缬草挥发油对戊四氮致癫痫大鼠海马内γ-氨基丁酸和谷氨酸含量的影响

目的:研究缬草挥发油对戊四氮致癫痫大鼠海马内兴奋性与抑制性氨基酸含量的影响,探讨其抗癫痫的可能机制。方法:采用腹腔注射戊四氮建立大鼠癫痫模型,观察经缬草挥发油治疗后的癫痫大鼠与对照组大鼠海马内γ-氨基丁酸(GABA)和谷氨酸(Glu)含量的变化。结果:经缬草挥发油治疗后的癫痫大鼠与对照组大鼠海马内的γ-氨基丁酸含量明显升高,谷氨酸显著降低(P<0.05)。结论:缬草可调节癫痫大鼠脑内的兴奋性与抑制性氨基酸的平衡,从而起到抗癫痫的作用。     

癫痫清片对慢性致痫大鼠海马区氨基酸含量的影响

目的:探讨癫痫清片(DXQ)对慢性致痫大鼠氨基酸含量的影响。方法:采用腹腔注射利多卡因(Lidocaine)造成慢性癫痫大鼠模型,以高效液相色谱法(HPLC)检测海马区氨基酸的含量。结果:癫痫清片可使癫痫大鼠海马区兴奋性氨基酸Glu、Asp的含量减少,抑制性氨基酸GABA含量升高,与模型组比较具有统计学意义(P<0.05)。结论:癫痫清片可调节海马区兴奋性和抑制性氨基酸含量的平衡失调,从而减轻癫痫大鼠发作程度和发作时间。     

天麻促智颗粒对反复脑缺血再灌小鼠脑组织递质性氨基酸含量的影响

目的 :为探讨天麻促智颗粒 (TMCZKL)的脑保护作用机制 ,观察了该药对反复脑缺血再灌注小鼠的脑组织递质性氨基酸含量的影响。方法 :结扎小鼠双侧颈总动脉进行反复缺血再灌注 ,造成小鼠血管性学习记忆障碍模型 ,测定小鼠大脑皮层和海马区递质性氨基酸含量的变化 ,探讨该药的脑保护作用。结果 :TMCZKL大、中、小 3个剂量组均可非常显著升高小鼠脑皮层和海马的谷氨酸含量 (P<0.001) ,升高海马区天门冬氨酸含量 (P<0.001) ,非常显著降低脑皮层的γ-氨基丁酸的含量 (P<0.001)。结论 :提示TMCZKL可调节脑内递质性氨基酸含量 ,维持兴奋性氨基酸和抑制性氨基酸的动态平衡 ,从而可对抗兴奋性氨基酸毒性作用。     

囊立消对大鼠癫痫模型脑组织中GABA Glu含量的影响

目的:通过囊立消对美解眠诱导的大鼠癫痫模型脑组织中GABA、G lu含量测定,探讨囊立消的抗癫痫作用。方法:利用氨基酸自动分析仪测定大鼠癫痫模型脑组织中GABA、G lu的含量。结果:该方药可使癫痫大鼠脑内GABA含量明显升高(P<0.05),并可降低癫痫大鼠脑内G lu含量(P<0.05)。结论:囊立消可有效地改善癫痫大鼠的行为表现,囊立消具有一定的抗癫痫作用,与维持脑内兴奋性氨基酸和抑制性氨基酸的动态平衡有关。     

β-细辛醚对慢性点燃癫痫大鼠脑组织c-fos表达的影响

目的:研究β-细辛醚对慢性点燃癫痫大鼠脑组织即早基因c-fos表达的影响。方法:大鼠随机分为β-细辛醚高、中、低(200,100,50mg·kg^-1.d^-1)剂量组,阳性药对照组(苯妥英钠36mg·kg^-1),模型对照组(基质),灌胃给药。以青霉素点燃大鼠慢性癫痫,采用westernblot法测定海马c-fos的表达,免疫组化法测定脑皮质c-fos的表达。结果:β-细辛醚能显著增强癫痫大鼠脑内c-fos的表达,且呈量效关系。海马c-fos的表达量:β-细辛醚高、中、低剂量组为(1139.45±155.56),(1109.56±134.03),(1103.73±235.82)CNT.mm²,基质对照组(920.54±203.20)CNT.mm^-2,苯妥英钠组(1106.26±186.24)CNT.mm²。皮质c-fos阳性细胞数:β-细辛醚高、中、低剂量组为(87.1±2.2),(76.3±1.3),(59.9±1.3)个,基质对照组(39.3±2.6)个,苯妥英钠组(95.2±1.1)个。结论:β-细辛醚能增强癫痫大鼠脑内c-fos的表达,是机体重要的抗癫痫反应。     

癫痫清颗粒对海人藻酸癫痫大鼠脑组织氨基酸类神经递质含量及学习记忆能力的影响

目的:建立海人藻酸(KA)大鼠癫痫模型,研究癫痫清颗粒对KA大鼠海马内谷氨酸(Glu)含量的影响和探讨其对学习记忆能力的影响。方法:应用脑立体定位仪,在大鼠单侧海马CA3区注射KA,选取造模成功大鼠连续口服给药28 d,观察其学习记忆能力的改变及海马内氨基酸递质含量变化。结果:癫痫清颗粒能有效地改善KA大鼠的学习记忆能力,减少海马内Glu含量。结论:癫痫清颗粒能降低KA大鼠脑内Glu的含量,保护神经元不受Glu的损害,从而减慢了神经元的凋亡,提高了癫痫大鼠的学习记忆能力。     

超临界CO2从柴胡中萃取挥发油及其皂甙的研究

目的 :研究超临界CO₂ 萃取柴胡挥发油和皂甙的工艺。方法 :主要探讨压力、温度、时间、流量、夹带剂等条件对收率的影响 ,确定超临界CO₂ 萃取柴胡挥发油和皂甙的最佳条件。并将挥发油的超临界CO₂ 萃取法与传统的水蒸气蒸馏法进行比较 ,同时 ,用GC/MS法对挥发油进行分离鉴定。结果 :挥发油的萃取压力为20MPa ,温度30℃;解析釜I压力为12MPa ,温度65℃ ;解析釜Ⅱ压力为 6MPa ,温度 40℃ ;萃取时间 4h ,CO₂ 流量为每1kg原料10～2 0kg·h^-1。柴胡皂甙的萃取压力是 30MPa ,温度65℃ ;解析釜I压力为 12MPa ,温度 55℃ ;解析釜Ⅱ压力为 6MPa ,温度43℃ ;萃取时间 3h ,CO₂ 流量为每 1kg原料 20～25kg·h^-1。结论 :超临界CO₂ 提取挥发油比传统法优越 ,表现在收率大大提高 ,提取时间短等方面。挥发油由己醛等22个化学成分组成。加入乙醇等夹带剂 ,并升高压力和温度 ,才能提出柴胡皂甙。     

葛根素抑制慢性低O2高CO2大鼠肺动脉高压形成机制研究

目的:探讨葛根素对慢性低O₂高CO₂大鼠肺血管重建的作用。方法:雄性SD大鼠40只,随机分成5组,正常(NC)组、低O₂高CO₂1周(LH1)组、2周(LH2)组与3周(LH3)组,低O₂高CO₂3周+葛根素(puerarin)用药(LHP3)组,每组8只。将后4组动物放入常压低O₂高CO₂舱内,舱内吸入气O₂浓度为9%~11%,CO₂浓度为5%~6%,每天9h,每周6d,连续3周。葛根素用药组于每天低O₂前半小时腹腔注射葛根素注射液(20mg.kg^-1)。采用比色法测定肺组织超氧化物歧化酶(SOD)活力及丙二醛(MDA)含量,图像分析、氯胺T法、免疫组化、组织原位杂交技术等方法观察葛根素对慢性低O₂高CO₂大鼠肺组织羟脯氨酸含量、肺小血管显微结构、肺动脉管壁I,III型胶原和I,III型前胶原基因的影响。结果:①光镜下葛根素组内弹力板扭曲、中膜平滑肌细胞增生及管腔狭窄程度均明显轻于低O₂高CO₂组。②血浆ET含量低O₂高CO₂组高于正常组(P<0.01),葛根素组低于低O₂高CO₂组(P<0.01)。血浆NO含量低O₂高CO₂组低于正常组(P<0.01),葛根素组高于低O₂高CO₂组(P<0.01)。③氯胺T法发现肺组织羟脯氨酸含量低O₂高CO₂组高于正常组(P<0.01),葛根素组低于低O₂高CO₂组(P<0.01)。④肺组织SOD活力低O₂高CO₂组低于正常组(P<0.01),葛根素组高于低O₂高CO₂组(P<0.01)。而MDA低O₂高CO₂组含量均明显升高于正常组(P<0.01)。葛根素组高于低O₂高CO₂组(P<0.01)。⑤免疫组化、原位杂交法发现肺细小动脉I型胶原和I型前胶原mRNA平均吸光度值低O₂高CO₂组高于正常组(P<0.01),葛根素组低于低O₂高CO₂组(P<0.01)。而Ⅲ型胶原及Ⅲ型前胶原mRNA平均吸光度值各组间无显著差异。结论:葛根素改善大鼠慢性低O₂高CO₂肺动脉高压形成和肺血管重建,其改善肺血管重建可能与其抑制肺动脉管壁胶原的沉积有关。     

超临界CO2萃取测定姜黄中姜黄素的实验研究

目的 :筛选超临界CO₂ 萃取姜黄中姜黄素的最佳工艺条件。方法 :采用正交试验优化超临界流体萃取姜黄素的工艺条件 ,采用HPLC法测定姜黄素含量。结果 :超临界CO₂ 萃取姜黄素的最佳条件 :萃取压力 25MPa ,萃取温度 55℃ ,采用无水乙醇作为夹带剂 (与超临界CO₂ 流体同步泵入萃取器中 ) ,用量为 30 % ,静态萃取 4h ,动态萃取 5h ,CO₂ 流量 3.5L·min^-1。结论 :超临界CO₂ 萃取姜黄素具有操作简便、无有机溶剂残留的优点 ,其方法可靠 ,切实可行。     

涤痰汤对老年轻度认知功能障碍大鼠海马Aβ1-42含量及PS-1,PS-2表达的影响

目的: 观察涤痰汤对老年轻度认知功能障碍(MCI)大鼠海马β淀粉样蛋白(Aβ_1-42)含量及早老素1(PS-1)、早老素2(PS-2)表达的影响。方法: 将60只13月龄SD大鼠随机分为正常组、模型组、西药组、涤痰汤高剂量组、涤痰汤低剂量组,另设12只3月龄青年大鼠作为青年对照组。模型组、西药组、涤痰汤高、低剂量组采用中年大鼠颈部皮下注射D-半乳糖8周结合半高脂饮食4周的方法建立老年轻度认知功能障碍大鼠模型。第5~8周,涤痰汤高、低剂量组分别ig给予涤痰汤8.55,4.275 g·kg^-1,西药组ig给予盐酸多奈哌齐0.9 mg·kg^-1,空白组、模型组、青年组ig给予等容积的蒸馏水,每日1次。采用Morris水迷宫检测大鼠学习记忆能力,酶联免疫测定法(ELISA)检测大鼠海马组织Aβ_1-42含量,免疫组化法检测海马PS-1,PS-2阳性表达。结果: 与空白组比较,模型组大鼠平台逃避潜伏期延长(P<0.01),海马CA1区PS-1,CA3区PS-2阳性表达增多(P<0.01),海马Aβ_1-42含量上升(P<0.05)。与模型组相比,涤痰汤低、高剂量组大鼠平台逃避潜伏期缩短(P<0.05,P<0.01),海马Aβ_1-42含量下降(P<0.05,P<0.01),海马PS-1,PS-2表达均下降(P<0.01)。结论: 涤痰汤可能通过下调模型大鼠海马PS-1,PS-2水平,降低海马Aβ_1-42含量,从而改善老年认知功能障碍大鼠的学习记忆能力。     

痫愈痊颗粒对戊四氮致痫大鼠海马Glu,GABA含量的影响

目的:观察痫愈痊颗粒对戊四氮致痫大鼠海马谷氨酸(Glu),γ-氨基丁酸(GABA)含量的影响,探讨痫愈痊颗粒治疗癫痫的机制。方法:将70只健康雄性SD大鼠随机分为正常组、模型组、丙戊酸钠组(200 mg·kg-1)、痫愈痊颗粒低、高剂量组(586,1 172 mg·kg-1),采用亚惊厥剂量戊四氮(PTZ)ip建立癫痫大鼠模型,在造模同时即开始给药,共28 d。行为学观察后取海马组织,采用高效液相色谱-四级杆离子阱串联质谱仪检测海马中Glu,GABA的含量。结果:59只大鼠进入结果分析,与模型组比较,痫愈痊颗粒与丙戊酸钠干预后发作潜伏期延长、惊厥持续时间缩短(P0.01);惊厥持续时间高剂量组优于低剂量组(P0.05)。模型组与正常组相比,海马Glu含量明显上升,GABA含量明显下降(P0.01);与模型组比较,痫愈痊颗粒高、低剂量组和丙戊酸钠组可明显降低海马Glu含量,升高GABA含量(P0.05,P0.01)。结论:采用亚惊厥剂量PTZ能够建立癫痫大鼠模型;痫愈痊颗粒抗癫痫机制可能与其降低海马Glu含量,增加GABA含量有关。     

电针遏制癫痫小发作时脑内氨基酸含量的变化

目的 :本课题前阶段已证明电针能遏制癫痫小发作 ,现拟探查此时脑内一些氨基酸含量的变化。方法 :在戊四氮注射及闪光刺激造成癫痫小发作的大鼠 ,收集脑内一些部位在电针穴位前后的灌流液 ,测定四种氨基酸的含量。结果 :皮层运动区、视区的γ 氨基丁酸、甘氨酸及牛磺酸在电针后显著增加 ,谷氨酸减少。丘脑网状核、黑质网状部的γ 氨基丁酸亦明显增加。结论 :电针促使脑内与抑制有关的氨基酸含量增加 ,而兴奋性氨基酸有减少趋势     

人参皂苷Rg1对抑郁症模型大鼠行为学及海马氨基酸的影响

目的:观察人参皂苷Rg1对长期慢性应激所致抑郁模型大鼠行为学及海马氨基酸含量的影响。方法:将SD大鼠随机分为5组:正常对照组、模型组、人参皂苷Rg1低、高剂量组(20,40 mg·kg-1)和阳性药组(氟西汀10 mg·kg-1)。采用慢性不可预见性温和应激方法造成大鼠抑郁模型,治疗组灌胃连续给药21 d,正常组及模型组每日等剂量生理盐水灌胃。造模前后测定各组大鼠糖水消耗量,造模后旷场试验测定大鼠水平活动和垂直活动变化,以高效液相法测定海马氨基酸含量。结果:与正常组相比,模型组大鼠糖水消耗及偏爱率均下降;旷场试验测定水平活动和垂直活动次数均下降;海马谷氨酸、天冬氨酸含量明显增高,氨基丁酸和牛磺酸含量则明显下降。人参皂苷Rg1干预后,大鼠糖水消耗量和偏爱率增加;水平活动和垂直活动次数明显增加;海马谷氨酸、天冬氨酸含量下降,氨基丁酸和牛磺酸含量上升。结论:人参皂苷Rg1对抑郁症状有明显改善作用,其机制可能与调节长期慢性应激反应海马氨基酸水平,防止兴奋性氨基酸的神经毒性作用有关。     

石菖蒲对小鼠脑组织氨基酸类神经递质的影响

目的研究石菖蒲对小鼠脑组织氨基酸类神经递质的影响,分析作用机制.方法 石菖蒲不同部位提取物灌胃,用高效液相色谱法测定小鼠脑组织氨基酸类神经递质的含量.结果石菖蒲挥发油、水提液、去油水煎液可使大鼠谷氨酸( Glu)水平显著降低,挥发油、水提液使天门冬氨酸( Asp)含量降低,挥发油组的牛磺酸( Tau)含量也有较明显降低.结论 石菖蒲可降低小鼠脑组织兴奋性氨基酸的含量,对脑细胞有保护作用.     

石菖蒲-远志药对不同组分对AD模型大鼠学习记忆和海马突触蛋白表达的影响

目的:探讨石菖蒲-远志药对不同组分(挥发油、水提物)对阿尔兹海默病(AD)模型大鼠学习记忆和海马突触蛋白表达的影响。方法:选用SPF级SD大鼠,随机分为8组,分别为正常组、痴呆模型组、石菖蒲-远志挥发油低、中、高剂量组和石菖蒲-远志水提物低、中、高剂量组。用D-半乳糖(D-gal)制成亚急性衰老模型,造模成功后治疗组大鼠分别给予石菖蒲-远志不同组分0.6,1.2,1.8 g·kg-1(生药用量)体重ig,正常组和模型组分别给相应生理盐水ig,给药28 d后,用Morris水迷宫实验测试大鼠的空间学习记忆能力,蛋白质免疫印迹(Western blot)检测各组大鼠海马突触蛋白含量。结果:与正常组比较,模型组潜伏期延长(P0.01),药物治疗组与模型组比较,潜伏期缩短(P0.01),石菖蒲-远志药对水提物高剂量组潜伏期短于其低剂量组和挥发油中、低剂量组(P0.05);空间探索实验中水提物高剂量组目标象限时间明显优于其低剂量组(P0.01),且优于挥发油各治疗组(P0.05);石菖蒲-远志药对两种组分均可使AD模型大鼠海马内突触蛋白突触素(Synaptophysin),突触蛋白1(Synapsin1),突触后致密物-95(PSD-95),PSD-93蛋白表达高于D-gal模型组(P0.05),并呈一定的剂量依赖性,但挥发油组分的Synapsin1表达却随着剂量的增加而递减。结论:石菖蒲-远志药对能促进AD模型大鼠海马内突触蛋白的表达,尤以水提物组分效果明显。     

黑骨藤挥发油乳剂抗炎作用及机制

目的:研究黑骨藤挥发油的抗炎作用,阐明挥发油作为药用活性成分的作用机制。方法:制备挥发油乳剂,采用大鼠佐剂性关节炎药理模型,设正常对照组、模型对照组、黑骨藤挥发油乳剂高、低剂量(以挥发油量计为375μL,94μL.kg-1,给药容积均为15 mL.kg-1)治疗组及阳性药(雷公藤多苷片,6.0 mg.kg-1)对照治疗组,造模后,各用药组于致炎后10 d灌胃给药,1次/d,连续给药11 d,正常组及模型组给予等容量(3 mL)蒸馏水,灌胃给药,采用容积法测定其肿胀度;造模后21d,大鼠眼眶取血,采用丙二醛(MDA)测定试剂盒、一氧化氮(NO)测定试剂盒检测血清中MDA、NO的含量。采用醋酸致小鼠毛细血管通透性实验,设正常对照组、黑骨藤挥发油乳剂高、中、低剂量(500,250,125μL.kg-1,给药容积均为20 mL.kg-1)治疗组及阳性药(地塞米松,4 mg.kg-1),灌胃给药,每天1次,连续给药5 d,研究黑骨藤挥发油的抗炎作用。结果:与模型对照组比较,挥发油高、低剂量组大鼠的足趾肿胀值在18～21 d内均有所降低;与空白组比较,模型组大鼠血清中MDA和NO的含量显著升高(P<0.01),与模型组比较,挥发油高、低剂量组均能降低大鼠血清中的MDA含量,高剂量组大鼠血清中的NO含量明显低于模型组(P<0.05),但与空白对照组并无差异;模型组大鼠血清中的NO含量明显高于空白对照组(P<0.01),对大鼠佐剂性关节炎药理模型有治疗效果,可以明显降低模型大鼠血清中的NO,MDA含量,减轻局部病理反应,起到抗炎作用;黑骨藤挥发油可明显抑制醋酸所致小鼠腹腔毛细血管通透性亢进。结论:黑骨藤挥发油具有抗炎作用。     

应用HPLC研究莪术油的药动学

 目的　研究莪术油的大鼠体内药动学。方法　采用高效液相色谱法测定莪术油中标志性成分吉玛酮血浆药物浓度。结果　大鼠尾静脉注射及灌胃给药后莪术油指标性成分吉玛酮药时曲线符合静注和口服的二房室模型,静注给药t_1/2α,t_1/2β分别为9.890,41.53min,灌胃给药K_a为0.479h^-1,t_max为3.284h,c_max为0.501μg·mL^-1。结论　静注给药后吉玛酮在大鼠体内表现为快速分布和消除,口服莪术油吸收较慢。     

柴胡挥发油对大鼠和小鼠的急性毒性研究

目的:观察柴胡挥发油对大、小鼠的急性毒性反应,评价其安全性大小。方法:分别给大、小鼠ig不同剂量的柴胡挥发油,观察急性毒性反应症状、体征、死亡时间和累计死亡率,用Bliss法分别计算半数致死量(LD50)及其95%可信限。结果:柴胡挥发油给大、小鼠ig的急性毒性症状主要有:烦躁、异步态、心率加快、呼吸急促、连续性抽搐,柴胡挥发油给大、小鼠ig的LD50及其95%可信限分别为2.081(1.759 9～2.461 3)mL.kg-1和3.118(2.872 4～3.391 2)mL.kg-1。结论:ig柴胡挥发油对大、小鼠ig可造成急性毒性损伤,有必要对柴胡挥发油的致毒成分、毒性机制、作用靶点等进行深入研究,以期为柴胡及其制剂的安全有效应用提供依据。     

假益智果实挥发油成分分析及其抑菌活性

目的:对假益智果实挥发油进行化学成分研究,并进行抗菌活性测试,为进一步研究开发假益智提供实验依据。方法:使用水蒸气蒸馏法从假益智的果实中提取出挥发油,运用气相色谱-质谱(GC-MS)联用技术进行分析;使用微量稀释法测试挥发油的抗菌活性。结果:假益智果实挥发油提取率为0.17%,检测到42个化合物,鉴定出31个,占挥发油总成分的94.18%。挥发油对四联球菌具有很好的抑菌作用,最小抑制浓度为12.5 g·L-1,对白色葡萄球菌、蜡状芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、大肠埃希菌细菌具有中等强度的抑制作用。结论:本文对假益智果实进行挥发油提取鉴定,其主要成分为萜类、长链烃类化合物。抗菌实验结果表明假益智果实挥发油对四联球菌具有较好的抗菌活性。