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相似文献
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1.
莫非  胡晶莹  甘愉  赵仰星  赵新泰 《中药材》2008,31(9):1368-1372
目的:明确五行汤的抗肿瘤作用并初步探讨其机制.方法:不同浓度五行汤处理培养肿瘤细胞, MTT检测细胞存活率;流式细胞术检测细胞凋亡率;琼脂糖凝胶电泳检测细胞DNA变化;电镜观察细胞形态变化;特异性荧光探针检测胞浆钙离子浓度变化.结果:五行汤对多种肿瘤细胞生长有较特异的抑制作用;五行汤处理后的SGC-7901细胞经流式细胞仪检测出现亚二倍体峰,并呈时间-浓度依赖性;琼脂糖凝胶电泳呈现的DNA Ladder;电镜显示五行汤处理后的SGC-7901细胞呈现凋亡特征;Fluo-3 AM染色荧光显微镜观察到胞浆钙离子浓度升高;胞内钙离子拮抗剂Bapta AM可以明显降低五行汤处理后SGC-7901细胞的凋亡率,且对细胞的保护作用呈浓度依赖性.结论:五行汤有较明确的抑制肿瘤细胞生长作用,可能通过钙离子介导的肿瘤细胞凋亡发挥作用.  相似文献   

2.
大黄素对HL-60细胞增殖和凋亡的影响   总被引:1,自引:0,他引:1  
目的:探讨大黄素对人白血病细胞HL-60增殖及凋亡的影响。方法:应用MTT法检测大黄素对HL-60细胞增殖的影响;应用流式细胞术、DNA琼脂糖凝胶电泳观察和检测细胞凋亡;蛋白印迹法(Western-Blot)检测Bcl-2蛋白表达水平的变化。结果:在5~20mg/L浓度范围内,大黄素对HL-60细胞增殖的抑制作用呈时间剂量依赖性20mg/L作用72h后,抑制率分别达到(19.8±2.7)%,(58.8±4.4)%和(73.8±5.7)%;流式细胞术检测发现:大黄素5、10和20mg/L作用24h后,细胞凋亡率分别为(15.5±3.4)%、(56.0±3.4)%和(71.1±5.0)%,与对照组(1.01±0.06)%有显著性差异(P<0.05);DNA琼脂糖凝胶电泳显示典型的梯形条带。大黄素作用24h后,Bcl-2蛋白的表达水平随药物波度增加呈逐渐下降趋势。结论:大黄素能够抑制HL-60细胞增殖,并诱导其凋亡。Bcl-2基因可能参与了大黄素抑制HL-60细胞增殖和诱导凋亡的过程。  相似文献   

3.
羊栖菜多糖诱导肿瘤细胞凋亡的实验研究   总被引:6,自引:1,他引:6  
目的研究羊栖菜多糖(SFPS)对人白血病HL-60细胞系增殖抑制和凋亡诱导作用。方法MTT法检测SFPS对HL-60细胞增殖的抑制作用;扫描电镜、透射电镜、琼脂糖凝胶电泳和流式细胞仪检测细胞凋亡。结果SFPS对HL-60细胞具有显著生长抑制作用,并呈量效和时效关系;药物浓度为300 mg/L和500 mg/L作用HL-60细胞后,观察到典型的细胞凋亡形态学特征;DNA凝胶电泳呈现梯状条带;DNA直方图出现亚G1峰。在一定浓度范围内,SFPS诱导细胞凋亡的作用呈现浓度和时间依赖性,同时G2/M期细胞比例增多。结论SFPS抗肿瘤作用与诱导细胞凋亡和G2/M期细胞阻滞有关。  相似文献   

4.
三叶青黄酮诱导SMMC-7721肝癌细胞凋亡的实验研究   总被引:2,自引:0,他引:2  
目的 观察三叶青黄酮对SMMC-7721肝癌细胞诱导凋亡的作用.方法 通过四氮噻唑蓝(MTT)比色法检测三叶青黄酮对细胞的抑制增殖作用;光学显微镜、荧光显微镜下形态学观察;DNA琼脂糖凝胶电泳及流式细胞仪(FCM)研究分析三叶青黄酮对肝癌细胞的诱导凋亡作用.结果 三叶青黄酮能显著的抑制SMMC-7721肝癌细胞的生长,并具有浓度依赖性.光学显微镜、荧光显微镜下观察,发现细胞凋亡现象;DNA琼脂糖凝胶电泳可见DNA梯形条带;流式细胞仪(FCM)检测分析出现凋亡亚二倍体峰.结论 三叶青黄酮对肝癌细胞具有诱导凋亡作用,有抗肝癌的药用价值.  相似文献   

5.
刘珺  徐选福  杨文娟  郭传勇 《中草药》2009,40(8):1270-1274
目的 研究红花注射液对肝星状细胞(hepatic steuate cell,HSC)HSC-T6增殖、凋亡及凋亡相关基因bcl-2及bax mRNA表达的影响.方法 体外培养HSC株,用不同质量浓度的红花注射液处理HSC-T6,采用MTT法检测细胞增殖;采用5、10、20 mg/mL红花注射液干预细胞24 h,流式细胞仪检测细胞周期;倒置显微镜下观察细胞凋亡形态学改变;并用琼脂糖凝胶电泳法检测DNA Ladder凋亡梯度;Annexin V-FITC/PI双染色流式细胞仪分析凋亡率;Real time-RT PCR检测凋亡相关基因bcl-2、bax mRNA的表达水平.结果 红花注射液对HSC增殖有明显的抑制作用,且作用呈剂量和时间依赖性;红花注射液(10、20 mg/mL)作用24 h流式细胞术测出G0/G1期细胞所占比例增多,与对照组比较差异显著(P<0.05、0.01);药物干预后细胞表现不同程度的凋亡,琼脂糖电泳可见DNA出现断裂、PI/Annexin V双染流式细胞仪分析对照组凋亡率为(0.73±0.33)%,红花注射液在5、10、20 mg/mL凋亡率分别为(2.04±0.58)%、(9.46±1.29)%、(16.55±11.27)%,差异显著(P<0.01);Real time-RT-PCR结果显示红花下调抗凋亡基因bcl-2的mRNA表达,同时上二调HSC-T6的促凋亡基因bax的mRNA表达.结论 红花注射液能抑制HSC增殖及增殖周期,促进活化的HSC凋亡,其机制可能是调控bcl-2/bax mRNA的表达.  相似文献   

6.
白屈菜红碱对人胃癌BGC823细胞的增殖抑制和凋亡诱导作用   总被引:4,自引:1,他引:4  
宗永立  刘艳平 《中草药》2006,37(7):1054-1056
目的观察白屈菜红碱(che lerythrine)对人胃癌BGC 823细胞的增殖抑制和诱导凋亡作用。方法通过M TT实验检测白屈菜红碱对细胞生长的抑制率,AO/EB的荧光核染色观察细胞形态,DNA琼脂糖凝胶电泳及流式细胞术检测细胞周期和细胞凋亡。结果M TT实验显示白屈菜红碱抑制BGC 823细胞的生长呈时间、浓度依赖的方式,显微镜下观察到AO/EB的荧光核染后凋亡的细胞,琼脂糖凝胶电泳出现DNA的片段化,在白屈菜红碱质量浓度为1.5、2.0、2.5μg/mL且培养24 h时,流式细胞仪可以检测到凋亡峰,且细胞被阻滞在S和G2/M期。结论白屈菜红碱能有效地诱导BGC 823细胞凋亡,而且其诱导的凋亡具有周期依赖性。  相似文献   

7.
李炜  孟艳冬  赵玲  丁诗语  孙莉 《河北中医》2006,28(12):940-942
目的观察六神丸与灯盏细辛注射液对人乳腺癌MCF-7细胞的作用,并从细胞凋亡角度探讨其相互作用机制。方法将六神丸含药血清及灯盏细辛注射液作用于体外培养的人乳腺癌MCF-7细胞,检测其对细胞增殖的直接抑制作用,流式细胞仪检测其对细胞凋亡及对Caspase-3表达的作用。结果六神丸含药血清对MCF-7细胞的增殖均有直接抑制作用,24、48、72 h生长抑制率分别为41.23%、36.93%、36.82%;灯盏细辛注射液对MCF-7细胞的增殖均亦有直接抑制作用,24、48、72 h生长抑制率分别为27.09%、19.40%、25.58%;两者合用作用增强,24、487、2 h生长抑制率分别为67.89%、65.57%、68.31%。流式细胞仪检测证明,灯盏细辛注射液可抑制MCF-7细胞凋亡及Caspase-3表达,六神丸含药血清可促进MCF-7细胞凋亡及Caspase-3表达。两者合用,MCF-7细胞凋亡及Caspase-3表达较对照组增强,效果界于两者单用之间。结论六神丸可通过逆转灯盏细辛注射液抑制MCF-7细胞凋亡及Caspase-3的表达而表现出促MCF-7细胞凋亡的作用。  相似文献   

8.
目的:研究万寿菊叶黄素对乳腺癌MCF-7细胞株增殖和凋亡的影响。方法:选用对数生长期的乳腺癌MCF-7细胞为研究对象。按随机分配原则,将其分为六组:叶黄素(lutein)处理组浓度分别为5、10、20、40、50μg/m L,未处理组作为对照组。用不同浓度的叶黄素分别处理MCF-7细胞,并培养12、24、48h,噻唑蓝(MTT)法计算乳腺癌MCF-7细胞的增殖抑制率;流式细胞法检测MCF-7乳腺癌细胞凋亡率。结果:乳腺癌MCF-7细胞在相同的培养条件下,随着叶黄素浓度升高,叶黄素对人乳腺癌MCF-7细胞的抑制作用及凋亡率显著增加。差异有统计学意义(P0.05)。即相同的作用时间,用药浓度越大时,对MCF-7细胞的抑制作用和凋亡作用越强。用相同浓度的叶黄素处理MCF-7细胞,随着细胞的培养时间逐渐增加,细胞的增值抑制率及凋亡率呈明显上升趋势。且差异有统计学意义(P0.05)。结论:万寿菊叶黄素对MCF-7乳腺癌细胞的增殖有抑制作用,并能诱导乳腺癌MCF-7细胞凋亡。  相似文献   

9.
目的利用金正均Q值法评价苦参碱联合阿霉素对人乳腺癌细胞是否存在协同增效作用。方法 MTT法检测各组对MCF-7细胞的生长抑制率,确定苦参碱及阿霉素的IC50,采用金正均Q值法计算联合用药各组的Q值;克隆形成实验检测各组对人乳腺癌细胞的克隆抑制能力;免疫蛋白印迹法检测各组对人乳腺癌细胞bax蛋白的表达。结果苦参碱、阿霉素及联合用药对MCF-7细胞的抑制作用呈浓度依赖性,经苦参碱联合阿霉素处理后的细胞生长抑制作用,与单用苦参碱或阿霉素相比,细胞抑制率明显增高,其中,苦参碱0.5mg/ml联合阿霉素0.5μg/ml组的抑制率明显增高,为(75.50±1.55)%,Q值为1.16,表现为协同作用,其余组Q值为0.96~1.10,表现为相加作用;苦参碱和阿霉素对MCF-7细胞的抑制作用呈浓度依赖性,其对MCF-7细胞的IC50值分别为(2.00±0.17)mg/ml和(0.36±0.03)μg/ml。经苦参碱0.5mg/ml联合阿霉素0.5μg/ml处理后的细胞克隆形成率,与单用苦参碱或阿霉素相比,细胞克隆形成率明显降低,为(13.68±1.76)%。经苦参碱0.5mg/ml联合阿霉素0.5μg/ml处理后的bax蛋白的表达,与单用苦参碱或阿霉素相比bax蛋白表达水平明显升高,为(60.85±2.34)%。结论苦参碱联合阿霉素对MCF-7在抑制生长、抑制增殖以及诱导凋亡方面起协同作用,其原因可能与协同上调bax蛋白的表达有关,具体原因有待进一步研究。  相似文献   

10.
目的:研究大黄素(Emodin)对人胃癌细胞MKN45增殖及诱导凋亡的作用。方法:用噻唑蓝(MTT)法观察Emodin对MKN45的生长抑制作用;用DNA Ladder凝胶电泳法、荧光染色法、流式细胞仪法分析Emodin的诱导凋亡作用。结果:与对照组相比,Emodin能明显抑制MKN45细胞的生长且与浓度、时间呈依赖性,其IC50(48小时)为(47.5±0.3)μmol/L;Emodin处理胃癌细胞后,DNA凝胶电泳结果显示呈明显的梯状条带;吖啶橙(AO)染色观察示细胞核内可见浓染致密的颗粒荧光、新月型改变、核固缩或片段化及凋亡小体的形成;流式细胞仪分析Emodin能浓度依赖性诱导MKN45细胞凋亡和G2/M期阻滞。结论:Emodin对人胃癌细胞MKN45有明显的生长抑制作用,且该作用与诱导细胞凋亡有关。  相似文献   

11.
目的:研究并比较人胚胎发育不同时期肺与肠上皮细胞形态特征,增殖与凋亡生物学特性,以期能为肺与大肠组织发生上的同源性提供例证,并能为中医理论中肺与大肠相互关系提供参考。方法:胚胎发育不同时期肺与肠组织石蜡包埋,HE染色,观察上皮组织及细胞形态;流式细胞术检测人胚胎不同时期肺与肠上皮细胞的增殖与凋亡,并进行分析。结果:胚胎早期(9~16周龄),肺与肠在上皮组织及细胞形态一致,上皮细胞增殖、凋亡的生物学特性无统计学意义(P0.05)。胚胎中期(17~23周)、胚胎晚期(24周~出生)肺与肠在上皮组织及细胞形态不一致,上皮细胞增殖、凋亡的生物学特性有统计学意义(P0.05)。结论:胚胎早期(9~16周龄)可以为"肺"与"空肠、回肠、结肠"同源发生提供一定的依据。另外,"肺与大肠相表里"的成体肺肠相关虽主要是功能之间的相互联属,但可能与其原始的同源性相关。  相似文献   

12.
目的:研究丹参注射液对体外小鼠成体心脏干细胞的细胞学特性影响。方法:体外分离培养小鼠Sca-1+成体心脏干细胞,荧光显微镜及流式细胞仪鉴定细胞纯度。培养的小鼠心脏干细胞分为3组,分别为低剂量丹参注射液组(75μg/mL),高剂量丹参注射液组(300μg/mL)及对照组。干预后,采用CCK-8检测细胞活力;EdU掺入法检测细胞DNA合成情况;5%CO2和95%N2缺氧条件培养12h诱导细胞凋亡后,Caspase-3分光光度法检测细胞内Caspase-3酶活性情况。结果:成功分离培养小鼠心脏成体干细胞。荧光显微镜及流式细胞仪鉴定细胞纯度〉95%。与对照组相比,高剂量丹参注射液组细胞活力(P〈0.05)和DNA合成(P〈0.05)显著增加;与低剂量组相比,高剂量丹参注射液组细胞活力增强(P〈0.05),但DNA合成无显著差异。缺氧条件下,丹参注射液高剂量处理组Caspase-3酶活性较对照组显著下降(P〈0.05)。结论:丹参注射液增加小鼠心脏成体干细胞的细胞活力及DNA合成能力,减少缺氧诱导的细胞凋亡。  相似文献   

13.
目的:对人正常软骨细胞和骨关节炎软骨细胞进行体外培养,并就其2组在传代过程中生物学特性变化进行比较和评价。方法:酶两步顺序消化法消化关节软骨分离细胞;体外传代培养观察细胞形态、生长,MTT法测定增殖,甲苯胺蓝和Ⅱ型胶原免疫组化染色,从蛋白和基因水平检测Ⅱ型胶原、蛋白多糖的变化,以及用流式细胞仪检测细胞凋亡。结果:①骨性关节炎软骨细胞形态似成纤维细胞,生长速度明显较正常软骨细胞慢。②MTT检测骨关节炎组2、4、6代软骨细胞增殖均低于正常组(P0.05),Ⅱ型胶原免疫组化和甲苯胺蓝O染色均较弱,传至第4代软骨细胞生物学特性基本消失。③2、4代骨关节炎软骨细胞凋亡率明显高于正常软骨细胞(P0.05)④各代骨性关节炎软骨细胞Ⅱ型胶原和蛋白多糖表达量都不如正常软骨细胞。结论:体外培养的人骨性关节炎软骨细胞符合软骨细胞退变的表现,能很好的为骨关节炎细胞水平的研究提供最佳实验对象。  相似文献   

14.
冯春霞  李庆明  梁蔚文  魏菁 《中药材》2006,29(5):456-458
目的:观察胃康宁含药血清对胃癌细胞的增殖影响,从细胞凋亡角度探讨作用机理。方法:制备胃康宁含药血清培养胃癌细胞,采用MTT法检测细胞增殖,Hoechst DNA荧光染色法检测细胞凋亡,并计数凋亡率。结果:胃康宁各剂量组在初期均有抑制细胞增殖的作用,而高、中剂量抑制时间更持久。胃康宁高剂量组具有诱导细胞凋亡的作用。结论:胃康宁含药血清可明显抑制细胞增殖,其机理除与诱导细胞凋亡有关,还与细胞周期受阻也有关系。  相似文献   

15.
目的:初步探讨不同浓度四味肝泰软胶囊对人肝癌细胞株SMMC-7721细胞周期及凋亡的影响。方法:采用流式细胞仪PI染色法和Annexin V-EGFP/PI双染法研究不同浓度四味肝泰软胶囊作用于人肝癌细胞株SMMC-7721后细胞周期DNA含量变化及对细胞凋亡率的影响。结果:各浓度四味肝泰软胶囊均可以调节G1/S转换,使肿瘤细胞发生S期阻滞,造成S期细胞堆积,阻断细胞的DNA合成和复制,阻滞肿瘤细胞进入G2/M期,从而起到抑制肿瘤细胞的增殖,诱导SMMC-7721细胞凋亡,且这种诱导效应具有明显的时间-剂量-效应关系。结论:四味肝泰软胶囊对人肝癌细胞株SMMC-7721具有明显的抑制作用,其作用机制可能与抑制肿瘤细胞DNA的合成和诱导细胞凋亡有关。  相似文献   

16.
17.
染料木素对大鼠成骨细胞增殖与分化的影响   总被引:8,自引:0,他引:8  
王建华  孔德娟  李恩  佟晓旭  陈永春 《中药材》2002,25(11):803-805
目的:探讨染料木素体外对大鼠成骨细胞增殖与分化的影响。方法:用改良的组织块法分离培养新生大鼠颅骨成骨细胞,染料木素以不同浓度加入细胞培养体系,作用不同时间后,用MTT法检测成骨细胞的增殖情况;用对硝基苯二钠基质动力学法测定细胞内碱性磷酸酶的活性,用改良的Lowry法测蛋白含量。结果:染料木素在1×10~(-5)~1×10~(-9)mol/L浓度范围内作用24h、48h均能促进成骨细胞增殖,在1×10~(-7)~1×10~(-5)mol/L范围内作用72 h可提高成骨细胞内碱性磷酸酶的活性。结论:染料木素体外能促进成骨细胞的增殖与分化。  相似文献   

18.
目的:探讨蛇床子素对卵巢癌SKOV3细胞增殖与凋亡的影响以及其潜在的机制。方法:不同浓度蛇床子素作用于卵巢癌SKOV3细胞,采用MTT法检测蛇床子素对细胞增殖的影响;Hoechst 33258染色和流式细胞术检测蛇床子素对细胞凋亡的影响;实时荧光定量PCR(qRT-PCR)和Western Blot检测Bax、Bcl-2 mRNA和蛋白的表达水平。结果:蛇床子素明显抑制SKOV3细胞的增殖;蛇床子素干预后,有典型的凋亡小体形成,SKOV3细胞的凋亡率随着药物浓度的增加而增加,80mg/L处理组细胞的凋亡率达到(24.90±5.35)%;qRT-PCR和Western Blot结果显示各浓度蛇床子素对SKOV3细胞促凋亡因子Bax mRNA和蛋白水平表达均有上调作用,而抗凋亡因子Bcl-2mRNA和蛋白表达均下调。结论:蛇床子素能够抑制卵巢癌SKOV3细胞的增殖并诱导其凋亡,其机制可能与其下调抗凋亡因子Bcl-2和上调促凋亡因子Bax的表达有关。  相似文献   

19.
马钱苷对大鼠前脂肪细胞增殖与分化的影响   总被引:1,自引:0,他引:1  
目的探讨马钱苷对大鼠前脂肪细胞增殖与分化的影响。方法原代培养大鼠前脂肪细胞,以四甲基偶氮唑盐(MTT)方法检测马钱苷对大鼠前脂肪细胞增殖的影响;以酶组织化学提取法检测其对大鼠前脂肪细胞分化过程中磷酸甘油脱氢酶(GPDH)的影响;以油红O染色方法检测其对大鼠前脂肪细胞分化过程中细胞内脂肪积聚的影响。结果8,16,32μmol/L的马钱苷能够促进大鼠前脂肪细胞的增殖,抑制其分化过程中GPDH的升高和脂肪积聚,作用呈明显量效关系。结论马钱苷具有促进大鼠前脂肪细胞增殖,抑制大鼠前脂肪细胞分化的作用。  相似文献   

20.
人参皂苷Rg1对软骨细胞增殖及表型的影响   总被引:5,自引:0,他引:5  
目的探讨人参皂苷Rg1对体外软骨细增殖及表达的影响.方法在成功分离培养人软骨细胞后,以MTT法检测软骨细胞活性并绘制其生长曲线图,以不同浓度Rg1作用于IL-1α诱导的软骨细胞,检测培养液中SOD的活性及Ⅱ型胶原含量.结果浓度为40μmol/L的Rg1在3~5d内使细胞增殖率升高;浓度为40μmol/L的Rg1可对抗IL-1α,降低SOD及降解Ⅱ型胶原的含量.结论人参皂苷Rg1可促进体外软骨细增殖及其表型的表达.  相似文献   

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