健脾与补肾对脾虚模型大鼠学习记忆及脑内P物质、血管活性肠肽的影响

目的探讨脾虚模型大鼠学习记忆和脑内P物质(SP)、血管活性肠肽(VIP)的变化,以及健脾、补肾中药对上述变化的改善作用。方法采用苦降泻下、饮食失节加劳倦过度法建立脾虚大鼠模型,检测健脾与补肾对其学习记忆及脑内SP、VIP变化的影响。结果水迷宫实验学习期和记忆期,模型组游全程时间长,错误次数多;健脾组与补肾组游全程时间短,错误次数少。跳台实验学习期和记忆期,模型组错误次数较多,潜伏期短;健脾组错误次数较少,潜伏期长;在学习期补肾组错误次数较少,潜伏期较长,但记忆期错误次数较多。模型组SP免疫阳性反应物在下丘脑腹侧核、海马CA1区、前额叶皮层显著减少;健脾组在上述脑区则显著增加;补肾组海马CA1区和前额叶皮层明显增加,但在下丘脑腹侧核减少。模型组VIP免疫阳性反应物在海马CA1区、前额叶皮层显著减少;健脾组与补肾组海马CA1区、前额叶皮层VIP免疫阳性反应物显著增加。结论脾虚模型大鼠学习记忆及脑内对学习记忆有促进和增强作用的SP、VIP明显下降。健脾、补肾中药对上述变化有明显改善作用。     

脾虚模型脑内脑源性神经营养因子表达变化及归脾汤的影响

目的:研究脾虚模型脑内脑源性神经营养因子(BDNF)表达变化及归脾汤的影响作用.方法:采用苦降泻下、饮食失节加劳倦过度法建立脾虚大鼠模型,采用免疫组化法检测下丘脑腹侧核、海马CA1区、前额叶皮层BDNF变化及归脾汤的影响作用.结果:模型组BDNF免疫阳性反应物在下丘脑腹侧核、海马CA1区、前额叶皮层明显降低;归脾汤治疗组上述脑区的BDNF免疫阳性反应物明显增加.结论:脾虚模型脑内BDNF表达有变化,提示归脾汤可能通过对BDNF调节作用而影响学习记忆.     

健脾与补肾对脑内精氨酸加压素水平和基因表达的影响

目的:比较健脾与补肾对脑内精氨酸加压素(AVP)水平和基因表达的影响.方法:采用苦降泻下、饮食失节加劳倦过度法建立脾虚大鼠模型,以免疫组化和原位杂交法检测下丘脑腹侧核、海马CA1区、前额叶皮层精氨酸加压素(AVP)基因表达变化.结果:模型组上述脑区AVP免疫阳性反应物明显降低;健脾组与补肾组上述脑区的AVP免疫阳性反应物明显升高.模型组下丘脑腹侧核、海马CA1区、前额叶皮层AVP mRNA表达显著下降;健脾组与补肾组AVP mRNA表达明显升高.结论:脾虚模型脑内对学习记忆有促进作用的AVP水平和基因表达有变化,健脾与补肾可能通过调节AVP水平和基因表达而影响学习记忆能力.     

脾虚模型脑内一氧化氮与乙酰胆碱酯酶表达变化及归脾汤的影响

目的:研究脾虚模型脑内一氧化氮(NOS)与乙酰胆碱酯酶(ACHE)表达变化及归脾汤的影响作用。方法:采用苦降泻下、饮食失节加劳倦过度法建立脾虚大鼠模型,免疫组化法检测下丘脑腹侧核、海马CA1区、前额叶皮层NOS与ACHE变化及归脾汤治疗的影响作用。结果:模型组NOS和ACHE免疫阳性反应物在下丘脑腹侧核、海马CA1区、前额叶皮层明显降低;治疗组上述脑区的NOS和ACHE免疫阳性反应物明显增加。结论:脾虚模型脑内NOS和ACHE表达有变化,提示归脾汤通过影响NOS与ACHE而调节学习记忆功能。     

健脾与补肾对脑内神经肽Y水平和基因表达的影响

目的比较健脾与补肾对脑内神经肽(NPY)水平和基因表达的影响。方法采用苦降泻下、饮食失节加劳倦过度法建立脾虚大鼠模型,检测下丘脑腹侧核、海马CA1区、前额叶皮层NPY基因表达变化。结果模型组下丘脑腹侧核、海马CA1区、前额叶皮层NPY免疫阳性反应物明显降低;健脾组与补肾组上述部位的NPY免疫阳性反应物明显增加。模型组下丘脑腹侧核、前额叶皮层NPYmRNA表达明显降低;健脾组与补肾组上述部位的NPYmRNA表达明显增加。结论脾虚模型脑内对学习记忆有促进作用的NPY水平和基因表达有变化,健脾与补肾可能通过调节脑内NPY水平和基因表达而影响学习记忆。     

健脾与补肾对脾虚模型大鼠脑内生长抑素水平和受体基因表达的影响

目的比较健脾与补肾对脾虚模型大鼠脑内生长抑素(SS)水平和受体基因表达的影响。方法采用苦降泻下、饮食失节加劳倦过度法建立脾虚大鼠模型,以免疫组化和原位杂交法检测下丘脑腹侧核、海马CA1区、前额叶皮层SS及生长抑素受体1(SSR1)mRNA基因表达变化。结果模型组上述脑区SS免疫阳性反应物及SSR1 mRNA表达阳性反应物明显降低,与正常组比较差异显著;健脾组与补肾组上述脑区的SS免疫阳性反应物及SSR1 mRNA表达阳性反应物明显升高,与模型组比较差异显著,与正常组比较无显著差异。结论脾虚模型大鼠脑内对学习记忆有促进作用的SS水平和SSR1 mRNA基因表达有变化,健脾与补肾可能通过调节SS水平和SSR1基因表达而影响学习记忆能力。     

银杏酮酯对自然衰老大鼠学习记忆及海马、前额叶皮层c-fos、Caspase-3和Caspase-8表达的影响

目的:探讨银杏酮酯(Ginkgo biloba extract,GBE50)对自然衰老大鼠学习记忆及海马、前额叶皮层c-fos、Caspase-3和Caspase-8表达的影响。方法:21月龄大鼠随机分为模型组、银杏酮酯组和阳性药银杏叶提取物组,1月龄大鼠作为正常组。其中正常组和模型组用1%羧甲基纤维素钠灌胃,银杏酮酯组和银杏叶提取物组分别予100 mg/kg的药物灌胃60天。新物体识别实验检测学习记忆,免疫组织化学方法检测海马CA1区和前额叶皮层c-fos和Caspase-8的蛋白水平,免疫印迹方法检测海马和前额叶皮层Caspase-3蛋白表达。结果:新物体识别实验结果显示:与模型组相比,100mg/kg银杏酮酯和银杏叶提取物可使大鼠的分辨指数和优先指数明显升高。免疫组织化学结果显示:与模型组相比,100mg/kg银杏酮酯和银杏叶提取物可使海马CA1区和前额叶皮层cfos表达增加,Caspase-8表达降低。免疫印迹结果显示:与模型组相比,100mg/kg银杏酮酯和银杏叶提取物组可使海马和前额叶皮层Caspase-3蛋白表达下降。结论:100mg/kg的银杏酮酯可以改善自然衰老大鼠学习记忆缺陷,这种改善可能与上调自然衰老大鼠海马和前额叶皮层c-fos表达,降低Caspase-3和Caspase-8蛋白水平有关。     

智三针电针治疗对血管性痴呆小鼠工作记忆改善及作用机制的研究

目的：观察智三针电针对血管性痴呆（VD） 模型小鼠认知行为学、前额叶和海马CA1 区γ-氨基丁酸（GABA） 能神经元数量、树突棘密度的影响。方法：从45 只雄性C57BL6J 小鼠中随机选出10 只分入假手术组,余为造模组,采用改良的双侧颈总动脉反复夹闭法制作VD 模型。将造模成功的小鼠随机分为智三针组、非穴组和模型组,每组11 只。通过Y 迷宫实验、新物体识别实验观察4 组小鼠的认知行为学变化;制作脑组织切片,观察小鼠海马CA1 区锥体神经元损伤情况,前额叶及海马CA1 区GABA 能神经元［小清蛋白神经元、神经肽Y 神经元数量、生长激素抑制素神经元］数量及树突棘密度的变化。结果：行为学结果显示,智三针组、假手术组的自发交替率均高于模型组,差异均有统计学意义（P＜0.05）。各组小鼠的A''物体分辨比比较,差异无统计学意义（P＞0.05）。24 h 后,模型组的B 物体分辨比低于假手术组及智三针组（P＜0.05）。尼氏染色结果显示,智三针组海马CA1 区锥体神经元数量多于模型组,有部分神经元坏死,排列较紧密。免疫荧光结果显示,模型组前额叶、海马CA1 区的小清蛋白神经元、神经肽Y 神经元及生长激素抑制素神经元数量均少于假手术组,差异均有统计学意义（P＜0.05）。智三针组的前额叶、海马CA1 区的小清蛋白神经元、神经肽Y 神经元数量均多于模型组,差异均有统计学意义（P＜0.05）,生长激素抑制素神经元数量虽多于模型组,但组间比较,差异均无统计学意义（P＞0.05）。高尔基染色结果显示,智三针组、假手术组前额叶、海马CA1 区的树突棘密度均高于模型组（P＜0.05）。结论：智三针电针治疗可以保护VD 模型小鼠的海马CA1区锥体神经元,有效改善小鼠的工作记忆能力。     

银杏叶提取物对衰老大鼠前额叶皮层和海马炎性细胞因子及胶质细胞超微结构的影响

目的 探讨银杏叶提取物(Ginkgo biloba extract 50,GBE50)对衰老模型大鼠前额叶皮层和海马炎性细胞因子以及胶质细胞损伤的作用及可能的机制。方法 45只雄性SD大鼠随机分为正常对照组（12只）、模型组（11只）、GBE50低剂量组（10只）和GBE50高剂量组（12只）。采用D-半乳糖腹腔注射42天的方法建立衰老大鼠模型;造模第22天开始,GBE50低、高剂量组分别给予GBE50 75、150mg/(kg·d)灌胃给药,持续21天。用药结束后采用放射免疫分析法和实时荧光定量聚合酶链反应检测各组大鼠前额叶皮层和海马IL-1β、IL-6和TNF-α蛋白含量和mRNA表达;透射电镜观察海马CA1区胶质细胞的超微结构。结果 与正常对照组比较,模型组大鼠前额叶皮层和海马IL-1β、TNF-α蛋白含量及mRNA表达均明显升高(P<0.05,P<0.01),海马IL-6蛋白含量明显降低(P<0.01)。与模型组比较,GBE50低、高剂量组前额叶皮层和海马IL-1β蛋白含量及mRNA表达明显下调;GBE50低、高剂量组前额叶皮层和低剂量组海马TNF-α蛋白含量明显下调(P<0.05,P<0.01);GBE50低剂量组前额叶皮层和GBE50高剂量组海马IL-6蛋白含量明显上调,GBE50低、高剂量组前额叶皮层IL-6 mRNA表达明显升高(P<0.05,P<0.01)。GBE50低、高剂量对大鼠海马CA1区胶质细胞超微结构的损伤具有明显恢复作用。结论 GBE50对衰老大鼠神经炎症反应具有抑制作用,其机制可能与其对前额叶皮层和海马细胞因子、胶质细胞超微结构有不同程度的调节作用有关。     

智三针对血管性痴呆小鼠前额叶和海马小清蛋白、生长激素抑制素、神经肽Y神经元表达的影响

【目的】 探讨智三针治疗血管性痴呆（VD）小鼠的可能机制。【方法】 从40只雄性C57BL6J小鼠中随机选取8只作为假手术组,其余进行造模。采用动脉夹可逆性夹闭双侧颈总动脉法建立VD小鼠模型,将造模成功的小鼠随机分为智三针组、非穴组和模型组,每组各10只。造模成功后,开始进行每日针刺治疗,连续28 d。以Y迷宫和新物体实验检测小鼠治疗后认知记忆能力改善情况,采用免疫荧光染色法检测小鼠前额叶和海马CA1区的小清蛋白（PV）、生长激素抑制素（SST）和神经肽Y（NPY）神经元的表达情况。【结果】 与模型组比较,智三针组的Y迷宫的自发交替率提高（P＜0.05）,新物体辨别系数增加（P＜0.05）。免疫荧光染色结果显示,与模型组比较,智三针组的前额叶和海马 CA1 区 PV、NPY 神经元表达量显著增加（P＜0.05）。【结论】 电针智三针穴干预可以改善VD模型小鼠的认知记忆能力,其机制可能与提高前额叶和海马CA1区PV、NPY神经元表达量,改善神经元损伤有关。