参附汤上调HL60细胞热休克蛋白和糖皮质激素受体mRNA表达及其对细胞存活的影响

目的:探讨中药方剂参附汤对HL60细胞热休克反应时热休克蛋白信使核糖核酸(heat shock protein mRNA, HSPmRNA)和糖皮质激素受体信使核糖核酸(glucocorticoid receptor mRNA,GRmRNA)表达及对细胞存活率的影响.方法:建立细胞热休克模型,用动物血清学方法制备参附汤(SFT)血清,用Northern blot分析HSPmRNA和GRmRNA的改变,用台盼蓝拒染法观察细胞存活率.结果:HL60细胞热休克反应时GRmRNA明显减少,细胞存活率下降,HSPmRNA则增加;该细胞经SFT处理后在热休克反应时,GRmRNA表达增加,细胞存活率提高,HSPmRNA进一步增加.结论:SFT可上调HL60细胞热休克反应时HSPmRNA和GRmRNA表达,提高糖皮质激素的生物学效应和抗细胞损伤能力,从而提高HL60细胞在热休克时的存活率,这可能是临床上SFT用于治疗失血性休克的机制之一.     

针灸与热休克蛋白60、热休克蛋白70和细胞凋亡关系研究进展

细胞凋亡是基因控制的细胞主动死亡的过程,是细胞程序性死亡的形式.在正常情况下,细胞凋亡与细胞增生保持着一定的规律性.当细胞正常增生和分化被扰乱,导致增生和凋亡异常时,就会诱发疾病.热休克蛋白(HSP)是一类高度保守的应激蛋白,广泛存在于真核和原核生物体内.     

人参茎叶皂苷对失血性休克大鼠糖皮质激素受体的影响

目的 观察人参茎叶皂昔(ginsenosides，GSS)对失血性休克大鼠糖皮质激素受体(GR)的影响，并分析其作用机制，为研制及时抢救失血性休克患者的天然药物制剂提供实验依据。方法 雄性SD大鼠随机分为失血性休克组和对照组，失血性休克组分别每日ig200，100，50mg／kg GSS水溶液，对照组和模型组ig蒸馏水2mL，共10d。以[^3H]地塞米松为配体，用一点分析法测脑和肝胞液GR结合活性(Rs)、半定量RT—PCR方法测肝胞液GR mRNA水平、放免法测血浆促肾上腺皮质激素(ACTH)和皮质酮(GC)浓度。结果 GSS组大鼠脑和肝胞液的GR结合活性高于单纯失血性休克组，其中以中剂量组最明显(P＜0．01)；GSS组大鼠肝胞液GR mRNA表达水平高于单纯失血性休克组；GSS组大鼠血浆ACTH和GC浓度和单纯失血性休克组没有明显差别。结论 GSS可减轻失血性休克大鼠GR结合活性的下降幅度，作用机制可能与其促进了GR mRNA表达有关，并可能存在一个最佳剂量。     

213中药对糖皮质激素受体影响的研究进展

对近年来有关常用中药对糖皮质激素受体(GR)的调节作用的文献资料加以综合归纳,以明确其发挥作用的有效成分及其作用机理,为中药的临床应用奠定基础.     

逆针灸关元穴对自然更年期大鼠子宫雌激素受体α和热休克蛋白70表达的影响

目的探讨预先针灸关元穴对更年期早期机体异常的预防和治疗作用。方法以4月龄雌性SD大鼠为年轻对照组,将24只通过阴道涂片筛查的10月龄SD雌性大鼠随机分为4组,采用自然老化法制备大鼠更年期模型。观察12月龄自然更年期大鼠子宫雌激素受体α(ER-α)和热休克蛋白70(HSP-70)表达的变化及逆针灸对其的影响。结果自然更年期大鼠的子宫ER-α表达逐渐下降(P0.01),逆灸和逆针都可使大鼠子宫ER-α的表达水平明显提高(P0.01)。自然更年期大鼠的子宫HSP-70表达波动升高(P0.01),逆灸和逆针都可使大鼠子宫HSP-70进一步升高(P0.05)。结论 12月龄自然更年期大鼠的子宫表达的ER-α减少,逆针灸可以通过提高子宫ER-α水平和HSP-70表达,从而保护子宫功能。     

槲皮素阻断热休克蛋白70表达对艾灸预处理抑制胃黏膜损伤细胞凋亡的影响

目的通过槲皮素灌胃阻断热休克蛋白（HSP）70表达,观察艾灸预处理对大鼠急性胃黏膜损伤指数及细胞凋亡的影响,以进一步探明艾灸的细胞保护作用及其与HSP70的关系。方法40只大鼠随机分为捆绑对照组（A组）、模型组（B组）、艾灸＋模型组（C组）、槲皮素＋艾灸＋模型组（D组）、槲皮素＋模型组（E组）。D、E组每日采用槲皮素灌胃。C、D组每日艾灸足三里、梁门,以上处理共8 d。第9日,B、C、D、E组均采用无水乙醇灌胃制作大鼠急性胃黏膜损伤模型。采用western-blot方法检测胃黏膜HSP70蛋白表达;TUNEL法检测胃黏膜细胞凋亡指数（AI）。结果与A组比较,模型组大鼠胃黏膜AI明显增高（P〈0.05）,胃黏膜HSP70表达升高（P〈0.01）。与B组相比,C组大鼠AI明显降低（P〈0.05）,HSP70表达显著升高（P〈0.01）;D组大鼠胃黏膜AI值明显增加（P〈0.01）,HSP70表达未见上调。与C组相比,D组大鼠胃黏膜AI值升高明显（P〈0.01）,HSP70表达明显下调。结论艾灸预处理上调胃黏膜HSP70表达,急性病胃黏膜损伤所致的细胞凋亡被抑制。槲皮素阻断HSP70合成后,艾灸预处理抑制急性胃黏膜...     

针刺对脑缺血大鼠热休克蛋白70表达影响的研究进展

针刺治疗脑缺血性疾病具有良好的疗效,越来越受到国内外医学界的广泛关注,其治疗机制成为现代医学研究的热点.热休克蛋白70（heat shock protein70,HSP70）作为脑缺血诱导的神经元保护性物质,具有抗脑缺血后细胞凋亡、清除细胞内异常蛋白和减少氧自由基产生等作用.现将HSP70与缺血性脑损伤的关系及针刺对缺血性脑损伤过程中HSP70的影响综述如下.     

丹酚酸B预适应对缺氧复氧损伤细胞热休克蛋白70mRNA表达的影响

[目的]探讨丹酚酸B(Sal B)预适应的细胞保护机制是否与诱导热休克蛋白70(HSP70)合成有关。[方法]在缺氧复氧损伤大鼠心脏微血管内皮细胞(CMEC)后，采用RT-PCR法观察Sal B预适应对细胞HSP70 mRNA表达的影响。[结果]HSP70 mRNA在正常的CMEC有较低表达，缺氧刺激使其表达明显增强。Sal B预适应促进HSP70 mRNA表达增强，作用明显优于缺氧预适应(HPC)。晚期预适应保护中，Sal B预适应同样促使HSP70 mRNA表达明显增强，与HPC具有增强表达的叠加效应。[结论]Sal B预适应通过诱导HSP70表达升高发挥细胞保护作用。     

乳腺癌细胞中热休克蛋白70的检测

对乳腺癌细胞中热休克蛋白70进行鉴定分析,用乳腺癌细胞株SKBR-3作为实验材料,采用裂解液裂解在42℃处理后的人乳腺癌细胞株SKBR-3,离心后,通过十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS—PAGE）、Western—blot检测进行蛋白分子量鉴定。纯化后获得的蛋白中包含相对分子质量为70KD的蛋白,采用Western—blot方法可以从人乳腺癌SKBR-3细胞株中检测得相对纯度较高的HSP70。     

左归丸、右归丸对老年大鼠海马糖皮质激素受体mRNA表达的影响

目的：观察左归丸、右归丸对老年大鼠海马糖皮质激素受体（GR）mRNA表达的影响，探讨海马对下丘脑－垂体－肾上腺（HPA）轴的调节作用，以及左归丸、右归丸延缓老年大鼠神经内分泌调控退的作用机制。方法：以自然衰老大鼠为动物模型，采用原位杂交法，观察药物对大鼠海马各分区（DG、CA1、CA2、CA3）GRmRNA表达变化，结果：老年大鼠海马各分区GRmRNA表达均明显减弱，而左归丸、右归丸能不同程度地提高老年大鼠海马DG、CA1和CA3分区低下的GRmRNA的表达，结论：左归丸、右归丸通过提高GRmRNA表达，进而改善海马对HPA轴的抑制性调控作用，以延缓机体衰老。     

柴胡皂甙d上调人急性早幼粒白血病细胞糖皮质激素受体mRNA对细胞生长的影响

目的：观察柴胡皂甙ｄ（ＳＳｄ）对人急性早幼粒白血症细胞（ＨＬ６０）糖皮质激素受体（ＧＲ）ｍＲＮＡ表达的调节作用及对细胞生长的影响。方法：用从柴胡中提取的单体成分ＳＳｄ，以＾３Ｈ－胸腺嘧啶（＾３Ｈ－ＴｄＲ）掺入法和流式细胞仪观察细胞生长，用Ｎｏｒｔｈｅｒｎ ｂｌｏｔ分析ＳＳｄ对ＧＲ ｍＲＮＡ的改变。结果：经ＳＳｄ作用后，ＨＬ６０细胞＾３Ｔ－ＴｄＲ掺入率明显降低，呈时间和剂量依赖关系，ＳＳｄ１０μｇ／     

中药天癸方对雄激素致不孕大鼠下丘脑Leptin受体及神经肽Y mRNA的影响

目的：从基因转录水平探讨中药天癸方对雄激素致不孕大鼠（ＡＳＲ）肥胖及无排卵的影响。方法：采用α－＾３２Ｐ标记瘦素（ｌｅｐｔｉｎ）受体（ＯＢ－Ｒ）及神经肽Ｙ（ＮＰＹ）寡核苷酸探针原位杂交、放射自显影技术结合图像分析，观察中药治疗前后下丘脑弓状核（ＡＲＣ）两各物质ｍＲＮＡ的表达变化。结果：ＡＳＲ中ＡＲＣＡ的ＮＰＹ基因表达水平明显增加（Ｐ〈０．０１），ＯＢ－Ｒ基因表达水平明显降低（Ｐ〈０．０１），ＡＳＲ     

中西医结合治疗类风湿关节炎疗效及其对糖皮质激素受体的影响

目的探讨风湿康治疗类风湿关节炎(RA)的疗效及作用机制。方法将38例中医辨证为湿热痹阻证类风湿关节炎患者随机分为两组,中药组20例,用风湿康联合甲泼尼龙治疗;西药组18例,用氨甲喋呤联合甲泼尼龙治疗,两组均治疗1个月。分别检测治疗前后类风湿因子(RF)、C反应蛋白(CRP)、血沉(ESR)及hGRαmRNA、hGRβmRNA的表达水平,并与20名健康对照组进行比较。结果 1个月后中药组及西药组RF、CRP均较治疗前显著降低(P0.05),两组比较差异有统计学意义(P0.05);而两组ESR治疗前后及组间比较,差异均无统计学意义(P0.05);RA患者GRα和GRβ表达水平显著高于健康对照组(P0.01),治疗后两治疗组hGRαmRNA均显著降低(P0.01),中药组hGRβmRNA较治疗前显著降低(P0.01),而西药组hGRβmRNA与治疗前比较,差异无统计学意义(P0.05)。结论风湿康联合甲泼尼龙治疗可有效控制RA患者炎症反应,降低hGRα、hGRβ表达水平,提高RA的临床疗效。     

灯盏乙素对痴呆大鼠脑组织乙酰胆碱尼古丁受体蛋白及mRNA表达的作用

目的 观察灯盏乙素对痴呆模型大鼠乙酰胆碱尼古丁受体(nAChR)亚单位蛋白质和mRNA水平表达的影响,探讨其可能的作用机制。     

加味丹栀逍遥散对抑郁模型大鼠海马内盐皮质激素受体和糖皮质激素受体的影响

目的:观察加味丹栀逍遥散对抑郁模型大鼠海马内盐皮质激素受体(MR)和糖皮质激素受体(GR)含量的影响。方法:将50只Wistar雄性大鼠随机分为空白对照组、模型组、氟西汀组、加味丹栀逍遥散低剂量组、加味丹栀逍遥散高剂量组,每组10只;采用孤养结合慢性轻度不可预见性应激的复合模型,除空白组外,其余各组均接受不同应激因子刺激21 d,建立慢性应激抑郁大鼠模型,随后分别按氟西汀组2.5 mg·kg-1、加味丹栀逍遥散低、高剂量组2.04,4.08 g·kg-1,各组均按10 mL·kg-1ig给药,空白对照组和模型组ig 10 mL·kg-1生理盐水1次/d,每天应激前灌胃,从造模第22天开始,至动物处死当天,共21 d,实验周期共42 d;采用蛋白印迹法(Western-blot)测定大鼠海马内糖皮质激素受体(GR)和盐皮质激素受体(MR)的蛋白表达。结果:与空白组比较,模型组大鼠海马内GR的蛋白表达下调而MR的蛋白表达升高;经治疗后,各组大鼠海马内GR的蛋白表达较模型组显著上调(P<0.05),而各组大鼠海马内MR的蛋白表达较模型组显著下调(P<0.05)。结论:加味丹栀逍遥散可以通过调节海马内GR和MR的蛋白表达而起到抗抑郁的作用,经过药物干预后的模型大鼠海马内GR表达升高而MR的表达下调,其抗抑郁的作用机制可能与海马内GR和MR之间的比例关系失调有关。     

人参皂苷对大鼠肝缺血损伤后糖皮质激素受体的调节作用

目的　研究人参皂苷（GS）是否可以调节大鼠肝缺血后损伤糖皮质激素受体（GR）,并就其量效关系做一初步观察,为从GR着手寻找改善肝脏缺血后损伤新方法提供实验依据。方法采用成年雄性SD大鼠建立肝缺血损伤模型;造模前给予100、50、25 mg/kg（大、中、小）不同剂量GS灌胃7天,分别于造模后2、6、12、24 h动态观察肝脏GR的结合活性和GR mRNA的表达水平。结果　与正常大鼠比较,模型组及GS各给药组2、6、12 h肝脏GR结合活性和GR mRNA表达明显降低（P＜0.01）。与模型组比较,GS中剂量组造模后2、6、12 h肝脏GR结合活性升高和GR mRNA表达增加（均P＜0.01）,而GS大、小剂量组则无统计学意义。结论 GS 50 mg/kg能有效地提高肝缺血损伤大鼠肝脏GR的结合活性和GR mRNA的表达水平。     

加减四逆散对慢性心理应激大鼠胸腺糖皮质激素受体作用的研究

目的：观察加减四逆散对慢性心理应激大鼠胸腺细胞糖皮质激素受体作用的影响。方法：将大鼠随机分为正常对照组（C）、模型组（M）、加减四逆散组（C1）、人参皂甙组（C2）。电子天平称重并计算大鼠胸腺重量指数，采用放射免疫方法检测大鼠胸腺细胞糖皮质激素受体的数目、核转移率。结果：与C组比较，M组胸腺重量指数显著下降，糖皮质激素受体（glucocorticoid receptor,GCR)的数目略有上升的趋势，胸腺糖皮质激素受体的核转移率显著上升（P＜0.01)。与M组相比，C1组与C2组的大鼠胸腺细胞糖皮质激素受体复合物的核转移率均显著降低，胸腺重量指数显著提高（P＜0.01或P＜0.05)。在受体核转移率下降方面，C1组优于C2组（P＜0.05)。此外，C1组各项数据与C组比较无统计学差异。结论：加减四逆散能显著减轻糖皮质激素对胸腺的抑制作用。其作用途径可能是通过抑制慢性心理应激大鼠GCR由胸腺细胞胞浆向胞核转位来实现的。