HPLC/TOF-MS和HPLC/IT-MSn联合用于补骨脂药材的化学成分分析

目的 建立一种结合高效液相色谱飞行时间质谱（HPLC/TOF-MS）及高效液相色谱离子阱多级质谱（HPLC/IT-MSⁿ）对补骨脂药材进行化学成分定性分析的方法。方法 HPLC色谱分离采用Phenomenex luna C₁₈（5 μm）反相色谱柱为分析柱,0.1%甲酸水溶液-乙腈为流动相,梯度洗脱,检测波长为254 nm;质谱定性采用飞行时间质谱结合离子阱多级质谱,正负离子模式扫描。结果 在优化的液质联用条件下,飞行时间质谱筛查出13种成分的分子式,采用离子阱多级质谱鉴定分析此13种成分。结论 HPLC/TOF-MS和HPLC/IT-MSⁿ联合的分析方法,为中药的多成分分析提供了一种有效、可靠的新模式,此模式也同样适用于其他复杂体系的分析。     

HPLC-MS/MS 检测中药制剂及保健食品中添加 6 种减肥药物的研究

 目的 建立专属、灵敏的 HPLC-MS/MS 方法甄别中药制剂及保健食品中可能添加的氯噻嗪、盐酸西布曲明、酚酞、吲哒帕胺、布美他尼、吉非罗齐等 6 种化学减肥药物。 方法 样品经甲醇提取， 采用液相色谱 - 离子阱质谱联用法测定。色谱条件： Inertsil ODS-3 色谱柱 (4.6 mm × 250 mm ， 5 m m) ，梯度洗脱： 流动相 A 为 0.1% 醋酸溶液；流动相 B 为乙腈， 质谱条件：离子源 ESI ， 选择正负离子全扫描、选择离子监测 (SIM) 、多反应监测 (MRM) 方式检测临床常用的 6 种化学减肥药物，研究了这 6 种药物的质谱裂 解规律。 通过比较样品峰与对照品峰的相对分子质量、二级质谱碎片信息和液相色谱保留时间，确定样品中是否违法添加了化学药物 。 结果 应用本法 检测了 12 批市售减肥类中药制剂及保健食品 ， 其中 1 种减肥保健食品中检出西布曲明及酚酞， 1 种减肥保健食品中检出西布曲明，另外 2 种减肥保健食品检出酚酞 。 结论 该法 简便、快捷，灵敏度高、 专属性强，可作为 检测中药制剂及保健食品中非法掺入减肥类化学药的有效手段 。     

应用高效液相色谱-飞行时间质谱及离子阱质谱分析磷酸苯丙哌林中的杂质

 目的 应用高效液相色谱-飞行时间质谱及高效液相色谱-离子阱质谱分析磷酸苯丙哌林原料药中的杂质。方法 采用Waters C₁₈柱,以乙腈-0.01 mol·L^-1醋酸铵溶液（冰醋酸调节pH值至3.3）（60∶40）为流动相,分离杂质与磷酸苯丙哌林,采用飞行时间质谱测定杂质精确相对分子质量,采用离子阱质谱获得其质谱碎片。结果 通过精确相对分子质量确定杂质的分子组成为C₂₁H₂₅NO₂,为苯丙哌林氧化产物,通过分析质谱碎片和生产工艺,推测了杂质的结构。结论 飞行时间质谱和离子阱质谱相结合,可以在化合物结构确认方面发挥重要作用。     

减肥中成药中添加西布曲明西药成分的检测

 目的建立检测减肥类中成药中可能添加西药西布曲明的定性、定量方法。方法随机抽查市场上销售的3种减肥药,采用TLC及LC-MS联用技术定性鉴别,HPLC外标法定量。结果硅胶HF₂₅₄薄层板上,以氯仿-甲醇(8∶1)为展开剂,改良碘化铋钾溶液显色,供试品与对照品及阳性对照比较,呈现相同的橘红色斑点,Rf值为0.65。流动相:甲醇-水(80∶20,pH4.5),流速1.0 mL·min^-1,柱后分流,0.4 mL·min^-1进质谱仪;ESI(+)离子源,扫描范围m/z 100～400,干燥气流速8.00 L·min^-1,干燥气温度350℃,雾化气压2.1×10⁵Pa;借助于液相色谱-质谱联用仪的质量色谱图方式识别和确认西布曲明的保留时间,并获取其对应峰位的质谱图,供试品与对照品质谱图对比,碎片离子峰匹配因子达到0.999,检出西布曲明。HPLC定量分析,通过改变流动相及调整流速,样品中西布曲明作为定量峰与相邻干扰峰有较好的分离度,3种减肥中成药中的西布曲明分别在30～350,10～180,10～250 mg·L^-1内具有良好的线性关系(r分别为0.999 6,0.999 0,0.999 3,n=7)。结论本法简便、快速、分离效果好、精密度、准确度高,可用于中成药复杂的化学环境中添加西布曲明的定性、定量分析。     

液质联用检查15种降压类药物及数据检索库的建立

 目的为打击中药制剂及保健食品中非法添加化学药物现象,建立准确、灵敏的HPLC-MS/MS方法甄别中药制剂及保健食品中可能添加的15种化学降压药物。方法采用Waters Sunfire C₁₈色谱柱,梯度洗脱:流动相A为20 mmol·L^-1醋酸铵溶液,流动相B为甲醇-乙腈(2∶1),检测波长为230 nm,流速为1 mL·min^-1(分流比为4∶1)。选择正负离子全扫描方式检测临床常用的15种降压药,利用质谱解析软件研究了上述化合物的质谱裂解规律。通过比较样品峰与对照品峰的一级质谱、二级质谱质荷比,确定样品中是否掺杂了化学药物。结果在上述色谱及质谱条件下,15种降压药物HPLC图谱分离度良好,质谱分辨率符合鉴别要求。HPLC-MS/MS方法测定上述化学物质的最小检出量为1～80 ng。结论该方法灵敏度、准确性、重现性均可满足定性检查的要求,简便,快捷。     

超高效液相色谱-串联质谱法快速检测保健食品中非法添加的6种减肥类化学成分的研究

目的:建立减肥类保健食品中非法添加的6种化学成分的快速检测方法。方法:采用超高效液相色谱-串联质谱法(UPLC-MS-MS),Acquity BEH-C18色谱柱(2.1 mm×50 mm,1.7μm),流动相乙腈-0.1%甲酸进行梯度洗脱,电喷雾电离(ESI),选择性离子扫描(SIR)和多反应监测(MRM)模式,对25个减肥类保健食品进行6种化学成分非法添加的分析。结果:6份样品检出了非法添加成分盐酸西布曲明和酚酞。结论:该方法专属性强,灵敏度高,适用于减肥类保健食品中非法添加成分的筛选及确证工作。     

中药及保健食品中PDE5抑制剂检测方法研究及未知衍生物的发现

 目的为打击中药制剂及保健食品中非法添加化学药物现象,针对常见的5型磷酸二酯酶(PDE5)抑制剂,研究建立了快速理化鉴别方法和HPLC-MS/MS方法。方法采用Waters Sunfire C₁₈色谱柱,梯度洗脱:流动相A为20 mmol·L^-1醋酸铵溶液,流动相B为甲醇-乙腈(2∶1),检测波长为230 nm,流速为1 mL·min^-1(分流比为4∶1)。选择正负离子全扫描方式检测。结果在上述色谱及质谱条件下,对于常见的3种PDE5抑制剂进行了质谱裂解规律的分析总结,并用于未知衍生物的结构推测,成功检测出3个衍生物,其中一个结构未见报道,本所根据核磁共振图谱确定了结构。结论该方法简便,快捷、灵敏度、准确性、重现性均可满足定性检查的要求。     

山麦冬和麦冬皂苷类成分的HPLC/ESI-MS图谱研究

 目的鉴定山麦冬和麦冬中的皂苷成分,并建立其特征图谱。方法用甲醇提取山麦冬和麦冬对照药材,并用C₁₈SPE固相萃取柱除去提取液中的多糖成分制备供试液;用高效液相色谱-电喷雾离子阱质谱(HPLE/ESI-ITMS)研究供试液中的总皂苷成分并建立相应的特征图谱。实验条件为:AICHROM^TMRelizSilC₁₈(2.1mm×150mm,5μm)分析柱,流动相为10mmol·L^-1醋酸铵和乙腈(60min内乙腈浓度变化为25%～60%),流速为0.2mL·min^-1,自动进样后色谱分离、质谱检测。结果山麦冬、麦冬对照药材中分别有17个和14个特征色谱峰,根据各色谱峰的二级质谱碎片信息并参考有关文献,对其中的一些皂苷成分进行了初步定性分析。结论所测山麦冬与麦冬样品两者HPIE/ESI-ITMS的图谱特征性强,差异明显。     

基于UPLC/Q-TOF MS的大豆异黄酮保健食品中异黄酮成分的快速分析

目的：采用超高效液相色谱-四极杆飞行时间高分辨质谱（UPLC/Q-TOF MS）联用技术,对大豆异黄酮保健食品甲醇提取液进行分析,建立了一种快速、简便、可靠的异黄酮鉴别方法。方法：Agilent Eclipse Plus C₁₈ RRHD（2.1 mm×100 mm,1.8 μm）色谱柱;以乙腈-0.1%甲酸溶液为流动相进行梯度洗脱;流速0.3 mL?min^-1;柱温25℃;质谱定性采用飞行时间质谱,负离子模式扫描。结果：实验分析时间为10 min,结合二级质谱裂解数据、元素组成、数据库匹配,鉴定出5个异黄酮成分。结论：该方法准确、快速、灵敏,为保健食品的质量控制提供参考。     

LC-Q-TOF-MS及LC-IT-MS分析酸枣仁汤的化学成分

采用液相色谱-四级杆-飞行时间质谱（LC-Q-TOF-MS）及液相色谱-离子阱质谱（LC-IT-MS）系统剖析了酸枣仁汤中化学成分。色谱柱为Agilent Zorbax SB-C₁₈,Rapid Resolution HT（4.6 mm×50 mm,1.8 μm）;以乙腈（A）-0.05%甲酸溶液（B）为流动相,梯度洗脱;流速0.6 mL·min^-1;柱温30 ℃。共鉴定了酸枣仁汤中48个化合物,并对化合物的药材来源进行了归属,首次报道了方剂中的31个化合物。LC-Q-TOF-MS结合LC-IT-MS可以简便、快速地对酸枣仁汤中化学成分定性分析,本研究结果为酸枣仁汤质量控制和药效物质基础研究提供了一定的理论依据。     

高效液相色谱法测定盐酸氨溴索及其片剂含量

 目的：建立盐酸氨溴索的HPLC测定方法。方法：色谱柱为迪马公司Diamonsil(tm) C₁₈柱（5 μm，250 mm×4.6 mm）；流动相为乙腈-水-浓氨溶液-磷酸（30∶70∶0.10∶0.08，pH=3.0）；检测波长：244 nm；柱温25℃；流速0.6 mL·min^-1。结果：精密度及稳定性均良好；在5.92～53.3 mg·L^-1 的范围内, 峰面积与浓度呈良好的线性关系，r=0.9999（n=6），平均回收率为100.6%，RSD为0.9%。结论：本方法简便、 快速、准确、重现性好，可用于盐酸氨溴索原料及其制剂的含量测定。     

几种含金丝桃素植物提取物的HPLC分析

 目的分析几种形态非常相近，不易进行形态学鉴别的含金丝桃素的植物提取物的HPLC图谱，为正确鉴别含金丝桃素的植物提供参考。方法应用HPLC法，选定适当的流动相及紫外 可见检测波长进行分离鉴定。结果 采用Hypersil ODS(10μ)柱，流动相：甲醇-乙腈-醋酸= 42∶58∶0.3，检测波长473 nm可分离特征峰。结论 得到较稳定的具有特征的HPLC图谱，可为鉴别上述植物提供依据。     

LC-MS/MS法测定大鼠血浆中齐墩果酸的含量及其药动学研究

目的建立大鼠血浆中齐墩果酸的LC-MS/MS测定法,并应用于灌胃白花蛇舌草提取物齐墩果酸在大鼠体内的药动学研究。方法取大鼠血浆100μL,加入10μL内标甘草次酸(5μg·mL-1),依次用乙酸乙酯800μL提取两次,上清液用氮气流吹干,100μL流动相复溶,高速离心10 min,取上清液5μL进行LC-MS/MS测定。色谱条件:Agilent 1200高效液相色谱系统,色谱柱Phenomenex Gemini 110A C18色谱柱(50 mm×2.0mm,5μm);流动相:乙腈-0.01%甲酸水梯度洗脱;柱温为40℃;流速为0.3 mL·min-1。质谱:API4000负离子MRM模式,齐墩果酸和甘草次酸的选择检测离子质荷比分别为m/z 455.3→455.3,m/z 469.4→425.3。结果齐墩果酸血浆浓度线性范围0.5～250 ng·mL-1,线性关系良好(r=0.9979),最低检测限(LOQ)为0.1 ng·mL-1,提取回收率为62.76%～65.38%,日内精密度RSD为3.55%～7.45%,日间精密度RSD为2.34%～7.60%,稳定性均符合方法学测定要求,血浆无内源性基质干扰。结论该法简便,灵敏,重复性好,可应用于测定血浆中齐墩果酸的含量并应用于灌胃白花蛇舌草提取物大鼠体内齐墩果酸的药物动力学研究。     

人血清中伊立替康的液质联用测定方法

 目的　建立高效液相-质谱联用法(LC-MS)测定人血清中伊立替康(CPT-11)的浓度。方法　液相 :采用WatersSymmetryC₁₈色谱柱(2.1mm×150mm,5μm) ;流动相 :甲醇-5mmol·L^-1甲酸铵缓冲液(38∶62);流速:0.2mL·min^-1。质谱:电喷雾电离源(ESI⁺ ) ,选择性离子监测 (SIR)质荷比 (m/z)为 587。以盐酸洛贝林为内标 ,采用乙腈沉淀蛋白 ,上清液经酸化后进样分析。结果　本方法在 10～10000ng·mL^-1内线性良好,相关系数r=0.996.7(n =7)。高、中、低浓度质控样品的批内RSD均在2.70%～4.58% ,批间RSD均在2.74%～5.82%,方法学回收率为98.21%～110.49%,最低检测浓度为0.2ng·mL^-1。结论　本方法灵敏度高,操作简便易行 ,完全能满足体内低药物浓度的测定,可用于该药临床药物动力学特性的研究。     

高效液相色谱-串联质谱法测定人血浆中氯法拉滨的浓度

 目的 建立高效液相色谱-串联质谱法（LC-MS/MS）测定人血浆中氯法拉滨浓度。方法 采用API3000串联质谱仪及Shimadzu系列液相色谱仪进行检测。血浆样品经乙酸乙酯提取处理，以克拉屈滨为内标。色谱柱为Thermo C₁₈柱（4.6 mm×150 mm，5 μm），流动相为乙腈-水（250∶3，其中含4 mmol的乙酸铵和0.3%的甲酸），流速为0.5 mL·min^-1。氯法拉滨和克拉屈滨的MRM扫描离子通道m/z分别为304.0→170.0，286.1→170.0。进样体积为20 μL，每个样品的分析时间为5 min。结果 氯法拉滨和克拉屈滨保留时间分别为4.00，4.11 min。氯法拉滨在10~2 000 ng·mL^-1内线性关系良好（r=0.999 5），日内、日间RSD均低于9.60%，准确度为101.10%~102.94%。结论 本法样品预处理简便快速，检测准确、灵敏、专一，适用于氯法拉滨药动学的研究。     

RP-HPLC测定阿那曲唑含量及有关物质的方法学研究

 目的测定阿那曲唑片的含量及有关物质检查。方法采用反相高效液相色谱法，ODS色谱柱(4.6 mm×200 mm，填料：Hypersil，粒度：5 μm)，以水-乙腈-甲醇-三氟乙酸(560∶180∶260∶0.5)为流动相，流速1.0 mL·min^-1，检测波长215 nm，柱温40℃，测定。结果RP-HPLC测定的线性范围为5.11～35.77μg·mL^-1，相关系数r=0.999 9；片剂中阿那曲唑的平均回收率为99.97%，RSD=0.94%，n=9；最低检测限1.07 ng；精密度(RSD=0.3%)良好。结论该法操作简便、快速、准确，适用于阿那曲唑片的含量测定及其有关物质检查。     

RP-HPLC内标法测定大鼠血清红景天苷浓度的研究

 目的RP-HPLC内标法建立大鼠血清中红景天苷浓度的测定方法。方法健康♂SD大鼠尾静脉注射红景天苷(60mg·kg^-1)后,分别于不同时间点眼眶静脉丛取血0.5mL,高氯酸沉淀血清蛋白,离心取上清液进样分析。色谱柱为SHIMADZU C₁₈柱(4.6mm×250mm,5μm),流动相为乙腈-水-三乙胺-冰醋酸(10∶90∶0.011∶0.016),流速为1.5mL·min^-1,检测波长为277nm,柱温为50℃,进样量10μL,内标为咖啡因。结果红景天苷质量浓度在0.56～70mg·L^-1内线性关系良好(r=0.9975),以信号/噪音=3∶1计算,红景天苷最低检测浓度为0.15mg·L^-1,日内、日间精密度分别≤4.5%,≤5.4%,血清样品的平均回收率为(99.27±4.38)%。结论建立的RP-HPLC内标法方法简便、快速、准确,适合于红景天苷的血药浓度测定及药动学研究。     

建立评价当归质量的HPLC指纹图谱分析方法

 目的建立评价当归质量优劣的指纹图谱分析方法。方法采用高效液相色谱分析，Hypersil C₁₈柱(200 mm×4.6 mm，5μm)，分别以乙腈-0.01%磷酸水溶液(10∶90)、甲醇-乙腈-水(10∶30∶60)为流动相，流速为0.8 mL·min^-1，检测波长320 nm，测定了36批不同产地的当归药材的HPLC指纹图谱。结果 根据聚类分析和相似度分析处理结果，将当归药材分为两类：合格药材与不合格药材。结论 本方法简便、快捷、可靠，可用于当归的质量评价。     

液相色谱-二级质谱联用法测定人血浆中醋酸甲羟孕酮的浓度

 目的建立测定人血浆中醋酸甲羟孕酮的液相色谱-二级质谱联用法(LC-MS/MS)。方法取血浆,加入内标醋酸甲地孕酮,经正己烷液-液萃取后,在50℃水浴以氮气流吹干,残渣用流动相溶解,进行LC-MS/MS测定。色谱柱为Alltech Alltima-C₁₈柱(2.1 mm×100 mm,3μm);以甲醇-0.1%甲酸溶液(72∶28)为流动相;流速0.2 mL·min_-1;柱温40℃;电喷雾离子源(ESI),以选择性正离子方式检测;扫描方式为选择反应监测(SRM),用于定量分析的二级碎片离子m/z分别为327.4(醋酸甲羟孕酮)和325.4(醋酸甲地孕酮,内标)。结果醋酸甲羟孕酮的线性范围为0.10～8.0μg·L^-1,最低检测限为40 ng·L^-1,提取回收率为76.1%,日内、日间精密度(RSD)均小于9.0%。结论本方法专属性强,灵敏度高,操作简便,适用于临床药物检测。     

检测镇静安神类中成药中非法添加化学药品的方法研究

 目的建立镇静安神类中成药中非法添加化学药品的检测方法。方法对中成药中常见添加的10种化学药品,建立等度HPLC-DAD方法对样品进行分离测定。以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;甲醇-乙腈-体积分数0.5%甲酸pH(2.8±0.1)(30∶15∶55)为流动相;检测波长为254nm,同时进行DAD全波长扫描;然后建立UPLC-MS/MS方法对HPLC-DAD的结果进行确证。结果相关分子离子峰特征碎片离子明显,并在数批镇静安神类中成药中检出非法添加的化学药品成分。结论本方法专属性强、灵敏度高,结果准确可靠,可作为检测镇静安神类中成药中非法添加化学药品的有效方法。