一氧化氮在定心方防治大鼠缺血再灌注性心律失常中的作用

目的：研究一氧化氮(NO)在大鼠缺血再灌注性心律失常中的作用,以及定心方防治心律失常的NO机制。方法：大鼠冠状动脉结扎造成心肌缺血,松开结扎线造成缺血再灌注模型,观测NO激动剂及拮抗剂对NO及心律失常的影响,进一步观察定心方对NO及心律失常的作用。结果：NO升高时,心律失常的发生减少,定心方能增加心脏血中NO含量。结论：NO与心律失常的发生呈负相关,定心方能通过增加血中NO含量而防治心律失常。     

定心方对缺血再灌注心律失常大鼠心肌细胞凋亡的影响

定心方(Dingxin Recipe,DXR)是我校附属南方医院心律失常专科经验方,临床研究表明其对多种心律失常有显著疗效[1]。心肌缺血再灌注损伤(Ischemia reperfusion injury,IRI)后发生的严重心律失常是阻碍缺血心肌从再灌注疗法中获得最佳疗效的主要原因,心肌细胞的凋亡参与了心肌IRI     

定心方及丹参酮防治大鼠缺血再灌注性心律失常的NO机制研究

目的 :研究定心方和丹参酮防治大鼠缺血再灌注性心律失常的一氧化氮 (NO)机制。方法 :大鼠冠状动脉结扎造成心肌缺血 ,松开结扎线造成缺血再灌注模型 ,观测定心方及丹参酮对 NO及心律失常的影响。结果 :NO升高时 ,心律失常的发生减少 ,定心方和丹参酮均能增加心脏血中 NO含量 ,减少心律失常的发生。结论 :定心方和丹参酮能通过增加血中 NO含量而防治心律失常。     

定心方对大鼠缺血及再灌注心律失常的保护作用及对核因子κB活化的影响

目的研究定心方对大鼠缺血及再灌注心律失常的保护作用及对心肌组织核因子(NF)κB活化的影响。方法用冠状动脉结扎及再松开的方法制备缺血及再灌注心律失常动物模型;记录导联心电图,对心律失常进行评分;常规HE染色观察心肌组织的病理改变;免疫组化法检测心肌组织NF-κB的表达。结果定心方干预后缺血及再灌注心律失常明显减轻(P<0.01),心肌组织病理改变减轻,心肌组织NF-κB的表达明显减少(P<0.01)。结论定心方对大鼠缺血及再灌注心律失常具有良好的保护作用,抑制NF-κB的活化是其机制之一。     

定心方防治心肌缺血再灌注心律失常大鼠的心肌蛋白质组初步研究

目的:观察心肌缺血再灌注心律失常大鼠心肌蛋白质组表达谱及定心方对其的干预作用。方法:采用冠脉结扎再松开的方法制备动物模型,采用双向凝胶电泳及计算机图像分析系统对心肌总蛋白进行分离分析。结果:模型组动物发生各种心律失常,多个蛋白质的表达发生了变化,定心方作用后,心律失常有所减轻,蛋白质表达谱也发生变化。结论:缺血再灌注心律失常的发生及定心方的干预作用可能与心肌某些蛋白质表达的变化有关。     

冰片对大鼠缺血再灌注模型视网膜单链糖蛋白ICAM-1表达的影响

目的 观察灌胃及外用冰片对眼部缺血再灌注损伤大鼠视网膜ICAM-1表达的影响.方法 制作大鼠眼部缺血再灌注模型,应用激光显微镜及生物系统分析软件观察大鼠灌胃及外用冰片对缺血再灌注损伤中视网膜ICAM-1表达的影响.结果 冰片灌胃和冰片外用均可降低ICAM-1的表达,造模后24 h,与模型组比较均有显著性差异(P<0.01).结论 冰片可降低缺血再灌注时ICAM-1的表达,抑制缺血再灌注引起的视网膜损伤.     

定心方对家兔心肌缺血及再灌注损伤的保护作用和抗心律失常作用的研究

目的:研究定心方(DXR)抗兔心肌缺血及再灌注损伤和抗心律失常作用。方法:兔冠状动脉双重结扎造成心肌梗塞,观察各组心律失常情况并检测血浆超氧化物歧化酶(SOD)、cAMP、去甲肾上腺素(NE)、多巴胺(DA)、5羟色胺(5HT),观察心肌超微结构。结果:DXR对兔心肌梗塞后心律失常有拮抗作用,其中DXR大剂量组与对照组比较有显著性差异(P<001);对缺血再灌注心律失常也有拮抗作用,DXR大、小剂量组与对照组比较均有显著性差异(P<001);对上述状态的心电图ST-T抬高有改善作用。实验表明,DXR能升高血清SOD浓度,而使cAMP、NE、DA、5HT浓度和全血粘度降低。结论:DXR能拮抗心肌缺血及再灌注损伤和心律失常,其机理可能通过清除氧自由基、调节细胞第二信使、抑制交感神经系统、改善局部循环,保护线粒体、抑制溶酶体活化使心肌细胞免受损伤而实现。     

定心方对缺血再灌注大鼠心肌MAPK通路的调节

目的:研究定心方对缺血再灌注大鼠心肌MAPK通路的调节作用。方法:将40只雄性Wistar大鼠随机分为假手术组、模型组、定心方高、中、低剂量组,应用结扎(15min)和松开(30min)左冠状动脉前降支的方法制作缺血再灌注模型。应用免疫印迹技术检测MAPK通路中磷酸化ERK1/2、JNK1/2、P38蛋白的表达,并记录再灌注过程中Ⅱ导联心电图。结果:与模型组相比,其余各组的pJNK1/2和pP38表达及心律失常评分显著降低(P<0.05);定心方用药组的pERK1/2蛋白表达显著高于假手术组和模型组(P<0.001),而两组间无显著差异(P>0.05)。结论:定心方可以通过调节MAPK通路的激活,减轻大鼠心肌缺血再灌注损伤。     

定心方对缺血再灌注大鼠心肌PDCD5的表达的作用

目的:研究PDCD5在大鼠IRI心肌中的表达及定心方的干预作用。方法:将48只Wistar大鼠随机分为假手术组、模型组、定心方低剂量组和定心方高剂量组,采用冠脉结扎再松开的方法复制动物模型,计算心律失常评分和心肌梗死面积,荧光定量PCR法检测大鼠心肌PDCD5 mRNA水平,Western blotting法检测心肌PDCD5与p-ERK蛋白表达情况。结果:与假手术组相比,模型组PDCD5 mRNA与蛋白表达明显增高;定心方干预后两者的表达显著降低,而p-ERK的表达进一步增强,尤其是高剂量组(37.5 g/kg)变化更为明显。结论:IRI能诱导心肌p-ERK应激性增高,定心方可促进p-ERK水平进一步增高,降低PDCD5表达,其机制可能与激活ERK通路有关。     

益肾调督针法对脑缺血再灌注大鼠ICAM-1mRNA和蛋白表达的影响

目的:通过观察针刺对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤后脑组织中细胞间黏附分子-1(intercellular adhesion molecule-1,ICAM-1)mRNA和蛋白表达的影响,探讨益肾调督针法抗脑缺血再灌注炎性损伤的机制.方法:将Wistar大鼠随机分为正常组、假手术组、模型组、益肾调督针法组及普通针法组,各组随机分成12、24、48h三个时间段,每个时段10例,采用栓线法制备局灶性脑缺血动物模型,运用原位杂交和免疫组织化学技术检测各组大鼠大脑缺血侧皮层ICAM-1mRNA及蛋白表达的变化.结果:普通针法组和益肾调督针法组相应时间点ICAM-1 mRNA和蛋白表达的趋势和模型组相似,但在各时间点阳性表达均较模型组降低,且有显著差异(P<0.05或P<0.01).益肾调督针法组与普通针法组相应时间点相比,有显著性差异(P<0.05或P<0.01),益肾调督针法组下降程度高于普通针法组.结论:益肾调督针法可能通过下调脑缺血区ICAM-1mRNA和蛋白表达从而防治脑缺血再灌注炎性损伤.     

调气息风法对脑缺血大鼠ICAM-1、IL-1β及TNF-α表达的影响

目的观察调气息风合剂对脑缺血大鼠血清及脑组织内IL-β、TNF-α及ICAM-1表达的影响。方法将40只Wistar雄性大鼠随机分为空白组、模型组、对照组和治疗组,后三组采用线栓法制成大脑中动脉阻塞模型;用药7d后测定各组血清和脑组织IL-β、TNF-α水平及血清、脑组织ICAM-1活性。结果调气息风合剂在脑缺血损伤后显著抑制ICAM-1、TL-1β、TNF-α的表达,与对照组相比有明显优势。结论调气息风合剂通过抑制脑缺血损伤后ICAM-1介导的一系列炎症,从而在一定程度上减轻脑组织的损伤。     

含碘中药对甲亢大鼠细胞间黏附分子表达的影响

目的:观察不同浓度含碘中药对甲亢大鼠模型甲状腺组织细胞黏附分子ICAM-1、VCAM-1 mRNA表达的影响。方法:制作大鼠甲状腺机能亢进模型,灌服不同浓度含碘中药复方及其他对照药物进行治疗,然后RT-PCR法检测各组大鼠甲状腺组织ICAM-1、VCAM-1 mRNA水平。结果:含碘较低的中药复方较之含碘高的中药复方在减少ICAM-1及VCAM-1 mRNA表达上具有显著性的差异。结论:小剂量含碘中药复方对实验性甲亢大鼠具有抑制其甲状腺细胞黏附分子表达,保护甲状腺细胞的作用。     

青藤碱对糖尿病大鼠脑缺血再灌注损伤P-选择素和细胞间黏附分子-1表达的影响

目的 探讨青藤碱(sinomenine,Sin)对糖尿病大鼠脑缺血再灌注损伤P-选择素和细胞间黏附分子-1(ICAM-1)表达的影响.方法 采用高脂高糖饮食加腹腔注射小剂量链脲霉素建立糖尿病大鼠模型,造模成功后将大鼠随机分为假手术组、缺血再灌注组、Sin低剂量治疗组和Sin高剂量治疗组.线栓法建立局灶性脑缺血再灌注模型.Sin低(30 mg/kg),高剂量(60 mg/kg)治疗组于术前30 min分别给予大鼠腹腔注射.用免疫组化法观察缺血90 min再灌注24 h大鼠额顶部皮质P-选择素和ICAM-1表达,进行2,3,5-三苯基氯化四氮唑(TTC)染色和HE染色观察脑梗死体积及病理形态学变化.结果 ①糖尿病大鼠脑缺血再灌注24 h,P-选择素和ICAM-1表达均明显增加,与假手术组比较,差异具有显著性(均P<0.05);与缺血再灌注组比较,Sin高、低剂量治疗组均显著减少P-选择素和ICAM-1表达(均P<0.05),高、低剂量组之间差异亦具有显著性(P<0.05).②Sin治疗组脑梗死体积较缺血再灌注组减小,高、低剂量组之间差异亦具有显著性(P<0.05).③Sin高、低剂量治疗组脑组织缺血损伤病理学改变明显轻于缺血再灌注组,Sin高剂量治疗组缺血改变亦轻于低剂量治疗组.结论 Sin对糖尿病大鼠缺血再灌注脑损伤具有保护作用,其机制可能与减轻脑缺血再灌注损伤阶段P-选择素和ICAM-1所介导的炎症反应有关.     

芪棱汤对大鼠局灶性脑缺血再灌注后核因子-κB表达的影响

目的观察芪棱汤对大鼠脑缺血再灌注后核因子-κ B(NF-κ B)表达的影响.方法雄性 SD大鼠随机分为正常组、假手术组、模型组及治疗组,除正常组外其余各组按再灌注的时间又随机分为 1、 3、 6、 12、 24、 48和 72h共 21个亚组;采用颈内动脉线栓与环扎法建立 MCAO模型.在术前 12、 24h及术后即刻治疗组予腹腔注射芪棱汤精制液,余组给予等体积生理盐水.动物杀检前进行神经学评分;采用免疫组化二步法检测再灌注各时点 NF-κ B p65和 ICAM- 1的表达.结果正常组和假手术组神经学评分正常,治疗组神经学评分较模型组显著降低. NF-κ B p65在正常组和假手术组有微弱表达,两组情况相近;模型组和治疗组 NF-κ B p65表达较假手组明显增加,但治疗组表达低于对照组. ICAM- 1在正常组和假手术组未见表达,治疗组和模型组表达增加,与模型组相比,治疗组 ICAM- 1表达显著减少.结论芪棱汤可降低 NT-κ B和 ICAM- 1的表达,可能是其抗脑缺血再灌注损伤的部分作用机制.     

消痰散结方对裸鼠胃肿瘤中ICAM-1表达的影响

观察消痰散结方对裸鼠胃癌组织中胃癌细胞粘附分子ICAM 1表达的影响。建立裸鼠MKN 4 5人胃癌模型 ,采用免疫组化S P法检测胃癌组织中ICAM 1的表达。结果 ,中药组胃癌组织中ICAM 1表达水平明显低于空白对照组。说明 ,消痰散结方抑制胃癌细胞转移的环节可能与影响粘附分子的表达 ,进而影响细胞的粘附性机制有关。     

桂枝茯苓胶囊对大鼠子宫内膜异位症异位内膜组织中MCP-1和ICAM-1 mRNA的影响

目的:研究桂枝茯苓胶囊对大鼠子宫内膜异位症(EMs)异位内膜组织中单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1),细胞黏附分子-1(ICAM-1)在蛋白水平和转录水平的影响。方法:改进制作大鼠EMs动物模型,ig桂枝茯苓胶囊0.256,1.024 g.kg-1,28 d后取子宫内膜,采用免疫组化法检测内膜组织中MCP-1,ICAM-1的分布和表达;采用RT-PCR检测异位内膜组织中MCP-1,ICAM-1 mRNA的表达。结果:桂枝茯苓胶囊可降低大鼠子宫内膜异位内膜组织中MCP-1,ICAM-1的表达;高、低剂量组可使MCP-1,ICAM-1 mRNA水平显著下降(P<0.01),两剂量之间无显著性差异。结论:桂枝茯苓胶囊可降低EMS异位内膜组织中MCP-1,ICAM-I的表达,降低其mRNA的表达。     

活血熄风方对MCAO局灶性脑缺血模型大鼠脑皮质ICAM-1蛋白表达的影响

目的：观察活血熄风方对局灶性脑缺血大鼠的神经保护作用,并进一步探讨其作用机制。方法：采用线栓法阻断大鼠一侧大脑中动脉（MCAO）,制备局灶性脑缺血模型,观察活血熄风方对MCAO模型大鼠脑缺血后相关蛋白ICAM-1表达的影响,以此探讨活血熄风方对脑缺血的神经保护作用机制。结果：活血熄风方能抑制MCAO模型大鼠大脑皮质ICAM-1蛋白表达。结论：活血熄风方对大鼠局灶性脑缺血具有保护作用,其机理可能与活血熄风方影响抑制炎症反应相关蛋白ICAM-1的表达有关。     

黄芪注射液预处理对大鼠脊髓缺血再灌注损伤脊髓ICAM-1表达的影响

目的:探讨黄芪注射液对脊髓缺血再灌注损伤的保护治疗作用及其机制.方法:采用肾下腹主动脉阻断法,建立脊髓缺血再灌注模型.缺血组阻断腹主动脉30min后开放灌注.黄芪注射液治疗组静注黄芪注射12ml/kg30min后阻断腹主动脉.阻断腹主动脉30min后开放再灌注.术后进行神经功能评分,观察脊髓标本的病理改变,免疫组化染色ICAM-1表达.结果:神经功能评分治疗组在各时间点明显高于模型组(P<0.05),组织病理学变化各时间点明显好于模型组,ICAM-1免疫阳性血管数较模型组减少,差异有统计学意义(P<0.05).结论:1.黄芪注射液可显著改善大鼠脊髓缺血再灌注引起的后肢神经功能障碍和组织病理学改变,表明黄芪注射液对大鼠脊髓缺血再灌注损伤有明显的保护作用.2.黄芪注射液降低大鼠脊髓缺血再灌注后缺血脊髓ICAM-1的表达,可能为黄芪注射液保护脊髓缺血再灌注损伤的机制之一. 进行神经功能评分,观察脊髓标本的病理改变,免疫组化染色ICAM-1表达.结果:神经功能评分治疗组在各时间点明显高于模型组(P<0.05),组织病理学变化各时间点明显好于模型组,ICAM-1免疫阳性血管数较模型组减少,差异有统计学意义(P<0.05 .结论:1.黄芪注射液可显著改善大鼠脊髓缺血再灌注引起的后肢神经功能障碍和组织病理学改变,表明黄芪注射液对大鼠脊髓缺血再灌注损伤有明显的保护作用.2.黄芪注射液降低大鼠脊髓缺血再灌注后缺血脊髓ICAM-1的表达,可能为黄芪注射液保护脊髓缺血再灌注损伤的机制之一.     

胆酸、栀子苷及配伍对大鼠缺血再灌注脑组织TNF-α、IL-1β和ICAM-1含量的影响

目的 :观察胆酸、栀子苷及两者配伍应用对局灶性脑缺血再灌注脑组织TNF -α、IL - 1β和ICAM - 1含量的影响 ,探讨中药对抗缺血再灌注损伤的作用机制。方法 :成年雄性SD大鼠 ,随机分成假手术对照组、模型组和给药组 (胆酸组、栀子苷组、合用组、血栓通组 )。采用大脑中动脉栓塞方法 ,制作缺血 2h再灌注 12h的局灶性脑缺血再灌注模型 ,应用放射免疫法 (RIA)检测脑组织匀浆TNF -α和IL - 1β含量 ,酶联免疫法 (ELISA)检测脑组织ICAM - 1含量。结果 :再灌注 12h后 ,脑组织TNF -α、IL - 1β和ICAM - 1蛋白量升高。胆酸可以明显降低TNF -α和IL - 1β含量 ,与模型组比较P <0 0 1和P <0 0 5 ,而不影响ICAM - 1含量。栀子苷对三者表达无明显影响。而两者合用可显著降低TNF -α和ICAM - 1含量 ,与模型组差异显著 (P <0 0 1) ;而合用对IL - 1β表达没有明显影响。结论 :胆酸降低致炎因子TNF -α表达的作用在和栀子苷配伍应用后作用更显著 ,而胆酸干预IL - 1β表达的作用在与栀子苷配伍后降低 ,两者合用产生了单独使用时均不具有的降低ICAM - 1的作用。据此推断 ,中药的配伍作用不是组分各自生物效应的简单累加 ,而表现为增效或减效的作用 ,配伍应用与药物单独使用作用机制可能不同。