六味地黄汤对皮质酮所致小鼠下丘脑-垂体-卵巢轴紊乱的调节作用及其拆方研究

目的：研究比较六味地黄汤全方(LW)及其拆方三补(地黄、山茱萸、山药)和三泻(茯苓、泽泻、牡丹皮)对下丘脑-垂体-卵巢(HPO)轴的调节作用。方法：以肌肉注射外源性皮质酮(CORT)导致小鼠HPO轴功能紊乱为模型，用放射免疫分析法检测血清雌二醇浓度及下丘脑促性腺激素释放激素(GnRH)含量，用Western blot检测垂体促黄体生成素(LH)水平。结果：肌注CORT导致小鼠体重下降、卵巢重量减少，血清雌二醇、垂体LH及下丘脑GnRH水平下降，口服LW(5、10、15g／kg)对CORT所致的血清雌二醇、垂体LH及下丘脑GnRH水平下降具有不同程度的改善作用。LW及大、中剂量(9．6、6．4g／kg)三补对模型小鼠卵巢重量减轻的趋势无明显改善作用，而三泻及小剂量三补(3．2g／kg)却使小鼠卵巢重量进一步下降，单独应用三补和三泻对CORT处理小鼠血清雌二醇和垂体LH水平无明显调节作用。结论：外源性CORT导致小鼠HPO轴功能紊乱，LW对CORT所致的HPO轴功能紊乱具有改善作用，三补和三泻的作用不如LW，单独应用时存在产生不良反应的可能性。     

六味地黄汤对快速老化模型小鼠下丘脑-垂体-卵巢轴的调节作用及机理研究

目的 研究快速老化模型小鼠(senescence accelerated mice,SAM)增龄过程中下丘脑一垂体一卵巢(HPO)轴功能的变化及六味地黄汤(LW)的调节作用。方法采用阴道涂片法确定动物的动情周期;放射免疫分析法检测血清雌二醇(E2)水平及下丘脑β-内啡肽(β-EP)和P物质(SP)含量;蛋白免疫印迹法(westemb lotting法)检测垂体促黄体生成素(LH)、垂体及卵巢雌激素受体a(ERa)水平。结果在增龄过程中SAM快速老化亚系SAM-prone／8(SAMP8)的动情周期和动情间期均较同龄抗快速老化系SAM-resis-tance／1(SAMRl)明显延长,血清E2水平显著降低、垂体LH水平显著升高,下丘脑β-EP含量随增龄逐渐下降,SP含量一过性升高后又下降,卵巢ERa表达量明显低下。LW能显著缩短SAMP8动情间期,增加卵巢重量,升高血清E2水平,明显降低垂体LH水平;并能升高下丘脑β-EP含量,提高卵巢ERa的表达量,但却明显降低下丘脑SP含量。口服雌激素能显著提高SAMP8血清E2水平,降低垂体LH水平,升高下丘脑β-EP及SP含量,并增加垂体ERa表达量,但明显降低卵巢重量及ERa水平。结论SAMP8在衰老过程中所表现的进行性HPO轴功能紊乱与下丘脑肽类神经递质含量及卵巢ERa水平的变化具有密切关系。LW对SAMP8 HPO轴功能紊乱具有改善或调节作用。     

电针“三阴交”对自然围绝经期大鼠下丘脑-垂体-卵巢轴的影响

目的:观察电针"三阴交"对自然围绝经期大鼠的影响,探讨其对下丘脑-垂体-卵巢(HPO)轴紊乱的调节机制。方法:将3月龄SD雌性大鼠8只作为正常组,11~15月龄SD雌性大鼠阴道涂片法筛选符合围绝经期综合征表现者16只,随机分为模型组和电针组,各8只。电针组取两侧"三阴交"穴做电针,每次20min,隔日1次,共治疗15次。采用酶联免疫法测定各组大鼠下丘脑中促性腺激素释放激素(GnRH),垂体中卵泡刺激素(FSH)、促黄体生成素(LH)和卵巢中雌二醇(E2)的含量。结果:与正常组相比,模型组E2水平显著降低(P0.01),FSH、LH、GnRH水平均显著升高(P0.01);与模型组相比,电针组E2水平明显升高(P0.05),FSH、LH和GnRH含量均有不同程度下降(P0.05)。结论:电针"三阴交"能够对围绝经期大鼠紊乱的HPO轴功能起到良性调节作用。     

抗早2号方对青春期雌性大鼠下丘脑-垂体-性腺轴的影响

目的研究抗早2号方对雌性青春期大鼠下丘脑-垂体-性腺轴的影响。方法观察高、中、低不同剂量抗早2号方对雌性青春期大鼠体重、对下丘脑、垂体、性腺和性器官组织结构以及对血清促黄体生成素(LH)水平的影响。结果抗早2号方对青春期雌性SD大鼠的体重增长有抑制作用,能明显抑制血清LH水平,使大鼠的子宫腺体发育延迟,卵巢内卵泡发育滞后,能使青春期雌性SD大鼠的下丘脑星形胶质细胞数量减少,体积缩小,使脑垂体分泌促卵泡生成素(FSH)和LH的嗜酸细胞减少。结论清热化痰中药抗早2号方能延缓雌性青春期大鼠下丘脑-垂体-性腺轴的启动发育进程。     

电针对动情周期不同阶段大鼠生殖内分泌轴的调节作用

目的:探讨电针调节生殖内分泌相关激素的特异反应穴位、最佳治疗时机及作用途径。方法:①选用成熟雌性有正常动情周期的SD大鼠,根据阴道涂片确定动情周期所处阶段。设假电针组、关元组、内关组,每个组当中大鼠分别处于动情间期、动情前期、动情期和动情后期。分别在电针治疗前、电针30min后即刻、出针30min从髂外静脉采血,用放射免疫法检测血清促性腺激素释放激素(GnRH)和黄体生成素(LH)浓度。②设损毁组(损毁正中隆起)和假损毁组,观察电针“关元”穴对两组大鼠血中GnRH、LH和雌二醇(E2)的调节规律。结果:①从假电针组可以看出:动情周期不同阶段GnRH和LH水平是不同的,GnRH水平在动情期最高,LH水平在动情前期最高;GnRH和LH的含量变化是同步的;②针刺可以使血中GnRH和LH水平增加,以关元穴组效果明显,在动情间期和动情后期表现更明显;③针刺对GnRH和LH的调节作用表现出时间性,30min比60min明显;④损毁正中隆起后电针对血中GnRH水平仍有一定的调节作用,但对LH和E2水平的调节作用基本消失。结论:相同穴位在动情周期不同阶段对GnRH和LH的调节程度不同,以动情间期和动情后期表现更明显;不同穴位在动情周期相同阶段对GnRH和LH的调节作用不同。针刺对与生殖内分泌相关激素的调节作用主要是通过下丘脑-垂体-性腺轴实现的。     

更年乐颗粒剂对12月龄大鼠下丘脑-垂体-卵巢轴的调节作用

目的:通过检测内分泌激素的水平,下丘脑雌激素受体(ER)表达,考察更年乐对下丘脑-垂体-卵巢轴(HPO)的调节作用。方法:采用12-15月龄SD大鼠,同时设青年鼠作对照,灌胃给药30 d后,放免法检测血清E2、P、Te、FSH、LH水平,免疫组化法检测下丘脑GnRH,垂体和下丘脑ER表达。结果:与更年组比,12月龄组可以升高12月龄大鼠血清中E2,P(P<0.05或P<0,01)水平,有降低LH水平的趋势(P>0.05),明显降低下丘脑GnRH的表达(P<0.05),上调下丘脑ER表达。结论:更年乐能改善因体内雌激素水平降低导致的下丘脑、垂体功能的相对亢进状态,上调下丘脑ER表达,增强雌激素效应,调节HPO轴的失调。     

逆针灸关元对去卵巢大鼠下丘脑-垂体-卵巢轴影响

目的观察逆针灸“关元”对去卵巢大鼠的影响,探讨其调节围绝经期综合征下丘脑-垂体-卵巢(HPO)轴的机制。方法将3月龄SD雌性大鼠48只随机分为正常组、假手术组、去卵巢组、逆针关元组、逆灸关元组。术前30 d给逆针关元组和逆灸关元组予以针刺或艾灸,随后制作去卵巢大鼠模型,除正常组和假手术组外,其余组均行去卵巢手术。采用酶联免疫法测定大鼠下丘脑、垂体及子宫的促性腺激素释放激素(GnRH)、卵泡刺激素(FSH)、促黄体生成激素(LH)、雌二醇(E2)、雌激素受体(ER)的水平变化。结果与正常组比较,模型组E2、ER和GnRH水平显著降低(P＜0.01),FSH和LH的水平显著升高(P＜0.01)。与模型组比较,逆针和逆灸组E2、ER和GnRH水平均不同程度升高(P＜0.05),FSH和LH水平不同程度降低(P＜0.05)。逆针组和逆灸组比较,组间差异无统计学意义(P＞0.05)。结论逆针和逆灸“关元”均能良性地调节去卵巢大鼠HPO轴的紊乱,其对HPO轴的作用强度基本相同。     

针刺疗法对下丘脑—垂体—睾丸轴功能紊乱的调节作用(附52例临床报告)

为了探讨针刺疗法对下丘脑—垂体—睾丸轴功能紊乱有调节作用,对52例男性不育少精症患者进行了针刺前后的系统观察,做了放免血清性激素睾酮(Tes)、雌二醇(E₂)、促性腺激素促卵泡生成素(FSH)、促黄体生成素(LH)测定,及精液分析(SFA)。结果提示:针刺疗法能促进下丘脑—垂体分泌和调节促性腺激素FSH和LH的释放,提高血中睾酮的浓度,降低雌二醇的含量,改善性原轴的功能紊乱,促进精子产生、成熟和提高活动力,从而达到治疗男性少精症的目的。     

电针不同穴位对去卵巢大鼠HPO轴的影响

目的:观察电针太溪(KI3)、三阴交(SP6)、关元(RN4)穴对去卵巢大鼠下丘脑-垂体-卵巢(HPO)轴的调节作用,探讨腧穴主治作用的特异性。方法:以3.5月龄去卵巢大鼠为更年期模型,选取太溪、关元、三阴交穴进行电针刺激,30d后测定雌二醇(E2)、卵泡刺激素(FSH)、促黄体生成素(LH)、促性腺激素释放激素(GnRH)的含量。结果:与正常组比较,模型组大鼠血清E2水平显著降低(P<0.01),FSH、LH、GnRH水平明显升高(P<0.01)。与模型组相比,各穴位组电针治疗后,E2水平显著升高(P<0.05);FSH、LH、GnRH水平明显降低(P<0.05),尤以电针三阴交组、电针关元组降低显著。结论:电针对去卵巢大鼠紊乱的HPO轴功能具有良性调节作用,且不同穴位具有特异性。     

电针对围绝经期抑郁症大鼠下丘脑-垂体-卵巢轴的影响

目的:观察电针对围绝经期抑郁症大鼠下丘脑-垂体-卵巢(HPO)轴激素及血清β-内啡肽(β-EP)的影响,探讨针刺调节围绝经期抑郁症大鼠的神经内分泌机制。方法:雌性SD大鼠60只,随机分为空白组、假手术组、模型组、西药组和电针组,采用双侧卵巢切除和慢性不可预见刺激结合建立围绝经期抑郁症大鼠模型。电针组电针"百会"、双侧"肾俞"、双侧"三阴交",西药组使用盐酸氯米帕明灌胃,均每日治疗1次,连续治疗28d。观察大鼠阴道涂片、糖水偏嗜率,运用酶联免疫吸附法测定血清雌二醇(E2)、黄体生成素(LH)、促性腺激素释放激素(GnRH)、β-EP的含量。结果:与空白组相比,模型组及假手术组糖水偏嗜率明显减小(P0.05);与模型组相比,电针组及西药组糖水偏嗜率升高(P0.05)。模型组血清E2、β-EP含量较空白组和假手术组明显降低(P0.05),LH、GnRH明显升高(P0.05);与模型组比较,电针组及西药组血清E2、β-EP含量明显升高(P0.05),LH、GnRH明显降低(P0.05)。结论:针刺能够良性调节围绝经期抑郁症大鼠紊乱的HPO轴功能,改善围绝经期抑郁症状。     

针刺对痛经大鼠神经-内分泌影响的机制初探

目的:探讨针刺对痛经大鼠下丘脑-垂体-卵巢功能活动的影响。方法:雌性Wistar大鼠随机分为正常组、模型组、针刺组、益母草膏组,每组10只,己烯雌酚灌胃12 d建立痛经模型。针刺组取"关元",双侧"地机"三阴交"穴,留针30 min;益母草膏组采用益母草膏(每日80 g/kg)灌胃治疗。两组均在灌服己烯雌酚的第5天开始治疗,每日1次,连续7 d。末次给予己烯雌酚1 h后,腹腔注射催产素,观察各组大鼠的扭体反应潜伏期和30 min内扭体数;放射免疫法检测血清促卵泡生成素(FSH)、促黄体生成素(LH)、雌二醇(E2)、孕酮(P)的水平;RT-PCR检测各组大鼠下丘脑、卵巢促性腺激素释放激素(GnRH),垂体促性腺激素释放激素受体(GnRH-R),子宫雌激素受体(ER)及孕激素受体(PR)mRNA表达的差异。结果:①针刺组和益母草膏组的大鼠扭体次数明显低于模型组,潜伏期高于模型组(P<0.05);②针刺组和益母草膏组与模型组比较,FSH、LH、E2含量显著降低(P<0.05),P含量明显升高(P<0.05);③针刺组和益母草膏组下丘脑、卵巢GnRH,垂体GnRH-R,子宫ER mRNA表达水平均低于模型组(P<0.05),子宫PR mRNA表达水平高于模型组(P<0.05)。结论:针刺治疗原发性痛经的神经-内分泌机制可能与针刺调节大鼠下丘脑-垂体-卵巢轴的性激素及其受体表达有关。     

不同时机针刺对卵巢早衰模型大鼠中枢及外周激素水平的影响

目的探讨不同时机针刺对卵巢早衰模型大鼠中枢及外周激素水平的影响。方法50只清洁级性成熟未交配雌性SD大鼠,随机分为模型组(10只)、预针刺组(10只)、针刺组(10只)、佐剂组(5只)、空白组(5只)。模型组、针刺组及预针刺组连续15 d腹腔注射去氧乙烯基环己烯(4-vinylcyclohexene diepoxide,VCD)160 mg/kg建立卵巢早衰动物模型;佐剂组连续15 d注射同等剂量佐剂二甲基亚砜(dimethyl sulfoxide,DMSO);预针刺组在开始造模时即开始针刺,造模成功后继续治疗4周;针刺组于造模成功后开始针刺治疗,连续治疗4周;空白组不干预。治疗结束后,采用酶联免疫吸附测定(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)试剂盒检测各组下丘脑促性腺激素释放激素(gonadotropin release hormone,GnRH)、垂体促卵泡生成素(follicle stimulatin hormone,FSH)、垂体促黄体生成素(luteotropic hormone,LH),卵巢中促卵泡生成素受体(follicle stimulatin hormone receptor,FSHr)、促黄体生成素受体(luteotropic hormone receptor,LHr)、雌激素受体(estradiol receptor,Er)、雌二醇(estradiol,E2),血清中GnRH、FSH、LH和E2水平。结果VCD腹腔注射可以造成大鼠卵巢早衰的动物模型,成功率为83.3%。与空白组比较,模型组大鼠下丘脑GnRH含量升高(P<0.05),垂体FSH和LH含量均升高(P<0.05);血清中GnRH、FSH、LH含量均升高(P<0.05),E2含量降低(P<0.05);卵巢组织中FSHr、LHr含量均升高(P<0.05),Er和E2含量均降低(P<0.05)。与模型组比较,预针刺组和针刺组大鼠下丘脑GnRH含量降低(P<0.05),垂体FSH含量降低(P<0.05);预针刺组和针刺组大鼠血清中GnRH、FSH含量均降低(P<0.05);预针刺组和针刺组大鼠卵巢组织中FSHr、LHr含量均降低(P<0.05),E2含量升高(P<0.05)。预针刺组和针刺组各项指标组间比较差异均无统计学意义(P>0.05)。结论针刺对POF模型大鼠中枢及外周激素水平均可产生一定的调节作用,不同时机针刺组间比较无差异。     

逆针“关元”“三阴交”对去卵巢大鼠下丘脑-垂体-卵巢轴的影响

目的:观察逆针"关元"三阴交"穴对去卵巢大鼠下丘脑-垂体-卵巢(HPO)轴的调节作用,探讨腧穴主治作用的特异性。方法:选取3月龄SD大鼠,设正常对照组(6只)、假手术组(6只)、模型组(6只)、逆针关元组(11只)、逆针三阴交组(11只)、逆针关元续针组(11只)、逆针三阴交续针组(11只),共7组。4组逆针组预先电针15次(隔日1次)后与模型组一同去除大鼠双侧卵巢造模。两组续针组于造模12d后继续电针5次(隔日1次)。采用酶联免疫法测定各组大鼠下丘脑中促性腺激素释放激素(GnRH),垂体中卵泡刺激素(FSH)、促黄体生成激素(LH)和子宫中雌二醇(E2)的含量。结果:与正常组相比,模型组大鼠E2水平显著降低(P<0.05),FSH、LH、GnRH水平明显升高(P<0.01);与模型组相比,各电针组E2水平均有不同程度升高,FSH、LH、GnRH水平均有不同程度降低(P<0.05,P<0.01);但各电针组间比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:逆针"关元"三阴交"能够良性调节去卵巢大鼠紊乱的HPO轴功能,两穴之间未表现出明显穴位特异性。     

逆灸命门穴对大鼠力竭游泳时间及血清Cort、下丘脑GnRH、垂体GnRH和血睾酮的影响

目的：观察逆灸命门穴对大鼠力竭游泳时间、血清皮质醇（Cort）,下丘脑促性腺激素释放激素（GnRH）、垂体GnRH及血睾酮的影响,并探讨其作用机制.方法：采用3.5月龄SD雄性大鼠28只,将大鼠按游泳能力随机分为空白对照组、逆灸命门组、力竭对照组、逆灸命门＋力竭组,每组7只,分别干预20天后,力竭对照组、逆灸命门＋力竭组进行力竭游泳,观察力竭时间的差别,并采用生化法检测血清Cort,下丘脑GnRH、垂体GnRH及血睾酮含量.结果：逆灸命门＋力竭组力竭游泳时间较力竭对照组明显延长（P＜0.05）.与空白对照组相比,逆灸命门穴组大鼠的血清Cort,下丘脑GnRH、垂体GnRH及血睾酮含量无明显变化（P＞0.05）,力竭对照组大鼠的血清Cort,下丘脑GnRH、垂体GnRH及血睾酮含量显著升高（P＜0.01）.与力竭对照组比较,逆灸命门＋力竭组大鼠的血清Cort,下丘脑GnRH、垂体GnRH及血睾酮含量明显降低（P＜0.01）.结论：力竭游泳后HPG轴异常活跃,血清Cort异常升高.逆灸命门穴可缓和HPA轴过度应激、预防HPG轴的过度负反馈,并减少过度应激时HPA轴对HPG轴产生的不利影响,使机体睾酮含量和血清Cort维持在相对稳定的水平,这可能是逆灸命门穴能延长大鼠游泳力竭时间、提高其运动耐力的机制之一.     

滋阴泻火中药对性早熟模型大鼠促性腺激素释放激素及其受体mRNA表达的影响

目的：观察滋阴泻火中药对达那唑诱导的性早熟模型大鼠下丘脑促性腺激素释放激素(GnRH)和垂体GnRH受体mRNA表达的影响,探讨滋阴泻火中药的作用机制。方法：将动物分为正常组、模型组、生理盐水组和中药组。模型组、生理盐水组和中药组动物5日龄时皮下注射达那唑300μg;中药组在15日龄时开始喂饲滋阴泻火中药,生理盐水组同时给予等量的生理盐水。免疫组织化学ABC法观察大鼠下丘脑GnRH的表达;逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)观察下丘脑GnRHmRNA和垂体GnRH受体mRNA的表达。结果：和正常组比较,模型组和生理盐水组大鼠阴门开启和建立性周期的时间提前,下丘脑GnRHmRNA和垂体GnRH受体mRNA的表达升高,下丘脑GnRH免疫阳性神经元减少;中药组大鼠阴门开启和建立性周期的时间延缓,下丘脑GnRHmRNA和垂体GnRH受体mRNA的表达降低,下丘脑GnRH免疫阳性神经元增多。结论：滋阴泻火中药可能通过抑制下丘脑GnRH的合成和释放以及降低垂体对GnRH的反应性,抑制提前启动的下丘脑-垂体-性腺轴功能,这可能是滋阴泻火中药治疗性早熟的机理。     

Effects of electroacupuncture at Guanyuan(CV 4) or Sanyinjiao (SP 6) on hypothalamus-pituitary-ovary axis and spatial learning and memory in female SAMP8 mice

OBJECTIVE: To investigate the effects of electroacupuncture(EA) at the Guanyuan(CV 4) or Sanyinjiao(SP 6) acupoints on the hypothalamus-pituitary-ovary(HPO) axis and spatial learning and memory in female mice.METHODS: Nine-month-old female mice with senescence-accelerated mouse prone 8(SAMP8)were divided into three groups: the disease model,EA-Guanyuan and EA-Sanyinjiao groups. Concurrently, 9-month old female mice with senescence-accelerated mouse resistance 1(SAMR1)were set as the control model group. The two treatment groups were given the same pattern of EA stimulation. Gonadotropin-releasing hormone, luteinizing hormone, follicle-stimulating hormone(FSH) and Serum estradiol levels in the Hypothalamus-pituitary-ovary axis were assessed by enzyme-linked immunosorbent assay to determinethe HPO axis function level. Spatial learning and memory were assessed by the Morris Water Maze(MWM) test.RESULTS:(a) HPO axis: compared with the control model group, the disease model group displayed a decrease in E2 levels(P 0.01), and an increase in Gn RH, LH and FSH levels(P 0.01). E2 levels were increased in EA treatment groups compared with the disease model group(P 0.05). In contrast,Gn RH and LH and FSH levels were reduced(P 0.05). EA-Sanyinjiao group was superior than EA-Guanyuan group on increasing E2 and declining Gn RH levels(P 0.01).(b) The MWM test demonstrated that the response latency in the EA-Sanyinjiao treatment group declined from day 2 to day5 compared with the disease model group(P 0.05), whereas the EA-Guanyuan treatment group showed no significant difference.CONCLUSION: EA can regulate hormone(E2, FSH,LH, Gn RH) levels in the HPO axis and the spatial learning and memory ability in female SAMP8 mice. Moreover, this effect may have been more pronounced in the EA-Sanyinjiao group than the EA-Guanyuan group. The underlying mechanism of the EA-induced changes may be related to gonadal hormone shifts in the HPO axis, followed by an improvement in spatial learning and memory.     

舒肝方对心理应激肝郁大鼠神经生殖内分泌的作用

目的:探讨舒肝方(柴胡、芍药、枳壳等)对心理应激肝郁雌性大鼠神经生殖内分泌的影响。方法:以夹尾激怒法建立心理应激肝郁证大鼠模型,检测疏肝补肾中药对大鼠下丘脑垂体和血清NE、DA、5-HT、HVA、DOPAC、5-H IAA以及血清LH、FSH、E2、T、P、PRL水平。结果:模型大鼠下丘脑垂体NE减少,DA、5-HT及5-H IAA含量增加,血清FSH、LH、E2、P降低,NE、DA、5-HT、5-H IAA及T水平升高(P<0.05,P<0.01)。舒肝补肾组血清P及LH水平明显升高;舒肝及舒肝补肾方均能升高模型大鼠下丘脑垂体NE及血清FSH、E2水平,降低下丘脑垂体DA、5-HT、5-H IAA及血清NE、5-HT、T水平;补肾方亦能抑制下丘脑垂体NE、血清FSH、P水平下降及下丘脑垂体与血清5-HT、血清NE、T水平升高。(P<0.05)。结论:心理应激状态下肝郁证雌性大鼠的神经生殖内分泌功能紊乱,舒肝补肾中药具有改善神经生殖内分泌功能的作用。