鹿瓜多肽注射液对CⅡ诱导的免疫性关节炎大鼠血清TNF-α、IL-6以及CⅡ抗体活性的影响

目的：观察鹿瓜多肽注射液对类风湿性关节炎(RA)的治疗作用，并探讨其作用机理。方法：以Ⅱ型胶原(CⅡ)诱导的免疫性关节炎(CIA)大鼠为RA动物模型，通过测量其关节肿胀程度及制作病理切片并在光镜下计分，观察鹿瓜多肽注射液对其的治疗效果；采用ELISA法测定大鼠血清中TNF-α、IL-6以及CⅡ抗体活性，以探讨其作用机理。结果：与模型组比较，鹿瓜多肽组大鼠踝关节肿胀程度和病理损伤计分均明显减轻。鹿瓜多肽组血清TNF-α、IL-6的活性明显降低。结论：鹿瓜多肽注射液对CⅡ诱导的免疫性关节炎有治疗作用，其机理可能与抑制血清TNF—α、IL-6的活性有关。     

寒湿痹片抑制大鼠滑膜增生及相关机制研究

目的:观察寒湿痹片(HSB)对灭活结核分枝杆菌(heat-killed mycobacterium tuberculosis H37Ra.Mtb)诱导SD大鼠类风湿关节炎(Adjuvant-induced rheumatoid arthritis.AA)滑膜损伤的抑制作用及对基质金属蛋白酶MMP-1,MMP-3mRNA表达影响。方法:以Mtb免疫SD大鼠,制备实验性类风湿关节炎模型。采用核酸原位杂交法检测类风湿关节炎大鼠关节滑膜组织中MMP-1、MMP-3mRNA的表达。结果:寒湿痹片对Mtb诱导SD大鼠类风湿关节炎踝关节滑膜损伤具有显著的抑制作用,并减少MMP-1、MMP-3mRNA在滑膜组织中的表达。结论:寒湿痹片抑制实验性类风湿关节炎滑膜损伤,这种作用与减少滑膜组织MMP-1,MMP-3mRNA表达相关。     

鹿瓜多肽注射液对大鼠成骨细胞增殖及分化的影响

目的:研究鹿瓜多肽注射液对大鼠成骨细胞增殖、分化的影响。方法:体外分离、培养SD大鼠成骨细胞,CCK-8法检测成骨细胞增殖活性;碱性磷酸酶(ALP)活性试剂盒检测成骨细胞ALP活性比;逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测成骨细胞Ⅰ型胶原(Col1α1)、骨钙素(Bglap)及Runx-2的表达水平。结果:鹿瓜多肽注射液干预成骨细胞3d,发现鹿瓜多肽注射液组成骨细胞活性较对照组明显增强(P<0.05);在鹿瓜多肽注射液干预细胞后第8天时,鹿瓜多肽注射液组成骨细胞ALP活性较对照组明显增加(P<0.05);鹿瓜多肽注射液组成骨细胞骨钙素及Runx-2表达均较对照组明显增强。结论:鹿瓜多肽注射液能显著促进成骨细胞发育成熟。     

痹痛灵颗粒对胶原诱导关节炎滑膜白介素-17mRNA表达的影响

目的：观察中药复方痹痛灵颗粒对胶原诱导类风湿性关节炎大鼠关节滑膜组织微血管密度及白介素-17（IL-17）mR-NA表达的影响。方法：建立胶原诱导大鼠类风湿性关节炎模型,通过免疫组化测量微血管密度,实时荧光PCR法检测量关节滑膜组织IL-17mRNA表达量,评价痹痛灵颗粒治疗类风湿关节炎抗血管新生的作用机理。结果：痹痛灵颗粒可降低造模大鼠关节滑膜组织微血管密度,下调关节滑膜组织IL-17mRNA过量表达。结论：痹痛灵颗粒对胶原诱导大鼠类风湿性关节炎血管新生有一定的治疗作用,其作用机理与下调关节滑膜IL一17mRNA高表达可能有关。     

穴位注射鹿瓜多肽注射液对膝骨性关节炎患者关节液一氧化氮含量的影响

目的:观察穴位注射鹿瓜多肽注射液对膝骨性关节炎患者膝关节液一氧化氮含量的影响.方法:将100例患者随机分为2组,治疗组51例,采用穴位注射鹿瓜多肽注射液2 ml;对照组49例,采用穴位注射透明质酸钠注射液2 ml.治疗前、治疗1个疗程、2个疗程后分别测定膝关节关节液中NO含量.结果:治疗前两组关节滑液NO含量差异无统计学意义(P>0.05),按疗程治疗后治疗组比对照组膝关节液NO含量明显降低(P<0.05).结论:鹿瓜多肽注射液对NO有明显抑制作用,穴位注射鹿瓜多肽注射液对膝骨性关节炎有较好的治疗作用.     

中药前期干预脐带间充质干细胞治疗类风湿关节炎临床疗效观察

目的:观察中药前期干预脐带间充质干细胞治疗类风湿关节炎临床疗效。方法:两组采用甲氨蝶呤片、来氟米特及UC-MSCs,治疗组加丹参酮Ⅱa注射液和鹿瓜多肽注射液。结果:两组患者治疗后3个月在DAS28评分、HAQ评分、实验室指标ESR、CRP、RF、抗CCP均具有明显差异(P0.05);治疗组治疗后3个月30例符合ACR20指标,其中14例符合ACR50指标;对照组治疗后3个月10例符合ACR20指标,其中7例符合ACR50指标。结论:中药注射剂鹿瓜多肽、丹参酮Ⅱa前期干预UC-MSCs治疗RA疗效确切,具有降低炎性细胞因子、调节免疫、改善微循环、利于UC-MSCs迁移和病损组织的修复。     

鹿瓜多肽治疗类风湿关节炎临床疗效观察

目的:探讨鹿瓜多肽注射液辅助治疗类风湿关节炎活动期的临床疗效与安全性。方法:基础治疗对照组30例与加用鹿瓜多肽辅助治疗类风湿关节炎28例,观察两组治疗前后血沉、类风湿因子、C反应蛋白水平及肿胀压痛关节数、DAS28评分。结果:鹿瓜多肽组与对照组比较关节疼痛改善明显(P<0.05)。结论:鹿瓜多肽治疗类风湿关节炎有一定疗效,安全性高。     

痹肿消汤对胶原性关节炎大鼠滑膜AnnexinⅠ、Annexin V表达的影响

目的:观察痹肿消汤对胶原诱导性关节炎大鼠滑膜AnnexinⅠ、AnnexinⅤ表达的影响,探讨痹肿消汤治疗RA的作用机制。方法:70只SD大鼠随机分为3组,皮下注射牛Ⅱ型胶原与完全弗氏佐刺诱导SD大鼠实验性关节炎,Western blotting方法检测各组不同时间点大鼠滑膜组织AnnexinⅠ、AnnexinⅤ的表达。结果:造模大鼠88%出现关节炎症状;造模25天后,模型组AnnexinⅠ、AnnexinⅤ表达水平明显低于正常组(P＜0．05);痹肿消汤组AnnexinⅠ、AnnexinⅤ表达高于模型组(P＜0．01);随着时间延长,模型组AnnexinⅠ、Annexin水平逐渐降低,痹肿消汤组则逐渐增强。结论:AnnexinⅠ、Annexin在RA滑膜组织炎症形成和发展中发挥着重要作用;痹肿消汤通过上调滑膜AnnexinⅠ和Annexin表达水平发挥作用。     

灯盏花素对大鼠佐剂性关节炎的治疗作用及其对滑膜MMP-3、TIMP-1表达的影响

目的观察灯盏花素(BRE)对佐剂性关节炎大鼠的治疗作用及其对滑膜基质金属蛋白酶-3(MMP-3)、金属蛋白酶组织抑制物-1(TIMP-1)表达的影响。方法将50只雄性Wistar大鼠随机分为正常组、模型组、BRE组、来氟米特(LEF)组和联合用药(BRE LEF)组,采用弗氏完全佐剂造模,观察治疗前后各组大鼠的足爪容积及关节炎指数;免疫组织化学方法检测MMP-3、TIMP-1在关节滑膜组织中的表达。结果与治疗前比较,BRE组、LEF组及BRE LEF组治疗后大鼠的足爪容积及关节炎指数显著降低(P<0.05),联合用药组的效果更明显(P<0.01);与模型组比较,各用药组的MMP-3表达显著减少(P<0.05),TIMP-1表达均有所增加(P<0.05),联合用药组较单一用药组效果更明显(P<0.05)。结论BRE对大鼠佐剂性关节炎具有显著治疗作用,并可下调滑膜MMP-3表达、上调TIMP-1表达;BRE与LEF联合应用具有增效作用,为临床应用活血化瘀药联合治疗RA提供了实验依据。     

秦艽不同配伍对风寒湿痹模型大鼠MMP-3及TIMP-1的影响

目的:观察秦艽寒热不同配伍药对对风寒湿痹型类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)模型大鼠踝关节基质金属蛋白酶-3 (matrix metalloproteinase-3,MMP-3),基质金属蛋白酶组织抑制物-1 (matrix metalloproteinase tissue inhibitor-1,TIMP-1)的影响。方法:选取80只SD大鼠并随机分为正常组,Ⅱ型胶原组,风寒湿病证模型组,雷公藤多苷片组(6 mg·kg~(-1)),单味秦艽组(25 g·kg~(-1)),秦艽配伍威灵仙(秦威组,25 g·kg~(-1)),秦艽配伍桑寄生(秦桑组,25 g·kg~(-1))、秦艽配伍防己(秦防组,25 g·kg~(-1)),共8组,每组10只。采用注射Ⅱ型胶原乳剂诱导并给予风寒湿刺激制备风寒湿RA大鼠模型。模型建立完成后正常组,Ⅱ型胶原组及风寒湿病证模型组大鼠给予生理盐水,各给药组给予相应药液灌胃。实验过程中,每3 d测量1次大鼠左后足跖厚度,计算足跖肿胀度;实验第38天对各组大鼠进行关节炎指数(AI)评分;酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测大鼠血清类风湿因子(RF)含量;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测踝关节MMP-3,TIMP-1的表达水平;实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)技术检测踝关节MMP-3,TIMP-1 mRNA的表达。结果:与正常组比较,Ⅱ型胶原组及风寒湿病证模型组足跖肿胀度,AI评分,血清RF含量,踝关节MMP-3蛋白表达水平,MMP-3 mRNA明显升高(P 0. 05,P 0. 01),踝关节TIMP-1蛋白表达水平,TIMP-1 mRNA显著降低(P 0. 01);与风寒湿病证模型组比较,各给药组足跖肿胀度,AI评分及血清RF含量均有不同程度降低,其中秦威组降低最显著(P 0. 01); Western blot及Real-time PCR结果显示,与风寒湿病证模型组比较,各给药组踝关节MMP-3蛋白表达水平及MMP-3 mRNA表达水平均显著降低(P 0. 01),以秦威组降低最明显,雷公藤多苷片组、秦威组及秦桑组大鼠踝关节TIMP-1蛋白表达水平及TIMP-1 mRNA表达水平均有所升高,以秦威组升高最显著(P 0. 01)。结论:对于风寒湿痹型类风湿关节炎,平温相配的秦威组疗效优于平平相配的秦桑组、平寒相配的秦防组及单味秦艽组,实验结果与中医"寒者热之"的原则基本相符。该配伍治疗风寒湿痹型类风湿关节炎的机制可能与其可以减少MMP-3,升高TIMP-1的表达,减轻关节软骨破坏有关。     

洛拉曲克对3株肿瘤细胞胸苷酸合成酶mRNA水平的影响

 目的 研究3株肿瘤细胞的胸苷酸合成酶mRNA(thymidylate synthase,TS mRNA)水平在洛拉曲克作用后的动态变化规律。 方法 细胞用不同剂量的洛拉曲克处理不同的时间后提取总RNA,用逆转录多聚酶链式反映(RT-PCR)检测TS mRNA/β-actin mRNA的比率反映TS mRNA的动态变化。结果 RT-PCR结果显示,在3种肿瘤细胞的时间曲线中,TS/β-actin比值与对照相比 均有一定的变化趋势。但3种细胞的变化趋势各不相同,C6细胞呈升高后平台形,SRS-82细胞是升高后又降低呈峰形,LoVo细 胞呈持续升高的趋势。在剂量曲线中,除LoVo细胞变化不明显以外,其余两种细胞表现相似,即浓度在IC₉₀值附近或比其低浓度 的洛拉曲克可使TS/β-actin比值升高,但更高浓度则使比值降低,表现出细胞毒性。结论 尽管理论上经洛拉曲克作用后不应 该影响TS mRNA水平,但本实验证明TS mRNA水平在洛拉曲克作用下确有动态变化,提示洛拉曲克药理作用的复杂性。     

平调饮对原发性肝癌AFP mRNA、GPC-3 mRNA影响的研究

目的探讨平调饮对原发性肝癌患者AFP mRNA、GPC-3 mRNA表达的影响。方法抽取60例肝癌患者的抗凝血液,配对法随机分为试验组和对照组各30例。采用Tr-Izol一步法提取总RNA,用逆转录巢式聚合酶链反应(RT-nested PCR)技术检测治疗前后试验组及对照组患者AFP mRNA、GPC-3 mRNA的表达情况。结果治疗后试验组及对照组AFP mRNA、GPC-3 mRNA表达均显著下降,在降低AFP mRNA表达方面试验组与对照组无显著性差异,降低GPC-3 mRNA表达方面试验组明显优于对照组(P0.05)。结论平调饮能有效抑制人血液中AFP mRNA、GPC-3 mRNA的高表达,在降低GPC-3 mRNA表达方面效果优于华蟾素。其治疗原发性肝癌机制与临床应用价值值得进一步研究。     

固肾培元方对肾阳虚大鼠耳蜗组织Bcl-2及Bax mRNA表达的影响

目的 观察固肾培元方对肾阳虚大鼠耳蜗组织Bcl-2、Bax mRNA蛋白表达的影响。     

柴胡疏肝散对夹尾应激大鼠脑和胃组织GASR mRNA和CCK-AR mRNA表达的影响

目的 探讨柴胡疏肝散对夹尾应激大鼠脑和胃GASR mRNA和CCK-AR mRNA表达的影响.方法 将30只大鼠随机分为3组,正常对照组、模型组和柴胡疏肝散组,每组10只,采用慢性夹尾刺激方法制作慢性应激模型,分别给予生理盐水、柴胡疏肝散水煎剂灌胃,共4周.观察其一般情况及胃组织学变化,并用原位杂交方法检测大鼠脑和胃组织胃泌素受体(GASR)mRNA和胆囊收缩素受体A(CCK-AR)mRNA的表达.结果 ①模型组出现了抑郁和消化不良行为表现, 而柴胡疏肝散组则较不显著;②模型组胃黏膜均出现不同程度的糜烂和炎症反应,而柴胡疏肝散组则较轻;③模型组大鼠胃和脑组织上的GASR mRNA表达量较正常对照组有显著升高(均P<0.05),柴胡疏肝散组则较模型组有显著降低(均P<0.05).模型组大鼠胃组织CCK-AR mRNA表达较正常对照组显著升高(P<0.05),柴胡疏肝散组较模型组有显著降低(P<0.05).结论 柴胡疏肝散能改善慢性应激抑郁和消化不良行为,其机制可能与其能减低脑和胃组织GASR mRNA表达和减低胃组织CCK-AR mRNA表达有关.     

复方黄芩提取物对小鼠体内流感病毒mRNA复制和干扰素(IFN)表达的影响

目的:研究复方黄芩提取物对小鼠体内流感病毒(influenza virus,Ⅳ)mRNA复制的抑制作用和干扰素(interferon,IFN)表达的诱生作用。方法:以流感病毒鼠肺适应株A/FM/1/47(H1N1)感染的小鼠肺炎为模型,采用RT-PCR技术测定小鼠体内流感病毒mRNA和干扰素含量。观察复方黄芩提取物对小鼠体内流感病毒mRNA复制和IFN表达的影响。结果:复方黄芩提取物对小鼠体内流感病毒mRNA表达有较好的抑制作用(P<0.01),对干扰素的表达有诱生作用(P>0.05)。结论:复方黄芩提取物具有诱生干扰素、抑制流感病毒在小鼠体内的复制作用。     

针药对抑郁症模型大鼠海马α1-AR mRNA表达的影响

目的 观察中枢去甲肾上腺素系统在抑郁症病理和治疗机制中的作用.方法 建立慢性应激诱导的抑郁模型,通过原位杂交技术,观察α1受体mRNA在海马不同区域的表达.结果 ① 抑郁症模型大鼠海马α1-AR的mRNA阳性表达的神经元数目增加,在CA3和DG区显著高于正常组(P<0.01);而阳性表达神经元的平均光密度降低,在DG区显著低于正常组(P<0.05);②在早期(3天),氟西汀治疗组α1-AR的mRNA阳性表达神经元数目出现减少,尤其在DG区明显低于针药结合治疗组(P<0.05);③ 在中期(7～14天),α1-AR的mRNA阳性表达神经元的平均光密度有增强趋势,尤其是针药合用治疗组14天时CA1明显强于氟西汀治疗(P<0.05);④ 在多数时间段,针刺组和针药结合组α1-AR的mRNA阳性表达呈现较为相近的效应.结论 抑郁大鼠海马单个神经元α1-AR的活性下降,针刺、氟西汀单独或者合用都可以影响海马α1-AR的mRNA表达,但是各自有不同的效应特点,且存在时效差异.     

芪玄益心胶囊对糖尿病大鼠急性缺血心肌血管内皮生长因子121mRNA表达的影响

目的:探讨芪玄益心胶囊对糖尿病(DM)大鼠急性缺血心肌保护作用的机制.方法:以四氧嘧啶腹腔注射致胰腺损伤,舌下静脉注射垂体后叶素致心肌急性缺血复制大鼠DM心肌缺血模型,将其随机分美吡达组、丹参滴丸组、芪玄益心胶囊高、中、低剂量组、模型组,并设空白对照组.观察各组模型心肌组织血管内皮生长因子(VEGF)121mRNA表达水平,并与空白组对照.结果:模型组及各治疗组与空白组比较VEGF121mRNA表达均显著增高(P《0.05).芪玄益心胶囊各剂量组与模型组比较VEGF12-1mRNA表达明显增高(P《0.05),以高剂量组变化最显著.芪玄益心胶囊各剂量组与美吡达组、丹参滴丸组比较.对心肌组织VEGF121mRNA改善优于美吡达组(P《0.05),而高剂量组优于丹参滴丸组(P《0.05).结论:芪玄益心胶囊可能通过增强VEGF121mRNA表达,对心肌产生积极的保护作用.     

络气郁滞证大鼠主动脉组织葡萄糖调节蛋白78mRNA表达的研究

目的 观察络气郁滞证大鼠主动脉组织葡萄糖调节蛋白78(GRP78)mRNA表达的变化.方法 20只Wistar大鼠按体重随机分为正常组、络气郁滞组,实验末检测血清同型半胱氨酸(Hcy)、一氧化氮(NO)、血浆内皮素(ET),观察主动脉组织超微结构,以RT-PCR方法检测主动脉组织中GRP78mRNA的表达.结果 与正常组比较,络气郁滞组血清Hcy明显增高.NO明显下降(P<0.05),ET明显升高(P<0.05);主动脉组织超微结构发生明显改变,主动脉组织中GRP78mRNA的表达较正常组比较明显增强(P<0.01).结论 络气郁滞证大鼠的主动脉组织GRP78mRNA表达增强,其血管内皮功能障碍可能与主动脉组织内质网的应激有关.     

复方蒲黄颗粒对局灶性脑缺血再灌注大鼠热休克蛋白70及其mRNA表达的影响

目的 观察复方蒲黄颗粒对大鼠脑缺血再灌注后热休后蛋白70(HSP-70)及其mRNA表达的影响. 方法 75只雄性SD大鼠,采用大脑中动脉线栓法建立局灶性脑缺血再灌注大鼠模型,随机分为假手术组、模型组,蒲黄颗粒大、中、小剂量组,每组15只.各组大鼠分别在缺血2小时再灌注6、24、72小时断头取脑组织,每时间点5只.再灌注24小时进行神经功能缺陷评分,采用Nissl染色观察神经元形态学变化;采用原位杂交检测HSP-70 mRNA的表达;采用免疫组化法检测HSP-70蛋白的表达. 结果 蒲黄颗粒大、中剂量组在缺血再灌注24小时时神经功能改善显著优于模型组(P＜0.05);Nissl染色结果显示,模型组大脑皮层神经元形态不规则,体积缩小,胞核固缩深染,细胞间质水肿,尼氏体减少,可见明显的神经元丢失,而蒲黄颗粒各剂量组未见明显的神经元损伤和丢失;模型组在再灌注6～72小时HSP-70及其mRNA的表达均增加,与假手术组比较各时间点差异均具有统计学意义(P＜0.01),蒲黄颗粒各剂量均能增强HSP-70及其mRNA的表达,与模型组各时间点的差异均具有统计学意义(P＜0.05).结论 复方蒲黄颗粒能促进脑缺血再灌注后HSP-70的表达,减轻缺血再灌注损伤.     

怀牛膝对2型糖尿病大鼠脑组织p75基因表达的影响

目的:研究怀牛膝(Achyranthes bidentata Blume,BL)水煎剂对2型糖尿病大鼠脑组织P75基因mRNA表达的影响。方法:随机选取以不同剂量怀牛膝水煎剂灌胃的2型糖尿病大鼠每组10只,以生理盐水灌胃的2型糖尿病大鼠及正常对照组大鼠各10只,用RT-PCR法测定脑组织P75基因mRNA的表达。结果:2型糖尿病大鼠脑组织P75基因mRNA的表达上调,服用怀牛膝水煎剂的2型糖尿病大鼠脑组织P75基因mRNA的表达下降。结论:怀牛膝水煎剂能降低2型糖尿病大鼠脑组织P75基因mRNA的表达。