六味地黄汤对快速老化模型小鼠下丘脑-垂体-卵巢轴的调节作用及机理研究

目的 研究快速老化模型小鼠(senescence accelerated mice,SAM)增龄过程中下丘脑一垂体一卵巢(HPO)轴功能的变化及六味地黄汤(LW)的调节作用。方法采用阴道涂片法确定动物的动情周期;放射免疫分析法检测血清雌二醇(E2)水平及下丘脑β-内啡肽(β-EP)和P物质(SP)含量;蛋白免疫印迹法(westemb lotting法)检测垂体促黄体生成素(LH)、垂体及卵巢雌激素受体a(ERa)水平。结果在增龄过程中SAM快速老化亚系SAM-prone／8(SAMP8)的动情周期和动情间期均较同龄抗快速老化系SAM-resis-tance／1(SAMRl)明显延长,血清E2水平显著降低、垂体LH水平显著升高,下丘脑β-EP含量随增龄逐渐下降,SP含量一过性升高后又下降,卵巢ERa表达量明显低下。LW能显著缩短SAMP8动情间期,增加卵巢重量,升高血清E2水平,明显降低垂体LH水平;并能升高下丘脑β-EP含量,提高卵巢ERa的表达量,但却明显降低下丘脑SP含量。口服雌激素能显著提高SAMP8血清E2水平,降低垂体LH水平,升高下丘脑β-EP及SP含量,并增加垂体ERa表达量,但明显降低卵巢重量及ERa水平。结论SAMP8在衰老过程中所表现的进行性HPO轴功能紊乱与下丘脑肽类神经递质含量及卵巢ERa水平的变化具有密切关系。LW对SAMP8 HPO轴功能紊乱具有改善或调节作用。     

六味地黄汤对皮质酮所致小鼠下丘脑-垂体-卵巢轴紊乱的调节作用及其拆方研究

目的：研究比较六味地黄汤全方(LW)及其拆方三补(地黄、山茱萸、山药)和三泻(茯苓、泽泻、牡丹皮)对下丘脑-垂体-卵巢(HPO)轴的调节作用。方法：以肌肉注射外源性皮质酮(CORT)导致小鼠HPO轴功能紊乱为模型，用放射免疫分析法检测血清雌二醇浓度及下丘脑促性腺激素释放激素(GnRH)含量，用Western blot检测垂体促黄体生成素(LH)水平。结果：肌注CORT导致小鼠体重下降、卵巢重量减少，血清雌二醇、垂体LH及下丘脑GnRH水平下降，口服LW(5、10、15g／kg)对CORT所致的血清雌二醇、垂体LH及下丘脑GnRH水平下降具有不同程度的改善作用。LW及大、中剂量(9．6、6．4g／kg)三补对模型小鼠卵巢重量减轻的趋势无明显改善作用，而三泻及小剂量三补(3．2g／kg)却使小鼠卵巢重量进一步下降，单独应用三补和三泻对CORT处理小鼠血清雌二醇和垂体LH水平无明显调节作用。结论：外源性CORT导致小鼠HPO轴功能紊乱，LW对CORT所致的HPO轴功能紊乱具有改善作用，三补和三泻的作用不如LW，单独应用时存在产生不良反应的可能性。     

六味地黄汤对大鼠下丘脑—垂体—性腺轴组织器官形态和性激素的影响

本研究观察了六味地黄汤对中老龄大鼠下丘脑－垂体－性腺轴系统的器官的形态学及血清性腺激素水平的影响,以探讨“肾主生殖”的作用机理,结果表明,六味了黄汤能够升高ＬＨ,Ｔ的浓度,并能降低ＦＳＨ的浓度,而对Ｅ２浓度无影响,同时对大鼠的垂体,精囊有增重作用,并能增加垂体ＬＨ细胞的数量,并改变其形态结构,对ＦＳＨ细胞则有减少的作用,对睾丸无增重作用,但能够改善睾丸间质细胞及曲细精管的结构,分析认为主味地黄汤治     

循经通络推拿结合药物对乳腺增生大鼠下丘脑-垂体-卵巢轴的影响

目的 观察循经通络推拿手法结合药物治疗与单纯手法、单纯药物治疗对乳腺增生(MGH)大鼠的疗效差异及对下丘脑-垂体-卵巢(HPO)轴的影响。方法 SD大鼠随机分为对照组、模型组、手法组、药物组、药物加手法组,每组10只。采用孕雌激素联合造模法制备乳腺增生症模型。手法组予以循经通络推拿手法治疗,药物组灌胃给予三苯氧胺,药物加手法组同时给予循经通络推拿和药物灌胃。治疗结束后测量大鼠乳头直径和乳头高度,HE染色观察乳腺组织病理学变化,ELISA法检测血清中卵泡刺激素(FSH)和黄体生成素(LH)水平,Western-blot及RT-RCR检测下丘脑促性腺激素释放激素(GnRH)及垂体促性腺激素释放激素受体(GnRH-R)的蛋白和 mRNA 表达。结果 与模型组比较,各治疗组大鼠乳头直径、乳头高度显著减小(P<0.05);药物加手法组大鼠乳腺组织病理形态明显改善,手法组和药物组大鼠乳腺组织形态改善不明显;药物组、药物加手法组血清FSH水平明显降低,LH水平显著升高(P<0.05),手法组大鼠血清FSH、LH水平变化不明显(P>0.05);药物加手法组大鼠GnRH、GnRH-R的...     

六味地黄汤对大鼠下丘脑—垂体—性腺轴组织器官形态和性激素的影响

本研究观察了六味地黄汤对中老龄大鼠下丘脑—垂体—性腺轴系统的器官的形态学及血清性腺激素水平的影响,以探讨“肾主生殖”的作用机理。结果表明：六味地黄汤能够升高ＬＨ、Ｔ的浓度,并能降低ＦＳＨ的浓度,而对Ｅ２浓度无影响。同时对大鼠的垂体、精囊有增重作用,并能增加垂体ＬＨ细胞的数量,并改变其形态结构;对ＦＳＨ细胞则有减少的作用;对睾丸无增重作用,但能够改善睾丸间质细胞及曲细精管的结构。分析认为六味地黄汤治疗生殖功能减退的机理为其作用于下丘脑—垂体—性腺轴系统各个层次的综合效应。本实验为临床治疗男性生殖功能障碍等疾病提供了理论依据。     

针刺对痛经大鼠下丘脑-垂体-卵巢轴的影响

目的：观察针刺对病经大鼠下丘脑-垂体-卵巢轴（HPOA）的影响,并初步探讨其作用机制。方法：观察了针刺对痛经大鼠β-内啡肽（β-EP）、下丘脑激素（促性腺激素释放激素GnRH）、垂体激素（促性腺激素释放激素受体GnRH-R、卵泡刺激素FSH、黄体生成素LH）和卵巢激素（雌激素E2、雌激素受体ER、孕激素P及孕激素受体（PR）的影响。结果：针刺治疗后,β-EP、GnRH、GnRH—R、FSH、LH、E2、ER、P和PR的水平改变,因此针刺对痛经大鼠HPOA的有调节作用。结论：针刺对痛经大鼠HPOA的作用机制可能与针刺调节HPOA的性激素及其受体的表达有关。     

穴位埋线对慢性应激雌性大鼠下丘脑-垂体-性腺轴的影响

目的探讨穴位埋线对慢性应激模型大鼠下丘脑-垂体-性腺轴（HPG轴）的调节作用。方法采用制动应激方式作用于雌性SD大鼠21天,制成慢性应激模型,在百会、内关、三阴交、太冲穴进行穴位埋线,每5天1次,共埋线4次。运用放射免疫法（RIA）检测大鼠下丘脑GnRH、血清LH、E2和Cor的含量,并与对照组、模型组做比较。结果模型组大鼠下丘脑GnRH、血清LH和血清＆的含量明显低于对照组（P〈0．05）;埋线组下丘脑GnRH、血清LH和血清E。的含量明显高于模型组（P〈0．05）,与对照组比较差异无统计学意义（P〉0．05）。模型组大鼠血清Cor含量明显高于对照组（P〈0．05）：埋线组血清中Cor含量明显低于模型组（P〈0．01）,与对照组比较差异无统计学意义（P〉0．05）。结论慢性应激引起雌性大鼠HPG轴受到抑制,穴位埋线可以减轻应激对HPG轴的抑制作用。     

调神益肾针法对更年期大鼠下丘脑-垂体-卵巢轴功能的影响

目的：研究调神益肾针法对更年期雌性大鼠内分泌的调节作用机制。方法：应用放射免疫分析技术检测血清雌二醇（estradiol,E2)、卵泡刺激素（follicular stimulating hormone,FSH)和黄体生成素（luteinizing hormone,LH)的水平。结果：16月龄雌性大鼠血清E2水平降低，FSH和LH升高。经调神益肾针法干预后，血清E2水平升高，FSH和LH水平下降，三者重新达到稳态。结论：有效地调整下丘脑－垂体－卵巢轴可能是调神益肾针法治疗更年期综合征的重要机制。     

四逆散对慢性应激大鼠下丘脑-垂体-肾上腺轴作用的实验研究

目的研究调和肝脾之四逆散对慢性应激大鼠下丘脑-垂体-肾上腺轴（HPA轴）的影响。方法实验设正常组、模型1组、模型2组、四逆散组。除正常组外其余各组用电刺激法制备慢性应激动物模型,并给予相应的处理。观察大鼠行为学指标的变化,测定血浆皮质酮（CORT）、下丘脑促肾上腺皮质激素释放激素（CRH）和血浆促肾上腺皮质激素（ACTH）的含量,同时检测大鼠下丘脑CRH mRNA和垂体ACTH mRNA含量变化。结果四逆散能改善大鼠行为表现,降低大鼠血浆ACTH、下丘脑CRH、血浆CORT的含量及下丘脑CRH mRNA和垂体ACTH mRNA的过度表达。结论四逆散可有效调整慢性应激大鼠HPA轴的异常。     

电针对动情周期不同阶段大鼠生殖内分泌轴的调节作用

目的:探讨电针调节生殖内分泌相关激素的特异反应穴位、最佳治疗时机及作用途径。方法:①选用成熟雌性有正常动情周期的SD大鼠,根据阴道涂片确定动情周期所处阶段。设假电针组、关元组、内关组,每个组当中大鼠分别处于动情间期、动情前期、动情期和动情后期。分别在电针治疗前、电针30min后即刻、出针30min从髂外静脉采血,用放射免疫法检测血清促性腺激素释放激素(GnRH)和黄体生成素(LH)浓度。②设损毁组(损毁正中隆起)和假损毁组,观察电针“关元”穴对两组大鼠血中GnRH、LH和雌二醇(E2)的调节规律。结果:①从假电针组可以看出:动情周期不同阶段GnRH和LH水平是不同的,GnRH水平在动情期最高,LH水平在动情前期最高;GnRH和LH的含量变化是同步的;②针刺可以使血中GnRH和LH水平增加,以关元穴组效果明显,在动情间期和动情后期表现更明显;③针刺对GnRH和LH的调节作用表现出时间性,30min比60min明显;④损毁正中隆起后电针对血中GnRH水平仍有一定的调节作用,但对LH和E2水平的调节作用基本消失。结论:相同穴位在动情周期不同阶段对GnRH和LH的调节程度不同,以动情间期和动情后期表现更明显;不同穴位在动情周期相同阶段对GnRH和LH的调节作用不同。针刺对与生殖内分泌相关激素的调节作用主要是通过下丘脑-垂体-性腺轴实现的。     

六味地黄汤及其组方对小鼠血糖和肝糖元的影响

讨论了六味地黄汤及其组方的水煎剂对正常小鼠血糖和肝糖元的影响。三补、山茱萸加丹皮和山药加茯苓可降低血糖水平;全方、三补、熟地加泽泻及山茱萸加丹皮可增加肝糖元的含量。对六味地黄汤对糖代谢的影响及其配伍机理进行了初步的探讨。     

六味地黄汤对大鼠巨噬细胞Ia抗原表达的影响

六味地黄汤能够明显提高正常大鼠腹腔Ｍψ表面Ｉａ抗原表达的阳性率，强度与阳性对照绵人参皂甙组相似，该方还能够使ＣＯＲＴ肌肉注射所致“阴虚”模型大鼠ＭψＩａ抗原表达率的抑制得以明显改善。方中三味补药六味地ＭψＩａ抗原表达的主要成功，三味泻药单用对正常及模型大鼠ＭψＩａ的抗原表达均无直接影响。但民三配伍后同能够提高其对ＭψＩａ抗原表达的阳性率。     

六味地黄汤对大鼠巨噬细胞Ia抗原表达的影响

六味地黄汤能够明显提高正常大鼠腹腔Ｍφ表面Ｉａ抗原表达的阳性率，强度与阳性对照的人参皂甙组相似；该方还能够使ＣＯＲＴ肌肉注射所致“阴虚”模型大鼠ＭφＩａ抗原表达率的抑制得以明显改善。方中三味补药是六味地黄汤促进ＭφＩａ抗原表达的主要成分，三味泻药单用对正常及模型大鼠的ＭφＩａ抗原表达均无直接影响，但与三补配伍后则能够明显提高其对ＭφＩａ抗原表达的阳性率     

六味地黄汤不同配伍对马钱素药物动力学的影响

目的研究六味地黄汤不同配伍对马钱素药物动力学的影响。方法小鼠一次灌胃六味地黄汤、三补汤(山茱萸、山药、地黄)、一补一泄汤(山茱萸、丹皮)、山茱萸汤后,用建立的 HPLC 法测定吸收入血的马钱素血药浓度-时间曲线,用梯形法计算血药浓度-时间曲线下面积(AUC),比较马钱素的吸收速度及程度。结果以 C_(max)/AUC、T_(max)和 t_(1/2ka)为吸收速度指标,以一补一泻汤最快,其次为三补汤及全方汤,单味药山茱萸汤最慢;以 AUC 及 C_(max)为吸收程度指标,单味药山茱萸汤吸收程度最高,一补一泻汤最低。结论六味地黄汤不同配伍会影响马钱素药物动力学。     

六味地黄汤中抗癌元素的研究

用荧光分光光度法测定了六味地黄汤中六味药材及煎剂,五种不同配伍的煎剂和全方煎剂的硒含量。结果表明,地黄对硒具有富集作用。硒在各药材通煎液中的溶出率约为30～40%。     

六味地黄汤和四物汤中诸元素的含量及煎出率

研究了六味地黄汤中和四物汤中各单味药的铜、锌、铁、钙、镁等元素的含量及煎出率,并与复方煎出率作了比较。实验结果表明,不同生药中诸元素的煎出率有很大差异,各生药中元素含量与煎剂中的含量不一定成正比。     

六味地黄汤对雷公藤多甙损伤小鼠精子的影响

雄性小鼠灌胃雷公藤多甙２０、３０ｍｇ／ｋｇ,１４ｄ或２１ｄ均能引起精子损伤。六味地黄汤（剂量以ｇ生药／ｋｇ表示）以１５ｇ／ｋｇ或２５ｇ／ｋｇ灌胃能对抗雷公藤多甙以２０ｍｇ／ｋｇ灌胃１４ｄ所造成的精子损伤。通过对生育力的研究发现,雷公藤多甙以２０ｍｇ／ｋｇ灌胃雄性小鼠１４ｄ不能明显减少受孕雌性小鼠的只数,但能明显减少孕鼠的胎仔数。六味地黄汤分别以１５、２５ｇ／ｋｇ灌胃均能对抗雷公藤多甙降低胎仔数的作用。拆方研究表明：六味地黄汤全方与三泻（泽泻、丹皮、茯苓）、三补（熟地、山药、山茱萸）均有明显对抗雷公藤多甙损伤精子的作用。三泻与全方作用相当,而三补作用稍弱。