中药复方血清药理研究方法学探讨-Ⅰ

以桂枝汤的体外抗病毒实验为手段，对家兔含药血清制备时不同的给药次数和采血时间进行了探讨。结果显示：家兔单次口饲给药后１ｈ、２ｈ、３ｈ所采集的含药血清无抑制副流感病毒致细胞病变的作用；每日１次口饲给药，连续３ｄ，末次给药后２ｈ的血清，有明显抑制副流感病毒致细胞病变的作用。     

中药复方血清药理研究方法学探讨——Ⅳ

家兔灌胃桂枝汤,１日１次,连续３ｄ药以及１日２次,连续３ｄ给药,末次给药后０．５－９ｈ采血,分离血清,观察各含药血清对病致细胞病变作用的影响。结果：上述各方法制备的含药血清抗副感流毒致ＣＰＥ作用所表现出的有效时间点分别为：无明显有效时间点、４－５ｈ、２ｈ、５－７ｈ、１－６ｈ,１日２次给药３ｄ及１日３次给药后采集的含血清可引起培养细胞明显的退行性改变。     

中药复方血清药理方法学探讨-Ⅲ

将所采集的含药血清分为２份,其中１份经５６℃３０ｍｉｎ灭活,对比灭活前后血清对病毒致细胞病变作用的影响,结果：正常血清灭活后相对作用强度平均降低５０％左右,抑制病毒致细胞病变的作用基本消失;１次给药采集的含药血清灭活后相对作用强度平均降低５０％左右,２次给药采集的含药血清灭活后相对作用强度平均降低３５％左右,但两者灭活前所表现的有效时间点均仍然存在。     

含桂枝汤大鼠血清对病毒致细胞病变作用的影响

体外抗病毒实验发现，桂枝汤８ｍｇ生药／ｍｌ对与呼吸道感染有关的１０株病毒致细胞病变均有不同程度的抑制作用。取口饲给予桂枝汤后的大鼠血清进行体外抗病毒实验，发现该血清（１∶４）抑制单纯疱疹病毒Ⅰ型等４株病毒对Ｈｅｐ－２细胞的增殖；该血清在－２０℃保存３个月，其抑制作用无明显下降；而正常大鼠血清也具有较弱的延缓病毒致细胞病变作用     

抗肝纤维化有效中药复方血清药理学方法探讨

扶正化瘀方灌胃正常大鼠制备血清，温育大鼠肝细胞及星状细胞，将含药血清及冻干粉直接添加于培养细胞，通过观察细胞形态及功能变化，探讨复方抗肝纤维化的血清药理试验方法。结果表明冻干粉抑制细胞增殖及活力。二次给药１ｈ后同种灭活血清抑制星状细胞增殖、促进肝细胞增殖，能较好地用于抗肝纤维化的体外药理试验。     

中药复方血清药理研究方法学探讨——Ⅳ

家兔灌胃桂枝汤 ,1日 1次 ,连续 3d给药以及 1日 2次 ,连续 3d给药 ,末次给药后 0 5～ 9h采血 ,分离血清 ,观察各含药血清对病毒致细胞病变作用的影响。结果 :上述各方法制备的含药血清抗副流感病毒致CPE作用所表现出的有效时间点分别为 :无明显有效时间点、4～ 5h、2h、5～ 7h、1～ 6h,1日 2次给药 3d及 1日 3次给药后采集的含药血清可引起培养细胞明显的退行性改变。     

胰岛素经眼吸收后对正常和四氧嘧啶致糖尿病模型家兔的降血糖作用

 国产胰岛素（生化提取法）经眼吸收后能有效地降低正常和四氧嘧啶糖尿病模型家兔血糖。研究结果表明，胰岛素经眼给药后，能有效地降低两者的血糖浓度。用１％ＥＤＴＡ溶液为吸收促进剂，给正常家兔０．５％和１．０％胰岛素５０ｕｌ后，在１５ｍｉｎ即能发挥作用，维持低血糖状态５ｈ以上。给予糖尿病模型家兔１％和２％胰岛素５０ｕｌ后，在３０ｍｉｎ起效，可使血糖降至常范围内，药物疗效维持５ｈ以上。不加１％ＥＤＴＡ溶液的胰岛素作用明显减小。在０．５％～２．０％的剂量范围内吸收不存在饱和现象，而作用效果存在着浓度依赖性。     

青英颗粒抗病毒作用的实验研究

目的观察青英颗粒对副流感病毒Ⅰ型的体外作用，方法采用体外抑制病毒致细胞病变作用（CPE）的方法：用制备好的青英颗粒含药血清及对照组（感冒退热冲剂、病毒唑颗粒剂）含药血清抑制感染病毒的Hep-2细胞，用MTY法观测青英颗粒含药血清对病毒致细胞病变的抑制作用。结果青英颗粒高、中剂量含药血清对副流感病毒Ⅰ型的抑制作用与药物对照组、模型组比较差异显著。结论青英颗粒的抗病毒作用优于感冒退热冲剂、病毒唑，是治疗急性上呼吸道感染的良好抗病毒中成药。     

银黄清肺胶囊含药血清体外抗流感病毒实验研究

目的:检测银黄清肺胶囊含药血清体外对A型流感病毒的抑制作用。方法:通过体外培养技术进行MDCK细胞培养,以A型流感病毒株感染狗肾细胞(MDCK细胞),采用中药血清学药理方法[1]及MTT[2-3]法,分预防给药(先加药物)、治疗给药(先加病毒)、及直接抑制给药(药物病毒同时加入)3种方式测定银黄清肺胶囊含药血清对A型流感病毒感染MDCK细胞病变的作用。结果:与相应浓度空白血清比较,各浓度银黄清肺胶囊含药血清与利巴韦林片含药血清组,预防、治疗、直接抑制3种给药方式中,A型流感病毒感染MDCK细胞OD值均明显增高(P0.05);与相应浓度利巴韦林片含药血清组比较,各浓度银黄清肺胶囊含药血清对A型流感病毒感染MDCK细胞OD值无明显差别(P0.05)。结论:银黄清肺胶囊含药血清体外可以抑制流感病毒在细胞内增殖。     

中药复方“松友饮”含药血清体外抑制高转移人肝癌MHCC97H细胞的实验研究

目的：研究中药复方＂松友饮＂含药血清对体外培养的人肝癌MHCC97H细胞增殖、侵袭潜能的影响。方法：以MHCC97H细胞构建裸鼠原位移植瘤模型,84只成模裸鼠随机平均分成对照组和＂松友饮＂组,肝脏接种肿瘤24 h内开始1次/天灌胃给药。在第1、4、7、14、21、28、35次灌胃结束后2h,每组分别处死6只裸鼠收集血样。应用含药血清体外干预MHCC97H细胞,检测细胞增殖、侵袭潜能变化。结果：＂松友饮＂灌胃给药1、4、7天的荷HCC裸鼠含药血清体外抑制HCC作用逐渐增强,给药7、14、21、28、35天的含药血清抑制作用无统计学差异。灌胃7天的＂松友饮＂含药血清抑制HCC增殖的作用与中剂量卡培他滨作用近似,抑瘤率分别为37.4%、41.1%。给药7天的含药血清抑制HCC侵袭潜能达到最强,＂松友饮＂组穿膜细胞数明显少于对照组,为26.0±3.6和37.3±2.8。结论：给药7天的含药血清达到稳态血药浓度,对MHCC97H细胞的体外抑制作用达到最强。     

不同产地叶下珠及其联合用药抗鸭乙型肝炎病毒的实验研究

本文应用重庆麻鸭乙型肝为动物模型进行不同产地中草药叶下珠及其联合中药苦参与抗菌药环丙沙星的抗鸭乙型肝炎病毒疗效初探，连续用药１个月后，结果表明；广西叶下珠，云南叶下珠能使鸭血清中鸭乙型肝炎病毒脱氧核糖核酸滴度下降（Ｐ＜０．０５），而重庆叶下珠无此作用（Ｐ＞０．０５）；云南叶下珠停药后有血清ＤＨＢＶ ＤＮＡ回升现象，广西叶下珠与苦参合用，无明显协同作用，但与环丙沙星合用，似有增强抗毒的作用（Ｐ＜０．     

桂枝汤及方中单味药对体温双向调节作用的研究

观察组成桂枝汤的５个单味药对体温的影响，其中桂枝、芍药、炙甘草对体温呈现不同程度的双向调节作用；生姜有单向促进体温回升作用；大枣具有一定的单向解热作用。     

桂枝汤对发热及低体温大鼠下丘脑中腺苷酸环化酶和磷酸二酯酶活性的影响

目的：观察桂枝汤对发热和低体温模型大鼠下丘脑中腺苷酸环化酶（AC）和磷酸二酯酶（PDE）活性的影响。方法：采用放射性同位素方法测定模型动物下丘脑中AC及PDE活性。结果：在酵母诱导发热模型大鼠中，桂枝汤可使下丘脑中AC活性明显降低（P＜0．05）；而在安痛定诱导的低体温模型大鼠中，它可使AC活性明显增强（P＜0．05）。在两种模型中，桂枝汤对PDE活性的影响均不明显。结论：桂枝汤对体温的双向调节作用可能是部分通过影响AC活性来实现的。     

丹红注射液促进鸡胚绒毛尿囊膜血管生成的实验研究

目的探讨丹红注射液对鸡绒毛尿囊膜（CAM）血管生成的影响。方法种蛋在（37.5±0.5）℃条件下孵育,第7天开窗暴露CAM建立模型。将60枚存活鸡胚随机分为生理盐水组（N组）、正常血清组（C组）、丹红注射液治疗组（T组）、血管内膜损伤组（I组）、血管内膜损伤后丹红注射液治疗组（IT组）以及血管内皮生成因子（VEGF,20μg/mL）组（V组）,每组10枚鸡胚。新西兰大白兔腹主动脉用球囊导管损伤建立血管内膜损伤模型,丹红注射液治疗组及血管内膜损伤后丹红注射液治疗组于大白兔耳缘静脉注射丹红注射液2mL/kg,各组连续7d后取血清。第8天,在鸡胚CAM上放一直径为5mm的滤膜作为载体,分别加样5μL,每日1次,连续3d,第11天取CAM,数码相机拍照后平铺于载玻片上,计数载体周围血管数目及滤膜周围0.5cm范围内的血管分支点数并进行比较。结果比较CAM周围血管数目,T组（31.80±3.08）条与C组（28.40±3.75）条比较,血管以载体为中心呈辐辏状生长,血管总数明显增多,具有统计学意义;I组（47.30±3.27）条与C组相比较,载体周围血管数量明显增多,具有统计学意义;与IT组（47.60±3.89）条相比较,血管总数无统计学意义。结论含丹红注射液的兔血清能够明显促进CAM上血管生成,血管内膜损伤后的血清和内膜损伤丹红治疗组也分别强于血管内膜未损伤时。     

桂枝汤对发热及低体温大鼠下丘脑中腺苷酸环化酶和磷酸二酯酶活性的影响

目的 :观察桂枝汤对发热和低体温模型大鼠下丘脑中腺苷酸环化酶 (AC)和磷酸二酯酶(PDE)活性的影响。方法 :采用放射性同位素方法测定模型动物下丘脑中AC及PDE活性。结果 :在酵母诱导发热模型大鼠中 ,桂枝汤可使下丘脑中AC活性明显降低 (P <0 0 5 ) ;而在安痛定诱导的低体温模型大鼠中 ,它可使AC活性明显增强 (P <0 0 5 )。在两种模型中 ,桂枝汤对PDE活性的影响均不明显。结论 :桂枝汤对体温的双向调节作用可能是部分通过影响AC活性来实现的     

桂枝汤方中药对对体温双向调节的作用研究

为阐明桂枝汤对体温双向调节作用的组方配伍原理,对桂枝汤进行拆方研究,观察了桂枝汤中五个药对对高、低体温动物模型的影响,发现桂枝－芍药只有升温作用;芍药－炙甘草只有解热作用;单味桂枝和芍药均有解热和升温作用,分别伍以生姜、甘草、大枣,或桂枝芍药相伍,均未见协同相加     

桂枝汤方中药对对体温双向调节的作用研究

为阐明桂枝汤对体温双向调节作用的组方配伍原理,对桂枝汤进行拆方研究,观察了桂枝汤中五个药对对低体温动物模型的影响,发现桂枝－芍药只有升温作用,芍药－炙甘草只有解热作用;单味桂枝和芍药均有解热和升温作用,分别伍以生姜、甘草、大枣,或桂枝芍药相伍,均未见协同相加。     

针刺提插补泻法对血虚证模型家兔血清铁蛋白、总铁结合力的影响

目的:通过观察针刺提插补泻"足三里"穴对血虚证家兔血清铁蛋白(SF)和总铁结合力(TIBC)的影响,探讨提插补泻与效应的关系。方法:将60只家兔随机分为5组:空白组、模型组、留针组、补法组、泻法组,每组12只。采用放血加限食法制造血虚证模型。针刺各组每次治疗15min,隔天治疗1次,共计10次。采用放射免疫法检测血清SF及TIBC。结果:针刺治疗后第17天,补法、泻法两组的SF与针刺前相比明显升高(P<0.05),TIBC明显降低(P<0.05);针刺治疗后第32天,留针组、补法组、泻法组的TIBC与治疗前相比均明显下降(P<0.05);在针刺治疗后各检测时间点,补法、泻法两组的SF和TIBC相比差异均无统计学意义(P>0.05)。结论:①针刺"足三里"对血虚证家兔降低的SF与升高的TIBC有较好的疗效。②提插补法与提插泻法对改善SF和TIBC无明显差异,提示重插轻提的提插补法与重提轻插的提插泻法在虚证状态下未显示出补泻效应。     

锡类散缓释贴膜对复发性阿弗他溃疡家兔肿瘤坏死因子-α、白细胞介素-1及白细胞介素-2的影响

目的建立复发性阿弗他溃疡（RAU）家兔动物模型,观察锡类散缓释贴膜对RAU家兔肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素-1（IL-1）及白细胞介素-2（IL-2）的影响。方法将9只家兔脊柱两侧皮内注射家兔口腔黏膜抗原乳化液建立RAU家兔模型,造模后将RAU家兔随机分为3组,每组3只。空白模型组不给药;模型贴膜组,固定家兔口腔,将锡类散缓释贴膜敷至溃疡面上,每日1次;模型散剂组,固定家兔口腔,锡类散吹撒至溃疡面上,每4 h 1次,每日3次,用药后固定2 h。连续用药5 d,检测给药后RAU家兔炎性细胞因子TNF-α及IL-1、IL-2表达水平。结果实验动物注射家兔口腔黏膜蛋白后出现口腔黏膜溃疡,于最后1次注射10 d后口腔溃疡开始增多。模型贴膜组和模型散剂组炎性细胞因子TNF-α、IL-1及IL-2表达水平均低于空白模型组（P〈0.01）,且模型贴膜组低于模型散剂组（P〈0.05）。结论锡类散缓释贴膜及锡类散对RAU家兔具有治疗作用,其机制可能与减少炎性细胞因子的分泌有关。