中药灌肠1号对小鼠结肠炎CD4+ CD25+免疫作用的研究

目的：探讨CD4⁺CD25⁺调节性T细胞(Tregs)在2，4-二硝基氯苯(DNCB)和醋酸 (AA)复合法诱发的小鼠溃疡性结肠炎中的变化规律及中药灌肠1号治疗的作用机制。方法：建立DNCB＋AA复合法诱发的小鼠溃疡性结肠炎模型，设立正常对照、模型对照、柳氮磺氨吡啶(SASP)和中药灌肠1号治疗共4组，用流式细胞仪检测各组外周血、肠系膜淋巴结CD4⁺CD25⁺ Tregs细胞的变化以及结肠组织病理学改变。结果：建模后1～2周，模型组外周血和肠系膜淋巴结的CD4⁺CD25⁺ Tregs细胞数量较正常组明显下降，而使用SASP和中药灌肠Ⅰ号治疗后该细胞亚群明显高于模型组。结论：具有较强免疫抑制作用的CD4⁺CD25⁺Tregs细胞亚群在小鼠实验性溃疡性结肠炎的发病及病情转归中可能具有重要免疫调节作用，中药灌肠1号通过调节Tregs细胞的数量对溃疡性结肠炎发挥治疗作用。     

生津润燥方治疗干燥综合征及调控CD4+CD25+Foxp3T细胞/Th17机制研究

  目的：研究生津润燥方对免疫诱导干燥综合征模型小鼠外周血CD4⁺CD25⁺ Foxp3T细胞(Treg细胞)及Th17细胞水平的影响,同时观察腺体受累的改善状况和外周血淋巴细胞亚群的变化。  方法：雄性BABL/C小鼠分为空白组,模型组,硫酸羟氯喹组,生津润燥方高、中、低剂量组。除空白组外,其余各组小鼠采用免疫诱导法建立干燥综合征小鼠模型。各组采取相应干预措施。采用流式细胞术检测模型小鼠外周血中CD4⁺、CD8⁺、CD4⁺CD25⁺ Foxp3T细胞及Th17细胞水平,并测定模型鼠唾液、泪液分泌量;治疗的末期,观察下颌腺的组织形态学改变。  结果：与空白组比较,模型组第1周到第4周小鼠唾液和泪液流量均显著降低(P<0.05);与模型组比较,生津润燥方各剂量组第2、3、4周小鼠唾液流量和泪流量升高(P<0.05)。与空白组比较,模型组Th17淋巴细胞水平升高(P<0.05)。与模型组比较,生津润燥方各剂量组分别可升高CD8⁺T淋巴细胞水平,降低Th17淋巴细胞水平,升高小鼠Treg细胞水平,差异有统计学意义(P<0.05)。组织形态学观察显示,生津润燥方可抑制模型组小鼠颌下腺间质的淋巴细胞浸润。  结论：生津润燥方通过调节干燥综合征小鼠淋巴细胞的应答作用,从而能改善SS小鼠的症状。     

定心方通过上调CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞表达对PM2.5所致动脉粥样硬化的影响

目的:观察定心方(DXR)在小鼠吸入PM2.5所致动脉粥样硬化(AS)过程中对CD4~+CD25~+Foxp3~+调节性T细胞(CD4~+CD25~+Foxp3~+Tregs)表达调控的影响。方法:50只载脂蛋白E基因敲除(Apo E-/-)小鼠喂食高脂饲料并吸入严重污染的自然空气,随机分为5组,DXR低、中、高剂量组分别灌胃DXR 9.29,18.59,37.18 g·kg~(-1)·d~(-1);辛伐他汀组灌胃辛伐他汀5 mg·kg~(-1)·d~(-1);模型组灌胃等剂量生理盐水;10只C57BL/6J小鼠喂食普通饲料吸入过滤空气设为正常组。16周后检测小鼠血清脂质、酶联免疫吸附测定测定(ELISA)检测白细胞介素-6(IL-6),肿瘤坏死因子-α(TNF-α),白细胞介素~(-1)0(IL~(-1)0)及转化生长因子-β(TGF-β)水平;流式细胞法检测脾脏CD4~+CD25~+Foxp3~+Tregs数量;苏木素-伊红(HE)染色观察主动脉AS斑块形态学变化;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测主动脉AS斑块Foxp3蛋白表达。结果:与正常组比较,模型组小鼠主动脉AS斑块形成,血清脂质,IL-6及TNF-α水平明显升高,IL~(-1)0及TGF-β水平明显降低,CD4~+CD25~+Foxp3~+Tregs数量明显减少,Foxp3蛋白表达明显降低(P0.05);与模型组比较,辛伐他汀组,DXR中、高剂量组小鼠AS斑块面积明显减小,血清脂质,IL-6及TNF-α水平明显降低,IL~(-1)0及TGF-β水平明显升高,CD4~+CD25~+Foxp3~+Tregs数量明显增加,Foxp3蛋白表达明显增加(P0.05)。结论:DXR可通过上调CD4~+CD25~+Foxp3~+Tregs表达发挥抗PM2.5所致AS功效。     

中药对桥本甲状腺炎患者CD4+T细胞及血清IL-12,TNF-α表达的影响

目的:观察中药组方对桥本甲状腺炎甲状腺自身抗体,辅助性(CD4+)T细胞,血清白细胞介素-12(IL-12),肿瘤坏死因子-α(TNF-α)表达的影响以及甲状腺的病理变化,以探讨可能的作用机制。方法:70例桥本甲状腺炎随机分为治疗组和非治疗组各35例。治疗组用中药组方,每日1剂,12周为1个疗程,非治疗组给予优甲乐口服。游离三碘甲腺原氨酸(FT3),游离甲状腺素(FT4),促甲状腺激素(TSH)治疗前后各检测1次;甲状腺免疫标志物的测定:CD4+T细胞,血清甲状腺球蛋白抗体(TGAb),过氧化物酶抗体(TPOAb),IL-12,TNF-α治疗前后各检测1次;甲状腺粗针穿刺病理检查治疗前后各检测1次。结果:两组患者治疗前后甲状腺功能比较无统计学意义,且治疗组患者治疗前后FT3,FT4,TSH无显著变化,说明中药对甲状腺激素水平无明显影响。两组患者治疗前TGAb,TPOAb,IL-12,TNF-α比较无统计学差异,治疗组治疗后CD4+TC,TGAb,TPOAb,IL-12,TNF-α水平较治疗前及非治疗组明显降低,显示本组药物能很好调节免疫,减轻甲状腺的体液免疫损伤,促进组织修复。结论:本组药物能很好调节免疫,减轻甲状腺的体液免疫损伤,促进组织修复,对桥本甲状腺炎的甲状腺组织具有保护和修复作用。     

解毒祛瘀滋肾方对MRL/lpr狼疮小鼠CD4+T细胞CD229/CD25轴的影响

目的:从CD4+T细胞C D229/C D25轴探讨解毒祛瘀滋肾方治疗系统性红斑狼疮(SLE)的作用机制.方法:24只MRL/lpr狼疮小鼠随机分成模型组、激素组、中药组,各8只,8只C57BL/6小鼠作为空白组.中药组予2g/mL解毒祛瘀滋阴方水煎剂灌胃,激素组予0.5mg/mL醋酸泼尼松片混悬液灌胃,模型组和空白组...     

僵蚕对哮喘豚鼠血清IL-4和IFN-γ的影响

目的:探索僵蚕对哮喘模型豚鼠血清中IL-4和IFN-γ水平的影响。方法:用卵白蛋白致敏法制备哮喘豚鼠模型并以卵白蛋白激发哮喘发作后,予僵蚕或地塞米松治疗。采用ELISA法检测哮喘豚鼠血清中IL-4和IFN-γ的水平。结果:与模型组比较,僵蚕高、低剂量水提液及地塞米松均能降低哮喘模型豚鼠血清中IL-4水平,具有显著差异性(P0.01);并能提高IFN-γ水平(P0.05)。结论:僵蚕水提液可能通过调节机体IL-4和IFN-γ的水平,达到调节Th1/Th2平衡,有效控制哮喘发作。     

芪蛎消瘿汤对NOD.H-2h4小鼠甲状腺CD4+T细胞亚群影响的实验研究

目的：从CD4⁺T细胞亚群角度,探讨芪蛎消瘿汤治疗自身免疫甲状腺炎（AIT）的作用机制。方法：60只SPF级NOD.H-2^h4小鼠,随机分成以下4组：正常（NC）组、模型（MC）组、常规剂量芪蛎消瘿汤组（ZY1,20.8 g·kg^-1）、和3倍剂量芪蛎消瘿汤组（ZY3,62.4 g·kg^-1）,正常组饲以双蒸水,其余各组自由饮用含0.05%碘化钠水8周,8周后自发形成AIT动物模型,再给处理因素8周后处死小鼠,留取各组NOD.H-2^h4小鼠血清、甲状腺。放免法（RIA法）测小鼠血清总三碘甲状腺原氨酸（TT3）、总甲状腺素（TT4）,固相化学发光酶免疫法（IRMA法）测定小鼠血清促甲状腺激素（TSH）;光镜下观察甲状腺细胞形态;免疫组化法测定小鼠甲状腺γ-干扰素（INF-γ）、白细胞介素-4（IL-4）蛋白表达;RT-PCR法检测小鼠甲状腺INF-γ,IL-4 mRNA表达;Western blot法测定小鼠甲状腺组织叉头翼状螺旋转录因子（Foxp3）蛋白表达。结果：各组间血清TT3,TT4及TSH值比较无明显差异。HE染色显示MC组甲状腺组织淋巴细胞浸润,MC组AIT的发生率明显高于NC组（P<0.01）。MC组INF-γ,IL-4 mRNA及蛋白表达较NC组显著下降（P<0.01）;与MC组比较,ZY1,ZY3组INF-γ,IL-4的蛋白表达升高（分别P<0.01,P<0.05）;且ZY1组,ZY3组INF-γ,IL-4mRNA表达显著升高（P<0.01）。MC组甲状腺组织Foxp3的蛋白表达量较NC组明显下降（P<0.01）;ZY1,ZY3组Foxp3表达较MC组明显升高（P<0.01）。结论：芪蛎消瘿汤治疗AIT的机制可能与上调INF-γ,IL-4,Foxp3的表达,影响NOD.H-2^h4小鼠Th1,Th2,Treg细胞亚群水平相关。     

贞芪扶正胶囊对再生障碍性贫血大鼠EPO,IL-2,IL-11及CD34+细胞的影响

目的:观察贞芪扶正胶囊对再生障碍性贫血(AA)模型大鼠重组人红细胞生成素(EPO),CD34~+细胞,白细胞介素-2(IL-2),白细胞介素-11(IL~(-1)1)的影响,探讨其相关的作用机制。方法:按随机数字将60只清洁级Wistar大鼠分为6组,分别为正常组、模型组、贞芪扶正胶囊低、中、高剂量组(5,10,20 g·kg~(-1))及阳性药组(司坦唑醇混悬液,0.004 g·kg~(-1)),除正常组外,其余均釆用5-氟尿嘧啶(5-FU)与马利兰联合建立大鼠AA模型。模型成功后,给药组给予相应药物给药,阳性药组给予司坦唑醇混悬液,正常组与模型组给予相同体积的生理盐水,连续ig 30 d,以外周血细胞计数,骨髓单个核细胞(BMNC)计数,酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测IL-2,IL~(-1)1,EPO,肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平,CD34~+抗原和Fas抗原检测为主要观察指标综合评价贞芪扶正胶囊的干预效果。结果:与正常组比较,模型组的外周血白细胞(WBC),血小板(PLT),红细胞(RBC)及血红蛋白(Hb),BMNC,IL~(-1)1,CD3~+T细胞比例,CD3~+CD4~+T细胞比例,CD34~+抗原荧光量均明显降低,IL-2,EPO,TNF-α,Fas抗原荧光量明显升高(P0.01);与模型组比较,司坦唑醇组、贞芪扶正胶囊高剂量组的WBC,RBC,PLT,Hb,BMNC均有所升高(P0.05,P0.01),贞芪扶正胶囊中、高剂量组的IL~(-1)1,CD3~+T细胞,CD3~+CD4~+T细胞比例,CD34~+抗原荧光量升高,IL-2,EPO,TNF-α,Fas抗原荧光量降低降低(P0.05,P0.01);与司坦唑醇组比较,贞芪扶正胶囊中、高剂量组的WBC,CD3~+T细胞比例,CD3~+CD4~+T细胞比例,IL~(-1)1,CD34~+抗原荧光量较高(P0.05),IL-2,TNF-α,Fas抗原荧光量较低(P0.05)。结论:贞芪扶正胶囊能够改善AA大鼠外周血细胞状况、骨髓造血组织功能的恢复,增强免疫功能,可能与调控因子EPO,IL-2,IL~(-1)1水平和CD34~+细胞密切相关。     

健脾解毒方对脾虚证荷瘤小鼠肠道菌群的调节作用

目的探讨健脾解毒方对脾虚荷瘤鼠移植瘤的抑制作用、对脾虚小鼠肠道菌群的调节作用及两者之间的相关性。方法 48只小鼠随机取36只,利用番泻叶水煎剂成功制备脾虚模型,剩余12只为N.S.组,再使用CT26细胞构建移植瘤模型。36只脾虚模型小鼠则随机分为脾虚组、健脾解毒方低剂量组、健脾解毒方高剂量组,每组12只。连续灌胃给药4周后脱颈椎处死各组小鼠,称取瘤重,计算抑瘤率;计算胸腺指数和脾指数;流式细胞仪检测CD4~+、CD8~+T细胞比例,ELISA法检测血清中IL-17水平;16S rRNA基因测序法检测肠道菌群多样性。结果脾虚组平均瘤重、血清IL-17水平高于N.S.组和健脾解毒方低、高剂量组,同时脾虚组胸腺指数、脾指数、外周血CD4~+T细胞比例、CD4~+/CD8~+比值低于N.S.组和健脾解毒方低、高剂量组,差异均有统计学意义(P0.01);且脾虚组小鼠肠道菌群中拟杆菌门显著增多、厚壁菌门显著减少,存在明显的菌群失调现象。与N.S.组及健脾解毒方低、高剂量组比较,脾虚组小鼠肠道中双歧杆菌及乳杆菌减少,而肠杆菌及肠球菌增多。结论健脾解毒方具有抑制脾虚荷瘤鼠皮下瘤生长、提高CD4~+/CD8~+比例、减少炎症因子IL-17分泌的作用,这些作用可能与其改善脾虚小鼠的肠道菌群失调相关。     

小青龙汤对支气管哮喘小鼠肺泡灌洗液中炎性细胞及IL-4,IFN-γ水平的影响

目的:探讨中药方剂小青龙汤对小鼠哮喘模型气道炎症白介素-4(IL-4)及干扰素(IFN-γ)表达的影响.方法:30只SPF级BALB/c小鼠随机分为正常对照组(A组)、哮喘模型组(B组)、小青龙汤治疗组(C组).B,C组采用卵白蛋白(OVA) ip致敏与雾化吸人激发制作哮喘模型,在实验21 ～28 d,A,B组以生理盐水15 mL· kg-1 ig,C组激发前1 hig小青龙汤15 g·kg-1.于OVA激发结束后24 h收集支气管肺泡灌洗液(BALF)计数炎性细胞总数及嗜酸粒细胞(EOS)数目,并测定BALF上清液中IL-4和IFN-γ水平变化.结果:小青龙汤的干预治疗能显著降低小鼠BALF中炎性细胞总数及嗜酸粒细胞数量;BALF上清液中IFN-γ水平明显升高,IL-4水平显著下降.C组与A组、B组比较有显著性差异(P＜0.05).结论:小青龙汤能明显降低哮喘小鼠BALF中炎性细胞数量,影响细胞因子水平变化,从而改善哮喘气道炎症.     

红树莓原液对免疫抑制小鼠脏器指数及血清IFN-γ、IL-4水平的影响

[目的]观察红树莓原液对免疫抑制小鼠的免疫调节作用,探讨红树莓原液提高机体免疫功能的作用机制。[方法]测定红树莓原液对免疫抑制小鼠脾脏、胸腺指数的影响。应用酶联免疫吸附法(ELISA)检测免疫抑制小鼠血清γ-干扰素(IFN-γ)、白介素-4(IL-4)水平及计算IFN-γ/IL-4比值。[结果]红树莓原液对免疫抑制小鼠脾脏和胸腺指数下降有明显抑制作用,可显著提高小鼠血清IFN-γ、IL-4水平,降低IFN-γ/IL-4比值。[结论]红树莓原液对免疫抑制小鼠具有免疫增强作用。     

凉血祛风颗粒对变应性鼻炎大鼠模型IL-4、IFN-γ表达的影响

目的观察凉血祛风颗粒对变应性鼻炎(AR)大鼠模型IL-4、IFN-γ表达的影响。方法 SPF级Wistar大鼠50只随机分为空白对照组、模型对照组、低剂量凉血祛风颗粒组(9.45 g/kg)、高剂量凉血祛风颗粒组(18.9 g/kg)、氯雷他定组(0.9 mg/kg),每组10只。除空白对照组外,其余四组采用卵白蛋白(OVA)腹腔注射致敏、双侧鼻腔滴鼻激发制备AR大鼠模型。于第22天起,连续灌胃给药14天后处死大鼠,取血清和鼻黏膜组织,观察一般情况及鼻部症状评分;运用组织病理学方法观察鼻黏膜形态学改变;运用ELISA检测血清中IL-4、IFN-γ含量。结果与空白对照组比较,模型对照组干预后鼻部症状评分及IL-4含量升高,IFN-γ含量降低(P0.05,P0.01);与模型对照组比较,低、高剂量凉血祛风颗粒组及氯雷他定组鼻部症状评分及IL-4含量降低,IFN-γ含量升高(P0.05,P0.01)。HE染色显示,模型对照组大鼠的鼻黏膜损坏,大量炎性细胞浸润,腺体增生;各药物干预组较模型对照组病理变化明显减轻。结论凉血祛风颗粒可以有效缓解AR大鼠鼻痒、喷嚏、清涕等症状,减轻鼻部炎症反应,其机制可能是与抑制IL-4和增强IFN-γ的表达有关。     

益气复生方联合化疗对胃癌荷瘤小鼠肿瘤生长及肿瘤浸润淋巴细胞的影响

目的观察益气复生方(YQFS)联合化疗对胃癌荷瘤小鼠体内肿瘤微环境中肿瘤浸润淋巴细胞的影响,探讨YQFS联合化疗对胃癌荷瘤小鼠肿瘤生长的作用机制。方法雄性昆明小鼠腋下接种小鼠MFC胃癌细胞,建立小鼠荷瘤模型,分为空白对照组、模型组、5-FU+YQFS低剂量组、5-FU+YQFS高剂量组和5-FU组5组。空白对照组不作处理,模型组给予0.9%NaCl溶液灌胃,5-FU+YQFS低剂量组和5-FU+YQFS高剂量组给予5-FU腹腔注射7天和不同剂量益气复生方灌胃21天,5-FU组给予5-FU腹腔注射7天,21天后取材,对MFC胃癌荷瘤小鼠肿瘤组织和脾脏称重,计算抑瘤率和脾脏指数;采用流式细胞技术检测肿瘤浸润淋巴细胞CD4~+、CD8~+细胞亚群水平和比例;采用ELISA法检测外周血中IFN-γ、TNF-α、IL-10和IL-6的表达变化;采用组织切片HE染色观察小鼠胃黏膜的病理改变。结果 YQFS联合化疗对胃癌荷瘤小鼠的抑瘤率为54.46%,与单用化疗相比,差异明显;YQFS联合化疗能够改变胃黏膜形态,降低脾脏指数。并且随着YQFS浓度的增加而降低,具有剂量依赖性(P0.05)。与模型组相比,YQFS联合化疗能够增加肿瘤浸润淋巴细胞CD4~+/CD8~+比率;增加胃癌荷瘤小鼠外周血中的IFN-γ的表达,降低IL-10、IL-6、TNF-α的表达,并且与YQFS的浓度呈剂量依赖性变化。结论 YQFS的抗肿瘤作用可能与增加荷瘤小鼠肿瘤浸润淋巴细胞CD4~+/CD8~+比率,降低小鼠脾脏指数,使外周血中的IFN-γ上调而IL-10、IL-6、TNF-α下调,恢复肿瘤免疫功能稳态,提高免疫力有关。     

麋鹿角醇提液对正常小鼠IL-2和IFN-γ的影响

目的：观察麋鹿角醇提液对正常小鼠细胞因子白介素2(IL-2)和γ干扰素(IFN-γ)的影响。方法：30只ICR小鼠随机分成3组：正常组、麋鹿角醇提液低剂量组(2 g·kg^-1·d^-1)、高剂量组(4 g·kg^-1·d^-1),灌胃给药,连续7 d。采用ELISA法检测血清中细胞因子IL-2,IFN-γ的浓度,RT-PCR法检测脾淋巴细胞IL-2,IFN-γ mRNA的表达。结果：麋鹿角醇提液高剂量组小鼠血清中IL-2和IFN-γ的浓度升高,脾淋巴细胞IL-2,IFN-γ mRNA的表达增强。结论：麋鹿角醇提液能促进正常小鼠细胞因子IL-2,IFN-γ的分泌与表达,增强其细胞免疫功能。     

中药狼疮静颗粒对狼疮性BXSB小鼠脾脏CD4+T、CD19+B细胞凋亡的影响

目的：研究中药狼疮静颗粒对BXSB狼疮性小鼠脾脏CD4^+T、CD19^+B细胞凋亡的影响,并探讨其作用机理。方法：运用流式细胞术、免疫双荧光染色法检测脾脏CD4^+T、CD19^+B细胞凋亡。结果：雄性BXSB小鼠脾脏CD4^+T、CD19^+B细胞凋亡加速,中药狼疮静颗粒可明显抑制BXSB小鼠脾脏CD4^+T、CD19^+B细胞凋亡率。结论：中药狼疮静颗粒通过抑制T、B淋巴细胞过度凋亡,可能阻抑了过量核酸抗原释放,从而抑制了B细胞的异常增生活化,使自身抗体产生减少而达到治疗系统性红斑狼疮目的。     

拟黑多刺蚁活性组分对系统性红斑狼疮的治疗作用及机制

目的:采用动物模型和细胞模型,探讨拟黑多刺蚁活性组分(AFPV)对系统性红斑狼疮(SLE)的作用及可能机制。方法:采用大鼠Arthus反应,将60只SD大鼠随机分为正常组,模型组,醋酸泼尼松组(5 mg·kg~(-1)),AFPV高、中、低剂量组(400,200,100 mg·kg~(-1))。采用牛血清蛋白-弗氏完全(不完全)佐剂复制SLE模型。观察AFPV对SLE大鼠背部皮肤红肿直径的影响,酶联免疫吸附测定检测血清抗双链DNA(ds DNA)抗体,补体3(C3),补体4(C4),免疫球蛋白M(Ig M),白细胞介素-1(IL-1),白细胞介素-6(IL-6),白细胞介素-31(IL-31),白细胞介素-33(IL-33)水平;免疫磁珠法分选16～18周MRL/lpr狼疮小鼠和C57BL/6J正常小鼠脾脏CD4+T细胞,观察AFPV对miR-200a,miR-155的表达及沉默E盒锌指结合蛋白1(ZEB1)和细胞因子信号转导抑制因子1(SOCS1)水平的影响,探讨AFPV对SLE的作用及可能机制。结果:与正常组比较,模型组大鼠背部皮肤红肿直径显著增大(P 0. 01),与模型组比较,AFPV高、中剂量组可显著降低SLE大鼠背部皮肤红肿直径(P 0. 05,P 0. 01);与正常组比较,模型组大鼠血清Ig M,IL-6,IL-33明显增高(P 0. 05),与模型组大鼠比较,AFPV高、中给药组Ig M,IL-6,IL-33明显降低(P 0. 05);与正常组比较,MRL/lpr狼疮小鼠的CD4+T细胞miR-200a的表达显著降低,miR-155的表达显著增高及ZEB1水平显著增高而SOCS1的表达显著降低(P 0. 01),与模型组比较,AFPV干预后miR-200a的表达显著增高,miR-155的表达显著降低(P 0. 01),ZEB1水平显著降低而SOCS1的表达显著增高(P 0. 01)。结论:AFPV对SLE大鼠具有一定的治疗作用,其机制可能与其对miR-200a,miR-155及ZEB1和SOCS1的调节有关。     

甘利欣对肺纤维化大鼠的TGF-β1、IFN-γ、IL-4的影响

目的: 建立大鼠肺纤维化动物模型,探讨甘利欣治疗博莱霉素致肺纤维化大鼠的作用机制。 方法: 将SD级雄性大鼠60只,体重(180±20)g,随机分成4组:博莱霉素所致大鼠肺纤维化模型组(BLM组)、生理盐水对照组、甘利欣治疗组、地塞米松(Dexamethasone,DXM)治疗组,每组10只。博莱霉素致肺纤维化动物模型第28 d开始,各治疗组在每天同一时间段内连续14 d腹腔内注射。治疗的剂量分别为地塞米松注射液3 mg/(kg ·d)(浓度为5 mg/mL)、甘利欣150 mg(kg ·d);在治疗后第15 d取大鼠左肺下叶1 cm×1 cm×l cm大小的组织,固定于10%甲醛溶液,供免疫组化TGF-β₁、IFN-γ、IL-4表达观察;同样取大鼠右肺下叶供HE染色病理观察。抽取大鼠6~8 mL血液静置30 min后中速离心15 min,取其血清用ELISA双抗体夹心法测定各组大鼠血清TGF-β₁ IL-4、IFN-γ含量。 结果: ①采用分级方法定性评价HE染色大鼠肺组织的肺纤维化程度,发现甘利欣治疗组、DXM治疗组大鼠肺纤维化程度均较轻微。②模型组大鼠肺组织TGF-β₁染色呈强阳性反应,IFN-γ染色较淡,而甘利欣治疗组、DXM治疗组TGF-β₁、IFN-γ染色则相反。免疫组化TGF-β₁定量分析结果显示:与模型组均数相比,对照组、地塞米松组、甘利欣组的P值分别为0.007,0.000,0.001;而甘利欣组与地塞米松组相比,P值为0.018。免疫组化IFN-γ定量分析:模型组与甘利欣组、地塞米松组相比,P值分别为0.004,0.010;而甘利欣组与地塞米松组相比,P值为0.618。③模型组大鼠血清TGF-β₁,IL-4含量较高,IFN-γ含量较低,而甘利欣治疗组、DXM治疗组则相反。模型组大鼠血清TGF-β₁均数与对照组、地塞米松组、甘利欣组相比,P值分别为0.008,0.044,0.005;地塞米松组与甘利欣组相比P值0.169。模型组大鼠血清IL-4均数与对照组、地塞米松组、甘利欣组相比,P值分别为0.013,0.029,0.013,地塞米松组、甘利欣组两两相比无差异(P>0.05)。地塞米松组、甘利欣组大鼠血清IFN-γ均数两两相比无差异(P=0.389),但两者与模型组相比P值分别为0.001,0.000。 结论: 甘利欣可以减轻大鼠肺纤维化损伤和肺组织的TGF-β₁、IL-4的表达,并降低他们在血清中的含量,增加血清中的IFN-γ含量,增强肺组织IFN-γ的表达,为临床治疗肺纤维化提供理论支持。     

三氧化二砷对BXSB狼疮小鼠自身免疫及其生存时间的影响

目的探讨三氧化二砷（Arsenic Trioxide,ATO）对BXSB狼疮小鼠自身免疫及其生存时间的影响。方法BXSB狼疮小鼠随机平分两组,即ATO治疗组和对照组,ATO0．4mg／（kg·d）隔日腹腔注射至90天和105天,观察至210天实验结束,比较两组小鼠生存时间的差异;采用ELISA法检测小鼠血清抗ds—DNA抗体和IgG表达水平,RT—PCR法分别检测脾和肾组织干扰素-γ（interferon gamma,IFN-γ）mRNA表达水平。结果两组BXSB小鼠（每组各17只）生存时间比较,至210天时,ATO治疗组总死亡8只,而对照组总死亡13只,两组比较差异有显著性（x^2=4．20,P〈0．05）;血清抗ds—DNA抗体（0D值）对照组为0．566±0．080,ATO组为0．392±0．087,低于对照组（P〈0．001）。ATO组105天的血清IgG水平较治疗前和对照组均明显下降（P〈0．05）。治疗组与对照组小鼠脾组织IFN-γ mRNA表达（灰度比值）分别为0．540±0．300和2．320±0．522（P〈0．01）;肾组织IFN-γ mRNA表达（灰度比值）分别为0．338±0．163和0．588±0．104（P〈0．05）。结论ATO能够延长BXSB小鼠的生存时间,降低外周血抗ds—DNA抗体和IgG的表达水平,抑制脾和肾组织IFN-γ mRNA的高表达。     

温经化瘀止痛法治疗原发性痛经的临床疗效及其对T细胞亚群的调控机制

目的:观察温经化瘀止痛法对寒凝血瘀证原发性痛经(primary dysmenorrhea,PD)的临床疗效,探讨温经化瘀止痛法治疗PD的免疫机制。方法:收集寒凝血瘀证PD患者108例,按随机数字表随机分为中药组、布洛芬组和安慰剂组,每组各36例。所有患者均于月经来潮前3 d开始给药,中药组给予中药和布洛芬缓释胶囊模拟剂治疗,布洛芬组给予布洛芬缓释胶囊和中药模拟剂治疗,安慰剂组给予中药模拟剂和布洛芬缓释胶囊模拟剂治疗,连续治疗6 d,共治疗3个月经周期,停药后随访3个月经周期。观察记录各月经期间的视觉模拟评分(visual analogue score,VAS),腹痛累计时间及中医症状,流式细胞术检测患者治疗前后外周血CD3+,CD4+,CD8+水平及CD4+/CD8+。结果:治疗3个月经周期后,中药组和布洛芬组在降低VAS和减少腹痛累计时间方面均优于安慰剂组(P0.01);停药后随访远期疗效,中药组显著优于布洛芬组(P0.01)。中药组降低中医症状积分总有效率为91.43%(32/35),布洛芬组总有效率为66.67%(22/33),安慰剂组总有效率为30.30%(10/33),中药组疗效优于布洛芬组(χ2=-2.971,P0.01),布洛芬组优于安慰剂组(χ2=-2.371,P0.05)。与本组治疗前比较,治疗后中药组CD3+,CD4+水平及CD4+/CD8+显著升高,CD8+水平显著降低(P0.01);与布洛芬组和安慰剂组治疗后比较,治疗后中药组CD4+水平及CD4+/CD8+升高(P0.05,P0.01),CD8+水平降低(P0.01)。结论:温经化瘀止痛法能够显著减少PD患者的VAS评分和腹痛累计时间,改善痛经症状,逆转T细胞亚群失调可能是其治疗寒凝血瘀证PD的作用机制之一。     

中药狼疮静颗粒对狼疮性BXSB小鼠外周血CD4、CD8、CD19细胞的影响

目的：研究中药狼疮静颗粒对BXSB狼疮性小鼠外周血CD4、CD8、CD19细胞分布的影响，探讨其免疫调节机理。方法：运用微量全血免疫双荧光染色法及流式细胞仪进行检测。结果：中药狼疮静颗粒可升高BXSB狼疮鼠外周血CD4、CD8细胞及降低外周血CD19细胞分布。结论：中药狼疮静颗粒通过调节T淋巴细胞功能紊乱，降低B细胞分布，抑制了B细胞的异常增生活化，使自身抗体产生减少而达到治疗SLE的目的。