶正化瘀方具有明显的抗博莱霉素所致的大鼠肺纤维化的作用.     

贝母辛抗大鼠肝纤维化的作用研究

目的 观察贝母辛对四氯化碳(CCl4)致大鼠肝纤维化的保护作用.方法 实验设对照组,模型组,贝母辛低、中、高剂量(2.5、5、10 mg/kg)组.除对照组外,其他组大鼠每隔3天ip给予CCl4 1次,连续8周,贝母辛各组于造模第4周开始给药,每天1次,给药至造模结束后4周.通过观察肝纤维化大鼠肝组织病理学变化,血清中谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、碱性磷酸酶(ALP)、谷氨酰氨基转移酶(GGT)、透明质酸(HA)、层黏连蛋白(LN)、Ⅲ型前胶原(PC-Ⅲ)、Ⅳ型胶原(Ⅳ-C)水平,以及肝组织中羟脯氨酸(Hyp)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)量的变化,考察贝母辛对肝纤维化大鼠的影响.结果 与模型组相比,贝母辛组肝纤维化大鼠肝病理组织学改变得到明显改善,血清中ALT、AST、ALP、GGT、HA、LN、PC-Ⅲ、Ⅳ-C水平显著降低(P＜0.05、0.01);肝组织中Hyp、MDA的量显著减少(P＜0.01),SOD的量增加(P＜0.01).结论 贝母辛对CCl4致大鼠肝纤维有较好的保护作用,其机制可能与抑制肝内胶原合成、降低自由基生成、减轻脂质过氧化有关.     

扶正抑瘤方协同微波消融治疗肝癌的临床研究

目的探讨扶正抑瘤方协同微波消融治疗肝癌的临床应用价值。方法 60例肝癌患者采用随机数字表法分成对照组(30例)和治疗组(30例)。对照组单纯行微波消融治疗,治疗组于微波消融治疗后3天加用扶正抑瘤方,疗程6个月,治疗结束后对两组患者的近期客观疗效、肝功能、肝纤维化指标及细胞免疫功能进行统计学分析。结果治疗后治疗组肝功能、肝纤维化、细胞免疫功能等指标较对照组均有显著改善(P<0.05),治疗组CD4+(40.38±12.47)、CD4+/CD8+(1.49±0.41)较对照组(CD4+:28.19±6.59,CD4+/CD8:1.22±0.31)明显升高,治疗组6个月结节复发率(14.0%)较对照组(33.3%)显著降低(P<0.05)。结论扶正抑瘤方协同微波消融治疗肝癌可提高疗效,增强机体免疫力,改善肝功能及肝纤维化程度。     

Selective apoptosis in hepatic stellate cells mediates the antifibrotic effect of phenanthrenes from Dendrobium nobile

Regardless of the etiology, cellular death of the liver parenchymal hepatocyte seems to be a primary event of hepatic fibrogenesis, which ultimately results in hepatic stellate cell (HSC) activation and the synthesis of extracellular matrix proteins. Recently it has been demonstrated that hepatic fibrosis can be a reversible process when the stimulus is properly eliminated. Apoptotic removal of active HSC is considered an essential part of the resolution. By employing the HSC cell line, HSC-T6, it was found that the methanol extract of Dendrobium nobile stem significantly inhibited the proliferation of HSC-T6 cells. Three phenanthrenes, denbinobin, fimbriol B and 2,3,5-trihydroxy-4,9-dimethoxyphenanthrene isolated from D. nobile were proven to inhibit HSC proliferation. Growth arrest of HSCs by these compounds was accompanied by cellular loss via autophagy-linked apoptosis. The maximal dose of these compounds, however, had little effect on primary cultured hepatocytes in rats. Collagen deposition in HSC-T6 cells was attenuated by these phenanthrenes. Collectively, the above results demonstrated that denbinobin, fimbriol B and 2,3,5-trihydroxy-4,9-dimethoxyphenanthrene exhibited antifibrotic activities possibly by the induction of selective cell death in HSCs but not in hepatocytes, implying that these compounds may be useful candidates for developing therapeutic agents for the prevention and treatment of hepatic fibrosis.     

酒精性肝纤维化大鼠肝星状细胞及肝细胞凋亡和清肝活血方调控机制研究

目的 观察酒精性肝纤维化大鼠肝星状细胞（HSC）、肝细胞凋亡及清肝活血方对不同细胞凋亡的影响。方法 将大鼠分为空白组,模型组,清肝活血低、中、高剂量组,易善复组,清肝活血方低剂量组[4．75g／（kg·d）]、中剂量组[14．25g／（kg·d）]、高剂量组[28．5g／（kg·d）]及易善复组[66．5mg／（kg·d）],分别予相应药物灌胃,空白组和模型组以等量生理盐水代替,给药2周。比色法检测血清ALT、AST、γ-GT,HE、Masson染色观察肝脏炎症和纤维化程度。TUNEL法检测肝细胞凋亡,TUNEL-α-SMA双标记法检测HSC凋亡。结果 清肝活血方能降低大鼠血清ALT、AST、γ-GT水平,减轻炎症及纤维化程度（P〈0．05）;诱导活化的HSC凋亡,减少肝细胞凋亡（P〈0．05）。结论 清肝活血方能有效减轻大鼠肝纤维化程度,并减少酒精引起的肝细胞凋亡,诱导活化的HSC凋亡。