葛根等几种中药对蛋白质非酶糖基化反应的抑制作用

目的研究葛根、绿茶、吴茱萸、苦瓜、桑叶、玉米须等7种植物提取物及葛根素对体外蛋白质非酶糖基化反应的影响,同时测定葛根和葛根素的IC50。方法将牛血清白蛋白和果糖/葡萄糖在体外共同孵育建立体外蛋白非酶糖基化反应体系,并将反应液分成空白组,对照组和药物组,在37℃孵厢中孵育7d,检测波长430nm测定各组荧光值。结果葛根、绿茶、吴茱萸、桑叶、肉桂、玉米须、苦瓜7种植物提取物以及葛根素对体外孵育AGEs的形成抑制作用不同,其抑制率分别为85.4%,83.8%,66.3%,41.5%,36.4%,25.6%和8.6%,葛根及葛根素的IC50分别为45.45μg/ml和18.13μg/ml。结论这7种中药提取物对蛋白质非酶糖基化的抑制作用不同,其中绿茶和葛根提取物的抑制作用最强,而葛根素也具有蛋白质非酶糖基化的抑制作用,是葛根抗蛋白质的非酶糖基化一个主要活性成分。     

葛根素改善3T3-L1 脂肪细胞葡萄糖摄取和胰岛素抵抗

目的：探讨葛根素对3T3-L1脂肪细胞胰岛素抵抗（Insulin resistance,IR）模型葡萄糖利用和IR的影响及其作用机制。方法：诱导分化3T3-L1前脂肪细胞为成熟脂肪细胞;用地塞米松诱导建立3T3-L1脂肪细胞胰岛素抵抗模型。成功建立模型后,将实验分为5组进行,分别为空白组、模型组、葛根素10 mg·L-1组、葛根素100 mg·L-1组、葛根素200 mg·L-1组;其中,空白组不建模,模型组建模但不用药物干预,各葛根素组为在建立模型后,给予不同浓度的葛根素干预。用葛根素干预24小时后,以葡萄糖氧化酶-过氧化物酶法测定细胞培养基中葡萄糖浓度,四甲基偶氮唑蓝[3-(4,5-dimehyl-2-thiazolyl)-2,5-diphenyl-2H-tetrazoliumbromide, MTT]比色法检测细胞增值活力;然后分别用Real time PCR、Western Blot 方法检测细胞葡萄糖转运蛋白4（glucosetransporter type 4, GLUT4）、磷脂酰肌醇3-激酶（phosphatidylinositol 3-kinase, PI3K）、蛋白激酶B（protein kinaseB, PKB/AKT）、腺苷酸活化蛋白激酶（adenosine monophosphate activated protein kinase, AMPK）、过氧化物酶体增殖物激活受体γ（peroxisome proliferator -activated receptor gamma, PPARγ）mRNA基因和蛋白表达。结果：葛根素干预后,细胞培养基中葡萄糖浓度均较模型组降低（P < 0.01）;GLUT4、PI3K、AKT、AMPK、PPARγ mRNA水平及蛋白表达较模型组均增加（P < 0.05）。结论：葛根素能增加3T3-L1脂肪细胞胰岛素抵抗模型葡萄糖利用、改善IR,其作用机制可能与上调P13K、AKT、AMPK、PPARγ基因和蛋白表达,进而增加葡萄糖运转有关。     

补肾中药对体外蛋白非酶糖化产物的抑制作用

目的研究补肾中药对体外蛋白非酶糖化产物的抑制作用。方法选用终浓度为0.1 mmol/L的怀牛膝、淫羊藿、熟地黄、肉苁蓉4味补肾中药及氨基胍（AG）分别加入终浓度为200 mmol/L的葡萄糖、50g/L的牛血清白蛋白（BSA）糖化系统中,37℃温孵12周后,用荧光光度计测定晚期糖化终末产物（AGEs）的荧光度值（F）,计算抑制率（IR）和相对IR。结果怀牛膝、淫羊藿、熟地黄对AGEs的IR、相对IR与AG比较差异无统计学意义（P〉0.05）,怀牛膝、淫羊藿、熟地黄与AG的抑制作用相同;肉苁蓉对AGEs的IR、相对IR与AG比较差异有统计学意义（P〈0.05）,肉苁蓉对非酶糖化抑制作用低于AG。结论补肾中药怀牛膝、淫羊藿、熟地黄对体外蛋白非酶糖化产物有直接抑制作用。     

抑制蛋白非酶糖化中药的研究现状及展望

非酶糖化是在无需酶的参与下葡萄糖和蛋白质氨基酸结合的反应,它是法国生物学家Maillard在1921年发现的,故又称为Maillard反应。蛋白非酶糖化是引起糖尿病慢性并发症的主要原因之一,现代医学为此已进行了一些工作,如维生素E、阿司匹林、盐酸二甲双胍、贝那普利等相继被证实有抑制蛋白非酶糖化作用[1～3]。非酶糖化抑制剂氨基胍的研究已达到分子水平[4]。近年来,一些学者对中药抑制蛋白非酶糖化也进行了探讨。本文就目前该领域的研究现状及发展前景作一介绍及分析。 1 蛋白非酶糖化反应 在体内葡萄糖、果糖及葡萄糖-6-磷酸等酮糖与蛋…     

通脉Ⅰ号对自发性高血压大鼠血管平滑肌细胞增殖的影响

目的：研究中药复主通脉I号对自发性高血压大鼠（SHR）血管平滑肌细胞（VSMC）增殖的影响。方法：采用[3H]胸腺嘧啶核苷[3H]TdR）掺入法、电镜、细胞计数等方法观察通脉1号对SHR胸主动脉平滑仙细胞生长、增殖有超微结构的影响。结果：通脉I号能显著减少VSMC对^3H－胸腺嘧啶（^3H－TdR）的摄取；抑制平滑肌细胞生长；促进SHR的VSMC的超微结构改变；结论：通脉I号具有抑制血管平滑肌细胞增殖的效应。     

益气活血化瘀方药对血管胶原转换及相关基因表达的影响

目的：观察益气活血化瘀中药对大鼠血管细胞外基质(ECM)重塑的影响并探讨其分子机制。方法：采用^3H—TdR和^^3H—Pro掺入实验和血管壁羟脯氨酸含量测定检查血管平滑肌细胞(VSMC)增殖活性及胶原合成与降解程度;应用Northern印迹和Ⅳ型胶原酶(MMP-2)酶图分析检测MMP-2和骨桥蛋白表达的变化。结果：益气活血化瘀中药可显著抑制bFGF对VSMC的促胶原合成作用,降低血管内皮剥脱大鼠血管壁胶原转换速率,下调MMP-2和骨桥蛋白在体外培养的VSMC及血管壁中的表达水平,抑制VSMC增殖。中药血清去蛋白后对VSMC的影响不发生明显变化。结论：益气活血化瘀中药通过调节MMP-2和骨桥蛋白基因表达及降低胶原转换速率可抑制和(或)减缓ECM重塑。     

葛根素和葛根黄酮的药代动力学研究概述

中药的作用特点是多成分、多途径、多靶点,中药药代动力学的研究是中药研究的关键技术之一。葛根的主要有效成分和有效部位为葛根素及葛根黄酮,该文从生物样品预处理、样品测定、葛根素及葛根黄酮在体内的吸收、分布、代谢排泄和药动学参数等方面着手,对葛根素和葛根黄酮的药代动力学研究进行综述,认为应加强正常和病理状态下葛根素和葛根黄酮在脑脊液及脑组织中的分布和代谢研究,为临床脑血管疾病以及相关疾病的治疗提供用药指导。     

西红花酸对体外蛋白质非酶糖基化的抑制作用

目的研究西红花酸对体外蛋白质非酶糖基化的影响。方法以牛血清白蛋白(BSA)质量浓度、葡萄糖质量浓度及温孵时间为3因素,采用3因素4水平正交设计,通过方差分析寻找体外非酶糖基化的最适反应体系,以此最适体系观察西红花酸对非酶糖基化的影响。结果糖基化蛋白产量与BSA质量浓度、葡萄糖质量浓度、温孵时间呈正相关;方差分析结果提示,5 g/L BSA、4.5 m g/mL葡萄糖及14 d的温孵时间为蛋白质体外非酶糖基化的最佳条件;荧光值测定和聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE s)均表明西红花酸对体外蛋白质非酶糖基化具有显著的抑制作用。结论西红花酸对体外蛋白质的非酶糖基化具有明显的抑制作用;这可能是西红花酸具有广泛的心血管药理活性及改善胰岛素抵抗的重要机制之一。     

血清药理学方法在诱导肿瘤细胞凋亡降低酶活性研究中的应用

目的：探讨血清药理学方法在诱导肿瘤细胞凋亡、降低酶活性等研究中的应用。方法：应用治疗肝癌、胃癌、肺癌、大肠癌等中药血清学方法，探讨其诱导肿瘤细胞凋亡、降低肿瘤细胞三磷酸腺苷酶（Mg^2＋ -AT-Pase）与葡萄糖-6-磷酸酶（G-6-Pase）酶活性作用。结果：①4种不同中药复方的中药血清，均能诱导相应肝癌细胞株、A549人肺癌细胞株、CCL-229人大肠癌细胞株和SGC-7901胃癌细胞株发生凋亡。②降低肿瘤细胞三磷酸腺苷酶与葡萄糖-6-磷酸酶活性。结论：血清药理学方法在诱导肿瘤细胞凋亡、降低酶活性等研究中的应用具有稳定性、可信性。     

葛根素与血浆蛋白非共价结合的电喷雾离子阱质谱研究

 目的研究葛根素与人血清白蛋白和α₁-酸性糖蛋白之间的非共价结合特性。方法应用电喷雾离子阱质谱分别测定葛根素、人血清白蛋白、α₁-酸性糖蛋白及其所形成复合物的相对分子质量,通过结合前后的相对分子质量变化计算复合物化学计量比;通过Scatchard方程拟合计算复合物结合常数(K);根据热力学常数△H、△S推测复合物间的作用力类型。结果葛根素与人血清白蛋白、α₁-酸性糖蛋白形成的复合物的结合常数分别为7.59×10⁴和8.01×10⁴mol·L^-1,最大表观化学结合计量比分别为1∶5和1∶8。葛根素与人血清白蛋白、α₁-酸性糖蛋白间的作用力主要为静电引力。结论电喷雾离子阱质谱是一种研究药物与蛋白间非共价结合的灵敏快速和准确的方法。     

基于ICP-MS法的加味左金丸中无机元素分析

目的 通过电感耦合等离子体质谱（inductively coupled plasma mass spectrometry,ICP-MS）法建立加味左金丸中Cd、Pb、As、Hg、Co、V、Ni、Cu、Li、Sb、Ba、Mo、Sn、Cr、Na、Mg、Al、Ca、Ti、Mn、Fe、Zn、Ga、Se、Sr、Tl共计26种无机元素的测定方法。方法 加味左金丸通过微波消解法处理后,根据相对分子质量的大小选择内标物,其中⁷Li、²³Na、²⁴Mg、²⁷Al、⁴⁰Ca、⁴⁸Ti、⁵¹V、⁵²Cr、⁵⁵Mn、⁵⁶Fe、⁵⁸Ni、⁵⁹Co、⁶³Cu、⁶⁶Zn、⁷⁰Ga、⁷⁵As、⁷⁷Se、⁸⁶Sr以⁷²Ge作为内标;⁹⁵Mo、¹¹⁴Cd、¹¹⁸Sn、¹²¹Sb、¹³⁷Ba以¹¹⁵In作为内标;²⁰²Hg、²⁰⁵Tl、²⁰⁸Pb以²⁰⁹Bi作为内标。对标准品溶液、空白溶液与供试品溶液进行分析,采用标准曲线法进行定量分析。通过ICP-MS法进行测定。结果 26种无机元素线性的相关系数r ≥ 0.999 6,检出限为0.001~1.500μg/L,定量限为0.01~5.00 μg/L,精密度与重复性试验的RSD均小于5%,平均回收率在82.64%~106.44%,RSD均小于5%。对3个厂家的12批样品进行了测定,26种元素的含量差异较大,其中Na、Mg、Ca、Fe 4种元素的含量比较高,均大于500 μg/g,Cd、Pb、As、Hg、Co、Li、Sb、Mo、Sn、Cr、Se、Tl的含量比较低,均小于1 μg/g。由结果可知,人体的常量元素,如Na、Mg、Ca的含量比较高,Cd、Pb、As、Hg等有害元素含量比较低。根据《中国药典》2020年版一部的要求,本品中Cd、Pb、As、Hg与Cu均符合规定。结论 该方法快速、准确,可以用于加味左金丸中无机元素的测定。     

Erstaunliches Ergebnis einer Schädelakupunktur nach Yamamoto bei Hemihypsarrhythmie rechts

A girl, three and a half years old at the respective date, premature in 25th week of gestation, had been presented. On day three after birth, she had had a IVH III° right and left with severe involvement of parenchyma and other multiple complications, e. a. infant respiratory distress syndrome up to the 42nd day postpartum, and epileptic attacks with apnoeic events.     

七味红花殊胜散对缺血再灌注肝损伤的保护作用

目的::研究七味红花殊胜敬对缺血再灌注肝损伤的保护作用.方法:在大鼠肝缺血再灌注模型上,观察七味红花殊胜散对缺血再灌注肝损伤引起的血清丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、一氧化氮(NO)含量的变化.结果:七味红花殊胜散对大鼠血清MDA、SOD、GSH与再灌组比较有明显差异(P<0.05),NO含量与再灌组比较有明显差异(P<0.05).结论:七味红花殊胜散对大鼠急性缺血再灌注肝损伤具有保护作用.     

Methodology of Canine/Feline YNSA and Tail Acupuncture

BackgroundYamamoto New Scalp Acupuncture (YNSA) is a well-known acupuncture system for human patients which was developed by Dr. Yamamoto.ObjectiveMy aim was to transpose the human YNSA map onto canines and felines.MethodI started researching a canine/feline YNSA map in 2002. I investigated approximately 3,000 canines and felines for YNSA and 2,500 for Tail Acupuncture. The ratio of canines and felines was 6 to 4. I researched and found all the equivalent points by palpating animal patients on the basis of an exact Neck Diagnosis.ResultsI nearly completed the map in 2006. The points in the occipital region are incomplete and my research is still in progress. In the process of researching canine/feline YNSA points, I accidentally found the other microsystems around the tail and named it “Tail Acupuncture”.ConclusionsYNSA and Tail Acupuncture are acupuncture systems utilizing microsystems and support each other in canines and felines. The merits of YNSA and Tail Acupuncture are 1) immediate effects, such as in cases of lameness, 2) simplicity in finding the exact points to treat and 3) the scalp and the tail can be utilized separately or together as treatment zones, according to the situation.     

Chinesische Orthopädie: Teil 1: Die Zukunft der Akupunktur in der Postmoderne

The locomotor system is one of the major fields of application for acupuncture. The results of the large acupuncture studies funded by German Health Insurances from 2000 until 2006 are impressive and repressive: they restrict acupuncture application by allocation of reimbursement and create the necessity of reorientation, since acupuncture can neither be adequately described nor prescribed solely on the basis of disease entities. Regarding these disease entities, it seems rather necessary to analyse the layers of problems and formulate a hierarchy of therapeutic goals instead. Only in this way the effects of acupuncture, related techniques and further therapeutic modalities can be matched with the set of objectives. The article presents general principles and follows their application from biological aspects to implications for the locomotor system and consequences for the application of physical therapy. The manual of acupuncture focuses on therapeutic effects and objectives first, and then goes on to sketch simple therapeutic strategies and finally complex approaches within acupuncture. These may encompass acupuncture, microsystem acupuncture and complex therapeutic modes.     

Fallbericht: Patientin mit Schlafstörung

Background

Since the onset of her menopause about ten years ago, a sixty-year old patient has been suffering from hot flashes and sleep disorders causing her to become increasingly anxious and nervous. As the patient's mother had died of breast cancer, substitution of hormones was not advisable. Relaxation methods such as Yoga and Autogenic Training could only mildly alleviate the symptoms.

Objective

To effectively treat the sleep disorder, improve quality of life, lessen frequency and severity of hot flashes

Methods

Weekly sessions with ear- and body acupuncture for ten weeks

Results

After the third acupuncture session the patient reported a decrease of nightly waking episodes but suffered from acute pain in the neck as well as shoulder region. After nine therapy sessions, the patient reported a 50% decrease of nightly waking episodes. The hot flashes, however, remained unchanged.

Discussion

In this case, acupuncture significantly improved the patient's sleeping disorder. It also reduced the symptoms of anxiety and nervousness. Other menopausal symptoms such as hot flashes and dryness of mucous tissues, could not be influenced.     

Patientin mit chronisch rezidivierenden Gelenks- und Wirbelsäulenschmerzen

Background

Acupuncture as a regulative therapy is well-suited for the treatment of functional, reversible disorders. Additionally, the WHO recommends its application for pain therapy in cases of arthritis and back pain due to various causes. This case study should clarify which paths to take in the case of a multi-morbid patient suffering from chronic pains due to polyarthrosis.

Objective

Pain reduction and improvement of quality of life as well as improvement of sleep quality.

Methods

Annual treatment series consisting of 10 sessions each, one session per week.

Results

short-term pain reduction before undergoing endoprosthetic surgery; considerable improvement of general status and sleep.

Conclusions

Acupuncture may bring temporal relief in cases of chronic pain due to osteoarthritis and should therefore be applied in combination with western medicine. Acupuncture is particularly well-suited to treat the co-emergent vegetative symptoms.     

常见证候荷瘤小鼠神经内分泌免疫组织基因转录的总体特征

目的揭示常见证候荷瘤小鼠神经-内分泌-免疫组织基因转录的总体特征。方法采用小鼠标准化四诊及辨证方法，及Gene Chip Mouse Exon1．0ST Array等技术，检测H22荷瘤小鼠早期邪毒壅盛（邪毒）和气虚、中期阳气虚、中晚期气阴阳虚等4个常见证候下丘脑、垂体、肾上腺、睾丸、脾脏、胸腺、肿瘤RNA的转录与剪接。结果正常昆明种雄性小鼠下丘脑、垂体、肾上腺RNA电泳的28S峰低于18S，而睾丸、脾脏、胸腺、肿瘤相反。肿瘤发生的早期，下丘脑、垂体、肾上腺基因表达模式发生显著改变，邪毒尤甚，出现了失代偿。下丘脑28SRNA迅速抬升并持续，气虚强于邪毒。垂体RNA总量降低，28S陡降，邪毒尤甚。肾上腺RNA电泳特征类似垂体，气虚与邪毒相近，中晚期气阴阳虚尤甚。睾丸变化不明显。随着病情发展，脾脏重量持续增加，而胸腺相反，重量持续下降，蛋白合成和糖代谢下降。肿瘤组织蛋白合成与糖代谢，邪毒大于气虚。以上7个组织与正常对照组相比，有9127个基因表达发生差异、51126个外显子剪接发生差异。结论神经-内分泌-免疫网络组织基因转录的差异是荷瘤小鼠不同证候内在重要的物质基础。