基于中药质量标志物（Q-Marker）的鹿茸质量控制标准体系构建

鉴于鹿茸质量控制存在基原复杂、品种混乱,质量评价标准匮乏等问题,鹿茸质量控制标准体系建设亟待加强。中药质量标志物(quality marker,Q-Marker)的提出及鹿茸中一些相对特异的化学成分逐渐被科学家们发现,为鹿茸质量评价提供了新的契机。详细概括了目前鹿茸质量控制存在的问题,深度辨析了鹿茸Q-Marker的筛选原则,确定其Q-Marker为羟脯氨酸、硫酸软骨素和γ-氨基丁酸,系统构建了鹿茸质量评价标准体系,为推动鹿茸质量控制标准提升和规范鹿业市场提供了保障,有利于鹿业的健康、有序发展。     

鹿茸质量控制体系研究进展

鹿茸是我国传统名贵中药材。由于鹿茸供求关系紧张,市场价格昂贵,使得在国内的中药材市场上伪品、混淆品和代用品屡见不鲜。因此不断完善鹿茸的鉴定方法,建立综合评价鹿茸的质量控制体系有着极其深远的意义。本文就此方面的研究进行总结。     

鹿茸及其产品质量评价研究

鹿茸为我国传统名贵中药材,疗效独特,营养价值高,具有巨大的开发潜力。近年来发展迅速,但其市场却较为混乱,药材及产品质量参差不齐,其相关质量控制与评价体系也很不完善。现经查阅文献,对以往鹿茸及其产品的鉴定、质量控制方法进行总结概述。真伪及品种鉴定方法:传统经验法、显微鉴别法、TLC法、光谱鉴别法、DNA分子生物鉴别法。质量评价方法:HPLC含量测定、气象色谱法、红外光谱鉴定、指纹图谱分析、X射线衍射分析。     

基于指纹图谱和多指标定量测定的鹿茸饮片质量控制研究

目的采用HPLC法建立鹿茸饮片指纹图谱,并测定核苷类成分含量,进行聚类分析与主成分分析(PCA),比较鹿茸饮片中6种核苷成分(尿嘧啶、腺嘌呤、次黄嘌呤、尿苷、肌苷和鸟苷)的差异。方法采用HPLC法对16批不同批次鹿茸饮片6种核苷类成分进行测定,运用国家药典委员会"中药色谱指纹图谱相似度评价软件(2012版)"进行评价,并结合PCA和正交偏最小二乘判别分析(OPLS-DA)等化学计量学方法对4种饮片(蜡片、粉片、纱片和骨片)进行区分与比较。结果建立了鹿茸核苷类成分HPLC指纹图谱,相似度均达0.960以上,确定了6个共有峰(尿嘧啶、腺嘌呤、次黄嘌呤、尿苷、肌苷和鸟苷)构成鹿茸饮片的特征峰,尿嘧啶、次黄嘌呤和肌苷是差异性化合物,可作为鉴别和区分鹿茸饮片质量控制指标。结论该法所建立的鹿茸核苷类成分指纹图谱特征性强、方法简便,结合6种核苷类成分含量测定可更好控制其质量,对鹿茸饮片的鉴定及质量控制具有指导意义和参考价值。     

中药材质量控制方法体系探讨

作者根据多年从事中药质量控制研究的体会，提出中药材质量控制新的方法体系。即运用多学科结合的方法，通过中药材真伪鉴定现代技术体系、中药材质量优劣评价方法体系和中药材安全性评价方法体系的建立，构建中药材质量的数字化、自动化控制技术平台，最终实现中药材质量的数字化、自动化控制。     

基于化学指纹图谱和多指标成分含量测定的梅花鹿鹿茸质量评价

目的采用高效液相色谱法建立鹿茸中核苷类成分指纹图谱,进行聚类分析与主成分分析,并比较梅花鹿鹿茸药材中6种核苷成分的差异。方法采用高效液相色谱法对15批不同产地梅花鹿鹿茸进行测定,以甲醇-0.07%冰醋酸为流动相梯度洗脱,流速1 mL·min^-1,检测波长为254 nm。运用国家药典委员会"中药色谱指纹图谱相似度评价软件"2012版进行评价,并对6种核苷类成分进行含量测定。结果建立了鹿茸核苷类成分HPLC指纹图谱,确定了6个共有峰构成鹿茸药材的特征峰,且方法学考察达到标准。结论该法所建立的鹿茸核苷类指纹图谱特征性强、方法简便,结合6种核苷类成分含量测定可更好控制其质量,对梅花鹿鹿茸的鉴定及质量控制具有指导意义和参考价值。     

鹿茸药效物质基础、药理作用、临床应用及质量控制的研究进展

鹿茸是我国传统中药之一,使用广泛且临床应用历史悠久。通过查阅古代本草典籍及近现代文献,对鹿茸的活性成分、药理作用、临床应用以及质量控制方面进行综述,提出实际药效-活性成分-药材质量相联系的研究思路,寻找鹿茸药材的质量标志物,以期对中药复方龟龄集中鹿茸的药效物质基础及质量控制的相关研究提供参考。     

中药材质量控制方法体系探讨

作者根据多年从事中药质量控制研究的体会,提出中药材质量控制新的方法体系。即运用多学科结合的方法,通过中药材真伪鉴定现代技术体系、中药材质量优劣评价方法体系和中药材安全性评价方法体系的建立,构建中药材质量的数字化、自动化控制技术平台,最终实现中药材质量的数字化、自动化控制。     

基于全程质量控制理念的中药标准化体系研究思路探讨

药品质量源于设计,对药品生产整个生命周期的良好设计可使药品达到预期的质量要求。针对目前中药产业存在的问题,该文从国家战略层面出发,以国际制造业质量控制理念为指导,结合中药产业自身特点和发展现状,提出基于全程质量控制理念的中药标准化体系建设,其内涵是建立中药以三性指标为核心的综合质量指标体系、中药材和饮片的质量标准和规范体系、中药质量追溯体系、中药全程质量控制数据监控系统和中药全程质量管理体系这相互关联的5个体系,通过"顶层设计-分步实施-系统整合"的工作流程实现中药产业的全过程系统科学研究。通过对各环节质量标准间系统关联性的分析,建立各环节及全程标准操作规程,构建高标准的中药产业链全面质量管理体系,为中药全程质量控制体系的构建提供示范,为中药产业的标准化提供系统性的参考和依据。     

市售鹿茸饮片及鹿茸粉的DNA条形码鉴定

目的利用COI序列对市售鹿茸饮片、鹿茸粉进行鉴定,并建立统一的分子鉴定方法。方法对不同产地的鹿茸饮片及鹿茸粉分别进行DNA提取、COI序列扩增和序列测定,建立分子鉴定方法,并对市售鹿茸饮片、鹿茸粉进行调查分析。结果鹿茸饮片均可以使用COI通用引物进行PCR扩增和测序;物种之间相互区分明显;市售40份药材中14份为药典规定物种,26份为非药典规定物种;鹿茸粉未成功获得COI序列。结论COI序列的DNA条形码鉴定方法可准确、有效鉴定市售鹿茸饮片,此方法为市场监管鹿茸饮片提供科学手段。     

马鹿茸的X射线衍射Fourier指纹图谱鉴定

目的:建立中药材马鹿茸的鉴定分析新方法.方法:采用粉末X射线衍射Fourier指纹图谱鉴定法.结果:通过应用粉末X射线衍射Fourier指纹图谱鉴定法对3个马鹿茸和1个花鹿茸中药材进行分析鉴定,获得了马鹿茸的对照X射线衍射Fourier指纹图谱及特征标记峰值.结论:表明X射线衍射Fourier指纹图谱鉴定法可用于中药材马鹿茸的鉴定.     

商品鹿茸药材中总磷脂含量测定

目的:建立鹿茸药材中总磷脂含量测定方法,以评价不同商品地鹿茸药材的质量。方法:采用Folch试剂超声提取,钼蓝试剂显色,分光光度法测定。结果:样品中总磷脂含量以磷计的回归方程y=0.0205x+0.0032(r=0.9997),线性范围在2.3～80.5μg,平均回收率为93.01%,RSD=2.2%(n=5)。结论:该方法操作简便,方法学考察结果理想,可作为鹿茸药材质量控制的方法。     

以鹿茸对去卵巢骨质疏松症模型大鼠的影响对不同规格鹿茸进行质量评价

目的： 考察8种不同规格鹿茸对去卵巢大鼠骨质疏松症的影响,并对8种不同规格鹿茸进行等级划分。 方法： 雌性SD大鼠100只,随机分为10组,分别为正常组、模型组、8组不同规格鹿茸组。采用切除大鼠双侧卵巢的方法复制骨质疏松症模型,同时给予8种不同规格鹿茸,给药12周后,观察不同规格鹿茸对大鼠骨密度、血清生化指标的影响,并以不同组大鼠的骨密度,血清中ALP,BMP-2,BGP含量为影响因素,对8种不同规格鹿茸进行聚类分析。 结果： 给药12周后,不同规格鹿茸均能显著提高去卵巢大鼠血清中ALP,BMP-2,BGP含量,提高去卵巢大鼠的骨密度,且聚类分析结果与传统商品鹿茸药材质量划分相似。 结论： 不同规格鹿茸对去卵巢所致的大鼠骨质疏松症均有拮抗作用,且作用强弱与商品药材质量相关。     

不同规格鹿茸商品药材中氨基酸含量分析

目的: 测定不同规格鹿茸商品药材中氨基酸的含量,从氨基酸含量方面对不同规格鹿茸进行质量控制. 方法: 采用柱前衍生化法,利用氨基酸自动分析仪对样品中18种氨基酸含量进行测定. 结果: 18种氨基酸线性方程r均大于0.997,平均回收率均在99.1%~108.1%,RSD均小于2.0%;39个不同品种规格鹿茸药材中均含有17种氨基酸及7种人体必需氨基酸,腊片氨基酸含量较高,头茬茸较二茬茸氨基酸含量高,与传统分类相一致. 结论: 该方法可用于鹿茸药材氨基酸含量测定及质量控制.     

基于特异性PCR的梅花鹿茸和马鹿茸区分

目的:开发及验证梅花鹿和马鹿茸的特异性聚合酶链式反应(PCR)筛选方法。方法:采集梅花鹿茸、马鹿茸、鹿茸混淆品、香港市场流通的鹿类产品、非鹿科动物、植物和真菌类样品。对鹿类线粒体基因组进行排序,设计及筛选特异性引物,采用特异性PCR对样品进行区分,并进行条件优化和方法学验证。结果:共收集77份样品,对87份线粒体基因组DNA排序并设计9个特异性引物组合。经验证后,CNIP-f/CNIP-r和CELA-f/CELA-r分别选作梅花鹿和马鹿的特异性引物组合,通过PCR可获得223 bp的梅花鹿和248 bp的马鹿特异性条带,作为区分梅花鹿茸和马鹿茸的依据。结论:该方法能作为中药鉴别的补充方案,用于质量控制中涉及动物制品的种属,进一步完善鹿茸饮片鉴别体系。     

基于仿生提取理论的鹿茸氨基酸成分研究

目的以仿生提取理论为指导,对鹿茸中的氨基酸进行化学成分分析。方法选取同一产地的鹿茸细粉,按提取方式的不同依次分为仿生组和超声组。以7种含量最高的氨基酸及氨基酸总量作为评价指标,使用SIMCA—P11．5及SPSS13．0统计学软件对各项评价指标进行统计学分析。结果仿生组氨基酸总量为（4．74±0．22）g／L,超声组为（1．83±0．14）g/L,仿生组样本中的氨基酸含量明显高于超声组（P〈0．001）;PCA分析结果显示,两组样本之间存在着显著性的差异。结论仿生提取理论作为一种新型中药提取理论,可有效地提高鹿茸中氨基酸的提取效果,对鹿茸相关产品的开发具有重要意义。     

双参苓颗粒质量标准研究

目的建立双参苓颗粒的质量标准。方法对制剂中的鹿茸和冬虫夏草进行显微鉴别;采用薄层色谱法对制剂中人参、丹参、山茱萸进行定性鉴别研究;用高效液相色谱法对有效成分黄芪甲苷进行含量测定,选用ZORBAXRX-C18(4.6mm×250mm,5μm)色谱柱,乙腈-水(31∶69)为流动相,流速1.0mL/min,蒸发光散射检测,柱温30℃。结果建立了双参苓颗粒的质量标准,包括鹿茸和冬虫夏草的显微鉴别,人参、丹参、山茱萸的薄层鉴别方法和有效成分黄芪甲苷的含量测定方法。结论该方法能很好地控制产品的质量,可以作为双参苓颗粒的质量标准。     

中药材鹿茸的分子分类学鉴定研究

目的 建立中药材鹿茸的分子分类学鉴定试剂盒。方法 根据对不同产地的梅花鹿、马鹿线粒体DAN进行PCR扩增和序列测定，并与亲缘关系较近的伪充药材来源动物线粒体DNA同位置序列比较，找到鹿的特征片段，经过实际经验，筛选出适合片段作为鹿的种属特异性PCR引物。结果 该引物与相关试剂组成试剂盒后，可用于中药材鹿茸与伪充药材的鉴别。结论 用分子分类学方法鉴别中药材鹿茸，具有科学、稳定、准确、简便等特点，值得推广。     

基于多元统计分析的鹿茸品质评价

目的:采用多元统计分析技术,探讨不同品种不同规格鹿茸的质量评价方法。方法:采用高效液相色谱法测定17种氨基酸、核苷组分、磷脂组分、胆固醇及多胺的含量;采用紫外分光光度法测定水溶性蛋白质及总磷脂含量;以测定的这些营养成分含量作为分析数据源,采用SPSS 19.0统计软件进行方差分析和聚类分析。结果:方差分析表明,不同规格及不同品种鹿茸之间氨基酸总量、总磷脂、磷脂组分、多胺无显著差异(P0.05),马鹿三岔中必需氨基酸的含量显著低于马鹿其他规格及梅花鹿所有样品的含量(P0.05),梅花鹿二杠侧枝二茬中核苷含量高于马鹿及梅花鹿二杠主枝头茬、三岔头茬,有显著性差异(P0.05),马鹿四岔中水溶性蛋白含量与其他规格马鹿、梅花鹿二杠主侧枝头茬及三茬有显著性差异(P0.05),马鹿单门及四岔胆固醇含量与梅花鹿二杠侧枝二茬、三岔有显著性差异(P0.05);聚类分析不能将马鹿茸和梅花鹿茸分为两大类,有交叉聚类现象,评价指标不同,聚类分析结果也不同。结论:应用方差分析技术及聚类分析法评价鹿茸的质量,具有可靠性,为鹿茸的开发和应用提供了重要的依据。     

参茸鞭丸等六种含参茸中成药的薄层色谱鉴别

对参茸鞭丸、参茸丸、参茸安神丸、参茸卫生丸、人参女金丸、人参益母丸６种中成药中所含人参、鹿茸贵重药材进行了薄层色谱鉴别，为制定检测方法及质量标准提供依据