家兔眼球组织中高三尖杉酯碱的高效液相色谱分析

高三尖杉酯碱（ｈｏｍｏｈａｒｉｎｇｔｏｎｉｎｅ，ＨＨ）是一种有效的抗急性非淋巴细胞白血病药物。研究发现ＨＨ可抑制体外培养的人眼翼状胬肉成纤维细胞的生长，对增殖性玻璃体视网膜病变（ＰＶＲ）可能具有防治作用。本研究试图建立一种测定眼球组织ＨＨ含量的方法，...     

高三尖杉酯碱抑制翼状胬肉生长13例

高三尖杉酯碱抑制翼状胬肉生长１３例解放军空军广水医院眼科（湖北４３２７２１）张斌自１９９０年３月以来我们用高三尖杉酯碱局部注射法治疗翼状胬肉患者１３例，获效佳，现报告如下。一般资料本组１３例１３只眼，男４例，女９例。年龄２３～７０岁；右眼５例，左眼８...     

不同浓度川芎嗪对人翼状胬肉成纤维细胞的作用

目的观察川芎嗪对体外培养的人翼状胬肉成纤维细胞的抑制作用。方法收集眼科临床手术切除的人翼状胬肉标本,消化分离成纤维细胞,进行体外细胞培养。分别在pH为7．40和pH为600的条件进行,以无血清RPMI1640培养液配制终浓度为4．0mg／ml、2．0mg／ml、1．0mg／ml、0．5mg／ml和0．25mg／ml的川芎嗪药液,0.02％的丝裂霉素C（MMC）作为阳性对照组,pH为740和／或pH为6．00的RPMI1640培养液作正常对照组,对体外培养的胬肉成纤维细胞进行作用。通过光镜观察对细胞进行计数;四甲基偶氮唑盐（MTT）技术检测显示细胞存活率,间接免疫荧光技术检测细胞波形蛋白（Vimentin）的表达。结果细胞计数和MTT法检测结果显示,在pH为740的条件下,与正常1640培养液组比较,4．0mg／ml的川芎嗪对体外培养的人翼状胬肉成纤维细胞均有明显的抑制作用（P〈0．001）。在pH为6．00的条件下,与正常1640培养液组比较,不同浓度的川芎嗪和pH为6．00的1640培养液对人翼状胬肉成纤维细胞均有明显的抑制作用,与pH为6．00的1640培养液组比较,4．0mg／ml的川芎嗪对人翼状胬肉成纤维细胞的抑制作用明显强于其他浓度的川芎嗪,0.5mg／ml和0.25mg／ml的川芎嗪可明显促进人翼状胬肉成纤维细胞的生长（p〈0.001）。结论川芎嗪对人翼状胬肉成纤维细胞的生长具有双重作用,较高浓度的川芎嗪（4．0mg／ml）对人翼状胬肉成纤维细胞的生长有抑制作用。较低浓度的川芎嗪（0.5mg／ml、0.／ml）在pH为6．00的条件下对人翼状胬肉成纤维细胞的生长有保护作用。     

高三尖杉酯对成纤维细胞增殖、凋亡及TGF-β1/Smad信号通路的影响北大核心

目的:探讨高三尖杉酯碱通过TGF-β1/Smad信号通路对人瘢痕疙瘩成纤维细胞(HKF)增殖及凋亡的影响.方法:取第4代对数生长期的HKF细胞,随机分为空白对照组、高三尖杉酯碱组、TGF-β1组、高三尖杉酯碱+TGF-β1组,各组细胞给予相应药物孵育后,CCK-8检测细胞存活率,流式细胞仪检测细胞凋亡率,划痕实验检测细胞迁移能力,Transwell实验检测细胞侵袭能力,qRT-PCR检测Col Ⅰ、Col Ⅲ mRNA表达,蛋白印迹法检测TGF-β1、Smad2、p-Smad2、Smad3、p-Smad3、Bcl-2、Bax蛋白表达.结果:与对照组比较,高三尖杉酯碱组细胞存活率、侵袭细胞数、划痕愈合百分比显著降低,细胞凋亡率、Bax蛋白表达显著升高,ColⅠ、Col Ⅲ、TGF-β1 mRNA及p-Smad2、p-Smad3、Bcl-2蛋白表达显著降低(P＜0.05).TGF-β1组上述指标变化趋势与高三尖杉酯碱组相反,除存活率外与对照组比较差异均有统计意义(P＜0.05).高三尖杉酯碱+TGF-β1组上述指标介于高三尖杉酯碱组和TGF-β1组之间,与高三尖杉酯碱组及TGF-β1组比较差异均有统计意义(P＜0.05).结论:高三尖杉酯碱可抑制HKF细胞增殖,诱导凋亡,降低细胞迁移和侵袭能力,其机制与抑制TGF-β1/Smad信号通路有关.     

小檗碱抑制体外培养的人翼状胬肉成纤维细胞迁移能力的机制研究

目的:探讨小檗碱抑制体外培养翼状胬肉成纤维细胞迁移的药理机制。方法:通过培养临床获取的翼状胬肉组织获得翼状胬肉成纤维细胞,采用终浓度0、20、40、80μmol/L的小檗碱对细胞进行处理,检测细胞迁移相关因子及AMP依赖的蛋白激酶(AMPK)途径关键因子(MMP-1、MMP-2、MMP-9、α-SMA、AMPK、ACC)mRNA及蛋白表达水平变化。结果:随着小檗碱终浓度的提高,AMPK、ACC mRNA表达水平及蛋白表达水平上调;细胞迁移能力降低;MMP-1、MMP-2、MMP-9及α-SMA等因子mRNA表达水平及蛋白表达水平显著降低。结论:小檗碱可通过激活AMPK信号通路抑制体外培养翼状胬肉细胞的迁移能力。     

清开灵和干扰素对翼状胬肉成纤维细胞增殖的影响

目的：研究清开灵注射液、α－干扰素和γ－干扰素对翼状胬肉成纤维细胞体外增殖的影响。方法：用组织培养技术建立翼状胬肉成纤维细胞系。用ＭＴＴ比色法测定清开灵注射液,α－ＩＮＦ和γ－ＩＮＦ对翼状胬肉成纤维细胞增殖的影响。结果：清开灵注射液,α－ＩＮＦ和γ－ＩＮＦ可以明显抑制胬肉成纤维细胞的增殖,并呈剂量依赖效应。结论：清开灵注射液,α－ＩＮＦ和γ－ＩＮＦ均能有效换制体外翼状胬肉成纤维细胞的生长。     

翼状胬肉头部逆行切除术的临床观察

目的：通过治疗组和对照组的比较,确认翼状胬肉头部逆行切除术的效果。方法：对患者进行随机分组,分别采取翼状胬肉头部逆行切除术（治疗组）和翼状胬肉单纯切除术（对照组）。结果：治疗组52例手术,17例复发,对照组46例手术,26例复发。经x2检验,P〈0.05,两组术后效果有显著性差异。结论：翼状胬肉头部逆行切除术治疗翼状胬肉,手术简单且治愈率高。     

生药三尖杉及其易混品种的性状与显微鉴别

生药三尖杉为三尖杉属(Cephalotaxus fortunei Hook．f．)带嫩枝的叶,具有抗癌和抑制骨质增生的作用,尤其对白血病L1210及P388有明显的抑制作用,其主要抗癌有效成分为三尖杉酯碱及高三尖杉酯碱与异三尖杉酯碱。因植物三尖杉与其相近品种在外观形状上较为近似,故生药三尖杉易于错采错用。为了便于真伪鉴别,现将三尖杉及其相近品种的性状及显微比较研究结果报道如下：     

改进逆流分配法与逆流分配法程序计算结果比较

 目的：对改进逆流分配法及逆流分配法进行对比研究。方法：分别对逆流分配法、改进逆流分配法设计电脑运算程序，以3个三尖杉酯碱、 高三尖杉酯碱混合物样品数据进入程序，统计三尖杉酯碱、高三尖杉酯碱分离率。结果：改进逆流分配法工艺过程简化，分离率比逆流分配法提高12%～20%。结论：改进逆流分配法在工艺过程中及时收集起始端(末端)的三尖杉酯碱(高三尖杉酶碱)，在实际生产中简便易行。     

高三尖杉酯碱抑制眼内纤维增生的实验研究

目的 观察高三尖杉酯碱抑制兔眼内纤维增生的效果。方法 建立20只青紫蓝兔右眼细菌性眼内炎模型，随机分为实验组和对照组，每组各10只。两组眼均行玻璃体晶状体切割术，术后第l天，第7天实验组球内注射高三尖杉酯碱0．1mg/0．1ml，对照组注射0．1ml生理盐水。观察术后瞳孔区纤维蛋白渗出情况和玻璃体内纤维增生程度。结果 两组兔术后第l天瞳孔区纤维蛋白渗出比较差异无显著性。第14天和28天玻璃体纤维增生程度实验组明显减轻，与对照组相比，差异有显著性。光学显微镜检查对照组视网膜色素上皮细胞增生明显，实验组无明显增生。结论 高三尖杉酯碱能有效防止眼内纤维增生，副作用较小。     

辛伐他汀联合血塞通软胶囊对酒精性脂肪肝的临床疗效观察

目的:观察辛伐他汀联合血塞通软胶囊治疗酒精性脂肪肝的临床疗效。方法:将2009年6月至2011年8月门诊酒精性脂肪肝患者,随机分为治疗组和对照组各30例。对照组给予辛伐他汀片,每晚一次,每次10mg。治疗组同时加服血塞通软胶囊,每日二次,每次二粒,两组均连续治疗8周,观察两组患者血脂、肝功能指标。结果:两组患者治疗后血脂均较治疗前有显著改善(P<0.05),组间比较差异无统计学意义(P>0.05)。治疗组反弹率(43.3%)明显低于对照组(93.3%)。治疗组ALT、AST较治疗前显著下降(P<0.01);对照组无改善,9例升高;组间比较差异有统计学意义(P<0.01)。结论:辛伐他汀联合血塞通软胶囊治疗酒精性脂肪肝具有保肝降脂的疗效。     

高三尖杉酯碱对HL-60细胞和QGY7703细胞的作用研究

采用MTT法和流氏细胞仪技术,研究了高三尖杉酯碱对HL-60细胞和QGY7703细胞的存活率和细胞周期分布影响.结果表明,高三尖杉酯碱对HL-60细胞的IC50是1.28 umol.L-1,对QGY7703细胞的IC50是0.55 umol.L-1.高三尖杉酯碱处理HL-60细胞24h后,G0-G1期细胞分布有所增加,G2-M期和S期细胞分布有所降低;高三尖杉酯碱处理QGY7703细胞24h后,G2-M期分布略有降低,G0-G1期细胞分布略有增加;高三尖杉酯碱处理HL-60细胞24h后,G0-G1期峰前有亚二倍体峰出现,说明高三尖杉酯碱在所用剂量下能够诱导HL-60细胞发生凋亡.     

消斑通脉合剂对PDGF-BB诱导血管平滑肌细胞增殖的影响

[目的]观察中药复方消斑通脉合剂药物血清对体外培养的VSMCs细胞周期的作用。[方法]体外培养VSMCs,取对数生长期细胞用作实验,MTT法检测不同浓度药物血清对体外培养的VSMCs增殖活力;应用流式细胞仪分析各组细胞周期分布。[结果] MTT法显示药物血清呈剂量依赖性抑制VSMCs增值,高剂量与低剂量比较有统计学差异(P<0.05),流式细胞仪显示药物血清可明显阻滞VSMCs细胞进程,高剂量与低剂量比较有统计学差异(P<0.01)。[结论]中药复方消斑通脉合剂药物血清可以阻滞VSMCs的细胞周期进程,达到抑制VSMCs增殖的作用。     

消斑通脉合剂对血管平滑肌细胞增殖和P21waf1/cip1蛋白表达的影响

目的：探讨中药复方消斑通脉合荆药物血清对血小板源性生长因子（PDGF—BB）诱导的大鼠血管平滑肌细胞（VSMC）增殖与细胞周期分布的影响及相关作用机制。方法：体外培养VSMCs，PDGF—BB刺激VsMCs，采用MTr法检测药物血清对VSMCs增殖的影响；流式细胞仪分析各组细胞周期分布情况；应用Western印迹法检测药物血清对VSMcs中P21waf1/cip1蛋白的表达变化。结果：MTT法显示药物血清呈剂量依赖性抑制VSMCs增值，高剂量与低剂量比较有显著差异（P〈0．05）；流式细胞仪分析结果显示与模型组比较，低剂量与高剂量组明显提高G0／G1期百分率（P〈0．01）、减少s期百分率（P〈0．01），低剂量与高剂量组比较有显著差异（P〈0．05）；Western印迹法显示与模型组比较，高剂量与低剂量可明显提高VSMCs中P21waf1/cip1蛋白表达（P〈0．01），低剂量与高剂量比较有统计学差异（P〈0．01）。结论：中药复方消斑通脉合剂药物血清通过促进VSMCs中P21waf1/cip1。蛋白表达，阻滞VsMcs细胞周期进程，起到抑制VsMcs增殖作用。     

宁血饮干预治疗特发性血小板减少性紫癜临床观察

目的:观察宁血饮干预治疗特发性血小板减少性紫癜(ITP)的临床疗效。方法:特发性血小板减少性紫癜100例(急性42例,慢性58例),随机分为治疗组和对照组各50例。治疗组用强的松或地塞米松和宁血饮联合治疗,对照组用强的松或地塞米松治疗。观察皮下紫癜等出血症状,血小板计数,血小板相关抗体和远期疗效等。结果:急性ITP治疗组与对照组出血症状改善无显著差异性,但治疗组血小板计数、血小板相关抗体、总有效率、远期疗效等指标改善明显优于对照组(P<0.05,P<0.01);慢性ITP治疗组出血症状改善以及血小板计数、血小板相关抗体、总有效率、远期疗效均明显优于对照组(P<0.05,P<0.01);结论:宁血饮干预治疗特发性血小板减少性紫癜疗效好,尤其是慢性ITP疗效突出。     

半边旗提取物5F影响高转移卵巢癌细胞HO-8910PM细胞周期的实验研究

目的:探讨半边旗提取物5F对人高转移卵巢癌细胞HO-8910PM细胞周期的影响及其作用机制.方法:以MTT法检测5F对高转移卵巢癌细胞HO-8910PM细胞增殖的影响;流式细胞术分析5F对HO-8910PM细胞周期的影响;Western blot法分析NF-κB(P65)、FAK的表达及FAK酪氨酸磷酸化水平.结果:不同浓度的5F分别处理细胞24 h后,对HO-8910PM细胞增殖有明显的抑制作用;流式细胞术分析表明5F使G0/G1期的细胞减少,阻断细胞于G2/M期;同时,5F可使NF-κB(P65)的表达下调,上调FAK的表达,并降低FAK酪氨酸磷酸化水平.结论:5F对HO-8910PM细胞周期的影响与NF-κB(P65)表达下调及FAK的表达上调有关.     

芒针透刺加通痹药熨包热敷治疗面神经炎62例临床观察

目的:观察芒针透刺加通痹药熨包热敷治疗面神经炎的疗效.方法:将124例本病患者随机分为两组各62例,治疗组采用芒针透刺加通痹药熨包热敷治疗,对照组采用传统毫针治疗.结果:总有效率治疗组为93.5%,对照组为64.5%,治疗组优于对照组(P＜0.05).结论:芒针透刺加通痹药熨包热敷治疗面神经炎疗效较好.     

天麻钩藤饮对胰岛素促自发性高血压乳鼠心肌成纤维细胞增殖的影响

目的观察天麻钩藤饮对胰岛素诱发的心肌成纤维细胞增殖升高的影响。方法从1日龄的自发性高血压乳鼠取得心肌,进行心肌成纤维细胞培养,并通过显微镜和免疫组化鉴定,观察天麻钩藤饮含药血清对胰岛素所致心肌成纤维细胞增殖升高的作用;以MTT比色法和3-H-TdR掺入法检测细胞增殖情况,以流式细胞仪检测细胞DNA周期。结果两种细胞增殖检测方法均显示天麻钩藤饮对胰岛素所致的心肌成纤维细胞增殖升高有抑制作用;胰岛素造模后细胞增殖升高主要是促进细胞从G0/G1期向S期转化,使细胞DNA合成增加而促进细胞增殖;天麻钩藤饮组与模型对照组比较G0/G1期百分率明显增加、S期百分率明显减少。结论天麻钩藤饮对胰岛素所致细胞增殖有抑制作用;可通过将细胞阻抑在G0/G1期,抑制其向S期转化从而抑制细胞增殖。这可能是天麻钩藤饮临床上治疗高血压病和防治心肌纤维化的作用机理之一。     

鸦胆子苦醇对三阴性乳腺癌细胞凋亡的影响

目的: 研究鸦胆子苦醇(BRU)对三阴性乳腺癌MDA-MB-231细胞的凋亡影响。方法:用BRU 处理 MDA-MB-231 细胞。采用 CCK-8 法检测MDA-MB-231细胞生长抑制率,流式细胞仪检测细胞的凋亡率和周期。结果:BRU对三阴性乳腺癌MDA-MB-231细胞生长抑制率测定结果显示,不同浓度的BRU对MDA-MB-231细胞生长抑制率与对照组相比存在明显差异,均具有统计学意义(均P<0.05),且呈时间与浓度依赖性,凋亡结果显示,经5、10、20、40 μmol/L BRU作用细胞48 h后,随着浓度增高细胞的凋亡率也相应提高,与空白对照组相比差异均有统计学意义(均P<0.05)。周期结果提示经5、10、20、40 μmol/L BRU作用细胞48 h后,随药物浓度增加,处于G₀/G₁期的细胞比例逐渐增加,S/G₂/M期的细胞比例下降,与空白对照组相比差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论:中药鸦胆子苦醇在体外能抑制三阴性乳腺癌MDA-MB-231细胞的生长,并能诱导该细胞凋亡。