大黄素对狼疮性肾炎成纤维细胞生物学行为的影响

目的：观察中药大黄素对狼疮性肾炎（ＬＮ）肾间质成纤维细胞生物学行为的影响。方法：将ＬＮ患者肾活检组织体外培养分离出成纤维细胞，分别用＾３Ｈ－ＴｄＲ掺入法和流式细胞术检测不同温度的大黄素对人肾成纤维细胞增殖，凋亡及ｃ－ｍｙｃ蛋白水平表达情况。结果：大黄素能明显抑制人肾成纤维细胞的分裂增殖，并通过促使ｃ－ｍｙｃ蛋白高水平表达诱导细胞发生凋亡。结论：大黄素有抑制成纤维细胞生殖和促其凋亡的作用，从而达到减     

柴胡皂甙d上调人急性早幼粒白血病细胞糖皮质激素受体mRNA对细胞生长的影响

目的：观察柴胡皂甙ｄ（ＳＳｄ）对人急性早幼粒白血症细胞（ＨＬ６０）糖皮质激素受体（ＧＲ）ｍＲＮＡ表达的调节作用及对细胞生长的影响。方法：用从柴胡中提取的单体成分ＳＳｄ，以＾３Ｈ－胸腺嘧啶（＾３Ｈ－ＴｄＲ）掺入法和流式细胞仪观察细胞生长，用Ｎｏｒｔｈｅｒｎ ｂｌｏｔ分析ＳＳｄ对ＧＲ ｍＲＮＡ的改变。结果：经ＳＳｄ作用后，ＨＬ６０细胞＾３Ｔ－ＴｄＲ掺入率明显降低，呈时间和剂量依赖关系，ＳＳｄ１０μｇ／     

丹参对狼疮性肾炎成纤维细胞增殖、凋亡及c-myc蛋白表达的影响

观察丹参对人肾间质成纤维细胞生物学行为的影响。用狼疮性肾炎患者肾活检组织培养分离的成纤维细胞，观察丹参对人肾成纤维细胞＾３Ｈ－ＴｄＲ掺入率的影响，并用游戏工细胞仪检测了细胞凋亡及ｃ－ｍｙｃ蛋白表达情况。丹参对人肾成纤维细胞增殖有抑制作用，并通过使ｃ－ｍｙｃ蛋白高水平表达而诱导细胞凋亡。     

肾康注射液对肾小球系膜细胞增殖的影响

为了探讨中药肾康注射液（ＳＫ）对肾小球系膜细胞增殖的影响,笔者采用人的肾小球系膜细胞进行体外培养,用氚标记的胸腺嘧啶核苷（＾３Ｈ－ＴｄＲ）掺入法观察其增殖情况。结果：不同肾康注射液剂量组＾３Ｈ－ＴｄＲ掺入率无明显低于对照组,提示肾康注射液可明显抑制人肾小球系膜细胞增殖。     

中药清肝饮对在鼠肝贮脂细胞和成纤维细胞增殖效应的调控作用

目的：研究中药清肝饮对人成纤维细胞（ＨＬＦ）、大鼠肝贮脂细胞（Ｉｔｏ细胞）增殖生性的影响。方法：采用胶原酶灌流,密度梯度离心方法分离大鼠肝Ｉｔｏ细胞,以＾３Ｈ－胸腺嘧啶（＾３Ｈ－ＴｄＲ）和＾３Ｈ－脯氨酸（＾３Ｈ－Ｐｒｏ）的掺入法观察细胞增殖效应。结果：清肝馀结ＨＬＦ、Ｉｔｏ细胞具有显著的抑制细胞增殖和胶原合成作用,并随清肝饮浓度的升高而作用增强。结论：清肝饮对肝纤维化相关细胞ＨＬＦ、Ｉｔｏ细胞增殖     

青蒿琥酯松弛气管平滑肌作用机制实验

为探讨青蒿琥酯松弛气管平滑肌的作用机制。采用放射配位体测定法和Ｆｕｒａ－２／ＡＭ荧光分光光度计测定法。结果：青蒿琥酯１０＾－７～１０＾－４ｍｏｌ／Ｌ,均为０．８ｎｍｏｌ／Ｌ［＾３Ｈ］－ＱＮＢ与ＳＤ大鼠唾液腺Ｍ３－Ｒ（受体）的结合无明显的影响（ｎ＝３,Ｐ〉０．０５）;１００．０μｍｏｌ／Ｌ青蒿琥酯对１０．０μｍｏｌ／Ｌ ＣＰＡ（Ｃｙｃｌｏｐｉａｚｏｎｉｃ ａｃｉｄ）诱发培养的豚鼠气管平滑肌细胞胞内钙     

扶正化瘀方对3T3细胞殖和胶原生成的影响

为了探讨扶正化瘀方抗肝纤维化的作用机制。以体外培养的ＮＩＨ／３Ｔ３细胞作为肝脏成纤维细胞的替代模型，用扶正化瘀方药物血清，以１０％的浓度被添加到培养液中，通过［＾３Ｈ］ＴｄＲ掺入法和免疫细胞化学，观察药物血清对３Ｔ３细胞［＾３Ｈ］－ＴｄＲ掺入量和胶原生成的影响。结果表明药物血清组［＾３Ｈ］－ＴｄＲ掺入量明显少于正常大鼠血清组。药物血清组Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ型胶原量均明显低于正常大鼠血清组，其中Ⅰ、Ⅲ型胶原更     

利肾口服液拮抗细胞因子对系膜细胞影响的研究

探讨利肾口服液治疗系膜细胞增殖型肾炎的机理。以肾小球系膜细胞培养技术,＾３Ｈ－ＴｄＲ掺入测定法。结果：利肾口服液高、中剂蜈组＾３Ｈ－ＴｄＲ掺入值极显著低于空白组和ＩＬ－１、ＩＬ－６、ＴＮＦ组（Ｐ〈０．０１）;ＩＬ－１、ＩＬ－６、ＴＮＦ组＾３Ｈ－ＴｄＲ掺入值极显著高于空白组（Ｐ〈０．０１）。提示：直接抑制系膜细胞和拮抗ＩＬ－１、ＩＬ－６、ＴＮＦ刺激系膜细胞异常增殖是利肾口服液治疗以系膜细胞增殖为主要     

蛇床子素和蛇床子总香豆素对肾阳虚小鼠免疫功能的影响

采用醋酸氢化可的松肾阳鼠模型，观察蛇床子素和蛇床子总香豆素对肾阳虚，观察蛇床子素和蛇床子总香豆素对肾阳虚小鼠疫功能的影响。结果：肾阳虚组与正常对照组比较，腹巨噬细胞吞噬百分率和吞噬指数、血清溶血清５０％溶血值、脾淋巴细胞＾３Ｈ－ＴｄＲ掺入数等指标明显降低；肾阳虚用ｏｓｈｔｏｌ及ＴＣＲ组与肾阳虚小鼠比较，上述各项指标均有显著提高（Ｐ＜０．０５，＜０．０１）。提示ｏｓｔｈｏｌ和ＴＣＲ可以增强肾阳虚小鼠     

水蛭中氨基酸成分与人白介素—6伍用对^60Co—γ照射小白鼠造血功能的 …

模拟临床放射治疗对实验小白鼠进行＾６０Ｃｏ－γ照射,研究中药水蛭中氨基酸成分对人白介素促进小白鼠造血功能的影响,结果表明：ＨＡＡ与ＨＩＬ－６伍用比单独应用ＨＩＬ－６时对血小板（ＰＬＴ）升高率高１０．７％,对白细胞（ＷＢＣ）升高率高７．０％,对红细胞（ＲＢＣ）的升高率高３．９％,Ｐ〈０．０５。     

柿叶黄酮对晚期氧化蛋白产物诱导的血管外膜成纤维细胞增殖的影响

目的:观察柿叶黄酮对晚期氧化蛋白产物(AOPP)诱导的血管外膜成纤维细胞增殖的影响.方法:体外培养NIH-3T3细胞,应用柿叶黄酮与晚期氧化蛋白产物共同进行作用并设立对照进行比较,采用非放射性的MTS/PES法确定成纤维细胞的增殖状态.结果:各组的细胞增殖率分别为对照组(1.789±0.299);AOPP 100 μg/ml组(2.064±0.141);AOPP 50 μg/ml组(2.149±0.218);AOPP 10 μg/ml组(2.108±0.165),AOPP 1 μg/ml组(2.124±0.131);AOPP 100 ng/ml组(2.087±0.125);柿叶黄酮50 μg/ml组(1.714±0.179);AOPP 50 μg/ml联用柿叶黄酮50 μg/ml组(1.807±0.105).统计分析显示低至100 ng/ml的AOPP仍能明显刺激成纤维细胞的增殖(P＜0.05).柿叶黄酮单独作用对成纤维细胞增殖率无影响(P＞0.05);柿叶黄酮对AOPP诱导的成纤维细胞增殖有明显的抑制作用(P＜0.05).结论:柿叶黄酮能明显抑制由晚期氧化蛋白产物刺激的血管外膜成纤维细胞增殖.     

大黄素对人胚肺成纤维细胞的影响

目的:探讨大黄素在抗肺纤维化中的作用。方法:采用体外细胞培养、免疫组化、透射电镜和同位素检测等技术,比较大黄素作用下人胚肺成纤维细胞(LF)的增殖和其分泌的白细胞介素(IL)-6的水平,检测大黄素作用下人胚 LF 电镜下的形态学特征。结果:(1)大黄素能够抑制人胚 LF 的增殖,并与其浓度、作用时间有关,大黄素高浓度组的抑制效果明显优于低浓度组,并随着时间延长其作用也明显增强;(2)在 IL-1诱导时,大黄素可以降低人胚 LF 分泌 IL-6的水平;(3)大黄素组人胚 LF 形态上与对照组比较差异无显著性。结论:大黄素具有抑制人胚 LF 增殖和抑制 IL-1刺激人胚 LF 分泌 IL-6作用。     

大黄素对肝星状细胞增殖及细胞外信号调节激酶的影响

目的:观察大黄素对HSC-T6细胞增殖及细胞外信号激酶(ERK1)表达的影响。方法:将培养细胞分成正常组和大黄素不同浓度干预组(大黄素终浓度分别为20μmol/L、40μmol/L、60μmol/L),采用MTT法观察大黄素对HSC-T6增殖的影响;采用流式细胞仪观察各组细胞周期的变化;采用反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)半定量法观察ERK1mRNA的表达;采用免疫细胞化学SABC法,观察HSC-T6 ERK1表达的变化。结果:不同浓度大黄素对HSC-T6的增殖均有抑制作用(与正常组比较P0.05,P0.01),且呈一定的量效关系。大黄素作用HSC-T6细胞后,G0/G1期增加,S期减少;当浓度为40～60μmol/L时,G2/M期减少(与正常组比较均P0.05)。正常组HSC-T6有ERK1mRNA表达,而大黄素使ERK1mRNA的表达显著降低,(与正常组比较P0.05,P0.01)。正常组HSC-T6 ERK1阳性均强表达,大黄素使ERK1阳性表达细胞数量减少,阳性减弱。结论:大黄素对HSC-T6细胞增殖有抑制作用,其作用与阻滞细胞于G0/G1期、抑制其ERK1表达有关。     

人参二醇、三醇皂苷对人骨髓造血祖细胞增殖作用的研究

目的：探讨人参二醇皂苷(panaxadiol saponin,PDS)和三醇皂苷(panaxtrol saponin,PTS)对骨髓造血祖细胞增殖的作用。方法：从人参总皂苷进一步分离纯化出PDS和PTS,用体外造血祖细胞集落形成技术,观察PDS、PTS对小鼠骨髓红系祖细胞(CFU—E、BFU—E)、粒单系祖细胞(CFU—GM)和多向祖细胞(CFU—Mix)的刺激增殖作用。结果：不同浓度的PDS(2．5～200μg／m1)可促进造血祖细胞增殖;CFU—E,BFU—E,CFU—GM和CFU—Mix集落产率均显著高于对照组(P<0．05),提高率(％)分别达54．9±6．3、48．8±5．1、27．6±4．2和48．9±3．9。而PTS在同样浓度时,CFU—E、BFU—E产率均显著低于对照组(P<0．05)：终浓度为200μg／ml时,CFU—E、BFU—E集落产率为零。在CFU—GM培养中,12．5μg／ml浓度的PTS使集落产率提高(29．7±2．2)％(P<0．05);而100μg／ml和200μg／ml的PTS却出现对CFU—GM的抑制作用,抑制率分别为(48．6±3．9)％和100％,、结论：PDS是总皂苷内促进造血的有效成分,而PTS对红系祖细胞具有抑制作用,对粒-单系祖细胞的作用呈剂量依赖关系。     

大黄素对人结肠癌HT-29细胞体外增殖的抑制作用

目的观察大黄素对人结肠癌细胞株HT-29体外增殖的抑制作用。方法取对数生长期的HT-29细胞,按每孔5×103个细胞接种于96孔板,贴壁24 h后换液,分为对照组和实验组(分别含有12.5μM、25μM、50μM、100μM大黄素),共5组。每组均设6个复孔,于37°C、5%CO2孵箱中分别培养24 h、48 h和72 h。采用MTT比色法检测细胞活力;倒置显微镜显像观察细胞数量变化;流式细胞仪检测细胞凋亡率及周期分布;分光光度法检测Caspase-3酶蛋白活性。结果①MTT比色法显示,处理24 h时,与对照组比较,大黄素50μM、100μM组细胞抑制率差异有统计学意义(P<0.05),而大黄素12.5μM、25μM组抑制率差异无统计学意义(P>0.05)。与对照组比较,处理48 h及72 h后大黄素12.5μM、25μM、50μM、100μM组的细胞抑制率差异有统计学意义(P<0.05);大黄素各浓度组处理48 h及72 h后的抑制率与同浓度组处理24 h比较,抑制率升高,差异有统计学意义(P<0.05);大黄素各浓度组处理72 h后的抑制率与同浓度组处理48 h比较抑制率升高,差异有统计学意义(P<0.05)。②倒置显微镜观测显示,对照组多为类圆形成团生长,经各浓度大黄素处理后,细胞体积缩小、间隙变大,细胞数减少。③流式细胞仪检测显示,对照组G2/M期细胞比率明显高于大黄素各浓度组,差异有统计学意义(P<0.05);对照组G0/G1期细胞比率明显高于大黄素25μM、50μM、100μM浓度组,差异有统计学意义(P<0.05);对照组与12.5μM大黄素组G0/G1期细胞比率差异无统计学意义(P>0.05);对照组S期细胞比率明显低于大黄素各浓度组,差异有统计学意义(P<0.05)。与对照组比较,大黄素12.5μM、25μM、50μM、100μM组HT-29细胞凋亡率增加,差异有统计学意义(P<0.05)。④与对照组比较,大黄素各浓度组Caspase-3酶蛋白活性显著增高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论大黄素抑制人结肠癌细胞株HT-29体外增殖,其作用呈浓度、时间依赖性;大黄素能够阻滞HT-29细胞周期,并激活Caspase-3诱导细胞凋亡。     

羟基喜树碱对人胚肺成纤维细胞HFLl生长的影响

目的观察羟基喜树碱（HCPT）对体外培养的人胚秭成纤维细胞（HFLI）的增殖抑制和促凋亡作用。,方法采川四甲块偶氮唑蓝法（MTT）检测不同浓度的HCVF对HFI．1细胞作用24h、48h、72h的增殖抑制效果,计算细胞生长抑制率和半数抑制量（IC50）,确定HCPT抑制HFL1细胞增殖的最佳给药浓度和最佳作用时间;姬姆萨染色观察细胞形念学变化;流式细胞仪分析细胞周期;琼脂糖凝胶电泳观察捌亡细胞的DNA梯度。对所得数据用SPSS15．0软件进行统计分析。结果HCPT对HFL1细胞增殖有明显的抑制作用,在0．008-32mg／L范围内呈时间和剂量依赖性;与对照组比较,各实验组24h、48h、72hA值及细胞生长抑制率差异有统计学意义（P〈0．05,P〈0．01）HCPT作用HFL1细胞48h时的IC50为0．466mg／L,故确定48h、0．5mg／L为最佳作用时间和最佳给药浓度;0．5mg／I．HCPT作用HFL1细胞24h后,Cu,／G．期细胞所占比例为（50．46±3．91）％;作用72h后,G0／G．期细胞所占比例为（88．19±2．13）％,怀对照组比较,其余各组各期细胞所占比例差异均有统计学意义（P〈0．05,P〈0．01）;姬姆萨染色显示,HFLI细胞形态发生明显变化;琼脂糖凝胶电泳可见明显的DNA梯度带形成。结论HCVF对体外培养的HLI细胞具有抑制增殖和诱导凋亡作用,可能是一种潜在的抗肺纤维化的药物。     

芦荟大黄素对动脉损伤后血管平滑肌细胞增殖的影响

目的 :探讨中药大黄的活性提取成分———芦荟大黄素对兔髂动脉损伤后离体培养的平滑肌细胞的增殖动力学的影响。方法 :纯种日本大耳白兔髂动脉内皮剥脱术后 48h ,取中膜做平滑肌细胞原代培养。指数增长期中的平滑肌细胞同步化于G0 期后 ,加入浓度梯度为 1 0 - 1 ～ 1 0 - 5g/L的芦荟大黄素于含 1 0 %胎牛血清的细胞培养液中 ,2 4h后 ,用3H TdR脉冲标记 6h ,然后测平滑肌细胞中TdR掺入量 (cpm ,每份样品每分钟脉冲数 )。同样地 ,细胞同步化于G0 期后 ,加入 2 0mg/L芦荟大黄素于含 1 0 %胎牛血清的细胞培养液中 ,作用 2 4h后 ,用流式细胞仪对细胞周期时相进行了测定。以上两实验与对照组加入等体积的细胞培养液。结果 :药物组与对照组比较 ,3H TdR的掺入量有显著性差异 (P <0 0 5 ) ,药物浓度为 1 0 - 1 ～ 1 0 - 2g/L时 ,抑制率 (对照组cpm -药物组cpm/对照组cpm× 1 0 0 % )高达 90 %以上。药物对平滑肌细胞的抑制呈剂量依赖关系 ,药物浓度越高 ,抑制作用越大。与对照组比较 ,加入芦荟大黄素后 ,G0 /G1 期细胞百分比升高 ,S期百分比下降。细胞由G0 期向S期的转化受到阻滞。结论 :芦荟大黄素是一种强平滑肌细胞抑制剂 ,这种药理作用在体内可能有利于减轻平滑肌细胞的增殖 ,从而减轻导致动脉损伤后再狭?     

人参皂甙对CD34+造血干/祖细胞的增殖和分化作用

目的：探索人参皂甙（ＧＳ）对ＣＤ３４＾＋造血干／祖细胞的刺激增殖和诱导分化作用。方法：采用免疫磁珠法（ＭＡＣＳ）分离纯化脐血ＣＤ３４＾＋细胞，在造血细胞半固体和液体培养体系中加入不同浓度的ＧＳ，检测对ＣＤ３４＾＋造血干／祖细胞增殖，形成祖细胞集落的提高率，并用流式细胞仪检测液体培养后细胞表面标记的变化。结果：ＧＳ（５～５０μｇ／ｍｌ）能提高ＢＦＵ－Ｅ、ＣＦＵ－Ｅ、ＣＦＵ－ＧＭ、ＣＦＵ－ＧＥＭＭ集落