黄连解毒汤对幼龄自发性高血压大鼠内皮功能影响研究

目的:研究黄连解毒汤对幼龄自发性高血压大鼠内皮功能的影响,探讨黄连解毒汤预防高血压的机制。方法:雄性6周幼龄自发性高血压大鼠(SHR)16只随机分为黄连解毒汤组、模型组2组,治疗6周,分别检测治疗前后的血压变化,酶联免疫吸附(ELISA)法测定血管性假血友病因子(vWF)和ET-1浓度变化,硝酸还原法测定血浆NO的含量,黄嘌呤及黄嘌呤氧化酶反应系统检测SOD,硫代巴比妥酸比色法检测MDA,与预设同龄WKY大鼠8只做空白对照比较。结果:幼龄SHR血浆中vWF、MDA升高,NO、SOD降低,黄连解毒汤治疗后可以降低SHR血压,降低血浆vWF、MDA,升高NO、SOD。结论:SHR在高血压前期已存在内皮功能不全,黄连解毒汤早期应用可改善SHR血管内皮功能。     

化肝解毒汤对慢性乙肝模型大鼠一氧化氮及一氧化氮合酶的影响

目的：通过检测化肝解毒汤对慢性乙型肝炎模型大鼠血清一氧化氮、一氧化氮合酶的影响,探讨化肝解毒汤治疗慢性乙肝的作用机理。方法：按照3ml/kg体重,皮下注射40%四氯化碳（CCl4）橄榄油溶液,复制成慢性肝损伤动物模型。将60只大鼠随机分为正常组、模型组、化肝解毒汤大、小剂量组,对照药乙肝清热解毒片组（每组12只）共5组,分别对各组大鼠血清一氧化氮、一氧化氮合酶含量进行检测。结果：与正常组相比,模型组的NO含量、iNOS的活力增高,两者差异显著（P〈0.01）;与模型组相比,各用药组NO含量、iNOS的活力下降,差别有显著性（P〈0.05或P〈0.01）且化肝解毒汤大剂量组优于小剂量组及乙肝清热解毒片组。结论：化肝解毒汤对四氯化碳引起的慢性肝损伤大鼠模型有一定的治疗作用。     

姜黄素对COPD患者内皮祖细胞一氧化氮分泌及内皮型一氧化氮合酶表达的影响

目的:观察姜黄素对慢性阻塞性肺病患者外周血内皮祖细胞一氧化氮分泌和内皮型一氧化氮合酶表达的影响,探讨姜黄素对慢性阻塞性肺病患者血管保护作用的机制。方法:选取住院慢性阻塞性肺病患者30例,诱导外周血单个核细胞分化为内皮祖细胞,消化收集贴壁细胞,加入不同浓度姜黄素(分别为5,10,15μmol/L),并设立不加入姜黄素的对照组,相同条件下培养一定时间(6小时,12小时,24小时和48小时)。鉴定荧光双染色阳性的细胞为内皮祖细胞,使用Griess法检测一氧化氮分泌量,Western Blot法检测一氧化氮合酶蛋白的表达。结果:姜黄素显著改善了慢性阻塞性肺病患者内皮祖细胞的一氧化氮分泌功能,呈浓度时间依耐性,当姜黄素浓度为15μmol/L,共培养24h后改善最为明显。姜黄素也显著增强了慢性阻塞性肺病患者内皮祖细胞的一氧化氮合酶表达,姜黄素浓度为15μmol/L时最为显著。结论:姜黄素促进了内皮祖细胞的一氧化氮分泌量并增强了一氧化氮合酶的表达,提示姜黄素可通过改善内皮祖细胞的功能活性来修复慢性阻塞性肺病患者损伤的血管内皮功能。     

精制清开灵及其组分对中风后大鼠内皮型一氧化氮合酶表达的影响

目的：清开灵是一种治疗脑中风的传统中药复方。精制清开灵是从清开灵衍生出的有效成分复方,既往研究证明,此药具有减轻大脑中动脉栓塞（MCAO）大鼠血管内皮细胞损伤和抑制炎症过程的作用,从而体现出神经保护的效果。而内皮型一氧化氮合酶（eNOS）来源的一氧化氮在脑缺血发作后的病理过程中起到重要的保护作用,是近年药理学研究的热点之一。本实验研究了大鼠持久性局灶性脑缺血72h后精制清开灵及其各组分对抗脑缺血损伤的作用以及它们对eNOS表达的影响。方法：以线栓法复制SD大鼠持久性大脑中动脉栓塞（PMCAO）模型。缺血72h后,取出脑组织做冠状切片,TTC染色计量梗死程度,并以酶联免疫吸附法（ELISA）检测血浆内皮细胞凝血因子Ⅷ相关抗原（血管性假血友病因子,vWF）含量。以免疫组织化学染色方法观察大鼠脑组织eNOS的表达情况。并根据免疫组织化学分析的结果,取缺血侧脑组织以免疫印记法验证精制清开灵及其各组分对eNOS表达水平的影响。结果：PMCAO 72h,模型组大鼠eNOS蛋白在缺血半暗带的血管内皮细胞表达增加。与模型组动物相比,精制清开灵及其各组分治疗组动物eNOS蛋白的表达明显增加,而脑梗死范围则显著缩小。结论：持久性局灶性脑缺血后,在缺血半暗带血管内皮细胞表达增加的eNOS可能具有重要的代偿作用。精制清开灵及其各组分能够不同程度地促进缺血后半暗带eNOS的表达,这可能是它们阻抑脑缺血损伤的重要机制之一。     

精制清开灵及其组分对中风后大鼠内皮型一氧化氮合酶表达的影响

目的：清开灵是一种治疗脑中风的传统中药复方。精制清开灵是从清开灵衍生出的有效成分复方,既往研究证明,此药具有减轻大脑中动脉栓塞（MCAO）大鼠血管内皮细胞损伤和抑制炎症过程的作用,从而体现出神经保护的效果。而内皮型一氧化氮合酶（eNOS）来源的一氧化氮在脑缺血发作后的病理过程中起到重要的保护作用,是近年药理学研究的热点之一。本实验研究了大鼠持久性局灶性脑缺血72h后精制清开灵及其各组分对抗脑缺血损伤的作用以及它们对eNOS表达的影响。方法：以线栓法复制SD大鼠持久性大脑中动脉栓塞（PMCAO）模型。缺血72h后,取出脑组织做冠状切片,1TrC染色计量梗死程度,并以酶联免疫吸附法（ELISA）检测血浆内皮细胞凝血因子Ⅷ相关抗原（血管性假血友病因子,vWF）含量。以免疫组织化学染色方法观察大鼠脑组织eNOS的表达情况。并根据免疫组织化学分析的结果,取缺血侧脑组织以免疫印记法验证精制清开灵及其各组分对eNOS表达水平的影响。结果：PMCAO72h,模型组大鼠eNOS蛋白在缺血半暗带的血管内皮细胞表达增加。与模型组动物相比,精制清开灵及其各组分治疗组动物eNOS蛋白的表达明显增加,而脑梗死范围则显著缩小。结论：持久性局灶性脑缺血后,在缺血半暗带血管内皮细胞表达增加的eNOS可能具有重要的代偿作用。精制清开灵及其各组分能够不同程度地促进缺血后半暗带eNOS的表达,这可能是它们阻抑脑缺血损伤的重要机制之一。     

电针对大鼠蓝斑一氧化氮合酶阳性神经元表达的影响

目的 :观察电针对大鼠蓝斑 (locusceruleus ,LC)内一氧化氮合酶 (NOS)阳性神经元表达的影响。方法 :采用还原型尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸脱氢酶 (NADPH d)法结合计算机图像分析技术 ,观察电针大鼠一侧“足三里”穴对LC内NOS表达的影响。结果 :电针大鼠一侧“足三里”穴后 ,同侧LC内NOS阳性神经元的数量增多 (P <0 .0 5) ,染色加深 ,细胞平均灰度值明显降低(P <0 .0 1) ;非电针侧较正常组无明显改变 (P >0 .0 5)。结论 :电针对大鼠同侧LC内NOS阳性神经元的表达有上调作用     

健心颗粒对慢性心力衰竭大鼠一氧化氮合酶的影响

目的探讨健心颗粒对大鼠慢性心衰（CHF）一氧化氮合酶（NOS）的影响。方法以32周老龄自发性高血压大鼠（SHR）的CHF模型作为研究对象．观察应用健心颗粒4周后SHR左室心肌NOS1、NOS2、NOS3蛋白表达,检测血浆血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）、心钠素（ANP）、脑钠素（BNP）水平。结果健心颗粒可以提高SHR的NOS1、NOS3表达．降低SHR的NOS2表达;降低血浆的AngⅡ、ANP、BNP水平。结论 健心颗粒可以通过NOS系统,调节NOS1、NOS2、NOS3三者之间的动态平衡,达到改善心功能。     

翻白草对糖尿病大鼠血管内皮细胞一氧化氮合酶表达的影响

目的研究翻白草对糖尿病大鼠血管内皮细胞一氧化氮合酶(NOS)表达的影响。方法采用四氧嘧啶建立糖尿病大鼠模型,造模成功后,给予翻白草水煎液灌胃,连续给药4周;采用组织化学技术和图像分析系统检测血管内皮细胞NOS活性。结果翻白草组大鼠血管内皮细胞NOS平均吸光度值显著高于模型对照组和实验对照组(P<0.01),与正常对照组无差异(P>0.05)。结论翻白草能有效防止NOS的破坏,提高NOS的活性,提示其对血管内皮细胞有一定的保护作用。     

原发性高血压患者内皮型一氧化氮合酶G894T与中医证候分型关系研究

目的：探讨原发性高血压患者内皮型一氧化氮合酶（NOS）G894T与中医证候分型的关系。方法：采用聚合酶链反应-限刺性片段长度多态性（PCR—RFLP）方法,检测168例原发性高血压患者（EH组）和42名正常血压者（NT组）eNOS G894T基因突变频度。比较2组eNOS G894T基因型频率和等位基因频率分布、中医证候分型与eNos G894T基因多态性分布。结果：2组基因型频率分布符合Hardy—Weinberg平衡,2组比较,差异有非常显著性意义（P〈0．01）。eNOSG894T基因型TT型纯合子出现频率肝火亢盛型较高,与阴阳两虚型比较,差异有显著性意义（P〈0．05）。其余各组间比较差异不显著。结论：原发性高血压患者中医各证候间可能存在一定的分子遗传学基础,值得进一步深入研究。     

参芎化瘀胶囊预处理对大鼠脑缺血再灌注损伤后一氧化氮合酶亚型表达的影响

目的：观察参芎化瘀胶囊预处理对大鼠脑缺血再灌注损伤后一氧化氮合酶（NOS）亚型内皮型（eNOS）、神经元型（nNOS）及诱导型（iNOS）表达的影响,探讨参芎化瘀胶囊对大鼠急性脑缺血再灌注损伤保护作用的机制。方法: 实验大鼠随机分为：假手术组,缺血再灌注组,参芎化瘀胶囊高、中、低剂量预处理 组（480、240、120 mg?kg－1）,各组又分为缺血2 h 再灌注后3、6、12、24、48、72 h 组,每组6 只。灌胃给药7天,每天1 次,第7 天灌胃2 h 后线栓法制作大脑中动脉阻断（MCAO）再灌注模型。免疫组化方法检测 eNOS、nNOS 和iNOS 蛋白表达。结果：①与假手术组比较,缺血再灌注组各时间点（3、6、12、24、48、72 h）eNOS、nNOS 和iNOS 表达均增强（P<0.05 或P<0.01）;于与缺血再灌注组比较,参芎化瘀胶囊预处理组各 时间点eNOS 表达均增强（P<0.05 或P<0.01）,nNOS 和iNOS 表达均减少（P<0.05 或P<0.01）,其中均以高剂量组效果最为显著。结论：参芎化瘀胶囊预处理对脑缺血再灌注损伤具有保护作用,其作用机制可能与调节NOS 分型表达有关。     

一氧化氮及诱导型一氧化氮合酶的研究进展

一氧化氮(Nitric Oxide,NO)是一个普遍存在的第二信使,具有广泛的生理病理作用,其在呼吸、消化、循环、免疫、神经等全身多系统的生理、病理生理及有关临床疾病中起着重要作用。由于其独特的理化性质和生物学活性,使得对于NO的研究主要集中在其合成的关键酶一氧化氮合酶(NOS)上,特别是对于诱导型一氧化氮合酶(iNOS)的研究更是成为近年的研究热点。本文将对NO及iNOS作用机制、调节及在部分临床疾病中的作用研究作一综述。     

电针对神经病理性疼痛大鼠一氧化氮合酶表达的影响

目的：观察电针对大鼠脊髓背角NOS的影响，探讨局部与夹脊不同部位电针治疗神经病理性疼痛的机制是否存在差异。方法：采用坐骨神经钳夹大鼠模型，将30只雄性SD大鼠随机分为正常对照组（A组）、模型组（B组）、节段电针组（C组，取双侧L4“夹脊”穴）、局部电针组（D组，取双侧“阳陵泉”）。通过NADPH—d组织化学染色，观察电针后脊髓背角NOS表达的变化。结果：模型组比正常组、电针组脊髓背角NOS的表达均增多（P〈0．05）。节段电针组脊髓背角NOS的表达较局部电针组减弱（P〈0.05）。结论：电针的镇痛作用可能部分是通过抑制NOS的活性实现的。与局部电针组相比，节段电针组抑制NOS活性的作用较强。     

针刺对致病大鼠大脑皮层一氧化氮合酶阳性神经元的影响

目的本研究根据行为学和形态学观察NOS阳性神经元在正常、致痫和针刺治疗组大鼠大脑皮层的分布,对一氧化氮(NO)在癫痫发作和痫波汇聚与传播中的意义以及针刺的影响进行探讨.方法采用强直电刺激海马诱导癫痫模型,脑组织进行还原型辅酶Ⅱ依赖性黄递酶(NADPHd)染色.结果(1)建模鼠全部出现癫痫发作,而针刺治疗组则发作症状明显减轻,发作时间缩短;(2)NOS神经元弥散分布于大脑皮层,尤以皮质内、外中央前区,第1、2感觉运动区,纹状皮质17、18区和颞叶、听区第Ⅱ、Ⅲ和Ⅵ层数量最多,细胞胞体较大并借突起相互交织层网.梨状皮质区和内嗅皮质区也明显可见;(3)建模组阳性细胞数较对照组明显增多,针刺治疗组则较模型组明显减少(P＜0.05).结论(1)癫痫发作伴有脑内NOS阳性神经元的明显增加,这可能与癫痫引起的神经元损伤和NO介导的痫性放电的发生、传播和汇集有关.(2)针刺大椎、百会可通过抑制一氧化氮合酶--一氧化氮(NOS-NO)途径而抑制大脑皮层神经毒性作用和痫波的启动与传播.     

针刺对肥胖并发高血压患者一氧化氮和一氧化氮合酶含量的影响

目的：探讨针刺对单纯性肥胖病并发高血压病患者一氧化氮（NO）和一氧化氮合酶（NOS）含量的影响。方法：观察了30例单纯性肥胖病并发高血压病患者针刺治疗前后NO和NOS含量的的变化。结果：患者N0及NOS水平于治疗前均显著降低，于治疗后明显回升。结论：针刺可以提高患者NO和NOS的含量，从而调节血管张力，达到降低血压的目的。     

二苯乙烯苷对动脉硬化大鼠一氧化氮合酶及其基因的调节作用

目的:探讨二苯乙烯苷(TSG)对动脉粥样硬化(AS)大鼠一氧化氮合酶(NOS)及其基因的调节作用与抗AS机制。方法:采用高脂饲料喂饲+维生素D3复制大鼠动脉粥样硬化模型,雄性SD大鼠60只,随机分为6组:正常组、模型组、辛伐他汀阳性对照组、TSG高、中、低剂量组(120,60,30 mg.kg^-1.d^-1)。造模12周后抽样检测大鼠主动脉,以大鼠动脉粥样硬化斑块形成为造模指标。经治疗给药6周后,检测大鼠血清和主动脉组织中NOS水平,RT-PCR检测大鼠主动脉eNOS和iNOS mRNA表达。结果:与模型组相比,辛伐他汀组和TSG高、中剂量组均能显著增加血清和主动脉组织NOS的活性、主动脉组织eNOS mRNA的表达及降低主动脉组织iNOS mRNA的表达。结论:TSG能上调AS大鼠动脉壁eNOS mRNA的表达,抑制AS大鼠动脉壁iNOS mRNA的表达,这可能是TSG抗AS的机制之一。     

甘草酸对哮喘小鼠一氧化氮及一氧化氮合酶的影响

目的观察甘草酸对哮喘小鼠血清中一氧化氮（NO）、一氧化氮合酶（NOS）活性的影响,探讨甘草酸防治支气管哮喘的可能机制。方法建立小鼠卵蛋白哮喘模型,测定正常、模型、激素和甘草酸各组血清中NO含量及NOS活性的变化。结果模型组小鼠血清中NO含量及NOS活性的较正常组显著升高（P〈0．01）,甘草酸组血清中NO及NOS较模型组显著降低（P〈0．05）。结论甘草酸可降低哮喘小鼠血清中NO含量及NOS水平,对支气管哮喘有一定的防治作用。     

滋阴补肾方药对糖尿病大鼠骨中一氧化氮合酶mRNA表达的影响

目的：观察链脲佐菌素复制的糖尿病模型大鼠骨密度与骨组织中诱导型一氧化氮合酶(iNOS)mRNA表达的相关性，探讨糟尿病骨质疏松的发病机制及滋阴补肾方的防治机理。方法：6月龄SD大鼠随机分为正常对照组、病理模型组、病理模型中药治疗组，病理模型氨基胍治疗组4组，检测体重、血糖，12周后取股骨、腔骨用双能X线骨密度仪测骨密度值，采用组织学及逆转录一多聚酶链式反应技术观察骨组织形态及骨中iNOSmRNA表达的变化。结果：病理模型组骨密度值明显降低，骨组织形态学呈退行性变化，骨iNOSmRNA表达增多；中药治疗组的骨密度值明显升高，骨组织形态学明显改善，骨中iNOSmRNA表达少，与氨基胍治疗组相当。结论：糖尿病骨质疏松骨中的iNOSmRNA的异常表达可能是其发病的重要机制之一，抑制骨中iNOSmRNA表达，可能是滋阴补肾方药防治糖尿病骨质疏松的重要途径。     

海带多糖对高脂饮食性大鼠主动脉一氧化氮合酶和细胞外基质的调节作用

目的:观察海带多糖对高脂饮食性大鼠主动脉内皮型一氧化氮合酶(eNOS)、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)与基质金属蛋白酶(MMP)-2、MMP-9表达的影响,探讨海带多糖抗高脂饮食诱导血管病变的作用与机制。方法:采用高脂饲料联合维生素D3诱导大鼠高脂血症。造模成功后,将大鼠随机分为正常组、模型组、辛伐他汀2 mg/kg、海带多糖低剂量(250 mg/kg)、中剂量(500 mg/kg)、高剂量(1000 mg/kg)治疗组。给药8周后,颈动脉取血测定血清中总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)的含量;测定血清与主动脉中NO和一氧化氮合酶(NOS)的含量。取大鼠主动脉,蛋白免疫印迹法检测eNOS、iNOS、MMP-2和MMP-9的蛋白表达,RT-PCR法分析eNOS、iNOS与MMP-2、MMP-9的基因表达。结果:与模型组相比,海带多糖在1000 mg/kg剂量下能显著降低血清中TC、TG、LDL-C的含量,同时也可升高HDL-C的含量;在500 mg/kg剂量下能够降低TG的含量,提高HDL-C的含量。海带多糖治疗能够显著恢复高脂饮食性引起的血清和主动脉NO和NOS含量的降低。此外,海带多糖在1000 mg/kg剂量下能显著抑制主动脉iNOS与MMP-2、MMP-9的表达,上调eNOS的蛋白表达;在500 mg/kg剂量下能明显降低血管iNOS并升高eNOS的表达。结论:海带多糖除改善高脂饮食性血清脂质谱,提高血清和大动脉NO及NOS含量外,对高脂饮食性大鼠主动脉eNOS、iNOS与MMP-2、MMP-9表达有再平衡作用。     

羟乙葛根素对大鼠脑缺血再灌注损伤一氧化氮和一氧化氮合酶的影响

 目的研究异黄酮类化合物羟乙葛根素对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤后脑组织一氧化氮(NO)含量和一氧化氮合酶 (NOS)活性的影响,为羟乙葛根素用于治疗缺血性脑血管病提供实验资料。方法雄性Wistar大鼠60只,随机分为假手术组; 缺血再灌注组;尼莫地平0.4 mg·kg^-1·d^-1组;羟乙葛根素30,60,120mg·kg^-1·d^-1组。以大脑中动脉栓线阻断法(MCAO)制备大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤模型,以硝酸还原酶法测定脑组织中的NO水平,以化学比色法测定总NOS活性,并测定诱导型一氧化氮合酶(iNOS)活力,观察羟乙葛根素对脑缺血再灌注损伤大鼠脑组织NO水平和NOS活性的影响,并探讨可能的作用机制。结果大鼠脑缺血1 h,再灌注48h后,脑组织中NO水平显著升高,总NOS和iNOS活性显著增加。羟乙葛根素30,60, 120 mg·kg^-1·d^-1均可显著降低缺血再灌注损伤大鼠脑组织NO含量和总NOS,iNOS活力。结论羟乙葛根素可能通过降低 NO对脑缺血再灌注损伤后的神经毒性作用而发挥保护缺血性脑损伤的作用。     

电针对大脑中动脉阻塞大鼠脑内一氧化氮合酶表达的影响

本课题旨在探讨电针对动物急性脑缺血时神经保护作用的可能机制，根据一氧化氮（NO）的作用依其在脑缺血不同阶段的细胞来源而有所不同，因此观察了电针对脑缺血后各型一氧化氮合酶（NOS）mRNA表达的影响，结果表明，针刺可能通过抑制脑缺血后nNOSmRNA、iNOSmRNA的过量表达而起到对神经元的保护作用。