海风藤水煎剂对纤维状Aβ_(1-42)介导的b End.3细胞损伤的影响

目的:探究海风藤水煎剂对纤维状Aβ_(1-42)介导的b End.3细胞损伤的影响及可能机制。方法:将b End.3细胞分为阴性对照组,模型组(Aβ_(1-42)20μmol/L),海风藤水煎剂低中高剂量组(Aβ_(1-42)20μmol/L+海风藤0.5,1,5 mg/m L);(1)利用噻唑蓝(MTT)法检测海风藤水煎剂对Aβ_(1-42)介导的b End.3细胞活力的影响;(2)利用Hoechst33258染色法鉴定b End.3细胞的凋亡情况;(3)Western Blot法检测死亡受体凋亡信号通路相关蛋白Caspase-8,Cleaved Caspase-8,Caspase-3及Cleaved Caspase-3的表达水平。结果:MTT与Hoechst33258染色结果显示,与模型组相比,海风藤低、中、高剂量组能显著提高b End.3细胞活性,抑制Aβ_(1-42)介导的b End.3细胞凋亡(P0.05),且保护作用与海风藤水煎剂浓度成正相关;Western blot显示,与模型组相比,海风藤预处理后,可明显减Cleaved Caspase-8/Caspase-8、Cleaved Caspase-3/Caspase-3的比值(P0.05)。结论:海风藤能够提高b End.3细胞可能通过抑制Aβ_(1-42)诱导的死亡受体信号通路发挥其神经保护作用。     

琐琐葡萄多糖对阿尔茨海默病细胞模型APP表达的影响

目的:观察琐琐葡萄多糖(polysaccharide from Vitis viniferal,VTP)对β-淀粉样蛋白25-35(Aβ25-35)诱导PC12细胞β-淀粉样前体蛋白(beta-amyloid precursor protein,APP)基因表达的影响,探讨VTP在阿尔茨海默病(Alzheimer's disease,AD)发病机制中的作用。方法:体外培养PC12细胞,分为对照组,AD模型组(20μmol·L-1Aβ25-35作用24 h),VTP低、中、高剂量组质量浓度分别为20,40,80 mg·L-1。VTP作用24 h后,检测细胞活性、超氧化物歧化酶(SOD)活力、丙二醛(MDA)含量和细胞超微结构,采用实时荧光定量PCR(real-time PCR)检测APP mRNA表达。结果:与正常组比较,模型组细胞活性及SOD活力降低(P0.01),MDA含量及APP mRNA表达增高(P0.01),细胞超微结构明显异常;与模型组比较,给药组细胞活性及SOD活力增强(P0.05),MDA含量及APP mRNA表达下降(P0.01),减轻神经细胞损伤。结论:VTP对Aβ25-35诱导的氧化损伤有保护作用,通过抗氧化和调节APP mRNA表达,抑制Aβ形成,保护神经细胞,起到防治AD的作用。     

补气活血方对多因素损伤AD大鼠海马区β-APP及相关基因表达的影响

目的：探讨补气活血方对老年性痴呆的作用及作用机制。方法：采用腹腔注射D-半乳糖、氢溴酸东莨菪碱注射液（SCOP），胃饲AlCl3，喹啉酸（QA）海马区注射相结合的方法建立多因素损伤AD大鼠模型，采用免疫组化法观察大鼠海马区β-APP、COX-2、IκB-α及nNOS的变化。结果：补气活血方能明显降低AD模型大鼠海马区β-APP、COX-2、IκB-α表达，使nNOS表达升高。结论：补气活血方可能通过降低COX-2、NF-κB／IκB-α，增加模型大鼠海马区nNOS表达，影响β-APP生成，延缓神经元细胞的早期损伤和迟发性损伤，从而达到治疗AD作用。     

黑水缬草提取物对老年痴呆大鼠脑内神经元中β-APP、Aβ_(1-40)和Caspase-3表达的影响

目的:探讨黑水缬草提取物对老年痴呆模型大鼠大脑皮质神经元和海马神经元中β-APP、Aβ1-40和Caspase-3表达的影响。方法:利用多因素造成大鼠老年痴呆病理复合模型,采用免疫组化法观察老年痴呆大鼠大脑皮质神经元和海马神经元中β-APP、Aβ1-40和Caspase-3蛋白表达变化。结果:黑水缬草各给药组和中药对照组显示出一定的疗效(P0.05),其中以50%乙醇树脂洗脱高剂量效果尤为显著(P0.05或P0.01)。结论:黑水缬草50%乙醇树脂洗脱物能有效抑制神经元细胞内β-APP和Aβ1-40阳性细胞过表达,阻止其聚集脑内形成老年斑和神经纤维缠结,并能有效抑制Caspase-3的活化而减少神经元细胞的凋亡。     

补阳还五汤对Aβ1-40所致老年性痴呆大鼠海马区β淀粉样前体蛋白及相关基因表达的影响

目的探讨补阳还五汤对老年性痴呆（AD）大鼠海马区B淀粉样前体蛋白（β-APP）及相关基因：环氧合酶2（COX-2）、核转录因子抑制蛋白α（IκB-α）、神经元型一氧化氮合酶（nNOS）的影响及可能的作用机制。方法采用Aβ1-40海马区注射，建立AD大鼠模型，免疫组化法观察中药补阳还五汤对AD大鼠海马区β-APP，COX-2，IKB-α及nNOS的影响。结果补阳还五汤能明显降低AD模型大鼠海马区B-APP，COX-2，IκB-α表达，使nNOS表达升高。结论补阳还五汤可能通过COX-2，NF-κB／IκB-α，增加模型大鼠海马区nNOS表达，影响B-APP生成，延缓神经元细胞的早期损伤和迟发性损伤，从而起到治疗AD的作用。     

丹皮酚对Aβ诱导的AD模型大鼠脑细胞凋亡因子的影响及作用机理

目的:研究丹皮酚对β淀粉样蛋白(Aβ)诱导的大鼠老年痴呆症(Alzheimer disease AD)动物模型的干预作用,探讨丹皮酚对AD模型大鼠脑细胞凋亡的影响及其作用机理。方法:32只大鼠随机分为正常对照组、假手术组、Aβ诱导AD模型组和丹皮酚治疗组。动物喂养40 d后取大鼠脑组织观察其病理变化,用免疫组化染色法和原位杂交法检测大脑细胞凋亡因子P53和活化的Caspase-3以及凋亡细胞的表达水平。结果:用丹皮酚干预减轻Aβ诱导的大脑组织病理结构变化,明显抑制AD模型鼠凋亡因子P53和Caspase-3的表达,减少了凋亡细胞的产生。结论:丹皮酚能保护神经组织,具有明显的抗凋亡作用,可减缓AD的发生发展。     

黄连解毒汤对APP/PS1双转基因阿尔茨海默病模型小鼠脑内β-淀粉样前体蛋白基因表达影响研究

目的:探讨黄连解毒汤对APP/PS1双转基因阿尔茨海黙病模型小鼠脑内β-淀粉样前体蛋白(β-APP)基因表达的影响。方法:选用3月龄APP/PS1双转基因阿尔茨海默病模型小鼠,随机分为空白对照组(CMC组)、西药安理申对照组(阳性对照组)、黄连解毒汤大剂量组(大HLJDT组)、黄连解毒汤中剂量组(中HLJDT组)、黄连解毒汤小剂量组(小HLJDT组),连续灌胃给药6个月后,通过反转录聚合酶链反应(RT-PCR)观察各组APP/PS1双转基因阿尔茨海默病模型小鼠脑内β-APP基因表达情况。结果:CMC组小鼠β-APPmRNA表达量较西药安理申组明显升高,差异具有统计学意义(P0.05),黄连解毒汤各剂量组小鼠β-APPmRNA表达量较CMC组明显降低(P0.05),其中中剂量组小鼠β-APPmRNA表达量与西药安理申组比较差异具有统计学意义(P0.01)。结论:各剂量黄连解毒汤均能降低APP/PS1双转基因阿尔茨海默病模型小鼠脑内β-淀粉样前体蛋白(β-APP)基因表达,其中中剂量组降低效果明显优于西药安理申。     

补肾活血方对阿尔茨海默病模型大鼠脑内胶质细胞的影响

全楷体目的:观察补肾活血中药黄芪三仙汤对AD大鼠脑内海马区胶质细胞的影响,探讨补肾活血中药治疗阿尔茨海默病(AD)的中枢免疫调节机制.方法:大鼠随机分组,于大鼠右侧Meynert核注入β-淀粉样蛋白(Aβ1-40)制成AD模型,4周后观察各组脑组织中神经胶质细胞超微结构变化.结果:模型组海马区可见神经胶质细胞增生,神经细胞变性.在变性神经细胞的周边和血管周围小胶质细胞增生活跃,脂褐素较多.治疗组和假手术组可见神经胶质细胞,数量较模型组明显减少.正常对照组可见少量脂褐素,其余超微结构基本正常.结论:黄芪三仙汤能明显抑制CNS的免疫炎性反应,抑制神经原变性、坏死,从而达到治疗AD的作用.     

千层塔合剂对AD模型大鼠学习记忆能力及细胞凋亡的影响

探讨千层塔合剂治疗AD的作用机理,为中医和地方特色药物治疗AD提供实验依据和临床指导。方法:采用腹腔注射D-gal6周致亚急性衰老模型,合并双侧海马区注射Aβ25-35复制AD模型;给予药物或生理盐水灌胃4周后,用Morris水迷宫法测试大鼠学习记忆能力,流式细胞仪观察脑神经细胞凋亡情况。结果:千层塔合剂对AD模型大鼠的学习记忆功能有明显的改善作用(P<0.01);并能降低Aβ毒性所致的脑神经细胞凋亡(P<0.01)。结论:千层塔合剂能够显著改善AD大鼠学习记忆能力,抑制细胞凋亡。     

补肾化痰益智法对AD细胞模型APPmRNA表达的影响

目的:本研究在成功建立AD体外模型基础上,探讨补肾化痰益智法治疗AD的作用机制。方法:运用Aβ1-42作用于PC-12细胞,制作AD神经元细胞模型,并用补肾化痰益智方含药血清进行干预,以吲哚美辛为对照。镜下观察细胞形态,MTT法检测PC-12细胞存活率,观察补肾化痰益智方对神经元细胞保护作用。RT-PCR法检测APP mRNA的表达,观察补肾化痰益智方抗Aβ神经毒性作用。结果:2.5 mmol·L-1聚集态Aβ1-42使细胞活力明显下降;RT-PCR法对APP mRNA表达进行半定量分析发现,经Aβ1-42诱导各组APP mRNA表达上调,补肾化痰益智法可明显降低其表达(P<0.01)。结论:补肾化痰益智法对神经细胞具有较好的保护作用,能够抑制APP mRNA的表达,降低毒性作用。