Intervention Study of SanHuangTang on Gene Expression of ESBLs within E.coli

目的:观察三黄汤水煎剂对E.coli细胞内编码ESBLs基因TEM,CTX-M,SHV,OXA以及编码膜外排泵蛋白AcrAB-TolC基因Acr-AB表达的干预效果,探讨中药对细菌耐药性逆转的可能性.方法:采集鉴定ESBLs阳性E.coli菌株30株,用试管二倍稀释法确定三黄汤的MIC(最低抑菌浓度),选取低于MIC的不同浓度在规定时间下培养耐药E.coli,测定不同浓度逆转效果和最佳逆转浓度,并以最佳逆转浓度培养24小时后提取菌体的总RNA进行RT-PCR,检测TEM,CTX-M,SHV,OXA,Acr-AB的表达量是否受到影响.结果:三黄汤水煎剂对ESBLs阳性大肠埃希菌最低抑菌浓度为0.2 g/mL;对照组与用药组相比,OXAQ差异显著,有统计学意义(P＜0.05),而OXAJ无统计学意义(P＞0.05),5个基因中,编码OXA型ESBLs的基因表达量在干预前后有统计学意义(P＜0.05).结论:中药汤剂能通过抑制ESBLs阳性E.coli内ESBLs的活性和表达量,降低细菌耐药性,且其逆转作用与中药浓度有关;0.2 g/mL三黄汤对ESBLs阳性E.coli体内的ESBLs编码基因OXA有抑制作用,可使其表达量下降;尚未发现三黄汤对受试菌TEM,CTX-M,SHV,Acr-AB基因有明确的干预作用.     

三黄汤对E.coli内ESBLs基因表达的干预性研究

目的:观察三黄汤水煎剂对E.coli细胞内编码ESBLs基因TEM,CTX-M,SHV,OXA以及编码膜外排泵蛋白AcrAB-TolC基因Acr-AB表达的干预效果,探讨中药对细菌耐药性逆转的可能性。方法:采集鉴定ESBLs阳性E.coli菌株30株,用试管二倍稀释法确定三黄汤的MIC(最低抑菌浓度),选取低于MIC的不同浓度在规定时间下培养耐药E.coli,测定不同浓度逆转效果和最佳逆转浓度,并以最佳逆转浓度培养24小时后提取菌体的总RNA进行RT-PCR,检测TEM,CTX-M,SHV,OXA,Acr-AB的表达量是否受到影响。结果:三黄汤水煎剂对ESBLs阳性大肠埃希菌最低抑菌浓度为0.2g/mL;对照组与用药组相比,OXAQ差异显著,有统计学意义(P<0.05),而OXAJ无统计学意义(P>0.05),5个基因中,编码OXA型ESBLs的基因表达量在干预前后有统计学意义(P<0.05)。结论:中药汤剂能通过抑制ESBLs阳性E.coli内ESBLs的活性和表达量,降低细菌耐药性,且其逆转作用与中药浓度有关;0.2 g/mL三黄汤对ESBLs阳性E.coli体内的ESBLs编码基因OXA有抑制作用,可使其表达量下降;尚未发现三黄汤对受试菌TEM,CTX-M,SHV,Acr-AB基因有明确的干预作用。     

黄连解毒汤对耐药性大肠杆菌的逆转作用

目的:探讨黄连解毒汤对耐药性大肠杆菌逆转作用的影响.方法:采用纸片法筛选产超广谱β-内酰胺酶大肠杆菌,确定黄连解毒汤的最低抑菌质量浓度,选取低于最低抑菌浓度的黄连解毒汤培养超广谱β-内酰胺酶大肠杆菌,确定最佳逆转效果的培养时间和药物浓度,并测定逆转率.结果:黄连解毒汤对大肠杆菌ATCC8099最低抑菌浓度为0.6 g·L-1,逆转超广谱β-内酰胺酶大肠杆菌的最佳培养时间为30 h,最佳质量浓度为0.3 g·L-1,对氨苄西林药敏逆转率为60.0％、头孢他啶药敏逆转率为66.7％、头孢美唑药敏逆转率为75.0％,头孢曲松药敏逆转率为66.7％.结论:黄连解毒汤对耐药性大肠杆菌逆转作用确切,可作为逆转耐药性大肠杆菌一种途径.     

黄连解毒汤与五味消毒饮加减治疗播散性神经性皮炎30例

目的:观察黄连解毒汤合五味消毒饮加减治疗播散性神经性皮炎的疗效。方法:采用黄连解毒汤合五味消毒饮加减内服并外洗治疗播散性神经性皮炎30例。结果:总有效率93.33%。结论:黄连解毒汤合五味消毒饮加减治疗播散性神经性皮炎有泻火解毒的疗效。     

古典清热方抗菌作用实验研究

本文选择了具有清热解毒功效的五个古典方:银翘散《温病条辨》、普济消毒饮《医方集解》、黄连解毒汤《外台秘要》、五味消毒饮《医家金鉴》及葛根芩连汤《伤寒论》进行了抗菌作用的实验研究。一、药物制备: 将原方按常规煎法制成水煎剂,每剂最后浓缩至25ml,为实验用原液。二、实验动物: 昆明杂种小鼠。三、体内实验。取小鼠随机分为治疗组、预防组及对照组。治疗组和预防组均按成人剂量50倍(等效量)灌胃给药(银翘散140g/kg;普济消毒饮67.5g/kg;黄连解毒汤25g/kg;五味消毒饮55g/kg;葛根芩连汤27.5g/kg;土霉素0.42g/kg)。观察腹腔注射细菌悬液后24hr内动物死亡情况,判断体内抗菌效果。预防组在注射菌液前一天给药;治疗组在注射菌液同时给药。     

应用压电微生物传感仪研究五味消毒饮抑菌作用的量效关系

目的 研究五味消毒饮对细菌生长、代谢的影响及量效关系。方法 用多通道串联式压电传感仪（MSPQC）测定五味消毒饮对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、绿脓杆菌生长代谢影响的频移曲线,根据曲线中细菌的检出时间（FDT）以及频移的大小得出最低抑菌浓度（MIC）和最低杀菌浓度（MBC）,绘制出五味消毒饮的质量浓度与FDT的线性关系曲线,进行量效关系分析。用传统试管稀释法进行平行实验。结果 五味消毒饮对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、绿脓杆菌有不同程度的抑制作用,质量浓度越高抑菌效果越强,其中对大肠杆菌的抑制作用最强,24 h内对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、绿脓杆菌的MIC分别为0.7、0.8、0.8 g/mL,MBC均为0.9 g/mL。结论 用MSPQC检测抑菌类中药的量效关系具有实时、灵敏、定量、快速等优势。     

黄连解毒汤所含黄芩苷、京尼平苷对K562/ADM细胞多药耐药相关基因表达的影响

目的:研究黄连解毒汤中黄酮成分对人类红白血病耐药细胞(K562/ADM细胞)的增殖抑制作用及相关因子表达的影响,并对其作用机制进行初步的探讨。方法:采用MTT法检测黄连解毒汤中黄酮成分对细胞增殖抑制的影响,半定量RT-PCR法检测mdr-1,TopoⅡ及Caspase-3基因的表达。结果:10μg/ml黄芩苷、20μg/ml京尼平苷对增值抑制作用明显,PCR结果显示50μg/ml黄芩苷、100μg/ml京尼平苷均可以通过降低mdr-1、TopoⅡ的表达,升高Caspase-3基因的表达,发挥逆转白血病细胞MDR的作用。结论:黄连解毒汤中黄芩苷、京尼平苷为其干预与逆转肿瘤多药耐药的有效成分,其作用机制可能与改变mdr-1、TopoⅡ及Caspase-3基因的表达有关。     

清热解毒法体外抑菌作用的实验研究

目的通过体外抑菌实验对清热解毒代表方五味消毒饮的机理做探索性研究,从而应对抗生素滥用以及各种原因引起的细菌耐药带来的一系列问题。方法通过纸片扩散法(K-B法)和试管二倍稀释法对五味消毒饮药物敏感性和最小抑菌浓度进行测定。结果药物敏感性:金黄色葡萄球菌对五味消毒饮提取液高度敏感,大肠埃希菌、绿脓杆菌、乙型溶血性链球菌对五味消毒饮提取液中度敏感。最小抑菌浓度:五味消毒饮对金葡菌的最小抑菌浓度为31.25 mg/m L,对大肠埃希菌的最小抑菌浓度为62.50 mg/m L,对绿脓杆菌的最小抑菌浓度为125 mg/m L,对乙型溶血性链球菌的最小抑菌浓度为125 mg/m L。结论通过体外抑菌实验,证明五味消毒饮具有抑制常见菌的作用,且对金黄葡萄球菌具有较好的抑制作用。     

黄连与盐酸小檗碱对幽门螺杆菌的体外抗菌活性

目的:探讨黄连与盐酸小檗碱对幽门螺杆菌(Helicobacterpylori,H.pylori)的体外抗菌活性。方法:采用纸片扩散法测量抑菌环大小和液体倍比稀释法测定黄连和盐酸小檗碱的最小抑菌浓度(MIC)。结果:对于H.pylori的MIC黄连70%酒精提取物为0.0156g/ml,盐酸小檗碱为0.025g/ml。结论:黄连与盐酸小檗碱对H.pylori均具有一定的抗菌活性,黄连的抗菌活性相对较好。     

痤疮丙酸杆菌对中药痤疮饮敏感性的探讨

目的:观察自制中药痤疮饮对痤疮丙酸杆菌抑制作用。方法:采用琼脂稀释法检测自制中药痤疮饮、红霉素、米诺环素、克林霉素对痤疮丙酸杆菌敏感性。结果:痤疮饮MIC为8.32～33.28?/ml,红霉素、米诺环素、克林霉素MIC分别为≤0.5μg/ml、2μg/ml、4μg/ml,痤疮饮与3种抗菌素最终浓度相近。结论:中药痤疮饮与红霉素、米诺环素、克林霉素作用相同,均具有良好的抑菌效果。