冰冻切片技术制作药用植物组织永久切片的研究

目的本实验建立了冰冻切片技术制作药用植物组织永久切片的实验方法。方法将材料用FAA固定液固定,经过包埋后,利用冰冻切片机在-18℃--20℃温度下切片,切片经乙醇梯度脱水、番红-固绿染色、二甲苯透明后,用加拿大树胶封片即得。结果应用该方法制作的植物组织永久切片,结构完整而清晰。结论冰冻切片技术是制作药用植物组织永久切片简便有效的方法,应用前景广阔。     

一种新型环保透明剂替代二甲苯制片的探讨

目的:探讨新型环保组织透明剂代替二甲苯进行组织石蜡制片的效果。方法:对比新型环保组织透明剂和二甲苯用于组织透明、石蜡切片染色前的脱蜡和染色后的切片透明。结果:用新型环保透明剂制作组织蜡块,经切片脱蜡后进行的常规HE染色。组织结构完整,细胞形态完好,无明显收缩;染色分明,透明效果好,较之二甲苯制作的切片质量好。结论 :新型透明剂能够代替二甲苯在常规HE病理制片中对组织进行透明及染色后的切片透明,并符合实验室环保的要求。     

胸椎小关节错位建立兔胃脘痛模型

目的:探讨胸椎小关节错位建立兔胃脘痛模型。方法:将12只兔按随机数字表法分为2组,错位组动物采用自制器械进行固定,造成相应的小关节错位;对照组动物仅方式内固定器械,但并不造成小关节错位,比较2组动物饲养3个月后胸椎CT三维重建以及胃窦部组织HE染色。结果:从CT三维重建来看,错位组动物其胸椎多个偏离正中线,同时脊柱均表现出不同程度的侧弯;取胃窦部组织进行HE染色,错位组可见有细胞变性、溃疡形成。结论:采用手术切开人工错位内固定能够成功造出胸椎小关节错位模型,同时胸椎小关节错位将引起胃脘痛。从组织病理检查结果来看,主要表现为细胞变性以及形成溃疡。     

丹红注射液对大鼠单侧睾丸扭转复位后健侧睾丸生精功能的影响

目的:探讨丹红注射液对大鼠单侧睾丸扭转复位后健侧睾丸的组织学以及附睾精子生成的影响。方法:将30只健康雄性Wi st ar大鼠随机分为假手术组(A组)、睾丸扭转复位组(B组)、丹红注射液处理组(C组),每组10只。按Tur ner法建立左侧睾丸扭转模型,A组大鼠切开左侧阴囊,使左侧睾丸充分游离暴露,不予以扭转,模拟Tur ner法手术过程随意搬动睾丸,随后缝合关闭阴囊;B组大鼠按Tur ner法制作睾丸扭转模型:左侧睾丸顺时针绕精索旋转720°,肉膜白膜缝合固定以防止复位,阴囊缝合,扭转6小时后复位固定;C组大鼠按上述相同方法制备睾丸扭转模型,于睾丸扭转复位前60分钟腹腔注射丹红注射液(2 m L/kg),同时在术后3天每天分别注射丹红注射液(2 m L/kg)。各组喂养至术后4周时处死,取右侧睾丸标本行组织病理学观察,同时取右侧附睾尾部行精子计数及活动率检测。检测睾丸组织一氧化氮合酶(NOS)、血清超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)水平。结果:C组与B组相比,生精上皮层数增多,平均曲细精管直径(MSTD)增大,同时附睾精子计数与活动率明显升高,其差异有统计学意义(P<0.05)。C组大鼠睾丸组织SOD水平升高,NOS、MDA水平降低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:丹红注射液能够减轻大鼠单侧睾丸扭转复位后健侧睾丸组织损害,使附睾精子生成显著增多,机制可能为减少大鼠睾丸组织内自由基生成,提高其抗自由基能力。     

加味宣肺透解剂对流感病毒感染小鼠肺组织中炎性细胞因子表达的影响

目的:探讨加味宣肺透解剂对实验性小鼠流感病毒肺炎的治疗及其药效机制。方法:复制流感病毒鼠肺适应株(FM1)小鼠肺炎模型,以加味宣肺透解剂灌胃治疗,共给药4天。感染后第5天,取各组小鼠肺组织福尔马林固定,石蜡包埋切片,HE染色,光学显微镜下观察肺组织病理变化;用SABC免疫组织化学法检测肺组织中TNF-α、IL-1β、MCP-1表达。结果:加味宣肺透解剂治疗组肺组织病变程度明显轻于病毒感染模型组(P<0.05),同时肺组织中TNF-α、IL-1β、MCP-1的表达明显低于病毒感染模型组(P<0.05)。结论:加味宣肺透解剂减轻肺部急性炎性损伤可能与该药降低肺组织中炎性因子TNF-α、IL-1β、MCP-1的表达有关。     

加味天雄散对少弱精子症模型大鼠附睾氧化损伤的保护作用

目的:观察加味天雄散对少弱精子症模型大鼠附睾内细胞氧化应激损伤的影响并研究其作用机制。方法:将腺嘌呤按80mg/ml浓度配制,并对Wistar大鼠进行灌胃,每日1次,连续灌胃2周,造模成功后按随机数字表法将大鼠分为模型组、中药组、正常对照组,中药组连续给药加味天雄散汤剂4周,实验结束后检测各组大鼠附睾精子密度和活率,取经固定的睾丸组织石蜡包埋切片,检测附睾组织中超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)含量。结果:与模型组比较,加味天雄散能显著改善大鼠睾丸组织病理状态,显著提高生精障碍大鼠模型的精子密度和精子活率,同时提高生精障碍大鼠附睾内SOD活性,降低附睾组织中MDA水平。结论:加味天雄散能够提高附睾组织中的抗氧化水平,对腺嘌呤导致的大鼠生精功能障碍具有保护作用。     

HE切片染色不良问题的分析及改进措施

HE切片染色是病理科中制作组织切片最常用的方法,其质量好坏直接影响病理诊断的准确性。通过统计2017年1月~2017年6月本科室所有的病理HE玻片,探讨HE切片染色常见的不良问题,对出现质量问题的进行总结和归纳。肉眼观察下的问题包括:切片有皱褶重叠,中性树胶溢出或不足形成气泡,切片呈现搓衣板样,组织有划痕或缺失;镜下观察的问题包括:切片染色模糊不清,核浆染色对比不清晰,切片有白色点状或云雾状不着色或色浅区域,切片有粉色片状异物污染。针对不同问题进行了原因分析并提出了改进措施,对今后病理科室提高HE切片染色技术起到了一定的指导意义。     

pH6.0醋酸-醋酸钠缓冲液在骨切片染色中的应用

长期以来 ,骨组织的染色技术虽然有很多改进和突破 ,但由于骨组织的制片环节特殊 ,其染色结果总是有些不甚理想 ,最近我们在工作中无意发现 ,骨切片在 p H6.0的醋酸 -醋酸钠缓冲液中浸泡后 ,再进行 HE或 Masson三色染色 ,其显示的各类组织成分 ,细胞核浆尤其鲜艳 ,明显优于常规方法。p H6.0醋酸 -醋酸钠缓冲液的配制方法　 1 0 .1 N醋酸钠 :取 8.2 0 4 g无水醋酸钠溶于蒸溜水在容量瓶中加水至 1 0 0 0 ml。2 0 .1 N醋酸 :取 5.9ml冰醋酸加水至 1 0 0 0 ml;再取 0 .1 N醋酸1 0 ml加 0 .1 N醋酸钠 1 90 ml,使 p H呈 6.0即可。染色方法与步…     

红花水煎剂对肿瘤组织病理学改变及血管生成的影响

目的:研究不同剂量红花水煎剂对肿瘤组织病理学改变及血管生成的影响。方法:采用不同剂量的红花水煎剂给接种H22肿瘤细胞的荷瘤小鼠灌胃,10天后取肿瘤组织称重,计算抑瘤率。并制作石蜡切片,HE染色后观察肿瘤组织形态学变化,并用免疫组化的方法检测各组微血管密度(MVD)。结果:红花水煎剂灌胃后,各组肿瘤重量均减少,以中剂量组最为明显(P<0.05)。组织病理学有明显的形态变化,微血管密度明显减少(P<0.01)。结论:一定浓度的红花水煎剂可明显抑制肿瘤生长,其作用可能是通过抑制肿瘤组织血管生成实现的。     

瘤体内注射消痔灵对荷H22肝癌小鼠凋亡蛋白表达的影响

目的:观察瘤体内注射消痔灵(XZL)对荷H22肝癌小鼠凋亡蛋白Bc l2、Bax表达的影响。方法:45只模型小鼠被随机分为3组,每组15只,分别予瘤体内注射生理盐水(NS),瘤体内注射XZL,腹腔内注射环磷酰胺(CTX)。瘤组织固定、脱水、石蜡包埋,3μm切片,常规HE染色,免疫组化方法检测各组瘤组织内Bc l2、Bax蛋白的表达。结果:镜下见NS组瘤组织排列致密,核大、深染;XZL组可见坏死组织,核固缩或碎裂、XZL组和CTX组的Bc l2蛋白都有所下降而Bax蛋白表达增加,而NS组相反,与NS组相比有显著性差异(P<0.05)。结论:上调Bax蛋白的表达而下调Bc l2蛋白的表达可能是XZL发挥起抗肿瘤作用的机制之一。