老鸦瓣芽茎组织培养初步研究

目的 建立老鸦瓣芽茎愈伤组织诱导及丛生芽增殖体系。方法 以老鸦瓣冷藏芯芽产生的芽茎为外植体,MS为基本培养基,考察不同质量浓度6-BA、NAA对愈伤诱导、分化及丛生芽增殖的影响。结果 芽茎诱导愈伤的最佳培养基为MS＋6-BA 0.5 mg/L＋NAA 2.0 mg/L,愈伤诱导率78.54%,诱导出的愈伤组织在原培养基上继代培养增殖后即可进行芽分化;愈伤分化不定芽最佳培养基为MS＋6-BA 2.0 mg/L＋NAA 0.2 mg/L,芽诱导率为66.21%;丛生芽增殖培养基为MS＋6-BA 0.5 mg/L＋NAA 0.2 mg/L,增殖系数2.48。结论 筛选出芽茎诱导愈伤、分化不定芽及丛生芽增殖的培养基,初步建立了老鸦瓣芽茎组织培养体系。     

激素对菘蓝器官分化及愈伤组织诱导的影响

目的研究激素对菘蓝器官分化及愈伤组织形成能力的影响。方法以菘蓝无菌苗的子叶和胚轴为外植体,采用含有不同植物激素配比的培养基培养菘蓝不同外植体,分析在不同激素配比的条件下诱导形成愈伤组织和分化不定根、不定芽的能力。结果在NAA 0.1 mg/L+6-BA 0.1 mg/L(14d)、NAA 0.5mg/L+6-BA 1.0 mg/L(14d)、NAA 0.5 mg/L+6-BA 0.1 mg/L(28d)三个条件下子叶的愈伤组织诱导率可达到100%;NAA(0 mg/L～0.1 mg/L)+6-BA1.0 mg/L的激素组合不定芽诱导率可达75%以上;生根培养以1/2MS培养基附加NAA 0.1 mg/L可使不定芽生根率可达100%。结论合适的激素组合,能促进菘蓝愈伤组织的形成和器官的分化。。     

波棱瓜愈伤组织诱导及植株再生研究

目的研究波棱瓜愈伤组织诱导、分化及生根的条件,探讨波棱瓜快速繁殖新途径,为波棱瓜组织培养与离体植株再生奠定基础。方法以波棱瓜幼嫩茎段和叶片为材料,比较不同外植体、基本培养基及植物生长调节剂对波棱瓜愈伤组织诱导、分化及生根的影响。结果幼嫩茎段作为外植体时,其出愈率较叶片高,愈伤量大;MS基本培养基能够产生明显的愈伤组织,出愈率较高;幼嫩茎段愈伤组织诱导适宜的培养基为MS+6-BA2 mg/L+NAA0.5 mg/L,出愈率达93.3%。愈伤组织的最佳分化培养基为MS+6-BA2 mg/L+NAA0.1 mg/L+KT 3.0 mg/L,分化率达87.2%。生根培养的适宜培养基为1/2MS+NAA 1.0 mg/L,生根率达95%。结论波棱瓜幼嫩茎段在适宜的培养基中可通过愈伤组织途径分化不定芽,且极易生根,能够得到正常生长发育的再生植株。     

苦荞麦叶柄的植株再生研究

目的:以苦荞麦叶柄为外植体,建立一套苦荞麦植物的快速繁殖技术。方法:以MS为基本培养基,通过研究激素6-BA、2,4-D、NAA和IBA对愈伤组织诱导、不定芽分化和不定根产生的影响,找出其相应的最佳培养基配方。结果与结论:苦荞麦最佳愈伤组织诱导培养基为MS+6-BA 0.5 mg/L+2,4-D 4.0 mg/L;最佳不定芽分化培养基为MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA 0.3 mg/L;最佳生根培养基为MS+IBA 0.5 mg/L。将组培苗移栽至松软的土壤中,注意适当遮光,组培苗成活率达90%以上。     

甘西鼠尾草愈伤组织诱导、增殖及分化研究

目的考察不同质量浓度激素组合对甘西鼠尾草愈伤组织诱导、增殖及分化的影响。方法以甘西鼠尾草叶片为外植体,采用正交试验研究2,4-D、NAA、6-BA、KT对愈伤组织诱导及增殖的影响,并探讨适宜愈伤组织分化的培养条件。结果以诱导率和相对生长速率为指标,6-BA和2,4-D均对甘西鼠尾草细胞脱分化和细胞增殖具有显著影响,愈伤组织诱导的最佳激素组合为2,4-D 0.5 mg/L+NAA 1.0 mg/L+6-BA 0.5 mg/L,增殖的最佳激素组合为2,4-D 0.5 mg/L+6-BA 2.0 mg/L+KT 0.1 mg/L,MS+NAA 0.5 mg/L+6-BA 1.0 mg/L的培养基有利于不定芽的分化,而1/2 MS+IBA 1.0 mg/L的培养基则有利于不定根的分化。结论本实验所建立的组织培养体系,适宜甘西鼠尾草的植株再生。     

箭根薯愈伤组织诱导及无性系的建立

目的 诱导箭根薯愈伤组织及建立无性系.方法 以箭根薯野生种为材料,采用不同激素组合对不同部位(根茎、叶片、叶柄)进行诱导,对比诱导效果,筛选出最佳部位及各个生长阶段的最佳激素组合.结果 外植体的消毒以0.1％ HgC12溶液处理8 min的效果最佳;诱导愈伤组织最佳外植体为叶柄;愈伤组织诱导的最佳培养基是MS +6-BA 2.0 mg/L+NAA 0.1mg/L+2,4-D 1.0 mg/L,在此培养基上使用叶柄诱导愈伤组织的诱导率达到100％;不定芽诱导分化的最适培养基为MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA 0.5 mg/L,分化率高达90％;生根诱导的最佳培养基为含1/2 MS+NAA 0.5 mg/L,生根率高达100％.结论 筛选出诱导箭根薯愈伤组织最佳诱导外植体及激素组合.     

明党参愈伤组织诱导及植株再生

目的:通过愈伤组织的增殖与分化实现快速繁殖,以建立明党参愈伤组织培养体系.方法:以明党参的嫩茎为外植体,在不同激素组合的脱分化、分化培养基上培养.结果:MS培养基附加NAA 0.5～1 mg/L,KT 0.1 mg/L适合于愈伤组织的诱导和培养;附加6-BA 1～2 mg/L适合愈伤组织芽的分化;附加IBA 0.5～1 mg/L适合根的诱导.结论:在一定培养条件下,通过愈伤组织的再分化是实现明党参植株再生的有效途径.     

番红花组织培养及快速繁殖研究

目的 为番红花的快速繁殖提供依据.方法 添加不同种类及不同浓度的激素,对番红花进行愈伤组织诱导、丛生芽诱导及球茎培养.结果 愈伤组织诱导的适宜培养基为MS+2.0 mg/L NAA+0.5 mg/L 6-BA;丛生芽诱导的适宜培养基为MS+0.5 mg/L NAA+2.0 mg/L 6-BA;在光照条件下,丛生芽可分化出小球茎.结论 利用组织培养技术能够实现番红花快速繁殖.     

裕丹参愈伤组织诱导、继代及植株再生的研究

目的 建立裕丹参愈伤组织的诱导、继代及植株再生体系.方法 比较不同的外植体基本培养基及植物生长调节剂对裕丹参愈伤组织的诱导、继代及植株再生的影响.结果 MS 6-BA 2 mg/L NAA 0.2～2 mg/L有利于叶柄和叶片愈伤组织的诱导,其出愈率均为100%,但叶柄出愈量更大;MS 6-BA 2 mg/L有利于叶片芽的分化,其分化率达55.6%,并有直接成芽现象;B5 6-BA 1 mg/L 2,4-D 1 mg/L是愈伤组织继代培养的最佳培养基.结论 愈伤组织诱导的最佳外植体为叶柄,最佳培养基为MS 6-BA 2 mg/L NAA 0.2～2 mg/L;诱导芽分化的最佳外植体为叶片,最佳培养基为MS 6-BA 2 mg/L;愈伤组织继代培养的最佳培养基为B5 6-BA 1 mg/L 2,4-D 1 mg/L.     

金线莲愈伤组织诱导分化

目的建立金线莲工厂化高效育苗技术。方法以金线莲种子在培养基上萌发获得原球茎、不定芽,通过正交试验对愈伤组织的诱导和分化先行筛选,然后根据响应面分析法中心组合试验,以愈伤组织分化率为响应值,对6-BA、NAA、芋泥3因素进行优化。结果正交试验分析结果表明:影响愈伤组织诱导和分化的关键因子为外植体类型,不定芽类型最易诱导产生愈伤组织,诱导率较高,达到27.64%,筛选出的最优培养基为1/2MS+6-BA3.0mg/L+NAA0.5mg/L+芋泥200g/L,在该培养基上继代培养,愈伤组织月增殖系数达50倍。利用响应面优化得到的愈伤组织分化培养基为1/2MS+6-BA1.0mg/L+NAA0.46mg/L+芋泥200g/L,预测分化率为为83.16%,验证值为81.4%。生根壮苗培养1/2MS+NAA0.5 mg/L+80g/L香蕉+7g/L芋泥。结论因此利用响应面方法可有效优化金线莲愈伤组织分化培养条件,可应用于实际生产。     

盾叶薯蓣成熟叶片植株再生的研究

目的 :以成熟叶片为外植体 ,建立一套盾叶薯蓣Dioscoreazingiberensis的快速繁殖技术。方法 :以大量元素减半的MS培养基为基本培养基 ,通过研究BA ,NAA和IBA对愈伤组织诱导、不定芽分化、不定芽增殖和生根的影响找出相应的最佳激素组合。结果与结论 :在含 1.0～ 5 .0mg·L^-1BA和 1.0～ 2 .0mg·L^-1NAA的培养基上 ,80 %以上的叶片可以在 60d内形成愈伤组织 ;愈伤组织转到含 2 .0～ 5 .0mg·L-1BA和 0 .2～ 0 .5mg·L^-1NAA的培养基上后 ,60 %以上的愈伤组织可以在 50d内分化出不定芽 ;在含 2 .0mg·L-^-1IBA的培养基上 ,100 %的不定芽可在20d内长出 4～ 6条不定根。再生植株移栽后 ,生长健壮 ,成活率达 80 %以上。     

北细辛叶柄愈伤组织的增殖培养及器官分化研究

目的研究北细辛Asarum heterotropoides叶柄愈伤组织增殖培养、再生芽分化及不定根诱导的最适条件,建立高效的愈伤组织培养和再生体系。方法以北细辛幼嫩叶柄诱导出愈伤组织,于含不同质量浓度6-苄基腺嘌呤(6-BA)和萘乙酸(NAA)的增殖培养基中扩大培养,选取嫩绿致密的愈伤组织接种在不同激素浓度配比的分化培养基上诱导再生芽及不定根,经驯化后移栽。结果愈伤组织增殖较适培养基为1/2 MS+0.40 mg/L 6-BA+0.10 mg/L NAA,在含0.40 mg/L 6-BA+0.05 mg/L NAA的1/2 MS培养基中再生芽分化率最高,无激素添加的1/2 MS培养基适于壮苗培养,不定根诱导最适培养基为1/4 MS+0.25 mg/L IBA。结论确定北细辛愈伤组织增殖及分化的最适培养基及激素水平,建立了完善的北细辛再生体系,成功获得再生植株。     

黑果枸杞基茎丛生芽诱导及植株高效再生体系的建立

目的优化黑果枸杞Lycium ruthenicum离体培养方法及条件,探索有效增殖方式,筛选适宜的植株再生途径,建立其人工高效繁殖技术体系。方法以无菌实生苗带1～2个节的茎段为材料,采用MS、改良的MS1以及改良的MS2为基本培养基,通过单因素、完全组合及L_9(3~4)正交试验研究不同植物激素种类及其质量浓度对愈伤组织诱导、腋芽萌发、基茎不定丛芽诱导及植株再生的影响。结果在MS+NAA 1.0 mg/L+6-BA 0.1 mg/L培养基中,可诱导出大量愈伤组织,但其再分化能力较弱,培养35 d后最高增殖系数仅为4.36;而在MS+NAA 0.1 mg/L+6-BA 0.05 mg/L+KT 0.5 mg/L中培养,随着腋芽萌发,茎段与培养基接触的节处开始膨大并出现不定芽点,萌发出基茎丛生芽,发生率达100%,培养45 d增殖系数最高可达到42.84;试管苗生根的适宜培养基为改良的MS1+NAA 1.0 mg/L,培养40 d后生根率达98.9%;试管苗经炼苗后移栽成活率90%以上。结论研究通过基茎丛生芽这一全新的增殖途径,成功建立了黑果枸杞体外高效再生体系,不仅大大提高了试管苗的产量及品质,也为枸杞属其他植物的体外快繁提供了另一思路。     

土茯苓离体快繁研究

以土茯苓Smilax glabra Roxb根状茎侧芽的生长锥为外植体,以MS、3/2MS、B5和改良H等培养基为基本培养基,附加不同浓度的植物生长调节剂进行离体培养研究.结果表明:外植体在MS 6-BA 1.0 mg/L NAA 0.1 mg/L培养基上芽的萌动速度较快;萌动芽在MS 6-BA 1.0 mg/L NAA 0.1 mg/L 10%CM(椰子汁)培养基上丛生芽诱导和增殖的效果最佳;3/2MS 6-BA 0.05 mg/L 4%蔗糖培养基的壮苗效果较好;H NAA 0.5 mg/L培养基的生根率可达94%以上;以沙和泥炭土各1/2为基质移栽试管苗,成活率达到95%以上.     

半夏丛生芽诱导及快速繁殖

目的:以叶片、叶柄为外植体,建立半夏的快速繁殖体系.方法:用半夏块茎诱导的丛生芽叶片、叶柄作外植体.结果:叶片、叶柄可以不经过愈伤组织而直接再生成植株,培养基MS 6-BA 2.0 mg/L NAA 0.1 mg/L对外植体叶的分化诱导效果最好,MS 6-BA 2.0 mg/L NAA 0.25 mg/L则适于叶柄,生根培养基以1/2MS KT 1.0 mg/L NAA 2.0 mg/L效果较好.结论:通过对半夏块茎诱导的叶片和叶柄形成的丛生芽可以提高半夏繁殖系数.     

药用植物墨旱莲的组织培养研究

 目的研究利用组织培养技术对药用植物墨旱莲进行快速繁殖。方法以顶芽、茎、叶和幼苗(上部为绿体,下部为愈伤组织)为外植体,诱导愈伤组织及根和芽的分化。结果在顶芽、茎、叶和幼苗4种外植体中,顶芽的愈伤组织诱导率和芽分化率均高达100%,愈伤组织褐化少,生长良好,易被诱导出不定芽,是较为理想的快速繁殖材料;茎段的愈伤组织诱导率也达100%,但其中不带茎节的茎段不能直接诱导芽分化。在适宜的培养基中顶芽和带节的茎段能大量生根,生根率均达100%。结论较适宜诱导愈伤组织的激素组合是MS+6-BA2.0mg·L^-1+NAA0.5mg·L^-1,诱导芽分化适宜的激素组合为MS+6-BA3.0mg·L^-1+NAA0.3mg·L^-1,根的诱导则在MS+NAA0.2mg·L^-1上进行。     

滇龙胆丛芽高效诱导与植株再生体系的建立

目的以滇龙胆Gentiana rigescens带叶茎尖、带芽茎段、叶片、根为外植体,建立滇龙胆高效、稳定的丛芽诱导体系,筛选出适宜的植株再生途径。方法以MS为基本培养基,在单因素实验的基础上,通过L16(45)正交及完全组合实验研究不同外植体和不同植物激素种类及其质量浓度对愈伤组织诱导、丛芽发生及植株再生的影响。结果带芽茎段为间接器官发生最佳材料,其在MS+6-BA 1.5 mg/L+NAA 1.5 mg/L+KT 0.05 mg/L中培养10 d、节上腋芽开始萌发后,基部可诱导出再分化能力极强的愈伤组织,得愈率为97.73%;15 d后愈伤组织开始分化出绿色丛芽,分化率100%;30 d后不定芽分化系数达18.65,增殖系数可达63.58。带叶茎尖为直接器官发生最佳材料,其在MS+6-BA 0.5 mg/L+NAA 1.0 mg/L+KT 0.5mg/L中培养30 d后,增殖系数亦可达44.36。2种材料培养获得的试管苗茎细瘦弱,不利于生根培养,试管苗在MS+6-BA1.5 mg/L+NAA 1.5 mg/L+KT 0.05 mg/L+PP333 10 mg/L中培养60 d后可获得健壮度大为改善的复壮苗。复壮苗生根则在1/2MS+6-BA 0.1 mg/L+NAA 2.0 mg/L中进行,45 d后可获得生长健壮的再生植株,生根率100%。再生苗移栽成活率达95%以上。结论建立的滇龙胆无性快速繁殖体系,为保护滇龙胆野生资源、优质种苗繁育提供了有效途径,也为其遗传转化研究奠定了实验基础。