氧化苦参碱对骨肉瘤U2OS细胞增殖的抑制作用及其机制研究

目的:在分子生物学水平上探讨氧化苦参碱(Oxymatrine,OMT)对骨肉瘤U2OS细胞的生长抑制作用和潜在的作用机制。方法:体外培养骨肉瘤U2OS细胞,用不同浓度梯度的氧化苦参碱处理细胞,光学显微镜观察骨肉瘤细胞形态的变化;四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测不同浓度氧化苦参碱对U2OS细胞增殖的影响;AnnexinⅤ-FITC/PI荧光双标流式细胞仪分析OMT处理后的U2OS细胞周期阻滞和凋亡的变化;RT-PCR方法分析凋亡相关分子(p53,bax,Bcl-2)mRNA的表达水平。结果:MTT法结果表明氧化苦参碱能够抑制U2OS细胞的增殖并呈剂量依赖性;光学显微镜下观察到氧化苦参碱处理后的U2OS细胞具有凋亡特征的形态学变化;流式细胞仪检测结果表明氧化苦参碱处理48h后,细胞凋亡率与药物浓度呈正相关;氧化苦参碱还能够诱导细胞周期阻滞于G0/G1期,并呈现浓度依赖性;RT-PCR检测结果表明氧化苦参碱处理后,U2OS细胞中p53mRNA和bax mRNA的表达水平明显上升,Bcl-2mRNA表达水平明显下降,并呈现一定的剂量依赖关系。结论:氧化苦参碱能够明显抑制骨肉瘤U2OS细胞的增殖,导致细胞周期阻滞并诱导细胞凋亡,具体分子机制可能和p53,Bcl-2,bax等凋亡调控基因相关。     

八宝丹对骨肉瘤细胞U-2OS的抑制增殖和诱导凋亡实验研究

目的:探讨八宝丹(BBD)对骨肉瘤U-2OS细胞的增殖抑制和诱导凋亡作用。方法:应用形态学观察、Ki-67染色、MTT实验检测八宝丹对细胞增殖的抑制,原位末端标记、电镜、DNA琼脂糖凝胶电泳和流式细胞术检测细胞凋亡。结果:MTT实验显示八宝丹抑制U-2OS细胞的增殖呈时间、浓度依赖的方式,实验组Ki-67指数降低,TUNEL检测阳性,琼脂糖凝胶电泳出现DNA的片段化,流式细胞仪可以检测到凋亡峰,随着作用时间延长和浓度增加,凋亡率增高;电镜观察染色质沿皱缩的核膜下凝聚,细胞表面出现凋亡小体。结论:八宝丹对骨肉瘤细胞U-2OS有抑制增殖和诱导凋亡作用,其作用表现出时间和剂量依赖关系。     

去甲斑蝥素抑制人骨肉瘤U2OS细胞生长及其机制研究

目的：探讨去甲斑蝥素抑制人骨肉瘤U2OS细胞生长的作用及其分子机制,为开发抗骨肉瘤新药提供实验基础。方法：以不同浓度的去甲斑蝥素处理骨肉瘤U2OS细胞,应用MTT法检测细胞生长抑制率,用Bliss法计算IC50值,通过流式细胞术和Hoechst33258荧光染色检测细胞凋亡,Caspase-3、8、9活性检测试剂盒检测其活性。结果：5、10、20、40、80μg/mL的去甲斑蝥素明显抑制骨肉瘤U2OS细胞生长并呈剂量依赖关系,48h的IC50值为26.15μg/mL;20μg/mL去甲斑蝥素作用12、24、48h诱导U2OS细胞的凋亡率分别为：7.8%、26.3%和43.9%,并出现明显的凋亡特征性形态变化;去甲斑蝥素处理U2OS细胞48h后Caspase-3、8、9的活性明显增强。结论：去甲斑蝥素可通过激活Caspase级联活化而抑制骨肉瘤U2OS细胞生长并诱导凋亡。     

八宝丹诱导骨肉瘤细胞U-2OS凋亡及其机制的研究

目的:研究八宝丹对骨肉瘤细胞U-2OS诱导凋亡的作用及其机制。方法:体外培养人骨肉瘤细胞U-2OS,MTT法观察不同浓度八宝丹作用不同时间对细胞生长的影响;原位末端标记染色、电镜和流式细胞仪检测细胞凋亡情况;RT-PCR法检测凋亡相关基因Bcl-2、Bax和Survivin mRNA的表达。结果:MTT实验显示八宝丹抑制U-2OS细胞的增殖呈时间、浓度依赖的方式;仅药物作用后的细胞呈原位末端标记染色阳性;流式细胞仪可以检测到凋亡峰;电镜观察染色质沿皱缩的核膜下凝聚,细胞表面出现凋亡小体;随着药物浓度的升高和作用时间的延长,凋亡相关基因Sur-vivin、Bcl-2表达减少,Bax表达增高。结论:八宝丹具有诱导骨肉瘤细胞U-2OS的凋亡的作用,其机制可能与调控凋亡相关基因Survivin、Bcl-2和Bax有关。     

华蟾酥毒基对U2OS细胞增殖和凋亡的影响

目的:观察华蟾酥毒基对人骨肉瘤细胞系U2OS增殖和凋亡的影响,从而探讨华蟾酥毒基诱导骨肉瘤凋亡的可能机制。方法:体外培养人骨肉瘤细胞系U2OS,CCK-8法检测不同浓度华蟾酥毒基对骨肉瘤细胞系U2OS增殖的抑制作用,Annexin V-FITC/PI染色,流式细胞术检测细胞凋亡,Hoechst 33258染色,显微镜下观察细胞凋亡的形态学变化,应用逆转录荧光定量PCR法检测华蟾酥毒基对凋亡通路相关mRNA表达的影响。结果:CCK-8检测显示华蟾酥毒基可抑制人骨肉瘤U2OS细胞增殖,并具有时间和剂量依赖性,在华蟾酥毒基浓度为20 nmol·L~(-1)时,对细胞增殖的抑制作用明显增强;流式细胞术检测显示华蟾酥毒基可明显诱导骨肉瘤细胞凋亡;Hoechst 33258染色可见凋亡小体;逆转录荧光定量PCR分析显示经华蟾酥毒基处理后的骨肉瘤细胞系U2OS表达Caspase-3,8,9较用药前明显增高。结论:华蟾酥毒基对骨肉瘤细胞系U2OS的增殖有显著抑制作用,并可诱导其发生凋亡,其作用机制可能与激活Caspase依赖的凋亡途径有关。     

苦参碱诱导宫颈癌Siha细胞凋亡的机制研究

目的:研究苦参碱对宫颈癌Siha细胞的自噬、凋亡作用,探讨苦参碱抑制宫颈癌发生发展的作用机制,为中药单体及联合用药治疗宫颈癌提供实验依据。方法:"采用SRB(sulforhodamine B,磺基罗丹明B)法检测苦参碱对Siha细胞生长的影响;用流式细胞术检测苦参碱对细胞周期的影响及不同浓度苦参碱引起细胞凋亡率的变化;倒置相差显微镜观察苦参碱干预后Siha细胞的形态学改变;同时用MDC染色后通过荧光显微镜鉴定自噬的发生;最后用实时定量RT-PCR检测促凋亡基因Bax和自噬相关基因Beclin 1的m RNA表达水平。结果:苦参碱能显著抑制Siha细胞增殖,作用呈现时间-剂量依赖性;诱导Siha细胞阻滞在细胞周期的G1期,并且随着剂量的增加,Siha细胞凋亡率明显增加(P0.05);倒置相差显微镜在苦参碱组观察到细胞质中可见大量的大小不等的空泡,而且随着苦参碱浓度的增加胞质中的空泡逐渐增大增多;MDC染色荧光显微镜检测可见苦参碱组比未处理组显示更强的荧光信号和更多的MDC标记颗粒;实时定量RT-PCR显示凋亡相关基因Bax和在自噬中起重要作用的Beclin 1基因在苦参碱组的表达均处于一个较高水平。结论:苦参碱可显著抑制宫颈癌Siha细胞的增殖,而且诱导细胞死亡时凋亡和自噬均被激活,自噬基因Beclinl参与了苦参碱诱导的自噬,而苦参碱的促凋亡机制可能与其促进凋亡分子Bax的表达相关。     

化岩胶囊对骨肉瘤细胞系诱导调亡作用的实验研究

为研究化岩胶囊对成骨肉瘤细胞系U2 OS的诱导凋亡作用。将不同浓度的化岩胶囊作用于成骨肉瘤细胞系U2 OS,应用形态学观察、台盼蓝染色、流式细胞术、原位末端标记 (TUNEL)等方法 ,检测其对骨肉瘤细胞的诱导凋亡的时间效应和剂量效应。结果显示化岩胶囊对U2 OS细胞有明显时间依赖和剂量依赖的生产抑制及诱导凋亡作用 ,细胞周期分析出现G2 /M期阻滞、明显的凋亡峰 ,形态学表现细胞核碎裂、染色体凝聚的典型凋亡特征 ,并出现大量多核细胞。免疫组织化学检测化岩胶囊诱导后细胞核中有广泛DNA断裂。表明化岩胶囊对骨肉瘤细胞有明显促凋亡作用。其作用表现出时间依赖和剂量依赖关系。     

三叶青黄酮诱导SMMC-7721肝癌细胞凋亡的实验研究

目的 观察三叶青黄酮对SMMC-7721肝癌细胞诱导凋亡的作用.方法 通过四氮噻唑蓝(MTT)比色法检测三叶青黄酮对细胞的抑制增殖作用;光学显微镜、荧光显微镜下形态学观察;DNA琼脂糖凝胶电泳及流式细胞仪(FCM)研究分析三叶青黄酮对肝癌细胞的诱导凋亡作用.结果 三叶青黄酮能显著的抑制SMMC-7721肝癌细胞的生长,并具有浓度依赖性.光学显微镜、荧光显微镜下观察,发现细胞凋亡现象;DNA琼脂糖凝胶电泳可见DNA梯形条带;流式细胞仪(FCM)检测分析出现凋亡亚二倍体峰.结论 三叶青黄酮对肝癌细胞具有诱导凋亡作用,有抗肝癌的药用价值.     

蜂毒素对人成骨肉瘤细胞体外增殖抑制作用的机制探讨

目的:探讨蜂毒素对人成骨肉瘤U2OS细胞体外增殖抑制作用的机制。方法:通过MTT法检测蜂毒素对骨肉瘤U2OS细胞的增殖抑制率,倒置显微镜下观察细胞生长状态,免疫细胞化学法检测PCNA表达变化,流式细胞仪检测细胞周期,透射电镜观察细胞超微结构变化。结果:蜂毒素能明显抑制U2OS细胞增殖,下调PCNA表达,造成S期细胞堆积。经蜂毒素处理后的U2OS细胞,在透射电镜下见染色质边集,有凋亡小体出现。结论:蜂毒素能够抑制骨肉瘤U2OS细胞增殖,其作用机制可能与其下调PCNA表达,将细胞周期阻滞于S期以及诱导细胞凋亡的作用有关。     

苦参碱诱导肺腺癌A549细胞凋亡及对人端粒酶逆转录酶表达的影响

目的观察苦参碱诱导肺腺癌A549细胞凋亡及对人端粒酶逆转录酶(hTERT)基因表达的影响。方法以终质量浓度为0.1、0.2、0.4、0.6 mg/mL的苦参碱作用肺腺癌A549细胞48 h后,通过台盼蓝拒染法计数细胞的生长抑制率;以终质量浓度为0.2 mg/mL的苦参碱作用A549细胞48、72、96 h后,经透射电镜和DNA Ladder实验了解到细胞凋亡的发生,PCR-TRAP法检测端粒酶活性,实时RT-PCR检测hTERT的mRNA表达水平。结果各种质量浓度的苦参碱作用A549细胞48 h后,均显著抑制细胞的增殖且呈浓度依赖性;0.2 mg/mL的苦参碱作用A549细胞不同时间后,经透射电镜形态学检测和DNA Ladder实验,均显示A549细胞发生了凋亡改变;0.2 mg/mL的苦参碱作用A549细胞48 h后,端粒酶活性明显受抑,hTERT mRNA表达显著降低。结论苦参碱能抑制肺腺癌A549细胞的生长并诱导其凋亡,其机制可能与下调hTERT基因表达,抑制端粒酶活性,破坏端粒稳定性有关。     

蟾毒灵诱导骨肉瘤细胞株凋亡的蛋白质组学研究

目的：探索蟾毒灵诱导骨肉瘤细胞株凋亡的作用及相关分子机制。方法：利用MTT法检测蟾毒灵处理骨肉瘤细胞株U2OS,U2OS/MTX300（甲氨蝶呤耐药细胞株）,SAOS2,IOR/OS9后24,48,72 h的生长抑制作用,通过流式细胞仪检测蟾毒灵处理48 h后上述细胞凋亡率,双向凝胶电泳联合MALDI-TOF/TOF质谱技术筛选蟾毒灵处理U2OS细胞48 h后差异表达的蛋白,Western blot法验证相关蛋白表达。结果：蟾毒灵对四株骨肉瘤细胞株生长抑制作用呈时间及剂量依赖性,蟾毒灵对甲氨蝶呤敏感细胞株U2OS及耐甲氨蝶呤细胞株U2OS/MTX300的72 h IC₅₀分别为（37.43±4.1）,（32.24±5.3） nmol·L^-1。流式细胞仪检测结果证实蟾毒灵可显著诱导四株骨肉瘤细胞凋亡。蛋白质组学筛选、鉴定出蟾毒灵处理U2OS 48 h后24种差异表达蛋白,进一步Western blot验证发现凋亡相关蛋白中热休克蛋白27表达变化最为显著,并且过表达热休克蛋白27可部分逆转蟾毒灵诱导U2OS及U2OS/MTX300细胞凋亡的作用。结论：蟾毒灵具有显著诱导骨肉瘤凋亡作用,其中热休克蛋白27蛋白水平下调在蟾毒灵诱导的骨肉瘤细胞凋亡中具有重要作用。     

苦参碱和氧化苦参碱对人肝癌细胞株 SMMC-7721凋亡的影响

目的：探讨苦参碱与氧化苦参碱对人肝癌SMMC-7721细胞凋亡的影响。方法采用MTT法检测SMMC-7721细胞增殖,并采用膜联蛋白V-异硫氰酸荧光素/碘化丙啶双染法检测SMMC-7721细胞凋亡。结果苦参碱与氧化苦参碱浓度为0.50～2.00 mg/ml时,细胞增殖抑制率均逐渐上升,呈药物浓度和作用时间的依赖性;同样浓度下（1.00 mg/ml）,苦参碱增殖抑制作用强于氧化苦参碱[24 h、48 h和72 h时苦参碱组分别为（42.39±0.04）%、（51.69±0.03）%、（78.98±0.05）%,氧化苦参碱组分别为（21.36±0.02）%、（36.16±0.02）%、（61.24±0.13）%;P均＜0.05]。苦参碱与氧化苦参碱浓度为0.25、0.50、1.00 mg/ml时SMMC-7721细胞凋亡率显著增高;同样时间点（48 h）,苦参碱对细胞凋亡的诱导强于氧化苦参碱[0.25、0.50、1.00 mg/ml时,苦参碱组凋亡率分别为（4.08±0.20）%、（4.32±0.19）%、（9.93±0.18）%,氧化苦参碱组分别为（2.20±0.18）%、（3.08±0.26）%、（9.01±0.20）%;P均＜0.05]。结论苦参碱和氧化苦参碱可抑制人肝癌SMMC-7721细胞增殖,促进其凋亡。     

氧化苦参碱对结肠癌LOVO细胞增殖及凋亡的作用研究

目的:探讨氧化苦参碱(oxymatrine,OM)对人结肠癌LOVO细胞增殖和凋亡的影响及其可能的机制。方法:采用MTT法检测OM对LOVO细胞的增殖抑制率;流式细胞仪检测LOVO细胞凋亡率以及细胞周期分布;吉姆萨染色法观察用药前后细胞形态变化;荧光定量逆转录-聚合酶链式反应(qRT-PCR)法检测药物作用后p53 mRNA表达变化情况。结果:MTT法显示,OM在一定浓度范围(200μg/mL～5mg/mL)对人结肠癌LOVO细胞的生长有明显的抑制作用,对LPS诱导的LOVO细胞的过度增殖也具有明显的抑制作用。LOVO细胞经OM作用后光镜下可见细胞数量明显减少,细胞内空泡明显增多。流式检测表明OM可明显诱导LOVO细胞凋亡,使LOVO细胞周期停滞于S期。荧光定量PCR法显示,OM作用后LOVO细胞p53 mRNA表达明显下降。结论:OM能显著抑制人结肠癌LOVO细胞增殖,并诱导LOVO细胞凋亡,其机制可能与OM使LOVO细胞周期停滞于S期,下调LOVO细胞p53 mRNA表达有关。     

槲皮素对人骨肉瘤细胞U-2OS/MTX300增殖和凋亡的影响及其机制研究

目的:研究槲皮素(quercetin,Qu)对骨肉瘤细胞系U-2OS/MTX300增殖和凋亡的作用及其机制。方法:MTT法观察细胞增殖活性;Annexin V/PI染色检测凋亡;线粒体膜电位及细胞色素C的Western blot检测线粒体凋亡途径;持续活化Akt瞬时转染、Western blot检测Akt通路相关蛋白表达水平变化。结果:槲皮素可明显抑制耐甲氨蝶呤骨肉瘤细胞U-2OS/MTX300生长,并呈时间和剂量依赖性;Annexin V/PI可明显检测到细胞凋亡;进一步发现其作用机制是通过下调线粒体膜电位,促进细胞色素C向胞浆释放及抑制Akt磷酸化来实现。结论:槲皮素可显著抑制耐甲氨蝶呤骨肉瘤细胞系U-2OS/MTX300细胞增殖并诱导其凋亡,其机制与线粒体凋亡途径及抑制Akt活性有关。     

蜂毒素抑制骨肉瘤血管生成拟态与影响肿瘤细胞增殖、调亡的关系

目的：探讨蜂毒素抑制骨肉瘤裸鼠移植瘤的作用及机制。方法：建立裸鼠骨肉瘤原位移植瘤模型,裸鼠18只,随机分3组：生理盐水组,蜂毒素组,顺铂组。观察各组裸鼠骨肉瘤体积和瘤体质量抑制率;应用免疫组化CD34与PAS双重染色法检测各组裸鼠瘤体血管生成拟态密度;免疫组织化学法检测增值细胞核抗原（PCNA）蛋白表达;TUNEL法检测肿瘤细胞凋亡;运用相关性分析法研究蜂毒素抑制骨肉瘤血管生成拟态与影响肿瘤细胞增殖、凋亡的关系。结果：蜂毒素组瘤体积和瘤体质量抑制率分别为42.98%、39.03%,蜂毒素能明显抑制CD34与PAS双重染色法标记的肿瘤血管生成拟态密度,能明显抑制肿瘤细胞增殖、促进细胞凋亡,且蜂毒素抑制肿瘤血管生成拟态密度与肿瘤细胞增殖呈正相关、与细胞凋亡呈负相关。结论：蜂毒素具有抑制骨肉瘤裸鼠移植瘤生长的作用,其作用机制可能与其能够抑制肿瘤血管生成拟态、诱导肿瘤细胞凋亡、抑制细胞增殖有关     

苦参素对肝星状细胞HSC-T6增殖及端粒酶的影响

目的 探讨苦参素在诱导肝星状细胞HSC-T6凋亡过程中的作用,以及对端粒酶及其亚单位端粒酶逆转录酶（rTERT）mRNA表达的影响。方法 将不同质量浓度的苦参素与HSC-T6细胞共培养不同时间后,MTT法检测苦参素对HSC-T6细胞的生长抑制作用;流式细胞术检测苦参素对HSC-T6细胞凋亡的影响;TRAP-PAGE-银染法检测苦参素作用后HSC-T6细胞中端粒酶活性的改变;RT-PCR检测苦参素对HSC-T6细胞rTERT mRNA表达的影响。结果 苦参素能显著抑制HSC-T6细胞生长、诱导细胞凋亡、降低端粒酶活性,并抑制rTERT mRNA表达。结论 苦参素对HSC-T6细胞增殖具有抑制作用,可能与抑制细胞端粒酶及其亚单位rTERT的活性有关。     

蜂毒素诱导骨肉瘤细胞凋亡作用的定性定量研究

目的：从定性定量角度探讨蜂毒素诱导骨肉瘤U2OS细胞凋亡的作用。方法：采用MTT法检测蜂毒素对骨肉瘤U20S细胞的增殖抑制作用，通过激光共聚焦显微镜、Annexin V／PI双标记法及原位缺口末端标记（TUNEL）等检测方法对细胞凋亡作定性定量分析。结果：蜂毒素能显著抑制U2OS细胞的增殖；激光共聚焦显微镜下可见到明显的凋亡细胞；蜂毒素浓度为2μg／ml、4μg／ml、8μg／ml时，应用流式细胞仪检测到U2OS细胞凋亡率分别为5.0211±0．3135、8．1111±1．0208和10．8933±1．7411，与对照组（1．7489±0．9281）相比，差异具有统计学意义（P〈0．01），TUNEL结果显示蜂毒素处理组的细胞凋亡指数较对照组显著升高（P〈0．01）。结论：蜂毒素能够抑制U2OS细胞增殖并能诱导其凋亡。     

茶黄素-3,3′-双没食子酸酯对人骨肉瘤细胞的抑制作用及转录组学分析

目的 采用转录组学等技术探讨茶黄素-3,3′-双没食子酸酯(theaflavin-3,3′-digallate,TF3)对人骨肉瘤(HOS)细胞的抑制作用及其潜在机制。方法 分别使用不同浓度的TF3和体积分数0.05%的二甲基亚砜(dimethyl sulfoxide, DMSO)处理HOS细胞后,采用CCK-8(cell counting kit-8)法、结晶紫染色、集落形成实验和流式细胞术来检测TF3对HOS细胞增殖的影响; Hoechst33258染色实验及流式细胞术检测TF3对HOS细胞凋亡的影响;Western blot检测HOS细胞增殖和凋亡相关蛋白的水平;采用转录组测序检测TF3处理组和对照组HOS细胞的差异基因表达情况,并使用生物信息学分析潜在分子机制。根据转录组测序结果,采用实时荧光定量PCR法检测各组细胞中分泌粒蛋白Ⅱ(SCG2),蛋白酪氨酸激酶受体B1(EPHB1)和紧密连接蛋白7(CLDN7) mRNA 的表达。结果 与对照组相比,TF3处理组中HOS细胞的增殖能力明显受到抑制(P＜0.05),同时细胞凋亡率显著增高(P＜0.05),呈浓度依赖性;增殖相关蛋白增殖细胞核抗原(PCNA)和细胞增殖抗原(Ki67)及抗凋亡蛋白B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)表达量降低,凋亡相关蛋白半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(caspase-3)的水平下降,凋亡标志蛋白B细胞淋巴瘤/白血病-2相关X蛋白(Bax)、活化的半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(cleaved caspase-3)和细胞色素C的表达量升高(P＜0.01);HOS细胞转录组测序结果显示,TF3处理组与对照组相比有809个差异表达基因(P-adjust＜0.05),其中596个上调,213个下调;基因本体论 (gene ontology,GO)主要富集于DNA复制的正调控、膜及蛋白结合等功能方面,京都基因与基因组百科全书(Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes,KEGG)主要富集于缺氧诱导因子1信号通路、癌症通路及肿瘤坏死因子信号通路等包括凋亡在内与肿瘤相关的信号通路。与对照组相比,TF3处理组的SCG2, EPHB1, 和CLDN7 mRNA 表达水平下调(P＜0.05)。结论 TF3可能通过多靶点调控多种信号通路的活性,从而抑制HOS细胞增殖并促进其凋亡。     

LC3Ⅱ在骨肉瘤组织中的表达及自噬上调对其化疗敏感性的影响

目的:探讨微管相关蛋白1轻链3II(LC3II)在骨肉瘤组织中的表达,观察自噬上调对化疗药物顺铂敏感性的影响。方法:利用免疫组化技术,检测LC3II在28例骨肉瘤及19例正常骨组织中的表达;采用MTT比色法,应用雷帕霉素上调自噬,测定化疗药物DDP对骨肉瘤细胞的增殖抑制率。结果:骨肉瘤组织中LC3II阳性率为64.29%,正常骨组织中LC3II阳性率分别为94.73%,两者比较差异有统计学意义(P0.05)。MTT比色法显示骨肉瘤细胞增殖抑制率与DDP的浓度呈正相关,Spearman相关系数为0.989;Rapamycin+DDP组和DDP组的细胞增殖抑制率比较差异有统计学意义(P0.01)。结论:LC3II在骨肉瘤组织中的阳性表达低于正常骨组织,它的低表达与骨肉瘤的发生发展有关;Rapamycin+DDP组的细胞增殖抑制率明显低于DDP组,自噬的上调降低了骨肉瘤细胞对化疗药物DDP的敏感性。